標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 18979-2003 是一項(xiàng)由中國發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)，旨在規(guī)定食品中黃曲霉毒素測定的方法。該標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合了免疫親和層析凈化技術(shù)和高效液相色譜法（HPLC）以及熒光光度法，以高靈敏度和準(zhǔn)確性檢測食品樣品中的黃曲霉毒素含量。下面是對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容的說明：

標(biāo)準(zhǔn)適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物、糧油及其制品、堅(jiān)果、調(diào)味品等多種食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測定。黃曲霉毒素是一類由真菌產(chǎn)生的有毒二次代謝產(chǎn)物，對(duì)人類和動(dòng)物健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅，因此其在食品中的含量控制至關(guān)重要。

測定原理

  1. 免疫親和層析凈化：利用黃曲霉毒素特異性抗體固定于固相載體上，形成免疫親和柱。樣品經(jīng)過提取、過濾后，通過該柱時(shí)，黃曲霉毒素與抗體特異性結(jié)合而被吸附，其他雜質(zhì)則被洗脫。隨后使用適當(dāng)?shù)娜軇┙馕?，從而?shí)現(xiàn)黃曲霉毒素的純化與濃縮。

  2. 高效液相色譜法（HPLC）：凈化后的樣品注入HPLC系統(tǒng)，通過高壓泵推動(dòng)，在柱內(nèi)根據(jù)化合物的物理化學(xué)性質(zhì)分離。黃曲霉毒素各組分在柱中被分離，并依次通過熒光檢測器。

  3. 熒光光度法：由于黃曲霉毒素具有自然熒光特性，當(dāng)它們通過熒光檢測器時(shí)，會(huì)吸收特定波長的光并發(fā)出熒光。熒光強(qiáng)度與其濃度成正比，據(jù)此可定量測定樣品中黃曲霉毒素的含量。

操作步驟

  • 樣品準(zhǔn)備：包括粉碎、稱重、提取等預(yù)處理步驟。
  • 免疫親和層析：將提取液通過親和柱進(jìn)行凈化。
  • 洗脫與濃縮：使用適宜溶劑洗脫結(jié)合的黃曲霉毒素，并濃縮至適合HPLC分析的體積。
  • HPLC分析：將樣品注入HPLC系統(tǒng)，進(jìn)行分離。
  • 熒光檢測與定量：通過熒光檢測器記錄黃曲霉毒素的熒光信號(hào)，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比進(jìn)行定量分析。

重要參數(shù)與質(zhì)量控制

標(biāo)準(zhǔn)中詳細(xì)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)所需試劑、儀器設(shè)備的具體要求，以及操作過程中的關(guān)鍵控制點(diǎn)，如提取效率、凈化回收率、檢測限、定量限等，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

結(jié)論

該標(biāo)準(zhǔn)為食品中黃曲霉毒素的檢測提供了一套科學(xué)、高效的分析方法，通過結(jié)合免疫親和層析的高選擇性和HPLC-熒光檢測的高度靈敏性，能夠有效監(jiān)測食品中這些有害物質(zhì)的含量，保障食品安全。


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  • 被代替
  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替，建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.22-2016
  • 2003-02-21 頒布
  • 2003-08-01 實(shí)施
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GB/T 18979-2003食品中黃曲霉毒素的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法-免費(fèi)下載試讀頁

文檔簡介

ICS67.050X04中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18979--2003食品中黃曲霉毒素的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法DeterminationaflatoxinscontentinfoodCleanupbyimmunoaffinitychromatogaphyyanddeterminationbyhigh-performanceliquidchromatigraphyyandfluorometer2003-02-21發(fā)布2003-08-01實(shí)施華中民共和發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T18979-2003前本標(biāo)準(zhǔn)由北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:北京市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所、青島出入境檢驗(yàn)檢疫局、國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王品、張鵬、張藝兵、邵明武。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布

GB/T18979-2003食品中黃曲霉毒素的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了免疫親和層析凈化一高效液相色譜法和免疫親和層析凈化一熒光光度法測定食品中黃曲霉毒素的條件和詳細(xì)分析步驥本標(biāo)準(zhǔn)適用于玉米、花生及其制品(花生醬、花生仁、花生米)、大米、小麥、植物油脂、醬油、食醋等食品中黃曲霉毒素的測定。樣品中黃曲霉毒素的檢出限：免疫親和層析凈化一高效液相色譜法測定黃曲霉毒素B，以及黃曲霉毒素B,B.、G,、G?？偭繖z出限為1Pg/kg。免疫親和層析凈化一熒光光度法測定黃曲霉毒素B、B.、Gi、G?？偭繖z出限為1Pg/kg.醬油樣品中檢出限為2.5Pg/kg。免疫親和層析凈化高效液相色譜法2.1方法提要試樣經(jīng)過甲醇-水提取，提取液經(jīng)過濾、稀釋后，濾液經(jīng)過含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和層析凈化·此抗體對(duì)黃曲霉毒素B、B.、G,、G。具有專一性.黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質(zhì)中的抗體上。用水或吐溫-20/PBS將免疫親和柱上雜質(zhì)除去，以甲醇通過免疫親和層析柱洗脫.洗脫液通過帶熒光檢測器的高效液相色譜儀柱后碘溶液衍生測定黃曲霉毒素的含量。2.2試劑和溶液除非另有規(guī)定·僅使用分析純?cè)噭⒅卣衾姿?.2.1甲醇(CH.OH):色譜純。2.2.2甲醇-水(7+3):取70mL甲醇加30mL水.2.2.3甲醇-水(8+2):取80mL甲醇加20mL水。2.2.4甲醇-水(45+55):取45mL甲醇加55mL水2.2.5苯：色譜純2.2.6乙清：色譜純、2.2.7苯-乙膀(98+2):取2mL乙腈加98mL苯2.2.8氯化鈉(NaCl)。2.2.9磷酸氫二鈉(NaaHPO,)。2.2.10磷酸二氫鉀(KH.PO,)2.2.11氯化鉀（KCI)。2.2.12PBS緩沖溶液：稱取8.0g氯化鈉.1.2g磷酸氫二鈉.0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解，然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0.最后用純水稀釋至1000mL.2.2.13吐溫-20/PBS溶液(0.1%):取1mL吐溫-20,加入PBS緩沖溶液并定容至1000mL2.2.14pH7.

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