臨床血液學(xué)檢驗技術(shù)：1血發(fā)生及其調(diào)控

《臨床血液學(xué)檢驗技術(shù)》是以血液學(xué)的理論為基礎(chǔ)，以臨床血液病為研究對象，以化學(xué)、物理、免疫和分子生物學(xué)等檢驗技術(shù)和方法為手段，來分析和研究血液、造血器官的病理變化，從而為臨床血液病的診斷、治療和預(yù)后提供實驗依據(jù)。既屬于血液學(xué)，又屬于檢驗醫(yī)學(xué)。理論課：36學(xué)時，1-16周，每周一下午。實驗課：64學(xué)時，1-16周，每周四下午。帶上理論教材和實驗指導(dǎo)！造血及造血調(diào)控第一節(jié)血細(xì)胞的起源與造血器官血液學(xué)發(fā)展史microscop－RBC1673y

－WBC1749y

－PLT1842y19世紀(jì)60年代認(rèn)識到骨髓有幼稚血細(xì)胞，成熟后進入血液。骨髓穿刺術(shù)－1929y正常成人外周血象、髓象一個50Kg體重的成年人每天約生成：1400億個RBC750億個WBC1200億個PLT造血---hematopoiesis定義：造血是指血細(xì)胞在造血系統(tǒng)生成和發(fā)育的過程，是生命活動的重要部分。造血主要涉及造血器官、造血干/祖細(xì)胞以及造血調(diào)控等。造血器官定義：能夠生成并支持造血細(xì)胞分化、發(fā)育和成熟的組織器官稱為造血器官，主要包括骨髓、胸腺、淋巴結(jié)、肝、脾等。造血器官的演變造血過程分：1.胚胎期造血2.出生后造血

胚胎期造血器官

1.中胚葉造血：卵黃囊，2w-9w2.肝臟造血：肝、脾、淋巴結(jié)，6w-7m3.骨髓造血：14w-出生后胚胎期造血特點胎兒發(fā)育時期不同，造血器官不同。經(jīng)歷了卵黃囊造血期－肝造血期－骨髓造血期各器官造血不是截然分開，而是此消彼長，互為交替。血細(xì)胞生成順序：紅系粒系巨核系淋巴系和單核系。出生后造血器官1.骨髓造血2.淋巴造血骨髓:骨骼內(nèi)海綿狀組織骨髓－出生后最重要的造血器官功能：骨髓是出生后唯一產(chǎn)生紅、粒、血小板的場所，也可產(chǎn)生淋巴、單核細(xì)胞。結(jié)構(gòu)：骨髓分紅髓和黃髓。P12圖1-3紅髓的特點（1）分布（2）結(jié)構(gòu)1.胸腺2.脾3.淋巴結(jié)淋巴器官造血P12髓外造血P13在某些病理情況下，胎兒出生2個月后其骨髓以外的肝、脾、淋巴結(jié)等組織又恢復(fù)其制造紅、粒和血小板的造血功能。髓外造血多見于兒童，是機體對血細(xì)胞需求特別增高或?qū)撬柙煅系K的一種代償。第二節(jié)造血干細(xì)胞和造血祖細(xì)胞P15一切血細(xì)胞都來源于造血干細(xì)胞

什么是干細(xì)胞？干細(xì)胞(stemcells)

：是一類具有多向分化潛能和自我復(fù)制功能的早期未分化細(xì)胞,在特定的條件下,它可以分化成不同的功能細(xì)胞,形成多種組織和器官。ExamplesofStemCellsFoundinAdultSomaticTissues

按照生存階段干細(xì)胞分為：

胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcell,ESC)

成體干細(xì)胞(adultstemcell,ASC)。造血干細(xì)胞間充質(zhì)干細(xì)胞血管干細(xì)胞造血干細(xì)胞來自胚胎干細(xì)胞

胚胎干細(xì)胞是胚胎發(fā)育早期囊胚（受精后約5－7天）的內(nèi)細(xì)胞團中未分化的細(xì)胞，它具有高度的分化潛能，可進一步分裂、分化發(fā)育成為完整個體，可以無限增殖并分化成為多種細(xì)胞類型，從而可以進一步形成機體的任何組織或器官。一、造血干細(xì)胞

(hemotopoieticstemcell,HSC)小鼠HSC的研究人類HSC的研究

HSC的定義小鼠造血干細(xì)胞的研究1961年由Till&McCulloch建立的小鼠脾結(jié)節(jié)實驗技術(shù)等一系列小鼠體內(nèi)實驗證明了小鼠體內(nèi)存在造血干細(xì)胞。小鼠HSC體內(nèi)實驗的研究（一）結(jié)論：小鼠骨髓中存在血液細(xì)胞的祖先，在特殊情況下，可先在脾內(nèi)形成造血結(jié)節(jié)（CFU-S），而后促進照射小鼠造血功能的恢復(fù)。小鼠HSC體內(nèi)實驗的研究（二）結(jié)論：轉(zhuǎn)移的脾結(jié)節(jié)生成細(xì)胞（CFC-S）具有重建照射小鼠全部造血功能的能力。脾結(jié)節(jié)實驗中相關(guān)名稱的介紹（CFU-S:ColonyFormingUnit－Spleen）脾結(jié)節(jié)生成單位：代表每一個脾結(jié)節(jié)（CFC-S:ColonyFormingCell－Spleen）脾結(jié)節(jié)生成細(xì)胞：能夠生成脾結(jié)節(jié)的原始細(xì)胞拉斯克獎素有“美國的諾貝爾獎”之美譽，是美國最具聲望的生物醫(yī)學(xué)獎項。

2005年的拉斯克獎

BasicMedicalResearch:Foringeniousexperimentsthatfirstidentifiedastemcell-theblood-formingstemcell-whichsetthestageforallcurrentresearchonadultandembryonicstemcells.

UniversityofToronto,OntarioCancerInstitute,Ontario,Canada

人類造血干細(xì)胞的實驗研究體外半固體培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)人造血祖細(xì)胞CFU-GM用流式細(xì)胞儀測CD34+細(xì)胞（CD34抗原：是分離純化HSC的主要標(biāo)志，見P16－17

）。免疫缺陷小鼠體內(nèi)重建造血。什么是造血干細(xì)胞？造血干細(xì)胞是由胚胎干細(xì)胞發(fā)育而來，具有高度自我更新和多向分化能力，并且在造血組織中含量極少，形態(tài)難以辨認(rèn)，外觀似小淋巴細(xì)胞的一群異質(zhì)性的細(xì)胞群體。P16造血干細(xì)胞含量CD34＋細(xì)胞占有核細(xì)胞比例：骨髓：0.5％－1.5％外周血：0.05％－0.15％臍血：0.1％每10000到15000個骨髓細(xì)胞中才能找到

1個干細(xì)胞；在血液中則降到1/100000。造血干細(xì)胞的性質(zhì)Self-renewal－自我更新MultilineageDifferentiation－多向分化G0phase－G0期造血干細(xì)胞的造血功能自我更新能力保持了干細(xì)胞自身數(shù)量和質(zhì)量的相對穩(wěn)定，維持正常機體造血功能的恒定，保證血細(xì)胞的不斷更新。多向分化能力補充了外周血循環(huán)中衰老和死亡的各系血細(xì)胞數(shù)量。血細(xì)胞生成增殖分化干細(xì)胞增殖：保證干細(xì)胞數(shù)量分化：形成各系血細(xì)胞干細(xì)胞Happenningofacuteleukemia白血病骨髓象指一類由造血干細(xì)胞分化而來但失去了自我更新能力的過渡性、增殖性細(xì)胞群。它介于造血干細(xì)胞與形態(tài)學(xué)可辨認(rèn)的前體細(xì)胞之間的由多向分化到單向分化的過渡階段細(xì)胞。

二、造血祖細(xì)胞

(hematopoieticprogenitorcell,HPC)CFU-ColonyFormingUnit

集落形成單位CFU-GMCFU-E

1.多向祖細(xì)胞：CFU-HPP，LTCIC，CFU-GEMM（CFU-MIX），CFU-GM2.單向祖細(xì)胞：BFU-E，CFU-E，

CFU-G，CFU-M，CFU-Eo，CFU-Bas,CFU-Meg,CFU-TL，CFU-BL造血祖細(xì)胞的種類粒系：CD33、CD13單核系：CD14淋巴系：CD19、CD7NK細(xì)胞系：CD56紅系：CD71巨核系：CD41、CD61造血祖細(xì)胞表面標(biāo)志:CD34+Lin＋三、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Mesenchymalstemcell,MSC分化為：成骨細(xì)胞，脂肪細(xì)胞，心肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞等。自學(xué)P17第三節(jié)血細(xì)胞的發(fā)育P18造血干細(xì)胞造血祖細(xì)胞骨髓細(xì)胞髓血屏障

血細(xì)胞

骨髓外周血

造血細(xì)胞的生長發(fā)育包括：增殖分化成熟釋放1.增殖：通過有絲分裂增加細(xì)胞數(shù)量除HSC外各階段細(xì)胞皆為對稱性地有絲分裂巨核細(xì)胞：多倍體2.分化：是發(fā)育過程中失去某些潛能同時又獲得新功能的過程。3.成熟指由原始經(jīng)幼稚到成熟細(xì)胞的發(fā)育過程

4.血細(xì)胞的釋放髓血屏障：marrowbloodbarrier,MBBMBB結(jié)構(gòu)：內(nèi)皮層、基膜和外膜層。MBB功能：成熟血細(xì)胞出髓干細(xì)胞回髓（homing,歸巢）血細(xì)胞的命名P201.紅細(xì)胞系統(tǒng)2.粒細(xì)胞系統(tǒng)3.巨核細(xì)胞系統(tǒng)4.單核細(xì)胞系統(tǒng)5.淋巴細(xì)胞系統(tǒng)6.漿細(xì)胞系統(tǒng)血細(xì)胞發(fā)育成熟的一般規(guī)律1.血細(xì)胞形態(tài)演變規(guī)律（實驗課體會）胞體、胞漿、胞核、核仁、核染色質(zhì)、顆粒。2.血細(xì)胞免疫表型分化特征（了解）

P20：CD分子

一、造血微環(huán)境(HIM)P13

由骨髓基質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成，包括骨髓微血管系統(tǒng)、末梢神經(jīng)、骨髓基質(zhì)細(xì)胞以及基質(zhì)細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，是造血干細(xì)胞生長、分化和自我更新的場所。

HIM:hematopoieticmicroenvironment第三節(jié)造血調(diào)控

HIM組成1.骨髓微血管系統(tǒng)：調(diào)控血細(xì)胞的釋放。

2.基質(zhì)細(xì)胞：黏附造血干細(xì)胞并支持和調(diào)控造血細(xì)胞定居、分化、增殖、成熟的重要場所。

3.細(xì)胞外基質(zhì)：糖蛋白，蛋白多糖和膠原。調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附和增殖分化。

4.基質(zhì)細(xì)胞分泌因子：因子-受體

骨髓血竇及造血微環(huán)境模式圖1.造血生長因子：SCF(干細(xì)胞因子)Flt-3配體（FL）集落刺激因子（CSF）

EPO

白介素（IL）

TPO二、造血的體液調(diào)控P30造血負(fù)調(diào)控：

TGF-β