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DNA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片斷課題2目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回一、DNA分子復(fù)制的過程參與的組分在DNA復(fù)制中的左右解旋酶打開DNA雙鏈DNA母鏈提供DNA復(fù)制的模板4種脫氧核苷酸合成子鏈的原料DNA聚合酶催化合成DNA子鏈引物使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回二、PCR原理PCR參與的組分在DNA復(fù)制中的作用高溫變性解旋酶打開DNA雙鏈DNA母鏈提供DNA復(fù)制的模板4種脫氧核苷酸合成子鏈的原料Taq酶（耐高溫）DNA聚合酶催化合成DNA子鏈15-30個核苷酸構(gòu)成DNA或RNA單鏈引物使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回DNA雙鏈反向平行3’5’5’目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回基本單位目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回①②③④⑤目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回實(shí)驗(yàn)操作步驟：（準(zhǔn)備）按配方將所需試劑擺放在實(shí)驗(yàn)桌上（移液）用微量移液器按配方在微量離心管中依次加入各組分（混合）蓋嚴(yán)離心管口的蓋子，用手指輕輕彈擊管壁（離心）將微量離心管放在離心機(jī)上（反應(yīng)）將離心管放入PCR儀上，設(shè)置好PCR儀的循環(huán)程序目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回反應(yīng)周期高溫變性低溫退火適溫延伸反應(yīng)循環(huán)數(shù)擴(kuò)增倍數(shù)106--10925--30目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回950C變性550C復(fù)性720C延伸PCR過程第一輪實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析DNA含量=50x（260nm的讀數(shù)）x稀釋倍數(shù)目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回移液器目錄上頁下頁習(xí)題參考書返回離心管離心

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