膠質(zhì)瘤異檸檬酸脫氫酶-1基因型診斷進(jìn)展

膠質(zhì)瘤異檸檬酸脫氫酶-1基因型診斷進(jìn)展膠質(zhì)瘤是最常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，約占顱腦腫瘤的50%-60%，在WHOⅡ-Ⅲ級膠質(zhì)瘤（包括星形細(xì)胞瘤和少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤）1（IDH1）突變在繼發(fā)性腫瘤中的發(fā)生率為70%-80%，而在原發(fā)性腫瘤中發(fā)生率較低，僅不到WHOI級毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤中沒有檢測到任何IDH1突變，間接提示這些腫瘤可能通過不同的機(jī)制發(fā)展而來。最近的基因組研究表明IDH1基因突變膠質(zhì)瘤顯示出更好的臨床預(yù)后。突變的IDH1誘導(dǎo)2-羥基戊二酸IDH1突變意味著膠質(zhì)瘤的不同治療策略。因此，臨床上識別IDH1突變對膠質(zhì)瘤的治療具有重要意義。筆者就膠質(zhì)瘤IDH1基因型診斷研究進(jìn)展予以綜述。DNA目前突變檢測多采用對聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）產(chǎn)物進(jìn)行DNA測序直接檢測，或采用特異性等位基因探針進(jìn)行定量PCR，可以檢測出很大比例的突變。免疫組化染色和測序技術(shù)已廣泛應(yīng)用于術(shù)后IDH1突變的檢測。Agarwal等研究了免疫組化及測序檢測的50個膠質(zhì)瘤標(biāo)本冷凍組織中IDH1突變（第4外顯子密碼子132）的一致性。免疫組化使用IDH1-R132H突變特異性抗體（DIA-H09），發(fā)現(xiàn)兩種方法有88%的一致性。免疫組化檢測到30個IDH1-R132H突變，測序檢測到24個IDH1-R132H突變。免疫組化是一種更好的方法，在6個不同的結(jié)果中，重復(fù)測序3個樣本沒有檢測到任何突變，另外3個樣本有R132L突變。相比之下，免疫組化檢測的突變樣本中，約45%的腫瘤細(xì)胞不同部位的免疫染色存在差異。磁共振波譜成像（MRS）2突變的腫瘤細(xì)胞會積累H突變代謝產(chǎn)物G提示腫瘤的2突變，SS能夠檢出G的存在，但是研究所使用的技術(shù)并不能在臨床中常規(guī)應(yīng)用。一項膠質(zhì)瘤全腦MRS研究發(fā)現(xiàn)，與IDH野生型膠質(zhì)瘤相比，IDHChoHS/總膽堿比值或脂質(zhì)（）也是區(qū)分IDH突變狀態(tài)的重要參數(shù)。對于膠質(zhì)瘤術(shù)前的分子診斷，通過7.0TeslaMRS上的2-HG可以很好地識別IDH1Emir等研究了共21例膠質(zhì)瘤患者，采用半定位法進(jìn)行MRS超高場下的絕熱選擇性再聚焦脈沖序檢測2-HG7TMRI掃描儀提供了增強(qiáng)的檢測，相對于常規(guī)3TMRI，IDH1突變的MRS中2-HG7T時，這個2-HG峰是一個視覺上可識別的信號，可檢測到的最小5-10s的數(shù)據(jù)采集，提示足夠的靈敏度，不僅能檢測到由于細(xì)微變化在疾病進(jìn)展或治療過程中細(xì)胞代謝的重新編程，也可用于鑒別常見的IDH1和罕見的IDH2突變。作為IDH突變的直接代謝結(jié)果，在IDH突變的膠質(zhì)瘤中，2-HG可累積高達(dá)5-35μmol/g。MRS和質(zhì)譜利用2-HG異常高積累的優(yōu)勢檢測膠質(zhì)瘤組織中的2-HG，確定IDH1突變狀態(tài)。MRS作為一種非侵入性監(jiān)測2-HG的方法，其敏感性會急劇下降，尤其是對小體積腫瘤。雖然高場MRS（7T）其臨床效用尚未得到證實。氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）GC-MS已用于術(shù)中快速診斷。由于GC-MS方法比MRS更靈敏，因此可以很好地平衡檢測生物樣品中的代謝物靈敏度和可靠性。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)首次應(yīng)用于尿酸患者尿液中2-HG的檢測。有研究采用GC-MS對2-HG進(jìn)行定性定量檢測，結(jié)果為腦腫瘤中IDH1突變狀態(tài)提供了信息，其敏感性和特異性均為100%，進(jìn)一步優(yōu)化GC-MS方法，可以在40min內(nèi)測定2-HG。編碼IDH1，2的代謝基因在膠質(zhì)瘤中經(jīng)常發(fā)生突變，突變的IDH定義一種不同的膠質(zhì)瘤亞型并預(yù)測治療反應(yīng)。IDH突變具有顯著的新形態(tài)活性，將α-酮戊二酸（α-KG）轉(zhuǎn)化為2-HG，這是現(xiàn)在通常被稱為腫瘤代謝物和膠質(zhì)瘤的生物標(biāo)志物。有研究利用PCR測序（n=220）、免疫組化染色（IHC，n=220）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS，n=87）對膠質(zhì)瘤中IDH突變進(jìn)行鑒定，比較這些方法的敏感性和特異性。PCR測序和IHC染色是可靠的。但兩種方法通常需要1-2天，這阻礙了基于GC-MS方法可以定性定量檢測2-HG，為IDH1提供信息的快速診斷。在氣相色譜-質(zhì)譜的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，該方法可以在40min內(nèi)測定膠質(zhì)瘤樣品中的2-HG復(fù)雜或耗時的準(zhǔn)備工作。最重要的是，2-HG/谷氨酸的比值被證明是可靠的用于確定突變狀態(tài)的參數(shù)。提供了一個對IDH1突變膠質(zhì)瘤的術(shù)中診斷有希望的方法。重要的是，2-HG/谷氨酸的比值被用來檢測突變，因為野生型腫瘤中2-HG很少。該比值能準(zhǔn)確區(qū)分IDH1突變膠質(zhì)瘤與野生型膠質(zhì)瘤，為膠質(zhì)瘤的術(shù)中診斷和患者治療提供新的參考。4.PETPET在代謝分析方面具有固有的優(yōu)勢，已被用于腦腫瘤的良惡性鑒別。具有IDH基因突變的低級別膠質(zhì)瘤（LGG）腦氧代謝率（CMRO2）降低，IDH突變的WHOⅢ級膠質(zhì)瘤中微血管型指標(biāo)（MTI）顯著增加。11C-MET腦PET顯像半定量參數(shù)SUVmax作為單一參數(shù)對IDH1基因突變的預(yù)測效能最佳，SUVmax+SUVpeak的多參數(shù)預(yù)測效能最具有IDH基因突變的LGG腦氧代謝率降低。18F-脫氧葡萄糖（FDG）是最常見的PET示蹤劑，其他放射性標(biāo)記的氨基酸或配體也可用于腦腫瘤的診斷。靜態(tài)和動態(tài)FDG-PET用于診斷膠質(zhì)瘤中IDH1基因型。PET圖像可以揭示膠質(zhì)瘤之間的代謝差異，為FDG、11C-choline（CHO）或11C-methionine（MET）的術(shù)前分子診斷提供可能的非侵入性診斷。通過計算MET攝取的最大瘤腦比ratioofMET預(yù)測膠質(zhì)瘤的IDH1突變，受試者工作特征分析顯示高AUC為0.7971例神經(jīng)1x和C可作為預(yù)測IDH1突變和IDH1野生型。因其具有無創(chuàng)傷、準(zhǔn)確預(yù)測膠質(zhì)瘤中IDH1突變，故在常規(guī)臨床應(yīng)用中具有很大潛力，并且能提供SUV在PET成像方面，結(jié)構(gòu)特征分析對膠質(zhì)瘤的診斷具有重要意義，有報道分析FETPET在IDH基因PET-MR立PET掃描儀，PET-MR雜交掃描儀預(yù)測IDH1IDH突變現(xiàn)象近年來受到程中發(fā)揮的關(guān)鍵作用或機(jī)制。其次，這些突變可能使患者成為靶向治療試驗的候選者?？傊?，當(dāng)組織標(biāo)本可用時，免疫組化是檢測IDHDNA測序具有輔助外顯基因研究的優(yōu)MRS可以在檢測腦組織2-HG中發(fā)揮重要作用，也可以作為IDH1突變的替代標(biāo)記物。同樣，測定血清和尿液中的2-HG與腦MRS檢測AMLMRS和2-HG測量可用于評估對治療的反應(yīng)和獨立