學(xué)習(xí)情景七細(xì)菌的接種與分離技術(shù)

學(xué)習(xí)情景七

細(xì)菌的接種與分離技術(shù)

Q1什么叫細(xì)菌的接種？接種的目的是什么？Q2為什么要細(xì)菌分離？細(xì)菌分離的方法有哪幾種？細(xì)菌的接種技術(shù)細(xì)菌接種就是將目標(biāo)菌種轉(zhuǎn)移到事先配好的培養(yǎng)基上使其繁殖增長(zhǎng)的一種活動(dòng)。接種的目的就是獲得更多的目標(biāo)菌，或者篩選出自己想要的菌。

接種和分離工具1．接種針2.接種環(huán)

3.接種鉤

4.5.玻璃涂棒

6.接種圈

7.接種鋤

8.小解剖刀細(xì)菌的接種工具接種工具的滅菌細(xì)菌的接種程序

接種程序通常分為5個(gè)步驟：①滅菌接種環(huán)(針)；②待冷；③蘸取細(xì)菌或標(biāo)本；④進(jìn)行接種；⑤滅菌接種環(huán)（針）不同培養(yǎng)基中細(xì)菌接種技術(shù)一、液體二、固體三、半固體一、液體培養(yǎng)基中細(xì)菌的接種菌種液體培養(yǎng)基接種工具菌液菌苔液體培養(yǎng)基中細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象菌膜生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)均勻混濁二、固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的接種固體培養(yǎng)基連續(xù)劃線

固體培養(yǎng)基平板培養(yǎng)菌落:單個(gè)細(xì)胞在固體培養(yǎng)基表面經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成肉眼可見(jiàn)的微生物集團(tuán)。菌落的鑒定價(jià)值：不同菌的菌落不同。同種菌在不同培養(yǎng)基上菌落不同。同種菌在不同培養(yǎng)條件下菌落不同。菌落的特征：

包括大小、形狀、顏色、邊緣、質(zhì)地、透明度、光澤、表面、濕潤(rùn)度等。細(xì)菌菌落的特征一般都較小，菌落與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密，用接種針容易挑起，多數(shù)表面較光滑、濕潤(rùn)、較粘稠，易挑取，質(zhì)地均勻，色澤多樣。固體培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)菌苔：

微生物密集生長(zhǎng)所形成的。其作用是可用來(lái)保存菌種。固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng)情況菌落（S型）菌苔菌落（R型）三、半固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的接種穿刺接種法半固體培養(yǎng)基中無(wú)鞭毛菌：僅沿穿剌線呈明顯線狀生長(zhǎng)。鞭毛菌：除沿穿剌線生長(zhǎng)外并呈羽毛狀或云霧狀擴(kuò)散生長(zhǎng)。無(wú)動(dòng)力有動(dòng)力

不同的培養(yǎng)基，接種方法不盡相同，生長(zhǎng)現(xiàn)象也各異：若細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，可表現(xiàn)為液體均勻混濁、出現(xiàn)菌膜或沉淀等不同現(xiàn)象；若在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，可觀察到菌苔（斜面培養(yǎng)）或菌落（平板分離培養(yǎng)）；在半固體培養(yǎng)基中可見(jiàn)擴(kuò)散生長(zhǎng)或沿接種線生長(zhǎng)。

細(xì)菌分離培養(yǎng)是為了獲得較純的目的菌。1．劃線分離法2．涂布分離法細(xì)菌的分離技術(shù)劃線分離法

用接種環(huán)蘸培養(yǎng)后的樣品菌液后在含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿平板上劃線，在劃線過(guò)程中菌液逐漸減少，細(xì)菌也逐漸減少。劃線到最后，可使細(xì)菌間的距離加大。在培養(yǎng)10～20h后，可由一個(gè)細(xì)菌產(chǎn)生單菌落，菌落不會(huì)重疊。

涂布分離法

先將培養(yǎng)的菌液稀釋，通常稀釋到10－5～10－7之間，然后取0.1ml不同稀釋度的稀釋菌液放在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上，用涂布棒或玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上進(jìn)行培養(yǎng)，在適當(dāng)?shù)南♂尪认拢?/p>