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文檔簡介
棒狀薄層色譜簡介及在分析脂類組成上的應用周波相關概念薄層色譜(thinlayerchromatography,TLC)是一種簡便、快速的微量色譜方法原理:組分不斷被吸附劑(固定相)吸附,又被展開劑(流動相)溶解而解吸附,且隨之向前移動。組成吸附劑(固定相)展開劑(流動相)種類:常規(guī)的薄層色譜、高效薄層色譜、棒狀薄層色譜、加壓薄層色譜、膠束薄層色譜等等流出曲線和色譜峰棒狀薄層色譜構成原理板薄層棒薄層
色譜棒(組份分離工具)氫火焰離子化檢測技術棒狀薄層色譜C:\DocumentsandSettings\zhoubo\桌面\色譜分離的過程原理.swf氫火焰離子化檢測技術1976年英國Padley
發(fā)明了棒狀薄層色譜/氫火焰掃描法
原理:化合物燃燒裂解,形成離子碎片和自由電子,再由電極收集它們并產生與化合物量成正比的電流信號而測出各物質的含量利用棒狀色譜分析脂類組成儀器:雅特隆薄層色譜分析儀
展開劑:正己烷:乙醚:甲酸=42:28:0.3(分析純即可)具體展開劑的選擇依據(jù)不同樣品而定分析步驟前期處理:1、采用Folch法取得總脂2、待測樣品用氯仿稀釋至10~20mg/ml流程圖空白掃描點樣展開分離干燥脫除展開劑掃描檢測原點掃描相關參數(shù)
1.空白掃描次數(shù)根據(jù)色譜棒的實際情況大致為3—5次2.點樣時用微量點樣器吸取1ul3.展開槽中放入70ml左右展開劑,用濾紙潤濕,形成飽和蒸汽4.在60℃下,烘干5分鐘5.氫火焰,氫氣流量為160ml/min,空氣流量2L/min數(shù)據(jù)處理和分析根據(jù)顯示的組份離子流圖上峰的保留時間和出現(xiàn)的先后順序,比照標準品的保留時間和先后順序確定種類燃燒離化后得到對應的組份離子流圖,對出現(xiàn)的各組分對應的峰,積分得到峰與峰基線所包圍的面積成為峰面積。成分(%)=(峰面積/總峰面積)x100%事例注意事項由于溫度以及展開時間等的影響實際操作中每次得到的離子流圖與標準品的離子流圖有著差異,可以根據(jù)峰出現(xiàn)的先后順序確定組分。樣品濃度必須控制在10—20mg/ml,點樣斑控制在3
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