羥丙基-β-環(huán)糊精包合莪術(shù)油的制備工藝研究 3400字

羥丙基?β?環(huán)糊精包合莪術(shù)油的制備工藝研究3400字【摘要】[目的]研究羥丙基《β《環(huán)糊精(HP《β《CD)對(duì)莪術(shù)油的最正確包合工藝。[辦法]以莪術(shù)油包合率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法進(jìn)行工藝優(yōu)選。[結(jié)果]運(yùn)用水溶液攪拌法包合，得到的最正確工藝條件為：在60℃時(shí)，莪術(shù)油與HP《β《CD按1：30的投料比，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為600r/min旋轉(zhuǎn)5h，可得包合率和收率的綜合得分為90.97%。[結(jié)論]此制備工藝提高了莪術(shù)油的穩(wěn)定性，且較優(yōu)化，為工業(yè)生產(chǎn)提供了可靠的理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】莪術(shù)油;HP《β《CD;包合物;制備工藝

近年來國(guó)內(nèi)外研究說明莪術(shù)油具有顯著的藥理活性，其抗菌、抗癌、抗炎等作用顯著，具有可觀的開展前景[1]。但其常溫為液體，并有異味，易隨制劑存儲(chǔ)時(shí)間的延長(zhǎng)而揮發(fā)損失，使其應(yīng)用受到限制。我們用HP《β《CD對(duì)莪術(shù)油進(jìn)行包合可以使固態(tài)化，有效避免莪術(shù)油的揮發(fā)，增加穩(wěn)定性，便于參加不同的基質(zhì)或及敷料中制成各種劑型,同時(shí)能掩蓋其異味，提高患者順應(yīng)性[2]。HP《β《CD包合物的制備辦法常用攪拌法，研磨法和超聲法。因攪拌法簡(jiǎn)單易行，實(shí)驗(yàn)條件易于控制，所以本實(shí)驗(yàn)采用該法對(duì)莪術(shù)油進(jìn)行包合。影響HP《β《CD包合率的主要因素有HP《β《CD與莪術(shù)油的質(zhì)量比，攪拌時(shí)間，攪拌速度，溫度，我們采用正交設(shè)計(jì)對(duì)這些因素進(jìn)行考察，并確定了較為優(yōu)化的包合工藝。

1材料和辦法

1.1試劑與藥品

莪術(shù)油(浙江天瑞藥業(yè)有限公司);莪術(shù)醇(浙江天瑞藥業(yè)有限公司);HP《β《CD(泰興一鳴精細(xì)化工有限公司);其余化學(xué)試劑均為分析純(溫州市九泰化學(xué)試劑有限公司提供)。

1.2儀器

DF《101S集熱式磁力加熱攪拌機(jī)(江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠);FD《1C冷凍枯燥儀(北京德天佑科技開展有限公司);Agilent1100高效液相色譜儀(配備DAD檢測(cè)器,C18柱)等。

1.3HP《β《CD包合工藝確實(shí)定

1.3.1正交實(shí)驗(yàn)中莪術(shù)油的HP《β《CD包合物的制備

辦法：稱取一定量HP《β《CD加蒸餾水適量置燒杯中,用磁力攪拌機(jī)恒溫?cái)嚢枰欢〞r(shí)間使其溶解，另取過量的莪術(shù)油用無水乙醇溶解后遲緩滴參加恒溫的上述溶液中，繼續(xù)攪拌一定時(shí)間后停止加熱，使之?dāng)嚢柚潦覝睾螅褂?.45μm微孔濾膜濾過，濾液在冰箱中預(yù)凍24h，至冷凍枯燥儀中4h后，冷凍枯燥48h,得莪術(shù)油的HP《β《CD包合物。因莪術(shù)油過量,包合物需再用乙醚洗滌，除去外表殘留的莪術(shù)油，然后揮去乙醚即可。

1.3.1.1包合物的鑒定：TLC檢查：分別取莪術(shù)油的乙醇溶液a,莪術(shù)油包合物的乙醚溶液b,莪術(shù)油包合物的乙醇溶液c,用毛細(xì)管取適量，點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層層析板上，以石油醚-乙酸乙酯(9：1)為展開劑,展開前將板置于展開槽中飽和10min，上行展開，揮干溶劑，用1%香草醛-濃硫酸溶液顯色，噴霧后烘干顯色，見圖1。結(jié)果說明無水乙醇提取液色譜中，在對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的數(shù)目的紫紅色斑點(diǎn)，而在乙醚提取液色譜中那么沒有以上斑點(diǎn)，可見包合物確已形成，并且包合前后主成分沒有發(fā)生變化。

紫外掃描檢查包合物的質(zhì)量:按文獻(xiàn)[3]所述辦法制備溶液,掃描波長(zhǎng)200nm～350nm。結(jié)果如圖2,圖2說明：莪術(shù)油(c)在212nm處有紫外吸收，而包合物(a)根本無紫外吸收，超聲破壞溶出后(c)，又有紫外吸收，表明莪術(shù)油包合后形成了新的包合物。

1.3.1.2HPLC測(cè)定莪術(shù)油包合率

色譜條件：色譜柱：C18柱;流動(dòng)相：甲醇《水(30：70);檢測(cè)波長(zhǎng)：256nm;進(jìn)樣量:10ul;柱溫25℃;流速:1.0ml/min。對(duì)照品溶液的制備:取莪術(shù)醇對(duì)照品加甲醇定容至50ml，取lml加甲醇定容至25mL,靜置，備用。莪術(shù)油供試品溶液1的制備:取莪術(shù)油加甲醇定容至50ml，取lml加甲醇定容至25ml,靜置，備用。包合物9份供試品溶液的制備:分別取9份包合物適量，加甲醇定容至50ml，搖勻，取上清液lml加甲醇定容至25ml，靜置，備用。測(cè)定法:分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液適量,注入高效液相色譜儀(自動(dòng)進(jìn)樣10ul),按照上述的測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)定。

1.3.1.3正交試驗(yàn)考察包合工藝

為得到最正確包合工藝，采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn),對(duì)影響包合工藝的主要因素：HP《β《CD與莪術(shù)油的投料質(zhì)量比A、攪拌時(shí)間(h)B、攪拌速度(r/min)C和溫度(℃)D分別選擇三個(gè)水平A1(10:1)A2(15:1)A3(25:1)，B1(3)B2(5)B3(7)，C1(600)C2(700)C3(800)，D1(40)D2(50)D3(60)進(jìn)行考察,以莪術(shù)油的包合率和收率的綜合得分為指標(biāo),確定最正確制備工藝。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

將上述對(duì)照品和九份供試品采用前述高效液相色譜法測(cè)定莪術(shù)醇含量，得到11個(gè)圖，這里我們給出具代表性的圖3、圖4、圖5。按峰面積公式計(jì)算莪術(shù)揮發(fā)油的包合率,同時(shí)進(jìn)行揮發(fā)油空白回收率測(cè)定,即用2ml移液管移取2ml揮發(fā)油置250ml圓底燒瓶中,加180ml水,提取至揮發(fā)油量不再增加,計(jì)算揮發(fā)油提取回收率,共3次,結(jié)果平均回收率為87.9%。在此根底上利用公式計(jì)算揮發(fā)油利用率(即包合率)及包合物的收率，同時(shí)考慮到生產(chǎn)本錢和包合效果，將收率和包合率的權(quán)重分別定為0.4和0.6,用綜合得分評(píng)價(jià)辦法優(yōu)劣并進(jìn)行方差分析,公式分別如下:莪術(shù)揮發(fā)油的利用率=[包合物中實(shí)際含油量(ml)/投油量(ml)]100%;空白回收率=[收集揮發(fā)油量(ml)/參加揮發(fā)油量(ml)]100%;包合物收率=包合物得量(g)/[揮發(fā)油重(g)+HP《β《CD重(g)]×100%;綜合評(píng)分=揮發(fā)油包合率得分0.6+包合物收率得分0.4

由正交試驗(yàn)結(jié)果所得的綜合得分可看出各列水平情況：第一列A因素：K3>K2>K1，第二列B因素：K2>K3>K1,第三列C因素：K1>K3>K2，第四列D因素：K3>K2>K1，故包合條件A因素取水平3體積比(25：1)，B因素取水平2攪拌時(shí)間(5h)，C因素取水平1攪拌速率(600r/min)，D因素取水平3溫度(60℃)為優(yōu)，再由方差分析辦法說明：HP《β《CD與莪術(shù)油的體積比對(duì)莪術(shù)油包合率有顯著影響(P3討論

3.1HP《β《CD是一種具有廣大前景的優(yōu)良藥用載體，它不僅水溶性高，對(duì)熱穩(wěn)定，且對(duì)腎無毒[4]，對(duì)很多難溶性藥物都有很好的增溶作用，如其可使ibuprofen在水中的溶解度增加1553倍[5]。本文采用HP《β《CD對(duì)莪術(shù)油進(jìn)行包合，這與β-環(huán)糊精相比，雖然兩者都可使揮發(fā)性或液體藥物粉末化，但前者的穩(wěn)定性，生物利用度都強(qiáng)于后者，而且HP《β《CD對(duì)肌肉和粘膜幾乎無刺激性，這就有效擴(kuò)大了應(yīng)用范圍。

3.2莪術(shù)油為液體并有異味，不能直接參加某些劑型(如膠囊劑等)中，一般用輔料吸附，隨著制劑存儲(chǔ)時(shí)間的延長(zhǎng)，易揮發(fā)損失。經(jīng)HP《β《CD包合后，能提高藥物的穩(wěn)定性，改善不良?xì)馕都巴貙捤幬飫┬汀Ｍ瑫r(shí)提高藥物的溶解度，實(shí)驗(yàn)得出包合物的溶解度比莪術(shù)油提高超過100倍，這就大大提高了藥物的生物利用度。

3.3實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)HP《β《CD與莪術(shù)油的投料比和包合時(shí)的溫度對(duì)提高包合率非常關(guān)鍵，所以我們又在其他條件不變的情況下，對(duì)投料比和包合時(shí)間分別作了進(jìn)一