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文檔簡(jiǎn)介
第十一章分光光度法Spectrophotometry
1
吸收光譜分析
AnalysisofAbsorptionSpectroscopy吸光光度法是以物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收為基礎(chǔ)的分析方法.可見(jiàn)光區(qū)(400-750nm)
的吸光光度法211.1物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收單色光具有同一波長(zhǎng)的光復(fù)合光不同波長(zhǎng)光組成的混合光互補(bǔ)光透射光與吸收光組成白光,稱為互補(bǔ)色光
物質(zhì)的顏色對(duì)不同波長(zhǎng)的光選擇性吸收溶液的顏色被吸收光色的互補(bǔ)色3硫酸銅溶液,吸收黃光呈現(xiàn)藍(lán)色.青藍(lán)白光綠青藍(lán)紫紅橙黃光的互補(bǔ)色示意圖高錳酸鉀溶液,吸收
綠光,呈現(xiàn)紫色。4
吸收曲線
入射光強(qiáng)度I0透射光強(qiáng)度I吸收光強(qiáng)度Ia
I0=I+
IaI0I溶液透光度T
T=I/I0吸光度
A
A=-lg
T=lg
I0/I5A~l作圖得吸收曲線(吸收光譜)最大吸收波長(zhǎng)吸光度測(cè)量的靈敏度最高6
11.2光吸收定律1.Lambert-Beer定律
一束平行單色光通過(guò)有色溶液時(shí),溶液的吸光度A與液層厚度L和溶液濃度c的乘積成正比。--------Lambert-Beer定律
K—常數(shù),與溶液性質(zhì),T,
l有關(guān)A=KLc7
c/g·L-1
a
吸光系數(shù)單位:L·g-1·cm-1
c/mol·L-1
e
摩爾吸光系數(shù)
單位:L·mol-1·cm-1A=KLcA=εLcA=aLc8
emolarabsorptivity
e
表示吸光物質(zhì)濃度為1mol/l,液層厚度為1cm時(shí)溶液的吸光度.
e值越大,溶液的吸光能力越強(qiáng),顯色反應(yīng)的靈敏度越高.e
是吸光物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下的特征常數(shù)
e
值是選擇顯色反應(yīng)的重要依據(jù).A=εLc9
例1:濃度為0.51mg/ml的Cu2+溶液,用雙環(huán)己酮草酰二腙光度法測(cè)定.在600nm波長(zhǎng)處用2cm比色皿測(cè)得A=0.297.求e,a.A=εLcA=aLc102.Lambert-Beer定律的偏離A=e
Lc原因:1)非單色光
2)化學(xué)因素:離解、締合、異構(gòu)化等Ac01111.3分光光度分析的方法和儀器1.測(cè)定方法1)目視比色法2)分光光度法定量方法
標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)比較法
As/Ax=Cs/CxAcAxcx0··光度分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線····12
2.分光光度計(jì)1.光源2.單色器3.吸收池4.檢測(cè)系統(tǒng)5.信號(hào)顯示系統(tǒng)3.分光光度法的優(yōu)點(diǎn)
靈敏度高10-5~10-6mol/l
準(zhǔn)確度好
RE=2~5%
簡(jiǎn)便,快速,成本低,應(yīng)用廣13
例2:用濃度為0.100mgMn/ml的KMnO4標(biāo)準(zhǔn)溶液.以1cm比色皿在520nm波長(zhǎng)處測(cè)得該溶液吸光度A為0.500,今取含Mn未知液10.00ml,氧化為MnO4-后,定容至50.00ml,在相同條件下測(cè)得A=0.300.求未知液Mn的濃度.A=εLc解:0.500/0.300=0.100/cx
cx=0.0600mg/mlc未=0.0600×50.00/10.00=0.300mg/ml1411.4顯色反應(yīng)和顯色條件1.顯色反應(yīng)
1).靈敏度高.Cu~NH3
e620=1.2×102
Cu~雙硫腙
e533=5.0×1042).選擇性好
3).顯色產(chǎn)物組成恒定,性質(zhì)穩(wěn)定.4).顯色產(chǎn)物與顯色劑色差大,顯色時(shí)顏色變化明顯.試劑空白值小.15
2.顯色條件
1)顯色劑的用量
M+R
=MR(被測(cè)組分)(顯色劑)(有色化合物)
AAACRCRCRabab000A與CR關(guān)系圖16
2)酸度
M+R
MR
M(OH)n
HROH-H+顯色反應(yīng)最適宜的酸度由實(shí)驗(yàn)確定17
pH2~3[Fe(Ssal)]+pH4~7[Fe(Ssal)2]-pH8~10[Fe(Ssal)3]3-
pH>12Fe(OH)3黃色橙色紫色沉淀
3)溫度、時(shí)間(實(shí)驗(yàn)確定)At18
11.5吸光度測(cè)量條件的選擇1.入射光波長(zhǎng)1)通常選擇lmax2)
lmax處有干擾時(shí),選擇干擾最小,吸光度盡可能大的波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)量.192.吸光度讀數(shù)范圍T=36.8%A=0.434Dc/c有極小值A(chǔ)=0.2~0.820
3.參比溶液(空白溶液)測(cè)定:空白溶液調(diào)節(jié)儀器A=0(T=100%),以消除溶液中其它物質(zhì)的干擾,抵消比色皿對(duì)光反射、吸收.1)溶劑參比
試液、試劑、顯色劑均無(wú)色(無(wú)吸收)
溶
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