第24章病毒感染檢查方法與防治原則

第24章病毒感染的檢查方法

與防治原則

醫(yī)學檢驗學系管艷（11022）E-mail:教學目的與要求掌握內(nèi)容病毒感染的檢查方法：標本采集和送檢；病毒的分離培養(yǎng)方法；病毒感染的血清學診斷方法。第一節(jié)病毒感染的檢查方法

第二節(jié)病毒感染的特異性預防第三節(jié)病毒感染的治療★病毒感染的檢查檢測內(nèi)容查病毒查特異性抗體

病毒顆粒病毒抗原病毒核酸病毒酶類：如逆轉錄酶

電鏡直接觀察光鏡檢查包涵體分離培養(yǎng)★★一、標本的采集與送檢原則基本與細菌相似，但應注意：1.急性期樣本2.標本用“雙抗”或兩性霉素B處理

3.

低溫保存，盡快送檢4.

血清學診斷采雙份血清★病程階段可檢測到病毒可檢測到特異性抗體潛伏期少無前驅癥狀有時無發(fā)病經(jīng)常有時急性期經(jīng)常經(jīng)?；謴推谏俳?jīng)常二、病毒的分離與鑒定一般程序：標本無菌處理動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)指標陽性指標陰性病毒鑒定盲傳2～3代指標陰性病毒陰性★（一）病毒的分離培養(yǎng)

動物接種（animalinoculation）

雞胚接種（egginoculation）

細胞培養(yǎng)（cell

culture）

二、病毒的分離與鑒定★1.

動物接種

應用：尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點：簡便，結果易觀察，可建立動物模型缺點：有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛在病毒2.

雞胚培養(yǎng)

優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復雜3.細胞培養(yǎng)

單層細胞培養(yǎng)（monolayercellculture）

生長方式

懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）

原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落(1)細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)(2)紅細胞吸附（hemadsorption）病毒包膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體

(3)干擾現(xiàn)象（interference）

(4)細胞代謝改變

（二）病毒鑒定1.病毒形態(tài)學鑒定2.病毒血清學鑒定3.病毒分子生物學鑒定二、病毒的分離與鑒定（三）病毒數(shù)量與感染性測定1.血凝試驗：病毒總量（活病毒＋死病毒）2.空斑形成試驗

（plaqueformationtest）

3.50％組織細胞感染量

（50％tissueculture

infectiousdose,

TCID50）感染性病毒量二、病毒的分離與鑒定（一）形態(tài)學檢查：

電鏡：病毒顆粒；光鏡：包涵體三、病毒感染的診斷（二）病毒成分檢測：蛋白抗原、核酸（三）血清學診斷★應用：①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調(diào)查等1.中和試驗（neutralizationtest）病毒＋中和抗體

病毒失去感染性

特點：特異性高，抗體維持時間長應用：人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用★2.血凝抑制試驗（hemagglutination

inhibitiontest）—正黏病毒型與亞型鑒定

病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）

病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集

（血凝抑制試驗）

★特點：特異性高，簡單

應用：鑒定病毒種、型、亞型3.IgM

特點：特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快

應用：近期感染指標?！锏谝还?jié)病毒感染的檢查

第二節(jié)病毒感染的特異性預防第三節(jié)病毒感染的治療滅活疫苗（inactivatedvaccine）減毒活疫苗（attenuatedvaccine）亞單位疫苗（subunitvaccine）基因工程疫苗（geneticallyengineeringvaccine)重組載體疫苗（binantcarriervaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）一、人工主動免疫常用生物制品二、人工被動免疫常用生物制品

免疫球蛋白

血清丙種球蛋白

細胞免疫制劑

IFN-α、β、γ細胞因子IL-2、IL-6、IL-12

TNF、CSF

第一節(jié)病毒感染的檢查

第二節(jié)病毒感染的特異性預防第三節(jié)病毒感染的治療病毒穿入脫殼核酸復制、轉錄及蛋白質合成裝配吸附釋放藥物藥物藥物藥物

核苷類藥物

非核苷類反轉錄酶抑制劑蛋白酶抑制劑

其他抗病毒藥物

干擾素和干擾素誘生劑

中草藥

基因治療劑

治療性疫苗

抗病毒化學制劑反義寡核苷酸干擾RNA核酶（ribozyme）

有關病毒標本的采集和運送不正確的方法是A.發(fā)病