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文檔簡介

1、RNA與DNA的提取與制備2、核苷酸的制備3、核苷的制備二、核酸類物質(zhì)的分離提取及其發(fā)酵生產(chǎn)1發(fā)酵法制備RNA2酶法制備脫氧核苷酸酶法制備5’單核苷酸雙酶法生產(chǎn)肌苷酸和鳥苷酸產(chǎn)氨短桿菌嘌呤核苷酸生物合成調(diào)節(jié)機制5受GMPATP的反饋抑制1被G阻遏2受GMP反饋抑制3被A阻遏4受ATPADPAMPGMP反饋抑制6受GTP的反饋抑制注：PRPP——5－磷酸核糖焦磷酸產(chǎn)氨短桿菌腺嘌呤缺陷型菌株IMP發(fā)酵機制肌苷酸誘變圖譜肌苷酸產(chǎn)生誘變過程的產(chǎn)量變化1、選用產(chǎn)氨短桿菌腺嘌呤缺陷型菌株以解除腺嘌呤衍生物對的反饋抑制；2、提供亞適量A培養(yǎng)基通過補救途徑合成微生物生命活動所需要的DNA，不足以產(chǎn)生反饋抑制的腺嘌呤衍生物；3、培養(yǎng)基中加入特異抑制IMP脫氫酶的化學(xué)物質(zhì)（如8－氮雜鳥嘌呤）則IMP被切斷，GMP不能生成，解除GMP的反饋抑制，使IMP進一步被積累；提高IMP產(chǎn)量的因素4、Mn2+在限量的情況下培養(yǎng)后期產(chǎn)氨短桿菌細胞膜容易透過細胞膜，并且嘌呤核苷酸補救合成所需的酶和中間體核糖－5－磷酸很容易透過，在細胞外重新合成大量的肌苷酸；5、因工業(yè)原料和工業(yè)水都含較高的Mn2＋，通過誘變育種的方法選育了對Mn2+不敏感的變異株，使發(fā)酵液Mn2＋含量高達1000g/ml時，肌苷酸的生物合成仍不受影響。3、核苷生產(chǎn)工藝流程二、核酸類藥物生產(chǎn)1、疊氮胸苷2、阿糖腺苷3、三氮核苷4、阿糖胞苷5、聚肌胞苷酸6、胞二磷膽堿是美國FAD批準的治療艾滋病的新藥；68％的病人臨床表現(xiàn)為減輕癥狀、延長壽命的顯著療效；副作用為貧血、白細胞減少，但有32％的患者服用后引起股骨頭壞死、破壞人的造血功能。系核苷酸的類似物，取代正常腺嘧啶核苷酸參與病毒的合成但不能繼續(xù)復(fù)制，從而達到阻止病毒增值的目的。1、疊氮胸苷－（Azidothymidine,AZT）疊氮胸苷AZT合成工藝商品名稱病毒唑，主要應(yīng)用于小兒呼吸系統(tǒng)的疾病治療。顯著改善艾滋病患者的癥狀，毒副作用小，價格便宜，比AZT相差50倍。它對病毒的作用點多，不易使病毒產(chǎn)生抗藥性。2、三氮唑核苷（Vira301,RibacirinRTC)2、氮唑核苷生產(chǎn)工藝抑制DNA聚合酶，干擾DNA

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