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兔展、易企秀、MAKA三個(gè)H5制作平臺(tái)分析測評一老師,請帶著情感進(jìn)課堂老師,請帶著情感進(jìn)課堂
/老師,請帶著情感進(jìn)課堂老師,請帶著情感進(jìn)課堂——聽陳林老師的《灰椋鳥》有感翔宇實(shí)小郝玉梅金秋十月,在翔宇實(shí)小的圓形報(bào)告廳內(nèi),我有幸聆聽了寶應(yīng)小語界十位名師的課堂教學(xué),如臨春風(fēng),如沐春雨。在享受著這一份難得的精神大餐的同時(shí),我也在不斷地思考:同樣精巧的教學(xué)構(gòu)思,同樣生動(dòng)活潑的學(xué)生,為什么有的課堂生機(jī)盎然,學(xué)生激情滿懷、躍躍欲試;而有的課堂空氣沉悶,學(xué)生吞吞吐吐,神情木訥。聽了望直中心小學(xué)陳林老師的《灰椋鳥》,我忽有所悟:老師只有帶著情感進(jìn)課堂,以情喚情,以情激情,才能帶給我們一個(gè)鮮活的課堂,還給我們一群生動(dòng)的學(xué)生。陳老師和他的學(xué)生為我們演奏了一曲動(dòng)人的“愛鳥交響曲”。一、前奏:以情喚情教育學(xué)家第斯多惠說過:教學(xué)的藝術(shù)不在于傳授的本領(lǐng),而在于激勵(lì)、喚醒、鼓舞。試想:沒有生氣勃勃的精神怎么鼓舞人?沒有昂揚(yáng)的情緒怎么激勵(lì)人?沒有清醒的理智怎么能喚醒沉睡的人呢?陶醉觀眾首先得陶醉自己。六年級的孩子,開始有意無意地扮演著小大人的角色,他們在課堂上“猶抱琵琶半遮面”,稍不留意,課堂就會(huì)死氣沉沉,師生都陷于煎熬之中。陳老師“防患于未然”,課前引領(lǐng)學(xué)生回憶、背誦寫鳥的詩句。吟誦著那一首首熟悉的小詩,自信的火花開始漫延,愛鳥的種子悄悄播撒。而陳林老師那深情的總結(jié):“鳥是通人性的動(dòng)物,鳥是有靈性的,鳥是值得贊美的?!狈路饋碜蕴旎[的道白,以其自身對鳥深沉的愛,由內(nèi)而外地告訴學(xué)生:愛鳥吧!緊接著教師聲情并茂的范讀,淋漓盡致地展現(xiàn)給人們一幅壯美的“鳥的天堂”,撥動(dòng)著孩子們,甚至聽課老師們的心弦,奏響了“愛鳥交響曲”的節(jié)奏,未成曲調(diào)先有情。盧梭指出:“在敢于擔(dān)當(dāng)培養(yǎng)一個(gè)人的任務(wù)之前,自己就必須造就成一個(gè)人,自己就必須是一個(gè)值得推崇的模范?!钡谒苟嗷菀舱f:“誰要是自己還沒有發(fā)展培養(yǎng)自己的情感,他就不能發(fā)展和培養(yǎng)好別人的情感。陳老師以其自身的情感喚醒了孩子們的熱情。二、弦律:以情激情正如蘇霍姆林斯基所說:“學(xué)生對知識的興趣的第一源泉、第一顆火星,就在于教師上課時(shí)所講的教材和要分析的事實(shí)所抱的態(tài)度。最后,教師只有對教育事業(yè)有著執(zhí)著追求,才會(huì)全身心地投入,而并不是僅僅當(dāng)作職業(yè)來從事。此時(shí)此刻,學(xué)生感覺到學(xué)習(xí)不是外部強(qiáng)加的,而是自己選擇的結(jié)果,他(她)們就會(huì)樂意地多參與課堂教學(xué)中去。”陳老師的課堂正是這樣的,我們在他的課堂上,看到孩子們“小手直舉,小臉通紅,小口常開,小眼閃光”,這里已經(jīng)不是一個(gè)常規(guī)意義上的課堂,而是師生、生生碰撞、交流的場所??窗桑n堂上的陳老師不是高高在上的說教者,他已經(jīng)融入學(xué)生之中,生命與生命在對話、靈魂與靈魂在碰撞、思想與思想在激蕩……什么是壯美?僅僅是“整群”“浩浩蕩蕩”“數(shù)百米”在演繹嗎?不,是陳老師與孩子們一次次投入地朗讀、激情地對話,那“排空而至”的氣勢在告訴我們:什么是壯美,什么是和諧,什么是真正的師生互動(dòng)。試想,一個(gè)上課平淡冷漠,嚴(yán)肅有余的教師,會(huì)有這樣自然、和諧、氣勢磅礴的教學(xué)效果嗎?不,那樣只會(huì)抑制學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,窒息學(xué)生的思維。三、尾聲:情情相生現(xiàn)代教育研究認(rèn)為,教育過程不僅僅是傳道、授業(yè)、解獲的過程,而且是一個(gè)師生雙方情感交流互動(dòng)的過程。只有知識的傳授,沒有師生情感的伴生,就不能引起學(xué)生的共鳴,就不會(huì)激發(fā)學(xué)生的動(dòng)機(jī)和需求,不能調(diào)動(dòng)學(xué)生的主動(dòng)性、積極性,單一的、單向的知識傳輸過程,是把學(xué)生當(dāng)作知識的容器。學(xué)生在認(rèn)識過程中處于壓抑、被動(dòng)的狀態(tài),沒有心靈自由的空間,沒有自由呼吸的空氣,缺乏想象的翅膀,必然堵塞心智發(fā)展的通道,從而導(dǎo)致精神麻木、行動(dòng)木訥。這樣,不但學(xué)不會(huì)知識,而且不會(huì)交流、不會(huì)求知,甚至不會(huì)健體、不會(huì)生存。如果說,陳老師與他的學(xué)生呈現(xiàn)給我們的主旋律是夏夜山洪,一瀉千里,那么隨著《一個(gè)真實(shí)的故事》那凄婉的音樂的響起,他們又如初春小雨,纏纏綿綿,潤物無聲。在當(dāng)時(shí)的氛圍中,老師、學(xué)生已經(jīng)進(jìn)入了“無我”的境界,他們在與那愛鳥的女孩徐秀娟用心對話,在與可愛的灰椋鳥親密交談。隨著音樂無聲地停止,“此時(shí)無聲勝有聲”。隨著陳老師動(dòng)情地惋惜:“風(fēng)兒在為她流淚,云兒在為她流淚?!焙⒆觽儼l(fā)出了真誠的呼喚:鳥是人類的朋友,樹林是鳥兒的樂園。此時(shí)此刻,還需要什么“愛鳥的倡議”、“環(huán)保的宣傳”?有什么比孩子們用心感受更可貴的呢?孩子們那認(rèn)真的表情已經(jīng)明白地告訴了我們:我們都是鳥兒的小衛(wèi)兵,我們永遠(yuǎn)是環(huán)保的小衛(wèi)土!蘇霍姆林斯基在《教學(xué)的藝術(shù)》一書中認(rèn)為,教育的藝術(shù)在于能激發(fā)出學(xué)生心靈的感情,而且這種工作做得愈細(xì)致,愈有感情,從孩子心靈深處涌出的力量便愈大。盧梭在《愛彌兒》一書中也指出:“教學(xué)的藝術(shù)是使學(xué)生喜歡你所教的東西?!蔽覀冊陉惱蠋煹恼n堂上看到的正是這樣的情景:教師將自己體驗(yàn)到的情感熔鑄于教學(xué)之中,用熱情、激情、真情撞擊著學(xué)生的心靈,掀動(dòng)著學(xué)生情感的漣漪,使他們置身于充滿濃烈氣氛的情境中,于是一曲優(yōu)美的“愛鳥交響曲”在我們的耳畔響起……
青島版2016六年級數(shù)學(xué)下冊百分?jǐn)?shù)二單元測試題青島版2016六年級數(shù)學(xué)下冊百分?jǐn)?shù)二單元測試題
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青島版2016六年級數(shù)學(xué)下冊百分?jǐn)?shù)二單元測試題青島版六年級數(shù)學(xué)下冊百分?jǐn)?shù)(二)單元測試題一、填空:姓名等級1.()÷()=
EQ\F(3,4)
=()%=
EQ\F((),20)
=()成()=()折2.比80米少20%是()米。3.甲乙兩數(shù)的比是3∶4,甲數(shù)是乙數(shù)的()%。4.六年級一班男生人數(shù)占全班人數(shù)的
EQ\f(5,9)
,那么男生占女生人數(shù)的()%。5.水泥廠3月份計(jì)劃生產(chǎn)水泥300噸,實(shí)際超產(chǎn)60噸,3月份超產(chǎn)()%。6.一批貨物有20噸,第一次運(yùn)走30%,第二次運(yùn)25%,這批貨物還剩下()噸。7.李阿姨看中了一套套裝原價(jià)1000元,現(xiàn)在商場八折優(yōu)惠,她買這套套裝實(shí)際付()元。8.小紅把3000元錢存入銀行2年,按年利率2.50%計(jì)算,到期時(shí)她可得到利息()元。9.一件衣服原價(jià)200元,先漲價(jià)10%,再降價(jià)10%,現(xiàn)價(jià)()元。10.一根繩子8米,把它平均分成10段,每段長()米,每段占全長的()%。11.50克鹽溶解在200克水中,鹽占水的()%,鹽占鹽水的()%,水比鹽多()%。鹽比水少()%。二、判斷題1.一批產(chǎn)品有95件合格,5件不合格,合格率為95%。()2.一個(gè)數(shù)除以25%,等于這個(gè)數(shù)縮小4倍。()3.一條公路已經(jīng)修了60%,已修與未修的比是3:2。()4.一件衣服先降價(jià)20%,又漲價(jià)20%,現(xiàn)價(jià)與原價(jià)相等。()5.有101粒種子,全部發(fā)芽,發(fā)芽率為101%。()三、選擇:1.某小學(xué)今年的學(xué)生數(shù)量比去年增加10%,今年的學(xué)生數(shù)量是去年的()A.90%B.110%C.10%2.15分鐘是1小時(shí)的()。A.15%?? B.10%?????C.25%?3.把25克鹽融化在100克水中,鹽的質(zhì)量占鹽水的()A.20%B.25%C.125%4.植樹500棵,死了20棵,成活率是()A.96%B.95.8%C.4%D.4.2%5.甲數(shù)是200,乙數(shù)比甲數(shù)大20%,乙數(shù)是()A.120B.40C.240四、計(jì)算直接寫出得數(shù)。30×5%=20×70%=70÷1.4=50×35%=60÷(1+20%)=10-0.09=45÷90%=50%÷6=12.6-1.7=200×(1-40%)=2.解方程。χ-65%χ=70(1+20﹪)x=6075%x-25%x=12五、只列式不計(jì)算(4分)280只1.多25%雞:
鴨:
列式:?只用去30%剩下28噸一共?噸2.
列式:六、解決實(shí)際問題1.學(xué)校四月份付水費(fèi)2000元,五月份付水費(fèi)1500元。五月份比四月份節(jié)約了百分之幾?2.我校新建教學(xué)樓,計(jì)劃投資300萬元,實(shí)際比原計(jì)劃節(jié)約了10%,實(shí)際投資多少萬元?3.電視機(jī)廠今年生產(chǎn)彩電8400臺(tái),比去年增產(chǎn)了20%,去年生產(chǎn)彩電多少臺(tái)?4.王師傅手工制作一條工藝毛毯,第一天完成了它的20%,第二天完成了它的25%,第二天比第一天多織了0.2米。這條毛毯長多少米?5.一輛汽車行駛了全程的40%,距離終點(diǎn)還有270千米。全程是多少千米?6.按《個(gè)人所得稅法》規(guī)定,個(gè)人月工資收入超出3500元的部分,應(yīng)按3%的稅率繳納個(gè)人所得稅。張叔叔每月工資收入是4500元,繳納個(gè)人所得稅后的收入是多少元?7.小華將自己的壓歲錢1000元存入銀行,她為自己辦理了一個(gè)定期5年的儲(chǔ)蓄,年利率為5%,到期時(shí)她能取出本金和利息一共多少元?
大學(xué)英語四級必考必背短語大學(xué)英語四級必考必背短語
/大學(xué)英語四級必考必背短語大學(xué)英語四級必考必背短語wouldrather寧愿……(而不愿)inthat因?yàn)?,原因在于butfor倘沒有,要不是regardlessof不顧,不惜incaseof1.假如,如果發(fā)生2.防備nowthat既然,由于……較量,接受……的挑戰(zhàn)4.承擔(dān),從事turnup1.開大,調(diào)大2.出現(xiàn),來到asfaras到……程度,就……asif好象,仿佛bytheendof截止,在……之前bythetime截止,在……之前evenif即使,雖然evenso即使如此,盡管這樣ifonly要是……多好infavorof支持,贊同inspiteof不顧,不管intermsof1.用……的話2.按照,從……方面來說putupwith容忍,忍受takeover1.接受,接管2.承襲,借用aboveall首先,其次是afterall畢竟,終究,究竟as/solongas1.只要,如果2.既然,由于baseon基于breakoff中斷,突然停止bynow到如今comeupwith提出,想出,提供exceptfor1.除……外,除去2.要不是由于forall盡管,雖然getoff1.(從……)下來2.動(dòng)身,出發(fā)3.結(jié)束(工作),下班4.逃脫懲罰gobackon背棄goinfor喜歡,從事incase假使,以防(萬一)incontrastto/with與……對比起來,與……形成對比orelse否則,要不然otherthan1.不同于,非2.除了……提供食宿,投宿5.進(jìn)行(抵抗等)6.提供,提名,提出ratherthan與其……倒不如,不是……而是resultin結(jié)果,導(dǎo)致,因此就seeto注意,照料………成朋友turnin1.交還,上交2.上床睡覺turnout1.結(jié)果是,證明是2.關(guān)掉,旋熄3.制造,生產(chǎn)4.驅(qū)除,(使)離開withregardto關(guān)于,涉及accountfor解釋,說明allinall從各方面說,總的說來asfor/to至于,關(guān)于atrandom隨便地,任意地becauseof由于,因?yàn)閎reakdown1.損壞2.(健康等)垮掉,崩潰breakout1.爆發(fā),突然出現(xiàn)2.逃脫,逃走breakup1.打碎,粉碎byfar最,……得多bymeansof用,依靠byvirtueof借助,由于callfor1.叫(某人)來2.要求,需要callin叫……進(jìn)來,召來carryoff拿走,奪走comeupto比得上,達(dá)到(標(biāo)準(zhǔn)等)copewith處理,應(yīng)付,對待drawup1.起草,擬訂2.(使)停住eversince自從farapart離得很遠(yuǎn)giveup1.停止,放棄2.(oneself)自首goafter追求,設(shè)法得到,追捕goalongwith一起去,贊同,附和handdown傳下來,宣布inbetween在中間,介乎兩者之間inlinewith符合inperson親自,本人inplaceof代替,取代,交換inquestof為了探求,為了尋求inrelationto有關(guān),關(guān)于,涉及l(fā)eadto導(dǎo)致,引起letalone1.不打擾,不驚動(dòng)2.更別提lookinto調(diào)查,觀察makeout1.看出,辨認(rèn)出2.理解,了解3.寫出,開出makeupfor補(bǔ)償,彌補(bǔ)onthecontrary正相反orso大約,左右overall遍及putaway放好putoff1.推遲,推延2.阻止,勸阻thesameas與……一致,與……相同thenandthere/thereandthen當(dāng)場,當(dāng)即turnon接通,打開withtheexceptionof除……以外aheadoftime提前allmannerof各種各樣的,形形色色的allowfor考慮到,顧及,為……留出余地anythingbut絕對不arminarm臂挽臂as……as象……一樣asaresult作為結(jié)果,因此asoftenasnot往往,多半assoonas一……就,剛……便asusual象平常一樣,照例aswellas除……之外(也),既…..又asaloss困惑,不知所措atbest充其量,至多atheart內(nèi)心里,本質(zhì)上atleisure1.有空,閑暇時(shí)2.從容不迫地,不慌不忙地attheexpenseof1.由……付費(fèi),由……負(fù)擔(dān)費(fèi)用2.以…..為代價(jià)attheriskof冒著……的危險(xiǎn)breakaway突然離開,強(qiáng)行逃脫breakthrough1.突圍,沖破2.取得突破性成就bringon引起,助長,促進(jìn)byallmeans當(dāng)然可以byitself自動(dòng)地,獨(dú)自地byrights按理說bytheway順便地,附帶地說說bytrialanderror反復(fù)試驗(yàn),不斷摸索bywayof1.經(jīng)過,路由2.通過……的方法callsb’sbluff要求某人攤牌,向某人挑戰(zhàn)carefor1.照料,照顧2.喜歡carryforward推進(jìn)carryon繼續(xù),進(jìn)行carryout1.實(shí)行,執(zhí)行2.完成,實(shí)現(xiàn)castoff拋棄,丟棄……產(chǎn)生惡果catch/get/takeholdof抓住,得到clearaway把……清除掉,收拾closeby在近旁,在旁邊comedownto可歸結(jié)為comeoff1.脫落,分開2.結(jié)果,表現(xiàn)comeout1.出現(xiàn),顯露2.出版,發(fā)表3.結(jié)果是comethrough經(jīng)歷……還活者,安然度過come/drawtoaclose漸進(jìn)結(jié)束comparenotes交換意見confidein信任,信賴cookup捏造,編造countin把……算入……算入countup算出……的總數(shù),共計(jì)cutdown1.削減,減少2.砍倒,殺死cutoff1.切斷,阻斷2.使分離,使隔離cutshort中斷,打斷dieaway變?nèi)酰饾u靜止doawaywith廢除,去掉drawin1.(天)漸黑,(白晝)漸短3.(汽車或火車)到站dreamup憑空想出dueto由于,因?yàn)閑achother互相fallon/upon1.襲擊,攻擊2.由……承擔(dān)figureout想出,理解,明白foranything[否定句中]無論如何foronething首先,一則fortherecord供記錄在案,為準(zhǔn)確起見forthesakeof為……起見,看在…..的份上fromscratch從零開始,從頭做起getacross(使)被了解,(將……)講清楚getalong1.前進(jìn),進(jìn)展2.(with)與…..相處(融洽)3.過活,生活getat1.夠得著,觸及2.意指,意思是3.查明,發(fā)現(xiàn)4.指責(zé)getaway1.走開,離開2.逃脫3.(with)做了(壞事)而逃脫責(zé)罰getinsb’shair惹惱某人geton1.登上(車,船,飛機(jī)等),騎上(馬,自行車等)2.(to)轉(zhuǎn)入(某一話題)3.(with)與……相處(融洽)4.進(jìn)展,過活5.(with)繼續(xù)getover1.從(疾病,失望等)中恢復(fù)過來2.克服,解決(問題等)3.將……講清楚gettogether相聚,聚集giveventto表達(dá),發(fā)泄(感情等)gofrombadtoworse每況愈下gooutofbusiness歇業(yè)gotheround(s)(of)傳播,流行g(shù)othrough1.仔細(xì)檢查,查找,詳細(xì)討論2.經(jīng)歷,遭受3.獲得通過,被批準(zhǔn)4.(with)將……干到底gowith1.跟……相配2.與……相伴3.附屬于hangabout/around閑蕩,閑呆著hangonto1.保留(某物)2.緊緊抓住hangtogether1.堅(jiān)持,抓緊,不放2.等待片刻,(打電話時(shí))不掛斷3.有賴于hangup1.掛斷(電話)2.懸掛,掛起havehadit1.受夠了,累極了2.完了,沒用了haveon穿著,戴者h(yuǎn)elponeself(to)自用,自取(食物等)holdon/to/onto緊緊抓住,堅(jiān)持holdon1.等一會(huì),(打電話時(shí))不掛斷2.握住不放,堅(jiān)持住inaword簡言之,總之,一句話inaccordwith與……一致,與…..相符合inaccordancewith與……一致,依照,根據(jù)inall總共,合計(jì)inanswerto作為對……的回答inbulk大量,大批incollaborationwith與……合作,與……勾結(jié)inessence本質(zhì)上,實(shí)質(zhì)上,基本上inexcessof超過inhotpursuit群追不舍innoway決不inparticular特別,尤其inprivate在私下,秘密地inresponseto作為對……的反應(yīng)inshort簡而言之,總之inthelongrun從長遠(yuǎn)看,終究inthewakeof1.緊緊跟隨2.隨著…..而來,作為……的結(jié)果inviewof鑒于,考慮到in/underthecircumstances在這種情況下,(情況)既然如此keepdown1.壓制,鎮(zhèn)壓2.使處于低水平,控制keepoff(使)讓開,(使)不接近keepsb’shead保持鎮(zhèn)靜keepto1.遵守,信守2.堅(jiān)持keepupwith跟上keepup1.(使)繼續(xù)下去,保持2.使居高不下keep/holdsthatbay使無法近身layaside1.把…..擱置一旁2.留存,儲(chǔ)存laydown1.放下,交出2.規(guī)定,制定layoff1.(暫時(shí))解雇2.停止做layout1.擺出,鋪開,展開2.安排,布置,設(shè)計(jì)lightup1.照亮,點(diǎn)燃2.容光煥發(fā)lookon觀看,旁觀lookover1.把……看一遍,把……過目2.察看,參觀lookthrough1.(從頭至尾)瀏覽2.詳細(xì)核查lookup1.好轉(zhuǎn)2.(在詞典等中)查找3.看望,拜訪4(to)尊敬makepeace言和,和解makesure1.查明,弄確實(shí)2.務(wù)必mayaswell還不如,不妨nosooner…than…一……就,剛……便nonebut除……之外沒有,只有noneotherthan不是別人,正是nothingbut只有,只不過oddsandends零星雜物,瑣碎用品ofnote顯要的,有名望的onaccountof為了……的緣故,因?yàn)?,由于onbusiness因公,因事onnoaccount決不,絕對不onone’sconscience引起某人悔恨(或內(nèi)疚)的onpurpose故意,有意onthejob在工作,上班ontheotherhand另一方面outofaction不(再)起作用,不(再)運(yùn)轉(zhuǎn)outofpractice生疏的,荒廢的outofseason不當(dāng)令的,不在旺季的outofstock無現(xiàn)貨的,脫銷的outofwork失業(yè)owingto由于,因?yàn)閜assaway去世pickup1.拿起,撿起2.取(物),用車接載(人)3.獲得,學(xué)會(huì)4.好轉(zhuǎn),改進(jìn),增加(速度)5.(使)重新開始,繼續(xù)presenceofmind鎮(zhèn)定自若prickupone’sears豎起耳朵注意聽,立刻注意起來priorup在……之前propup支持,資助pullout1.拔出,抽出,取出2.(車,船等)駛出3.(使)擺脫困境pullover把(車)駛到(或駛向)路邊pullthrough(使)度過危機(jī)(或難關(guān)),(使)恢復(fù)健康pullup(使)停下putina(good)wordfor為……說好話puton1.穿上,戴上2.上演,增加(體重)putthrough為……接通電話,接通電話reckonwith1.估計(jì)到,預(yù)料到2.處理,對付reinin嚴(yán)格控制,嚴(yán)加管束revolvearound以……為主要內(nèi)容runover1.在……上駛過,(撞車并)碾過2.把……很快地(或初略地)過一便see(toit)that一定注意到,務(wù)必使selloff廉價(jià)出售(存貨)setabout開始,著手setaside1.留出,拔出(時(shí)間,金錢等)2.把……置于一旁,不理會(huì)setback1.推遲,延緩,阻礙2.使花費(fèi)setdown寫下,記下setoff1.出發(fā),啟程2.激起,引起setstoreby重視,尊重setup1.創(chuàng)立,建立,為……作好準(zhǔn)備2.豎起,架起,建造3.開業(yè),開始經(jīng)商showup1.暴露,顯露2.來到,露面shrugup對……滿不在乎,對……不屑一顧sinkin被理解,被理會(huì)sniffout發(fā)覺,發(fā)現(xiàn)soakup吸收,攝取standdown退出(比賽或競選),(從某個(gè)職位上)退下standfor是……的縮寫,代表,意味著2.主張,支持3.[用于否定,疑問句]容忍,接受standupto1.勇敢的面對,抵抗2.經(jīng)得起,頂?shù)米tickto1.粘貼在……上2.緊跟,緊隨3.堅(jiān)持,忠于,信守strikeoff刪去,除名stumbleacross/to偶然遇到,碰巧找到suchas例如,諸如sureenough果然,毫無疑問takeafter(在外貌,性格等方面)與(父母等)相象takeaway減去takeeffect生效,起作用takeheart鼓起勇氣,振作起來takeintoconsideration考慮到,顧及Takeplace發(fā)生,進(jìn)行,舉行taketo1.對……產(chǎn)生好感,開始喜歡2.開始從事,形成……的習(xí)慣take/haveahandin參與,介入tanglewith與……爭吵(或打架),與……有糾葛thehell到底,究竟themoment(that)一……就themore……themore越……就越therankandfile普通士兵,普通成員tiedown限制,牽制timeaftertime/timeandagain屢次,一再tobeonthesafeside為了保險(xiǎn)起見tumbleto(突然)明白,領(lǐng)悟turnto求助于.求教于,查閱undernocircumstances無論如何不,決不wardoff防止,避開waveaside對……置之不理withaviewto為了,為的是withreferenceto關(guān)于,就……而論withrespectto關(guān)于,至于with/inregardto關(guān)于,就……而論英語四級聽力必考??嫉亩陶Z,幫大家掃除聽力路上的攔路虎。1.bill(1)賬單,買單。Iwillpaythebillthistimebecauselasttimeyoudidit.這次我來買單,因?yàn)樯洗问悄恪?2)提案。Weallpassedthebillonyesterday'sboardmeeting.在昨天的董事會(huì)上我們?nèi)蓖ㄟ^該提案。(3)紙幣。Here'sa10-dollarbill.Givemetwoticketsfortonight'sshowplease.這是一張10美元的紙幣,請給我兩張今晚演出的票,謝謝。2.apply這里我們詳細(xì)串聯(lián)一下在聽力考試中涉及到的與求職相關(guān)的短語。applyfor(申請),這是工作的第一步;既然要申請,必然需要遞交letterofapplication(求職信),只要你足夠confidentaboutyourself,就有可能獲得jobinterview(工作面試)的機(jī)會(huì)。是否能夠giveagoodimpression(留個(gè)好印象)給主管,那就得看你個(gè)人造化了。有些工作崗位會(huì)requiremuchtraveling,(要求經(jīng)常出差)還有些工作,做不了多久就會(huì)希望findawayout(找到出路)。正所謂城里城外,各有風(fēng)光。沒工作的人想工作,有工作的人又煩工作。3.aswell也Iftheweatheristhishottomorrow,wemayaswellgiveuptheideaofplayingtennisoutside.如果明天溫度還是這么高,我們也可能放棄到戶外進(jìn)行比賽的主意。4.assoonas一……就,盡快IwilldothatforyouassoonasIhavefixedthemachine.一修好機(jī)器我就會(huì)盡快為你完成那個(gè)工作。5.awfully非常地,相當(dāng)?shù)亍T诳谡Z中用于表程度的比例十分高。awfullynervous相當(dāng)緊張;awfullycold相當(dāng)冷;awfullysorry十分抱歉Tomlooksawfullynervous.湯姆看上去相當(dāng)緊張。Iamawfullysorry.Ididn'tmeantohurtyou.十分抱歉。我不想傷害你的。6.beboundto肯定,注定Themoviestartsin5minutesandthere'sboundtobealongline.電影還有5分鐘就開始了在那里肯定排著長隊(duì)。7.betiredof厭煩。當(dāng)一個(gè)人感到厭煩的時(shí)候,也是最容易loseone'stemper(生氣)的時(shí)候。I'mtiredofmoviesaboutromanticstories.我已經(jīng)徹底厭煩了電影中的浪漫故事。8.bewornout(1)筋疲力盡,這個(gè)表達(dá)不太正式,多用于口語。I'musuallywornoutattheendoftheday.在一天快結(jié)束時(shí)我時(shí)常覺得很累。(2)破舊不堪。Mysoleswerewornoutafteralongtimetrip.經(jīng)過長時(shí)間的旅行,我的鞋底已經(jīng)破舊不堪。9.better(1)'dbetter最好是I'dbetterreadoneofthearticlesfortheclass.我最好還是為上課讀篇文章準(zhǔn)備一下。Ithinkyou'dbetterfindanotherpartner.我想你最好還是另找一個(gè)搭檔吧。(2)makeitbetter讓……更好I'drewritethelasttwoparagraphstomakeitbetter.我已經(jīng)重寫了最后兩段以使它更好。(3)bebetter更好些Itoldyouitwouldbebetterforyouifyoutookfewercoursesduringthefirstsemester.我告訴過你如果你在第一個(gè)學(xué)期少選一些課程會(huì)比較好一些。10.book(1)書。本意,簡單名詞。(2)預(yù)定,訂購。bebookedup被預(yù)定空了;bookingoffice售票處Allthemorningflightshavebeenbookedup.所有明早的飛機(jī)票都預(yù)定光了。11.briefing(1)簡介。會(huì)議之前,總要有一個(gè)項(xiàng)目叫做Giveabriefing.Mrs.Lung'sbriefingseemstogoonforever.朗女士的簡報(bào)似乎沒完沒了。(2)news/pressbriefing新聞發(fā)布會(huì)12.change(1)改變,更改。這是該詞的基本意思,看兩個(gè)例子回顧一下。I'dlovetoseeadifferenttypeofmovieforachange.我想換換口味,看場不同類型的電影。I'llhavetogetmyticketchanged.我必須得更改我的票。(2)零錢。這是在口語中經(jīng)常使用的意思。Twoticketsandhere'sadollarfortycentschange.這是兩張票以及一美元四十美分的找零。Jane,doyouhavesomechange?Ihavetomakeacallonthepayphone.Jane,你有零錢嗎?我想在公用電話亭打個(gè)電話。13.check(1)檢查?;疽馑?。checkourbaggage檢查行李Couldyoucheckformewhoborrowedit?你能幫我查查是誰借走了嗎?Didyoucheckthepowerplugandpresstheplaybutton?你是否檢查了電源插頭并按了播放鍵了呢?(2)登機(jī)臺(tái)。check-incounterIsthisthecheck-incounterforFlight914toLosAngeles?這是飛往洛杉磯的914號航班的登機(jī)臺(tái)嗎?(3)詢問。checkonit問問看MaybeIshouldcalltocheckonit.也許我應(yīng)該打個(gè)電話問問看。(4)支票。Signthecheck.簽這張支票。14.copy(1)一本,一份。acopyof口語中經(jīng)常使用。I'dliketobuyacopyofProfessorFranklin'sbookOnAmericanCulture.我想買本富蘭克林教授寫的關(guān)于美國文化的書。WouldyoulikeacopyofprofessorSmith'sarticle?你想要份史密斯教授的文章嗎?(2)復(fù)印。簡單動(dòng)詞。Couldyoucopythisarticleforme?你能為我拷貝一下這篇文章嗎?15.count(1)數(shù)數(shù)。Sheiscountingthedays.她每天都在數(shù)著日子。(2)指望。counton依賴We'llhavetocountongoodweather.我們不得不指望一個(gè)好天氣。16.cover(1)封面。hardcover精裝書,與hardbackbook同意。另外,每個(gè)娛樂雜志的封面都免不了會(huì)有一位漂亮?xí)r尚的coverfigure(封面人物)。Thehardcoverisonsaleforthesamepriceasthepaperbackthisweekinthebookshop.在書店,這些精裝本與平裝本價(jià)格相同。(2)讀完,完成。Ithinkwe'vecoveredeverything.我認(rèn)為我們完成所有事情了。Ijustcoveredafewchapterswhichinterestedmemost.我只讀完了自己最感興趣的幾章。17.crosswordpuzzle縱橫字謎,一種填字游戲,。既可以entertainoneself(自我娛樂),也是一種不錯(cuò)的智力訓(xùn)練。Thisisnotagame.It'sonlyacrosswordpuzzlethathelpsincreasemyvocabulary.這不是游戲。這只是可以幫助我提高單詞量的一種縱橫字謎。18.drama戲劇。這是一種西方的藝術(shù)形式。四級聽力中曾經(jīng)多次出現(xiàn)。其他的藝術(shù)形式還有TVplay(電視劇),soapopera(肥皂劇),concert(音樂會(huì))……Somepeoplejustcan'tseemtoappreciatereal-lifedrama.有些人似乎不愿意欣賞真實(shí)生活的戲劇表演。19.drop(1)拜訪。dropbyIwonderifyoucandropbytomorrowevening.我想知道你能否在明晚過來。(1)載人一程。I'mgoinghome,butIcandropyouatthesupermarket.我要回家,但我可以載你到超市。(2)忘掉,放棄。dropitWecandropitthistime.Butdon'tdoitagain.這次我們可以算了,但下次不要再犯。Ihavetodropitthistime.我這次不得不放棄。20.drunkdriving酒后駕駛。在四級聽力中出現(xiàn),一般都是作為trafficaccident(交通事故)的主要原因之一。Ithinkit'shightimeweturnedourattentiontothedangerofdrunkdrivingnow.我認(rèn)為這是我們必須重視酒后駕駛的危險(xiǎn)性的時(shí)候了。21.expect愿意“期待,期望”。Nobodyexpectsyoutobeasuperstar.沒有人指望你會(huì)成為超級明星。引申意思為“等待,預(yù)期”。ThelecturewasmuchmoredifficulttofollowthanIhadexpected.這個(gè)演講比我預(yù)期的要難懂多了。Mr.Smithisexpectingyouat3o'clock.史密斯先生等待著你三點(diǎn)鐘到來。22.extremely使用頻率非常高,不亞于very,這個(gè)東西extremelyexpensive。Thespeechtheblindgirlgavethiseveningwasextremelymoving.今晚那個(gè)盲人女孩的演講非常感人。23.film(1)電影。最常見用語。(2)膠卷。ranoutoffilm膠卷用完;arolloffilm一卷膠卷;developthefilm沖洗膠卷,說成wash就完蛋了。(3)拍攝。filmtheriverbank拍攝河岸景致24.gainsandlosses得與失。Thinkaboutthegainsandlossesbeforeyoumakethedecision.在你做出決定之前,一定要好好想想得與失。25.give(1)givesbaride請某人搭便車Couldyougivemearidetoschooltomorrow?你明天能載我一程去學(xué)校嗎?(2)givesbahand幫助某人Canyougivemeahand,Mike?麥克,你能幫我一下嗎?(3)givesbaring打電話給某人IneedtogiveMumaringandtellherIwillnotbebackfordinner.我要給媽媽打電話告訴她不回去吃晚飯了。26.go(1)gobroke破產(chǎn);身無分文(2)goforaride乘車外出Mysisterwantedtogoforaridearoundtown.我的姐姐想乘車去鎮(zhèn)上轉(zhuǎn)一轉(zhuǎn)。(3)goDutch各付各的(4)goahead向前進(jìn);繼續(xù)下去Goahead,please.請繼續(xù)向前進(jìn)。(5)goonforever永遠(yuǎn)繼續(xù)下去Mrs.Lung'sbriefingseemstogoonforever.郎女士的演說似乎沒完沒了。(6)goagainst不順心Oh,yes,butnotathingtogoagainstme.哦,是啊,沒有什么不順心的事情發(fā)生在我身上。(7)goover復(fù)習(xí),溫習(xí)I'vehavetogoovermynotesfortomorrow'smidterm.我不得不為明天的期中考試復(fù)習(xí)筆記。
高中數(shù)學(xué)三角形面積公式高中數(shù)學(xué)三角形面積公式
/高中數(shù)學(xué)三角形面積公式高中數(shù)學(xué)三角形面積公式由不在同一直線上的三條線段首尾順次連接所組成的封閉圖形叫做三角形。平面上三條直線或球面上三條弧線所圍成的圖形。三條直線所圍成的圖形叫平面三角形;三條弧線所圍成的圖形叫球面三角形,也叫三邊形。面積公式:(1)S=ah/2(2).已知三角形三邊a,b,c,則(海倫公式)(p=(a+b+c)/2)S=√[p(p-a)(p-b)(p-c)]=(1/4)√[(a+b+c)(a+b-c)(a+c-b)(b+c-a)](3).已知三角形兩邊a,b,這兩邊夾角C,則S=1/2*absinC(4).設(shè)三角形三邊分別為a、b、c,內(nèi)切圓半徑為rS=(a+b+c)r/2(5).設(shè)三角形三邊分別為a、b、c,外接圓半徑為RS=abc/4R(6).根據(jù)三角函數(shù)求面積:S=absinC/2????a/sinA=b/sinB=c/sinC=2R注:其中R為外切圓半徑。
FISH檢測FISH檢測
/FISH檢測FISH檢測HER-2的意義乳腺癌有效的治療取決于正確的選擇治療方案,腫瘤專家研究發(fā)現(xiàn)HER-2的水平是以阿霉素為基礎(chǔ)藥物化療重要而獨(dú)立的預(yù)后因子。HER-2水平的檢測被認(rèn)為是選擇乳腺癌化療的標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。HER-2水平的檢測對乳腺癌治療具有指導(dǎo)性意義。不準(zhǔn)確的結(jié)果會(huì)造成不正確的治療方案。導(dǎo)致病人遭受不必要的化療或者使病人喪失有效的治療良機(jī)。 HER-2/neu也稱作CerbB-2,在調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長中起著重要的作用,是分子量為185kd的轉(zhuǎn)膜細(xì)胞受體,屬于酪氨酸酶家族的成員。HER-2被證實(shí)在乳腺癌、卵巢癌和其它腫瘤上擴(kuò)增和過表達(dá)。其擴(kuò)增和過表達(dá)被認(rèn)為是乳腺癌最重要預(yù)后和化療標(biāo)記。大約有25%-30%乳腺癌有HER-2基因擴(kuò)增。 化療是乳腺癌術(shù)后最重要的治療方法之一,患者腫瘤HER-2擴(kuò)增對以阿霉素為基礎(chǔ)化療的敏感性好,研究表明,HER-2擴(kuò)增的病人實(shí)施強(qiáng)化劑量的化療后其生存率明顯提高。而對無HER-2擴(kuò)增的病人沒有那么好的效果。所以對無HER-2擴(kuò)增的病人沒有必要執(zhí)行這樣的化療。準(zhǔn)確的HER-2水平檢測為正確選擇治療方案提供重要依據(jù)。目前用于治療乳腺癌的單克隆抗體Herceptin理論上只對細(xì)胞膜上過多HER-2蛋白表達(dá)的細(xì)胞才有作用,所以Herceptin治療需要篩選HER-2陽性的患者才有可能成功。目前檢測HER-2基因擴(kuò)增或HER-2蛋白過度表達(dá)的方法有許多種,有南方點(diǎn)墨法、西方點(diǎn)墨法、北方點(diǎn)墨法、免疫組織化學(xué)染色法(IHC)和熒光原位雜交法(fluorescenceinsituhybridization;FISH)等。目前DAKOHerceptintest,VysisPathVysionHER-2DNAProbe試劑盒和OncorINFORMHER-2/neu已通過美國食品藥物管理局(FDA)的認(rèn)證,目前被認(rèn)為是比較可靠的方法。IHC和FISH均可以使用福爾馬林固定的組織蠟塊來檢測,和一般病理組織標(biāo)本處理相同,病理存檔的組織塊也能用于HER-2的檢測,因此目前實(shí)驗(yàn)室多數(shù)使用IHC和FISH來檢測HER-2。Herceptintest和FISH相比Herceptintest操作時(shí)間比較短,大約4-6個(gè)小時(shí)即可完成,而FISH需要隔夜完成。使用的設(shè)備Herceptintest只需要一般光學(xué)顯微鏡,F(xiàn)ISH則需要使用熒光顯微鏡。從分子生物學(xué)原理上講FISH檢測的是腫瘤細(xì)胞的DNA,而Herceptintest(免疫化學(xué)法)檢測的是細(xì)胞膜表面的蛋白質(zhì)。實(shí)際上真正執(zhí)行基因功能的物質(zhì)是蛋白質(zhì)而不是DNA,這要看HER-2基因是否擴(kuò)增,當(dāng)然以觀察細(xì)胞膜表面HER-2蛋白質(zhì)的量是否增加最為直接。也最為可信。因?yàn)橛袝r(shí)即使DNA有擴(kuò)增其結(jié)果未必能在蛋白質(zhì)曾面表現(xiàn)出來。因?yàn)橛蒁AN有表現(xiàn)到蛋白質(zhì)被制造出來必須經(jīng)過很多程序,中間可能出現(xiàn)很多干擾因素。除此之外,免疫化學(xué)檢測法比較便宜,省時(shí),可以較普遍的篩選。 FISH的優(yōu)點(diǎn)在于使用傳統(tǒng)分子生物學(xué)方法檢測腫瘤組織的DNA。FISH在熒光顯微鏡下可以確認(rèn)出腫瘤所在的位置,以VysisPathVysionHER-2DNAProbe來說,它會(huì)把HER-2基因部位橘色熒光亮點(diǎn),還將第17對染色體的中心顆粒(centromere)呈現(xiàn)綠色亮點(diǎn),我們只要對比橘色和綠色亮點(diǎn)的數(shù)目,若橘色點(diǎn)/綠色點(diǎn)大于2,就表示有HER-2擴(kuò)增,正常細(xì)胞橘色點(diǎn)/綠色點(diǎn)數(shù)目比值小于2。FISH同IHCHER-2水平檢測方法相比,IHC檢測的準(zhǔn)確性不如原位雜交(CISH)和原位熒光雜交法(FISH)。就各種檢測方法比較FISH為最好,F(xiàn)ISH檢測的結(jié)果可靠,被喻為HER-2水平檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。 HER-2免疫組織化學(xué)+2的意思是腫瘤組織在免疫組織化學(xué)染色下著色強(qiáng)度為2價(jià)。多數(shù)認(rèn)為HER-2+3(3價(jià))具有臨床意義,可以作為使用Herceptin治療的依據(jù)。her-2IHC+2則必須加作FISH檢測是否真的有HER-2擴(kuò)增。而HER-2IHC0或+1則表示沒有沒有HER-2過表達(dá),不必再作FISH,也不適合使用Herceptin治療。FISH檢測方法試劑和儀器Vysis提供的材料根據(jù)訂貨該盒內(nèi)含有大約足夠檢測20,50和100人份試劑。限定一份檢測22x22mm靶區(qū)。LSIHER2/neu黃色光譜(lowcopynumberE.colivector)/CEP17綠光譜DNA探針(E.coliplasmid)VysisP.N(productnumber): 30-17060/35-171060Quantity: 200uL/500uL/500uLx2forthe100assaykitStorage: -20℃inthedarkComposition(成分): SpetrumGreenfluorophore-labeledalphasatelliteDNAprobeforchromosome17,SpectrumOrangefluophore-labeledDNAprobefortheHER-2/neugenlocus,andblockingDNA,pre-denaturedinhybridizationbuffer.2)DAPIConuterstain VysisP.N: 30-804840/30-804860/30-804960 Quantity: 300uL/600uL/1000Ul Storage: -20℃inthedarkComposition: 1000ng/mLDAPI(4,6-diamino-2phenylindole)inphenylenediaminedihydrochloride,glycerol,andbuffer.NP-40VysisP.N: 30-804820Quantity: 4mL(2vials)Storage: -20to25℃Composition: NP-4020XSSCsaltsVysisP.N: 30-805850Quantity: 66gforupto250mLof20XSSCsolutionStorage: -20to25℃Composition: sodiumchlorideandsodiumcitrateNote:MaterialSafetyDataSheets(MSDS材料安全數(shù)據(jù)表)forallreagentsprovidedinthekitsareavailableuponrequestfromtheVysisTechnicalDepartment.Storageandhandling貯存和處理未開封的PathVysis試劑盒-20℃貯存并避光和潮濕。20XSSC鹽和NP-40可以單獨(dú)貯存于室溫。每一種成分包裝上面都標(biāo)明了有效期。同時(shí)也標(biāo)明了打開和未開包裝的貯存條件。試劑盒中的某些成分接觸光、熱或潮濕會(huì)影響試劑的有效期,應(yīng)該避免。不按包裝規(guī)定的條件保存可能會(huì)影響檢測結(jié)果。需要的材料但Vysis公司不提供實(shí)驗(yàn)室試劑· HER-2/nue探針檢測正常對照(正常信號率)orderNo.30-805093· 福爾馬林固定,石蠟包埋,培養(yǎng)好的人細(xì)胞株(normalLSIHER-2/nue;CEP17ratio)應(yīng)用型顯微鏡載玻片數(shù)量:5片,對照片在15-30℃干燥劑防潮密封在容器中貯存?!?HER-2/nue探針界限對照片(弱擴(kuò)增信號率)orderNo.30-805042;福爾馬林固定,石蠟包埋。培養(yǎng)好的人細(xì)胞株(低水平HER-2/nue擴(kuò)增)應(yīng)用型顯微鏡載玻片數(shù)量:5片,對照片在15-30℃干燥劑防潮密封在容器中貯存。· 石蠟預(yù)處理試劑盒(Vysiscat.﹟32-801200)盒內(nèi)包括: · 預(yù)處理液(NaSCN)數(shù)量:5X50mL · 蛋白酶(胃蛋白酶2500-3000單位/mg)數(shù)量:5X25mg · 蛋白酶緩沖液(NaClsolution,pH2)數(shù)量:5X50Ml · 緩沖洗液(2XSSC,pH7)數(shù)量:2X250mL· 中性緩沖福爾馬林液(4%多聚甲醛PBS配制)· Hemo-De(血液德)透明劑(FisherproductNo.15-182-507A)· 蘇木精和伊紅(H&E)· 適當(dāng)?shù)臒晒怙@微鏡浸泡油。室溫貯存· 超純甲酰胺。從發(fā)貨計(jì)算4℃保存1個(gè)月(查看生產(chǎn)商推薦的詳細(xì)信息)· 100%乙醇。室溫貯存· 濃縮的(12N)鹽酸· 1N氫氧化鈉· 純凈水(蒸餾水或去離子水或Milli-Q)。室溫貯存· 橡膠水泥膠· Drierite德里拉特[干燥用無水硫酸,商品名]和液氮實(shí)驗(yàn)室設(shè)備· 預(yù)清潔硅化或正電荷顯微鏡載玻片· 載玻片加熱器(要求有準(zhǔn)確的溫度數(shù)字顯示)45-50℃· 22mmX22mm玻璃蓋玻片· 可調(diào)容積吸管(1-10uL)和無菌微量移液管頭· 聚丙烯微量離心管(0.5-1.5mL )· 計(jì)時(shí)器· 切片機(jī)· 磁力攪拌器· 漩渦混合器· 微量離心機(jī)· 刻度量筒· 水浴鍋(37±1℃,72±1℃和80±1℃)· 水?。?0℃)無蛋白質(zhì)· 干燥箱(37℃-56℃)· 鉆石筆· 雜交濕盒· 鑷子· 一次性注射器(5mL)· 染色缸(6)建議型號:WheatonProductNo.900620豎式染色缸· 熒光顯微鏡設(shè)備和推薦的濾光片(見第二部分)· pH計(jì)和pH試紙· 溫度計(jì)· 帶蓋載玻片盒· 0.45細(xì)孔過濾設(shè)備顯微鏡設(shè)備和附屬品顯微鏡:觀察原位雜交結(jié)果需要一種磊照明熒光顯微鏡,如果有合適的熒光顯微鏡。應(yīng)該檢查熒光顯微鏡是否能較好的觀察原位雜交樣品。用老式顯微鏡一般DNA染色例如DAPI,碘化丙啶和奎納克林不具備足夠的功能進(jìn)行FISH檢測。顯微鏡常規(guī)清潔和定期調(diào)試應(yīng)該由生產(chǎn)商家的技術(shù)人員完成。注釋:Oftenapresumedfailureofreagentsinaninsituassaymayactuallyindicatethatamalfunctioningorsub-optimalfluoroscopeorincorrectfiltersetisbeingusedtoviewasuccessfulhybridizationassay.激發(fā)光源:100W汞燈它的大約壽命200小時(shí)是推薦的激發(fā)光源。汞燈用后應(yīng)該記錄使用小時(shí)數(shù)。超過規(guī)定的時(shí)間之前應(yīng)該更換。確保汞燈適當(dāng)?shù)膽?yīng)用。接物鏡:顯微鏡汞燈100W使用的熒光接物鏡浸泡油數(shù)值孔徑≥0.75。一個(gè)40X接物鏡用10X目鏡連接適合掃描。對FISH分析用63X或100X油浸消色差透鏡型接物鏡就可以獲得滿意的結(jié)果。浸泡油:油浸接物鏡使用的浸油,是一種低自發(fā)熒光和專用熒光顯微鏡的配方。濾光片:多帶通熒光顯微鏡濾片裝置最適合用于CEP和LSIDAN探針試劑盒可以從Vysis獲得一些顯微鏡濾片型號。PathVysion試劑盒推薦濾片裝置是DAPI/9-Orange雙帶通,DAPI/Green雙帶通和DAPI/Green/Orange三重帶通。LSIHER-2/nue原位雜交和CEP17探針對它們的靶區(qū)分別標(biāo)記橙色和綠色熒光。其它所有DNADAPI染色為綠色熒光。工作液的準(zhǔn)備20XSSC(3M氯化鈉,0.3M檸檬酸鈉,pH5.3)配制20XSSCpH5.3加入的順序:66g 20XSSC200mL 純化水250mL 最終量徹底混合,用pH計(jì)室溫下測pH,用濃鹽酸調(diào)pH到5.3。加純水至總量250沒mL。通過0.45um孔徑的過濾設(shè)備過濾。室溫貯存6個(gè)月。變性液(70%甲酰胺/2XSSC,pH7.0-8.0)配制甲酰胺的順序:49mL 甲酰胺7mL 20XSSC,pH5.314mL 純化水70mL 最終量徹底混合,用pH計(jì)室溫下測pH,用玻璃電極(glasselectrode利用薄玻璃膜將兩種溶液隔離而產(chǎn)生電勢差的電極,常用于測量溶液的pH)調(diào)pH至7.0-8.0之間。液體可以保存一周。每次用前檢查pH。貯存于2-8℃,不用的時(shí)候蓋緊容器的蓋子。乙醇液用100%乙醇和純化水v/v稀釋70%,80%。避免蒸發(fā)或稀釋過量,不用的時(shí)候蓋緊容器的蓋子。配制后可以使用一周。后雜交緩沖洗液(20XSSC/0.3%NP-40)配制順序:100mL 20XSSC,pH5.3847mL 純化水3mL NP-401000mL 最終量徹底混合,用pH計(jì)室溫下測pH,用1N氫氧化鈉調(diào)pH至7.0-7.5。加純化水到總量1000mL。通過0.45um孔徑的過濾設(shè)備過濾。使用過的液體當(dāng)日丟棄,未使用過的液體室溫貯存6個(gè)月。注意事項(xiàng)和預(yù)防措施VysisPathVysionHER-2DNAProbekit用于體外診斷使用。ThePathVysionKit僅用于福爾馬林固定石蠟包埋乳腺癌組織;不作為新鮮組織或非乳腺癌組織使用。所有生物學(xué)標(biāo)本經(jīng)過防止傳染病傳遞的藥劑處理。盒子里提供的是人細(xì)胞株經(jīng)過10%福爾馬林固定的對照細(xì)胞涂片。因?yàn)槌32磺宄欠駮?huì)引起傳染,所有人標(biāo)本和對照片是經(jīng)普遍預(yù)防處理。標(biāo)本處理指南從美國疾病控制中心獲得。標(biāo)本應(yīng)該避免酸,強(qiáng)堿或過熱,這樣的條件會(huì)破壞DNA引起FISH檢測失敗。下面所有步驟對標(biāo)本變性,雜交和檢測可以引起不可接受失敗或錯(cuò)誤的結(jié)果。相同組織塊的第10張切片應(yīng)該進(jìn)行H.E染色對靶區(qū)進(jìn)行辨認(rèn)。使用其它試劑代替Vysis公司提供的試劑可能對雜交條件產(chǎn)生不利的影響。確保標(biāo)記的有效期以盒子上正確貯存說明為基礎(chǔ),不按貯存說明要求存放可能對檢測結(jié)果不利。如果貯存在低溫,20XSSC可以出現(xiàn)結(jié)晶,如果結(jié)晶在室溫下不能再溶解,該液應(yīng)該丟棄。如果其它工作液沉淀或渾濁應(yīng)該丟棄,從新配制新工作液。該DAPI對比染色含有DAPI(4,6-二氨基-2-苯基吲哚)和1,4苯二胺。DAPI是一種可能的誘變劑明確建立在遺傳毒性影響的基礎(chǔ)上。1,4苯二胺被認(rèn)為是一種皮膚致敏劑和一種可能的呼吸致敏劑,避免吸入,攝取或皮膚接觸。參考MSDS詳細(xì)警告。熒光暴露在光線下容易被光漂白,限制這種降級。操作所有含熒光的液體時(shí)要減少光線暴露。所有步驟牽涉到處理雜交的切片。所有(孵育、洗等)步驟不要在光線下應(yīng)該在暗處操作。LSIHER-2/neuCEP17DNA探針混合物含有甲酰胺,一種致畸因子。避免接觸皮膚和黏膜。校準(zhǔn)溫度需要測量液體、水浴鍋和恒溫箱的溫度??傄藢?shí)預(yù)處理液,變性液和洗液的溫度,使用前用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)對科普林缸內(nèi)液體進(jìn)行測量核對溫度。所有有危險(xiǎn)的物質(zhì)應(yīng)該按當(dāng)?shù)睾蛧抑笇?dǎo)方針進(jìn)行無害化處理。標(biāo)本處理和載玻片準(zhǔn)備標(biāo)本收集和處理PathVysion試劑是為福爾馬林固定石蠟包埋的組織樣品檢測而設(shè)計(jì)的,組織收集應(yīng)該按照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)程序執(zhí)行。PathVysion檢測對組織的選擇應(yīng)該由病理學(xué)家完成。標(biāo)本避免接觸酸,強(qiáng)堿或非常高的溫度。這種情況會(huì)破壞DNA導(dǎo)致FISH檢測失敗。切片厚度4-6微米,福爾馬林固定,石蠟包埋的組織可以按照實(shí)驗(yàn)室常規(guī)步驟處理和貯存。確保PathVysion試劑盒檢測的最佳結(jié)果,對所有標(biāo)本分析這些方法應(yīng)該一致。用于FISH檢測分析組織塊的第10張作H.E染色,以便對靶區(qū)進(jìn)行辨認(rèn)。組織切片應(yīng)該貼在膠包被載玻片的正面,以便在FISH檢測中脫片。PathVysion試劑盒有足夠檢測大約20人份的試劑;每份限定22mmX22mm區(qū)域。較大的組織切片超過22mmX22mm區(qū)域每份加探針應(yīng)該大于10uL。福爾馬林固定石蠟包埋組織切片準(zhǔn)備使用下列方法進(jìn)行準(zhǔn)備切片4-6微米。切片飄在無蛋白質(zhì)40℃水中。貼在有機(jī)硅烷膠包被載玻片的正面。讓切片在空氣中干燥。(StartprocessingProbeChekcontrolslideshere)烤切片56℃過夜。切片預(yù)處理在進(jìn)行PathVysion試劑盒檢測前標(biāo)本需要經(jīng)過固定,切片必須脫蠟。PathVysion預(yù)處理試劑盒插在包裝中,(ProductNo.32-801200)含有詳細(xì)的說明。下面是簡要的步驟說明。切片脫蠟切片浸在Hemo-De10min,室溫。用新Hemo-De重復(fù)兩次。切片在100%乙醇5min,室溫,重復(fù)??諝飧稍锴衅虬亚衅旁?5-50℃載玻片加熱器上。預(yù)處理切片切片浸在0.2NHCI20minutes切片浸在純化水中3minutes切片浸在緩沖洗液中3minutes切片浸在預(yù)處理液中80℃30minutes切片浸在純化水中1minutes切片浸在緩沖洗液中5minutes,重復(fù)蛋白酶處理在載玻片邊緣用紙巾吸干載玻片上過多的緩沖液切片浸在蛋白酶液中37℃,10minutes切片浸在緩沖洗液中5minutes,重復(fù)干燥切片在45-50℃載玻片加熱器上2-5minutes。標(biāo)本固定切片浸在中性緩沖福爾馬林液中,室溫,10minutes。切片浸在緩沖洗液中5minutes,重復(fù)干燥切片在45-50℃載玻片加熱器上2-5minutes。繼續(xù)thePathVysion檢測擬訂計(jì)劃FISH測試步驟Fluorescence InSituHybridizationProcedureSummary樣品DNA變性探針液DNA變性和雜交步驟準(zhǔn)備工作應(yīng)該同步進(jìn)行。將雜交用的濕盒在37℃中預(yù)熱(濕盒內(nèi)放有濕紙巾)。使用前在室溫下將變性液pH調(diào)到7.0-8.0,把變性液加入玻片染色缸內(nèi)(Coplinjar)而后在72±1℃水浴至少30min或變性液達(dá)到72±1℃,使用前測量溫度。使用鉆石筆尖劃刻標(biāo)記雜交區(qū)域。將準(zhǔn)備好的切片放入到達(dá)到72±1℃的變性液中(<6片/缸)5min。Note:Verifythesolutiontemperaturebeforeeachuse.用鑷子從變性液中取出切片并立即放入室溫70%酒精洗液中。搖動(dòng)切片去除甲酰胺,讓切片在酒精中維持1min。從70%酒精取出栽玻片,放入80%酒精,再入100%酒精。載玻片的底部接觸到一個(gè)小瓶子排掉載玻片上過多的酒精,用實(shí)驗(yàn)室紙巾擦干載玻片的底面。放在45-50℃載玻片加熱器上2-5min。探針準(zhǔn)備室溫下讓探針復(fù)溫,降低探針的黏度,以便探針充分準(zhǔn)確吸取。渦流混合。把內(nèi)容物裝入試管底部,每個(gè)試管用臺(tái)式離心機(jī)離心2-3秒,然后再次輕輕渦流混合。雜交加10uL混合后的探針到載玻片的靶區(qū),立刻在探針上加蓋22mmX22mm蓋玻片,讓探針均勻的在蓋玻片下擴(kuò)散。氣泡會(huì)干擾雜交應(yīng)該避免。探針使用后需要及時(shí)再冷凍保存。按下列方法用橡膠水泥密封蓋玻片:用5mL注射器抽橡膠水泥,在蓋玻片的周圍注射少量的橡膠水泥于蓋玻片和載玻片交界處重疊,因此在蓋玻片和載玻片周圍形成密封圈。把載玻片放入預(yù)熱的雜交濕盒中,蓋緊濕盒的蓋子37℃過夜(14-18小時(shí))雜交后洗滌加雜交后緩沖洗液(2XSSC/0.3%NP-40)到玻片染色缸內(nèi)。放進(jìn)72±1℃水浴中預(yù)熱雜交后緩沖洗液至少30min或液體溫度已經(jīng)達(dá)到72±1℃。注:在每次洗浴之前洗液的溫度必須回到72±1℃。室溫下加雜交后緩沖洗液到第二個(gè)玻片染色缸。洗液使用1天后都要丟棄。首先用鑷子輕輕拉掉密封劑,去除載玻片上密封的橡膠水泥。在室溫下將載玻片浸入雜交后緩沖洗液中漂洗掉蓋玻片。蓋玻片小心被去掉后,吸干載玻片邊緣過多液體,把載玻片浸入雜交后緩沖洗液中72±1℃2min(<6片/缸)。從雜交后緩沖液中移出每張載玻片,把載玻片放在暗處豎立空氣中干燥。(關(guān)閉抽屜或關(guān)閉貴出門足可以)加1010uLDAPI復(fù)染載玻片靶區(qū)并加蓋蓋玻片。在信號計(jì)算前載玻片貯存于暗處。載玻片貯存在暗處雜交載玻片(帶有蓋玻片)貯存于-20℃。使用熒光顯微鏡時(shí),先從-20℃移出來讓載玻片達(dá)到室溫。
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1/4如何讀懂一首古詩如何讀懂一首古詩?審視標(biāo)題,挖掘信息。例1:秋旱方甚,七月二十八忽夜雨,喜而有作宋陸游嘉谷如焚稗草青,沉憂耿耿欲忘生。鈞天九奏簫韶樂,未抵虛檐瀉雨聲。例2:題李凝幽居唐賈島閑居少鄰并,草徑入荒園。鳥宿池邊樹,僧敲月下門。過橋分野色,移石動(dòng)云根①。暫去還來此,幽期②不負(fù)言。例3:近試上張水部朱慶余洞房昨夜停紅燭,待曉堂前拜舅姑。妝罷低聲問夫婿,畫眉深淺入時(shí)無。關(guān)注作者,尋找提示。(聯(lián)系詩人的生平,詩人創(chuàng)作風(fēng)格)例:登岳陽樓唐杜甫昔聞洞庭水,今上岳陽樓。吳楚東南坼,乾坤日月浮。親朋無一字,老病有孤舟。戎馬關(guān)山北,憑軒涕泗流。利用注解,尋找?guī)椭楹我⒔??典故、背景南鄉(xiāng)子登京口北固亭有懷(宋辛棄疾)何處望神州?滿眼風(fēng)光北固樓。千古興亡多少事?悠悠。不盡長江滾滾流!年少萬兜鍪①,坐斷東南戰(zhàn)未休。天下英雄誰敵手?曹劉。生子當(dāng)如孫仲謀②?!咀ⅰ竣俣钓剩侯^盔,這里借指戰(zhàn)士。②生子當(dāng)如孫仲謀:曹操曾與孫權(quán)對壘,見吳軍陣容整肅,孫權(quán)儀表堂堂,感嘆說:“生子當(dāng)如孫仲謀,劉景升(劉表)兒子若豚犬(豬狗)耳!”抓住關(guān)鍵詞句,理解詩歌內(nèi)容。關(guān)鍵詞語——詩眼、詩人所煉的字(主要是動(dòng)詞、形容詞)、典故關(guān)鍵句子——律詩的尾聯(lián)(“起承轉(zhuǎn)合”的“合”句,或抒情,或議論,主旨所在)例:山居秋暝王維空山新雨后,天氣晚來秋。明月松間照,清泉石上流。竹喧歸浣女,蓮動(dòng)下漁舟。隨意春芳歇,王孫自可留。品味詩歌意境,領(lǐng)悟作者的感情。(
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