第十二章細(xì)胞分化與基因表達(dá)調(diào)控

第十二章細(xì)胞分化與基因表達(dá)調(diào)控●細(xì)胞分化(Celldifferentiation) ●癌細(xì)胞(Cancercell) ●真核細(xì)胞基因表達(dá)的調(diào)控(×)第一節(jié)細(xì)胞分化(Celldifferentiation)●細(xì)胞分化的基本概念●影響細(xì)胞分化的因素●細(xì)胞分化與胚胎發(fā)育—Hoxgenes一、細(xì)胞分化的基本概念●細(xì)胞分化●細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果●奢侈基因與管家基因●組合調(diào)控引發(fā)組織特異性基因的表達(dá)

●單細(xì)胞有機(jī)體的細(xì)胞分化●轉(zhuǎn)分化與再生

◆細(xì)胞分化(celldifferentiation)：在個(gè)體發(fā)育中，由相同細(xì)胞類(lèi)型經(jīng)分裂后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上形成穩(wěn)定性差異，產(chǎn)生不同細(xì)胞類(lèi)群的過(guò)程。 細(xì)胞分化是多細(xì)胞生物發(fā)育的基礎(chǔ)與核心；細(xì)胞分化的關(guān)鍵在于特異性蛋白質(zhì)合成；

特異性蛋白合成的實(shí)質(zhì)在于組織特異性基因在時(shí)空上的差異表達(dá)；

差異性表達(dá)的機(jī)制是由于基因表達(dá)的組合調(diào)控。細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果分子雜交技術(shù)檢測(cè)基因及其表達(dá)奢侈基因與管家基因◆管/當(dāng)家基因(house-keepinggenes)：是指所有細(xì)胞中均要表達(dá)的一類(lèi)基因，其產(chǎn)物是對(duì)維持細(xì)胞基本生命活動(dòng)所必需的；◆奢侈基因/組織特異性基因(tissue-specificgenes/luxurygenes)：是指不同的細(xì)胞類(lèi)型進(jìn)行特異性表達(dá)的基因，其產(chǎn)物賦予各種類(lèi)型細(xì)胞特異的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與特異的功能；

組合調(diào)控引發(fā)組織特異性基因的表達(dá)組合調(diào)控（combinationalcontrol）： 利用少量調(diào)控蛋白啟動(dòng)眾多的特異細(xì)胞類(lèi)型的分化的調(diào)控機(jī)制,即每種類(lèi)型的細(xì)胞分化是由多種調(diào)控蛋白共同調(diào)節(jié)完成的。組合基因的控制模式組合調(diào)控的生物學(xué)作用借助于組合調(diào)控，一旦某種關(guān)鍵性基因調(diào)控蛋白與其它調(diào)控蛋白形成適當(dāng)?shù)恼{(diào)控組合，即可啟動(dòng)細(xì)胞分化，表達(dá)特異蛋白，再由其參與進(jìn)一步的組合調(diào)控，最終誘發(fā)整個(gè)器官形成（如眼的發(fā)育）。分化啟動(dòng)機(jī)制：通過(guò)關(guān)鍵性調(diào)節(jié)蛋白級(jí)聯(lián)其他調(diào)節(jié)蛋白而啟動(dòng)。

單細(xì)胞有機(jī)體的細(xì)胞分化●與多細(xì)胞有機(jī)體細(xì)胞分化的不同之處：?jiǎn)渭?xì)胞有機(jī)體通過(guò)分化適應(yīng)不同的生活環(huán)境（形成芽孢，單倍體孢子），而多細(xì)胞有機(jī)體則通過(guò)細(xì)胞分化構(gòu)建執(zhí)行不同功能的組織與器官。●多細(xì)胞有機(jī)體具有更為復(fù)雜的分化程序與調(diào)節(jié)機(jī)制。單細(xì)胞生物不存在細(xì)胞分化

×轉(zhuǎn)分化與再生●轉(zhuǎn)分化（transdifferentiation）：一種類(lèi)型的分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變成另一種類(lèi)型的分化細(xì)胞的現(xiàn)象；轉(zhuǎn)分化經(jīng)歷去分化（dedifferentiation）和再分化過(guò)程?！裨偕╮egeneration）：指生物體缺失部分后進(jìn)行重建得過(guò)程，在生物界普遍存在；廣義的再生可包括分子水平、細(xì)胞水平、組織與器官水平及整體水平的再生。●不同的細(xì)胞有機(jī)體，其再生能力有明顯差異植物＞動(dòng)物；低等動(dòng)物＞高等動(dòng)物；年幼＞年長(zhǎng)再生過(guò)程大多涉及細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化二、影響細(xì)胞分化的因素●細(xì)胞的全能性(totipotency)●影響細(xì)胞分化的因素細(xì)胞的全能性(totipotency)◆概念：指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后仍具有產(chǎn)生完整有機(jī)體的潛能或特性，受精卵、早期胚胎細(xì)胞和植物細(xì)胞都具有全能性，在適宜的條件下可發(fā)育成正常的個(gè)體。 ◆動(dòng)物細(xì)胞核移植(Nucleartransfer)實(shí)驗(yàn)證明細(xì)胞核具有發(fā)育全能性 ◆干細(xì)胞(Stemcell)與細(xì)胞發(fā)育潛能影響細(xì)胞分化的因素受精卵細(xì)胞質(zhì)的不均一性對(duì)細(xì)胞分化的影響細(xì)胞間的相互作用與位置效應(yīng)胞外信號(hào)分子對(duì)細(xì)胞分化的影響,如眼的發(fā)生細(xì)胞記憶與決定環(huán)境對(duì)性別決定的影響染色質(zhì)變化與基因重排對(duì)細(xì)胞分化的影響細(xì)胞記憶

◆信號(hào)分子的有效作用時(shí)間是短暫的，但細(xì)胞可將其儲(chǔ)存,并形成長(zhǎng)期的記憶，逐漸向特定方向分化。

◆“決定早于分化”：決定是指一個(gè)細(xì)胞接受了某種指令，其本身及后代在發(fā)育中將分化成某種特定類(lèi)型細(xì)胞，即在形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能等分化特征尚未顯現(xiàn)之前就已確定了細(xì)胞的分化命運(yùn)。

◆細(xì)胞記憶的實(shí)現(xiàn)方式：1)正反饋:細(xì)胞接受信號(hào)刺激后，活化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，誘導(dǎo)自身基因及其他組織特異性基因表達(dá)；

2)通過(guò)將染色體結(jié)構(gòu)變化(DNA與蛋白相互作用)的信息傳到子代細(xì)胞中實(shí)現(xiàn);

◆卵細(xì)胞的胞質(zhì)中含有決定細(xì)胞向不同方向分化的信息，如多種蛋白和隱蔽mRNA(與蛋白結(jié)合，不能被核糖體識(shí)別）;◆受精后胞質(zhì)重新定位，少數(shù)隱蔽mRNA被激活，合成早期胚胎發(fā)育所需蛋白；受精卵細(xì)胞質(zhì)的不均一性對(duì)細(xì)胞分化的影響早期卵裂時(shí)，分配到子細(xì)胞中的胞質(zhì)組分（特別是隱蔽mRNA）不同，從而決定了未來(lái)細(xì)胞分化的命運(yùn)，產(chǎn)生分化方向的差異。細(xì)胞間的相互作用與位置效應(yīng)

改變細(xì)胞所處的位置可導(dǎo)致細(xì)胞分化方向的改變，這種現(xiàn)象稱位置效應(yīng)(positioneffectt)?！拔恢眯畔ⅰ笔钱a(chǎn)生效應(yīng)的主要原因。

環(huán)境對(duì)性別決定的影響◆蜥蜴類(lèi)的A．a(chǎn)gama，E.macularius，在低溫度下(240C)發(fā)育為雌性，而在高溫(320C)則全部發(fā)育為雄性?！酏旑?lèi)的T．graetta，C．Caretta則相反，在低溫下全部發(fā)育為雄性，而高溫則發(fā)育為雌性?！粑伵ｎ?lèi)的軟體動(dòng)物Crepidula的性別決定則取決于個(gè)體間的相互位置關(guān)系，在其形成相互疊壓的群體中，下方個(gè)體發(fā)育為雌性，上方個(gè)體發(fā)育為雄性?！酎S鱔環(huán)境影響性別的機(jī)制還不清楚太平洋珊瑚礁中生活著一種裂唇魚(yú)，以取食別種魚(yú)體表寄生蟲(chóng)為生(互利共生),受清潔的魚(yú)主動(dòng)游到“清潔站”接受清除體外寄生物。裂唇魚(yú)社群（socialgroup）通常由一條雄魚(yú)和若干條雌魚(yú)組成。如果雄魚(yú)不幸死去，又沒(méi)有鄰近雄魚(yú)來(lái)占領(lǐng)“閨室”時(shí)，群中最大雌魚(yú)就發(fā)生性轉(zhuǎn)變，迅速變成雄魚(yú)。若人工取走雄魚(yú)，同樣又有一條雌魚(yú)變成雄魚(yú)。某些海洋無(wú)脊椎動(dòng)物，有雄性附著在雌體體上生活的現(xiàn)象。它們產(chǎn)生中性的自由游泳的幼體，當(dāng)其單獨(dú)固著在某一基底物上時(shí)發(fā)育成雌體，而當(dāng)固著在雌體上時(shí)則發(fā)育成雄體。蘭科的Cycnochus和Catasetum，當(dāng)生長(zhǎng)在陽(yáng)光照著的地方發(fā)育成雌株，長(zhǎng)在遮蔭處則發(fā)育成雄株?！と缤芗t細(xì)胞核移植后發(fā)育成蝌蚪·Dolly羊的誕生說(shuō)明高度分化的哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核也具有發(fā)育全能性干細(xì)胞(stemcell)

：隨胚胎的發(fā)育，動(dòng)物細(xì)胞特別是高等動(dòng)物細(xì)胞逐漸喪失了發(fā)育成個(gè)體的能力，僅具分化成有限細(xì)胞類(lèi)型及構(gòu)建組織的潛能，這種潛能稱為多潛能性

(pluripotency)，具多潛能性的細(xì)胞稱為干細(xì)胞

。·胚胎干細(xì)胞(embryostemcell)

·造血干細(xì)胞：成體中具有分化成多種血細(xì)胞能力的細(xì)胞，僅占骨髓細(xì)胞數(shù)的萬(wàn)分之一。（臍帶血）·單能干細(xì)胞（monopotentialcell）：也叫定向干細(xì)胞，僅具有分化形成某一種類(lèi)型能力的細(xì)胞。臍血中含有大量未成熟的造血干細(xì)胞，將臍血干細(xì)胞移植，一方面可以抵制白血病等惡性血液病治療過(guò)程中放療、化療產(chǎn)生的副作用，另一方面也可加快病人造血功能恢復(fù)的時(shí)間，因此目前均用于對(duì)兒童患者的移植治療。“生命銀行”：把孩子出生時(shí)的臍血保留寄存，一旦孩子長(zhǎng)大成人時(shí)患病，可備今后之需。置疑：血液保存時(shí)間？細(xì)胞分化與胚胎發(fā)育細(xì)胞分化是胚胎發(fā)育的基礎(chǔ)；然而有限的基因如何分化出形態(tài)、功能多樣的細(xì)胞，最終構(gòu)建多姿多彩的生命體一直以來(lái)都是科學(xué)家們關(guān)注的重點(diǎn)（發(fā)育生物學(xué)）；線蟲(chóng)、果蠅、擬南芥、水稻等生物則是研究細(xì)胞分化和發(fā)育的好材料（模式生物）；細(xì)胞分化與胚胎發(fā)育◆同源異型基因

（homeoticselectorgene，Hoxgene）首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)，能夠時(shí)空特異性地調(diào)節(jié)果蠅的體節(jié)發(fā)生，其基因在染色體上的排列順序與果蠅體節(jié)發(fā)生的順序完全一致。后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，在無(wú)脊椎動(dòng)物和高等脊椎動(dòng)物中也含有大量的Hoxgene，且其同源性非常高（60%-80%），功能也十分相似，能夠時(shí)空特異性地調(diào)節(jié)動(dòng)物的胚胎發(fā)生，且基因的排列與發(fā)育的順序相同。第二節(jié)癌細(xì)胞(Cancercell)●癌細(xì)胞的基本特征●致癌因素●癌癥產(chǎn)生是基因突變積累和自然選擇的結(jié)果●癌癥能治療嗎？一．癌細(xì)胞的基本特征癌癥是一種嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命安全的疾病。動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞分裂調(diào)節(jié)失控而無(wú)限增殖的細(xì)胞稱為腫瘤細(xì)胞(tumorcell)。具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤稱為惡性腫瘤（malignancy）。上皮組織的惡性腫瘤稱癌。

●基本生物學(xué)特征●體外培養(yǎng)的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞的特征基本生物學(xué)特征◆mRNA轉(zhuǎn)錄譜系的改變（少數(shù)基因表達(dá)不同；突變位點(diǎn)不同，表型多變）◆細(xì)胞間相互作用改變（產(chǎn)生新的膜受體蛋白，沖破細(xì)胞識(shí)別作用的限制；表達(dá)水解酶類(lèi)以水解基底）◆具有擴(kuò)散性1)細(xì)胞間粘著性下降，具侵潤(rùn)性和擴(kuò)散性；2)在分化程度上低于良性腫瘤細(xì)胞（如疣子和息肉），失去許多原組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能?！舻鞍妆磉_(dá)譜系或蛋白活性改變（表達(dá)胚胎細(xì)胞蛋白、端粒酶活性升高）◆生長(zhǎng)與分裂失控，具無(wú)限增殖能力，是“永生”細(xì)胞?！羧旧w非整倍性體外培養(yǎng)的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞的特征

◆同癌細(xì)胞一樣具有無(wú)限增殖的潛能

◆在體外培養(yǎng)時(shí)貼壁性下降◆失去接觸抑制◆培養(yǎng)時(shí)對(duì)血清依賴性降低◆惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞注入易感動(dòng)物體內(nèi)，常會(huì)形成腫瘤二、致癌因素●多種理化因子致癌 ●DNA腫瘤病毒與RNA腫瘤病毒

三、癌癥產(chǎn)生是基因突變積累和自然選擇的結(jié)果

癌癥主要是體細(xì)胞DNA的病理變化而引起的疾病，涉及到兩大類(lèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的基因的突變?！翊龠M(jìn)細(xì)胞增殖相關(guān)基因突變：原癌基因(proto-oncogene)突變形成癌基因(oncogene)●抑制細(xì)胞增殖相關(guān)基因突變：腫瘤抑制基因(tumor-suppressorgene)●細(xì)胞癌變是多個(gè)原癌基因突變累積的結(jié)果，所以患者多為年長(zhǎng)者?！裨┗蚺c抑癌制基因產(chǎn)物協(xié)調(diào)作用，避免細(xì)胞癌變◆原癌基因存在于細(xì)胞基因組中(c-onc)，是控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的基因;主要編碼細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的調(diào)控因子（6種類(lèi)型的蛋白質(zhì)）;◆癌基因是控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的原癌基因的一種突變形式，能引起正常細(xì)胞癌變?！粼┗蛑械膬蓚€(gè)拷貝只要有一個(gè)發(fā)生突變，其產(chǎn)物量就增加或活性升高，促進(jìn)細(xì)胞癌變。(顯性突變)◆抑癌基因是正常細(xì)胞增殖過(guò)程中的負(fù)調(diào)控因子,其編碼的蛋白抑制細(xì)胞增殖，使細(xì)胞停留于檢驗(yàn)點(diǎn)上，阻止周期進(jìn)程?！粢职┗虬l(fā)生功能喪失性突變(隱性突變)，則導(dǎo)致細(xì)胞周期失控而過(guò)度增殖。例如：Rb基因突變導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)限制生長(zhǎng)和增殖,最后

導(dǎo)致腫瘤形成（Rb基因表達(dá)產(chǎn)物pRb對(duì)細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)作用）；P53基因突變將導(dǎo)致細(xì)胞癌變或凋亡。四、癌癥能治療嗎●傳統(tǒng)思路是手術(shù)、放療、化療●癌癥治療新方案

◆免疫治療(Immunotherapy)

◆基因治療(Genetherapy)

◆抑制腫瘤血管形成的“餓死腫瘤療法”幾種生物的細(xì)胞數(shù)目與類(lèi)型乳腺細(xì)胞具有分化成多種細(xì)胞類(lèi)型及構(gòu)建組織的潛能。細(xì)胞通過(guò)旁分泌產(chǎn)生信號(hào)分子旁泌素(細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子)影響周?chē)?xì)胞使其向一定方向分化，這種作用稱近端組織的相互作用

(promixatetissueinteraction)/胚胎誘導(dǎo)。遠(yuǎn)距離細(xì)胞間則主要通過(guò)內(nèi)分泌產(chǎn)生的激素來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞分化。神經(jīng)系統(tǒng)上皮頭外胚層視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮視泡腔晶狀體角膜細(xì)胞通訊，信號(hào)傳導(dǎo)視杯發(fā)育中的晶狀體圖：人肝細(xì)胞光學(xué)切片。示腫瘤細(xì)胞（染紅色）正在入侵正常組織。正常細(xì)胞：生長(zhǎng)到彼此接觸會(huì)停止運(yùn)動(dòng)和分裂活動(dòng)癌細(xì)胞：生長(zhǎng)到彼此接觸仍然繼續(xù)生長(zhǎng)，可以形成細(xì)胞克隆。原癌基因編碼的6類(lèi)蛋白pRB與轉(zhuǎn)錄因

子E2F結(jié)合,而使細(xì)胞停滯在G1期。突變和非整倍化療易使細(xì)胞產(chǎn)生抗藥性血管生成抑制素Endostatin治療癌較有效缺失作圖法鑒定啟動(dòng)子區(qū)域特殊位點(diǎn)缺失區(qū)域成纖維細(xì)胞肝細(xì)胞不同細(xì)胞中纖粘蛋白的mRNA編碼鐵蛋白mRNA的翻譯的調(diào)節(jié)polyA核苷酸酶降解3‘polyA的長(zhǎng)度<30時(shí)，5’帽子結(jié)構(gòu)被摘掉，也逐漸被降解圖:(A)要在新的部位產(chǎn)生一個(gè)轉(zhuǎn)移灶,上皮中的原發(fā)腫瘤細(xì)胞必須特地穿過(guò)基板,穿過(guò)結(jié)締組織,遷移進(jìn)入血流。(B)肝臟中的轉(zhuǎn)移灶,由結(jié)腸中原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移而來(lái)。這里染色較淺的細(xì)胞團(tuán)是轉(zhuǎn)移灶。(C)高倍放大。用另一種染色方法來(lái)顯示正常與腫瘤細(xì)胞之間明顯的差別。苯并芘黃曲霉毒素去氨基化UVA（320-400）：PA、IPD、PPD、PFA、INDICEUVA、UVA-Fak