標準解讀
GB/T 14926.58-2001 是一項關(guān)于實驗動物健康檢測的國家標準,專注于傳染性犬肝炎病毒(Canine Adenovirus Type 1, CAV-1)的檢測方法。這項標準旨在為實驗動物管理和研究機構(gòu)提供統(tǒng)一、科學(xué)、可靠的檢測手段,以確保實驗動物的質(zhì)量控制及生物安全。
標準適用范圍
該標準適用于實驗用犬及其他可能受CAV-1感染的動物中,該病毒的檢測與診斷。CAV-1是一種能引起犬只急性肝炎的重要病原體,對實驗動物的安全和實驗結(jié)果的準確性有直接影響。
檢測方法概述
標準推薦了兩種主要的檢測技術(shù):
-
病毒分離與培養(yǎng):通過將樣本接種到敏感細胞系(如犬腎細胞)中,觀察細胞病變效應(yīng)(CPE),并結(jié)合特異性血清學(xué)試驗進行病毒鑒定,以確認CAV-1的存在。
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血清學(xué)檢測:利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)或中和試驗檢測動物血清中針對CAV-1的特異性抗體。這些方法能有效識別出曾經(jīng)暴露于病毒或接種過疫苗的動物。
樣本要求
標準詳細說明了適宜的樣本類型,包括血液(用于血清學(xué)檢測)、組織樣本(如肝臟,用于病毒分離)以及可能的其他生物學(xué)材料。樣本采集、處理和保存的具體要求也做了規(guī)定,確保檢測結(jié)果的準確性和可靠性。
檢測結(jié)果判定與報告
標準明確了陽性、陰性及可疑結(jié)果的判定標準,并要求在檢測報告中詳細記錄實驗方法、所用試劑、操作步驟、檢測結(jié)果及其解釋,確保檢測過程的透明度和可追溯性。
質(zhì)量控制
強調(diào)了內(nèi)部質(zhì)控和外部質(zhì)控的重要性,推薦定期進行方法驗證、使用陽性和陰性對照樣品,以及參與能力驗證計劃,以維持和提升實驗室檢測的準確性和穩(wěn)定性。
結(jié)論
該標準為實驗動物領(lǐng)域提供了傳染性犬肝炎病毒檢測的規(guī)范化流程,不僅有助于及時發(fā)現(xiàn)和控制疫情,還對維護實驗動物模型的健康狀態(tài)、保障科學(xué)研究的可靠性和動物福利具有重要意義。通過遵循這些檢測方法,實驗動物設(shè)施可以有效地監(jiān)控和管理CAV-1的傳播風險。
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文檔簡介
ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標準GB/Tr14926.58-2001實驗動物傳染性犬肝炎病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofinfectiouscaninehepatitisvirus(ICHV)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施中華民民共.和.發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
GB/T14926.58-2001前本標準規(guī)定了傳染性犬肝炎病毒的檢測方法、傳染性犬肝炎是犬的主要烈性傳染病之一,在我國犬群中廣泛流行,是普通級犬和SPF犬的必檢項目。因此增加該病毒的檢測方法。本標準由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部提出并歸口。本標準起草單位:中國實驗動物學(xué)會。本標準主要起草人:田克恭。
中華人民共和國國家標準實動物GB/T14926.58-2001傳染性犬肝炎病毒檢測方法Laboratoryanimal一Methodforexaminationofinfectiouscaninchcpatitisvirus(ICHV)1范圍本標準規(guī)定了傳染性犬肝炎病毒(ICHV)的檢測方法、試劑等本標準適用于犬ICHV的檢測引用標準下列標準所包含的條文,通過在本標準中引用而構(gòu)成為本標準的條文。本標準出版時,所示版本均為有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應(yīng)探討使用下列標準最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001實驗動物酶聯(lián)免疫吸附試驗GB/T14926.54-2001實驗動物血凝抑制試驗原理根據(jù)免疫學(xué)原理,采用ICHV抗原檢測犬血清中ICHV抗體;或根據(jù)ICHV在一定的條件下,能凝集人"O”型紅細胞,這種凝集紅細胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理,檢測犬血清中ICHV抗體。4主要試劑和器材4.1試劑4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原用ICHV感染MDCK細胞,接種3~4天后,當病變達十十十~十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成ELISA抗原。4.1.1.2正常抗原MDCK細胞凍融破碎后.經(jīng)低速離心去除細胞碎片而獲得的上清液4.1.2血凝素ICHV接種MDCK細胞,培養(yǎng)3~4d.當病變達十十十~十十十十時收獲培養(yǎng)物。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細胞碎片,上清液分裝后低溫保存。4.1.3陽性血清ICHV實驗感染或自然感染的犬血清。4.1.4陰性血清無ICHV感
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