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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)上課課件生活聯(lián)系:
燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植,但對(duì)于大面積燒傷病人來(lái)講,健康皮膚很有限,請(qǐng)同學(xué)們想一想如何來(lái)治療該病人?自主閱讀P44第5段,思考下列問(wèn)題:1、什么叫動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(animalcellculture)?2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么?一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1、概念:從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織,將它們分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。原理:細(xì)胞增殖如何進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?
結(jié)合問(wèn)題,閱讀書本,三人一組,討論寫出動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖。每組推選一位“小老師”,準(zhǔn)備上臺(tái)講解(5min)學(xué)習(xí)活動(dòng)一:注意關(guān)鍵詞:
細(xì)胞貼壁接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)合作學(xué)習(xí)(結(jié)合問(wèn)題思考流程)1、為何動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程將組織分散成單個(gè)細(xì)胞呢?
2、如何將動(dòng)物組織分散成單個(gè)的細(xì)胞?3、胰蛋白酶的作用是什么?由此可說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分?4、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面為何要光滑、無(wú)毒?5、培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到什么時(shí)候就不再分裂、增殖?細(xì)胞貼壁接觸抑制
(contactinhibition)原代培養(yǎng):通常將直接從動(dòng)物體內(nèi)取出的動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制后,貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞增殖。這樣即為傳代培養(yǎng)。有關(guān)概念:
細(xì)胞株:原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡,少數(shù)細(xì)胞存活到40~50代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。
細(xì)胞系:細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài),只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無(wú)限制傳代,這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。有關(guān)概念:動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無(wú)限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎過(guò)程:細(xì)胞株細(xì)胞系動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì),將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變?nèi)サ艚M織間蛋白細(xì)胞增殖1、選用組織時(shí),一般用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做培養(yǎng)材料,而不用老齡動(dòng)物的,這是為什么?因?yàn)橛g組織或器官上的細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,容易培養(yǎng)。老齡動(dòng)物的細(xì)胞則相反。學(xué)習(xí)活動(dòng)二:尋根問(wèn)底,加深鞏固2、胰蛋白酶處理組織時(shí)要注意什么問(wèn)題?能夠用胃蛋白酶代替嗎?
控制好消化時(shí)間,太長(zhǎng)會(huì)消化細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)不能,因?yàn)閮烧叩淖钸mPH不同,而正常組織細(xì)胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近.學(xué)習(xí)活動(dòng)二:尋根問(wèn)底,加深鞏固3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否最終培養(yǎng)成新個(gè)體?不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體學(xué)習(xí)活動(dòng)二:尋根問(wèn)底,加深鞏固多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中,根據(jù)你所學(xué)的知識(shí),認(rèn)為體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞應(yīng)該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些條件呢?學(xué)習(xí)活動(dòng)三:無(wú)菌、無(wú)毒全部的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)適宜的溫度和PH值必要的氣體條件3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件:1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境(添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液)2、營(yíng)養(yǎng)(葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等。)3、溫度和PH36.5+(-)0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境:
O2和CO2(95%空氣和5%CO2
)補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì),保證細(xì)胞順利的生長(zhǎng)增殖①生物制品的生產(chǎn)②用于基因工程③用于檢測(cè)有毒物質(zhì)④細(xì)胞的生理、病理、藥理研究4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用獲得細(xì)胞細(xì)胞的全能性植物體培養(yǎng)結(jié)果或細(xì)胞產(chǎn)物快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較細(xì)胞群體1.動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段中,最基礎(chǔ)的是
A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B.動(dòng)物細(xì)胞融合
C.單克隆抗體D.胚胎核移植
練一練~~~2.貼壁細(xì)胞的分裂方式具體是
A.無(wú)絲分裂B.有絲分裂
C.減數(shù)分裂D.增殖3.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,不正確的是
A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開來(lái)
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