實驗動物學第二章實驗動物質量的標準化

實驗動物學第二章實驗動物質量的標準化第一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日本章掌握及熟悉的內容掌握：實驗動物的遺傳學分類和微生物學分類的方法及級別。各遺傳學類別實驗動物（如近交系動物、保種F1代動物、封閉群動物、突變系動物、同源突變近交系動物、同源導入近交系動物、分離近交系動物、重組近交系動物等）的概念。各微生物學級別實驗動物的概念、區(qū)別。熟悉：各遺傳學類別實驗動物的區(qū)別、特性及應用；品種和品系的概念；各微生物學級別實驗動物的來源、特性及應用。第二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第一節(jié)

實驗動物遺傳學質量的標準化第三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

實驗動物遺傳學質量標準化的重要意義

1、可以增加動物實驗結果的可比性和可重復性

2、根據(jù)模擬動物基因組與人類基因組的異同，可以在遺傳限定的動物身上復制出更多的人類疾病動物模型。第四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

3、標準化實驗動物有利于動物基因的作圖。4、對實驗動物遺傳學質量標準化的深入研究，可以建立一系列相關的生物信息數(shù)據(jù)庫。第五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日一、實驗動物按遺傳學分類第六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日品種、品系的概念

品種（stock）和品系（strain）是基本分類單位。

作為一個品種、品系，應具備以下條件：

（1）相似的外貌特征

（2）獨特的生物學特性

（3）穩(wěn)定的遺傳性能

（4）具有共同遺傳來源和一定的遺傳結構

通常稱近交系動物為品系，稱封閉群動物為品種。第七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日按基因組成特點分近交系突變系雜交F1代封閉群按基因純和程度分相同基因類型不同基因類型實驗動物分類方法第八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實驗動物相同基因類型不同基因類型雜種F1代普通近交系特殊近交系重組近交系分離近交系同源突變近交系同源導入近交系遠交種突變種近交系突變系封閉群雜種F1代第九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、各類別實驗動物的概念、特性及應用第十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的概念

經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內所有個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先。

近交系的近交系數(shù)（Inbreedingcoefficient）應大于98.6％。

1.

近交系動物（inbredstrain)第十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日Fn=1-(1-△F)n

n為近交代數(shù)△F=19%

第十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日亞系和支系

亞系：由于突變和殘留雜和基因而導致部分遺傳組成的改變，從而形成的新的近交系品系，稱為亞系。支系：由于飼養(yǎng)環(huán)境的改變、進行某種技術處理而引起某些生物學特性的改變，從而形成新的近交系品系，稱為支系。第十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的命名

近交系一般以大寫英文字母命名，亦可以用大寫英文字母加阿拉伯數(shù)命名，符號應盡量簡短。如A系、TA1系等。近交系的近交代數(shù)用大寫英文字母F表示。例如當一個近交系的近交代數(shù)為57代時，寫成（F57）。

亞系的命名方法是在原品系的名稱后加一道斜線，斜線后標明亞系的符號，如：1）數(shù)字：DBA/22）培育或產生亞系的單位或人的縮寫英文名稱：CBA/J3）數(shù)字再加保持者的縮寫英文名稱：C57BL/6J、C57BL/10J4）慣用：BALB/c等。第十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的特性

（1）純和性（homozygosity）（2）同基因性（isogeneicity）（3）均一性（uniformity）（4）遺傳穩(wěn)定性（geneticstability）（5）可分辨性（identification）（6）個體性（individuality）（7）分布的廣泛性（extensivedistribution）（8）背景資料可查性（retrievalablebackgrounddate）第十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日近交系動物的應用（1）與封閉群相比，近交系動物個體之間極其一致，可以消除雜合遺傳背景對實驗結果的影響，因此在實驗中，實驗組和對照組都只需少量的動物。（2）在某些涉及組織細胞或腫瘤移植的實驗中，個體之間組織相容性一致與否，是實驗成敗的關鍵，在這里，近交系動物成為必不可少的實驗動物。（3）由于近交，隱性基因純合性狀得以暴露，可以獲得大量先天性畸形及先天性疾病的動物模型，如糖尿病、高血壓等，是進行基因連鎖分析、比較遺傳學、生理學和發(fā)育生物學研究的理想實驗材料。（4）某些近交系具有一定的自發(fā)或誘發(fā)腫瘤發(fā)病率，并可以使許多腫瘤細胞株在活體動物上傳代。這些品系成為腫瘤病因學、腫瘤藥理學研究的重要模型。（5）多個近交系同時使用，可使不同研究者分析不同遺傳基因對某項實驗的影響，或者觀察結果是否具有普遍意義。第十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系同源突變近交系同源導入近交系分離近交系重組近交系第十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系的概念

●同源突變近交系：

是某個近交系在某基因位點上發(fā)生突變而分離、培育出來的新的近交系。兩個近交系，除了在一個指明位點等位基因不同外，其他遺傳基因全部相同?！裢磳虢幌担和ㄟ^雜交-互交（Cross-intercross）或回交（Backcross）等方式將一個基因導入到近交系中，由此形成的一個新的近交系與原來的近交系只是在一個很小的染色體片段上的基因不同，稱為同源導入近交系（同類近交系），簡稱同源導入系（同類系）。第十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日●分離近交系:是在培育近交系的同時，采取一定的交配方法，迫使個別基因位點上的基因處于雜合狀態(tài)?！裰亟M近交系:

由兩個近交系雜交后，經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配成的近交系。

同源導入近交系和同源突變近交系的不同之處在于與原來那株近交系相比，前者是一個染色體片段的差異，后者是單個基因的差異。分離近交系和同源突變近交系的區(qū)別:當突變基因為雜合狀態(tài)時，兩者的遺傳組成特征一樣，但培育的方法不同。第十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系的命名

●同源突變近交系：由發(fā)生突變的近交系名稱后加突變基因符號（用英文斜體印刷體）組成，二者之間以連接號分開，如：DBA/Ha-D.

當突變基因必須以雜合子形式保持時，用“+”號代表野生型基因，如：A/Fa-+/c。

●同源導入近交系：在品系（亞系）的名稱（或名稱縮寫）后面加“·”和供體品系名稱縮寫，然后加連字號和目的基因稱號。例如：B10·129-H-12b表示以C57BL/10品系為遺傳背景，攜帶來自129品系H-12b基因的同源導入近交系。第二十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

●分離近交系：在品系名稱后加連字號和雜合基因符號。如：DW-dw/+

●重組近交系：是在兩個祖系名稱縮寫中間加上大寫英文字母X。作母系的祖系名稱放在前，作父系的祖系名稱放在后。同一系列中不同的近交系可在其后面加連字號，再加數(shù)字表示。例如：AKR和C57BL雜交培育的一系列重組近交系可命名為AKXB-1、AKXB-2、AKXB-3等。第二十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日特殊近交系的應用同源突變近交系、同源導入近交系、分離近交系：（1）在同一遺傳背景下比較某基因位點上不同等位基因的遺傳效應。（2）在不同遺傳背景中研究同一基因與遺傳背景及其他基因的關系，消除雜合遺傳背景對某些突變基因表達的影響，以獲得更為穩(wěn)定的實驗動物模型。（3）對復雜的多基因性狀進行遺傳分析。

重組近交系：（1）分離分析（2）連鎖分析（

3）功能分析

第二十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物的概念

雜種F1代動物是由兩個不同的近交品系雜交而繁殖的第一代動物，各個體具有相同的表型和基因型。

2.雜種F1代動物第二十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物和重組近交系的區(qū)別雜種F1代動物是兩個近交系雜交產生的第一代雜種。重組近交系是兩個近交系雜交產生第一代雜種，再由兩個第一代雜種雜交后，所產生的雜種經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配而育成的近交系。第二十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物的命名

雜種F1代動物的命名習慣上是在括號內把親代母系名稱寫在前邊，以大寫英文字母X連接，后邊是親代父系名稱，再寫上F1。例如：（C57BL/6XDBA/2）F1第二十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日雜種F1代動物的特性及應用（1）遺傳和表型上的一致性。（2）雜交優(yōu)勢雜種一代具有較強的生命力，對疾病的抵抗力強，壽命較長，容易飼養(yǎng)，適用于攜帶保存某些有害基因和長時間的慢性致死實驗。（3）具有同基因性。（4）作為某些疾病研究的模型。(NZBXNZW)F1紅斑狼瘡自身免疫缺陷模型(C3HXI)F1肥胖病和糖尿病模型第二十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日封閉群動物概念

以非近親交配方式進行繁殖生產的一個實驗動物種群，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群，或叫遠交群。

封閉群動物的關鍵是不從外部引入任何新的基因，同時進行隨機交配，不讓群體內基因丟失，以保持封閉群一定的雜合性。

突變種是指攜帶個別突變基因的封閉群。

3.封閉群動物第二十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日封閉群動物的命名

例如：N：NIH表示由美國國立衛(wèi)生研究院（N）保持的NIH封閉群小鼠。Lac：LACA表示由英國實驗動物中心（Lac）保持的LACA封閉群小鼠。某些命名較早，又廣為人知的封閉群動物，名稱與上述規(guī)則不一致時，仍可沿用其原來的名稱。如Wistar大鼠封閉群，日本的ddy封閉群小鼠等。

突變種的命名是在遠交種命名的基礎上加上適當?shù)幕蚍枺⑶矣眠B字號相連。如：N：NIH-nu/nu。

封閉群由2-4個大寫英文字母命名，種群名稱前標明保持者的英文縮寫名稱，第一字母須大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個字母。保持者與種群名稱之間用冒昧號分開。第二十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日封閉群動物特性及應用

（1）遠交種動物的遺傳組成具有很高的雜合性。（2）遠交種具有較強的繁殖力和生活力。（3）突變種所攜帶的突變基因通常導致動物在某些方面的異常，從而可成為生理學、胚胎學和醫(yī)學研究的模型。第二十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日突變系動物的概念

突變系動物是指具有特殊遺傳性狀，并由基因符號表示出來的品系，以及基因符號表示雖不明顯，但經(jīng)淘汰和選擇后能保持特定遺傳性狀的品系。突變系動物可分為由自發(fā)突變而來和人工誘變而來的兩大類。

4.突變系動物第三十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日突變系動物的命名

在原品種或品系名稱后面加上連字號和突變基因符號。例如：BALB/c-nu/nu和N:NIN-nu/nu。

第三十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、實驗動物遺傳監(jiān)測第三十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1、實驗動物遺傳監(jiān)測

遺傳監(jiān)測是對實驗動物培育、維持和生產全過程進行的遺傳學控制和質量檢測。它是評價實驗動物飼養(yǎng)管理水平和實驗動物的遺傳學質量的重要手段。遺傳監(jiān)測結果是實驗動物遺傳學質量標準化工作是否有效的最終判定標準。第三十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2、近交系動物必須符合以下要求：

1）、具有明確的品系背景資料，包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳組成、主要生物學特性等，并能充分表明新培育的或引種的近交系動物符合近交系定義的規(guī)定。

2）、用于近交系保種及生產的繁殖系譜及記錄卡清楚完整，繁殖方法科學合理。

3）、經(jīng)遺傳檢測（生化標記基因檢測法，皮膚移植法，免疫標記基因檢測法）質量合格。第三十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3、造成遺傳改變，與標準遺傳概貌不一致，主要有以下原因：

1）遺傳污染

2）遺傳漂變

3）基因突變第三十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4）數(shù)量性狀

下頜骨形態(tài)分析法4、遺傳檢測常用的性狀及方法1）形態(tài)學遺傳標記如：毛色毛色基因測試法2）生化標記如：同工酶、異構蛋白生化標記電泳法3）免疫學標記如：組織相容性抗原皮膚移植法5)分子標記DNA多態(tài)檢測法（DNAmarkers）:RFLP、RAPD、SSR（微衛(wèi)星DNA）、SNP

第三十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日P:DBA(已知基因型）aabbCCF1:待測基因型毛色性狀返回毛色基因測試法A_B_C_野鼠色

aaB_C_黑色

A_bbC_桂皮色aabbC_棕色

____cc白色第三十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日生化標記電泳一、抽樣

對基礎群，凡在子代留有種鼠的雙親動物都應進行檢測。

對生產群，按下表要求從每個近交系中隨機抽取成年動物，雌雄各半。

生產群中雌性種鼠數(shù)量

抽樣數(shù)目

100只以下

6只

100只以上

>6只二、步驟

電泳樣品的制備（血漿、溶血素、組織勻漿上清液）浸膜點樣電泳染色與標準生化遺傳概貌對照，并判斷結果第三十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日返回第三十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日通過同系異體間的植皮的成功與否來判斷供體和受體是否屬同一品系或是否發(fā)生的遺傳變異或遺傳污染。凡受體含有供體基因皮膚移植就能接受。

近交系具有同基因性，同一品系不同個體之間的皮膚移植是不會產生排斥反應的。

F1代動物可以接受任何一個雙親的組織移植物，雙親則不能接受F1代的移植物。

F1代動物可以接受F2代以后各代動物的移植物。親本品系可以接受某些F2代以后各代動物的移植物，但是絕大部分被排斥。皮膚移植法第四十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日背部皮膚移植法：

尾部皮膚移植法：

第四十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日注意以下幾點：1、供體和受體為同一性別。2、要嚴格消毒，防止產生非免疫排斥。3、最后判定，如不排斥，至少要觀察100天，才可判定不排斥。結果觀察:1、皮片在第一周內蒼白、干癟、脫落，則為技術失敗。對照自體移植，技術失敗率不得大于10%。2、皮片在第2～3周內發(fā)炎、水腫、壞死、結痂直至脫落，則為急性排斥。遺傳污染通常引起急性排斥。3、皮片在第3～9周內逆毛逐漸脫落，直至無毛；或者因排斥留下凹陷疤痕，都為慢性排斥。遺傳突變通常引起慢性排斥。4、皮片在100d的觀察期內，始終有逆毛，則為永久接受的標志。5、如果對結果有懷疑，則要進行重新移植，以得出明確結果。返回第四十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日與標準遺傳概貌完全一致未發(fā)現(xiàn)遺傳變異，遺傳質量合格有一個位點的標記基因與可疑

增加檢測位點數(shù)目和增加標準遺傳概貌不一致檢測方法后重檢，確定只有一個標記基因改變可命名為同源突變系兩個或兩個以上位點的標不合格

淘汰，重新引種記基因與標準遺傳概貌不一致5、遺傳檢測結果判斷

檢測結果判斷處理

第四十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第二節(jié)

實驗動物微生物學質量的標準化第四十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實驗動物實行微生物學質量標準化的意義1、保證實驗動物的質量以確保動物實驗結果的可靠性和可重復性。2、保證實驗動物生產和動物實驗的正常進行。3、保證實驗動物飼育管理人員和動物實驗人員的健康和安全。第四十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日一、實驗動物微生物學等級分類1、國際上的分類方法：普通級動物conventionalanimal(CVA)無特定病原體動物specificpathogenfreeanimal(SPFA)已知菌動物gnotobioticanimal(GNA)無菌動物germfreeanimal(GFA)2、我國的分類方法：普通級動物conventionalanimal(CVA)清潔動物cleananimal(CLA)無特定病原體動物specificpathogenfreeanimal(SPFA)無菌動物germfreeanimal(GFA)第四十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日種類飼養(yǎng)環(huán)境微生物控制程度附記無菌動物隔離系統(tǒng)

以封閉的無菌技術取得，用現(xiàn)有方法不能檢出任何微生物和寄生蟲的動物悉生動物隔離系統(tǒng)

確知帶有的微生物叢，特殊飼養(yǎng)的動物

確知帶有的微生物SPF動物屏障系統(tǒng)

沒有特定的致病性微生物和寄生蟲的動物

明確知道不帶有的微生物普通動物開放系統(tǒng)

不明確所帶微生物、寄生蟲的動物，亦稱通常動物。但不得帶有人畜共患傳染病病原體

對微生物帶有情況不夠明確3、按微生物控制程度的實驗動物分類原則

第四十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、各級別實驗動物的概念、特性、來源、應用第四十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1.普通動物

conventionalanimal(CVA)

指未經(jīng)嚴格的微生物和寄生蟲控制，飼育在開放系統(tǒng)中，其體內外不帶有質量標準規(guī)定的主要人畜共患病和動物烈性傳染病病原體的動物。第四十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日普通動物的特性及應用特性：微生物寄生蟲控制要求最低，生產成本最低，量多價廉。應用：供教學和一般性試驗用。第五十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2.清潔動物

cleananimal(CLA)

指經(jīng)嚴格的微生物和寄生蟲控制，飼育在屏障系統(tǒng)中，其體內外除普通動物應排除的病原體和寄生蟲外，不攜帶有質量標準規(guī)定的對動物危害大和對科學實驗干擾大的人畜共患病和動物烈性傳染病病原體的動物。

清潔動物來源于SPF動物或無菌動物或悉生動物或剖腹產動物。第五十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)入口處第五十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)洗消間第五十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)內部結構第五十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)內部結構第五十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日屏障系統(tǒng)內操作第五十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日清潔動物的特性及應用特性：微生物寄生蟲控制要求比普通動物高但比SPF動物低，無人畜共患病和主要傳染病，無明顯可見的疾病臨床癥狀，是價廉健康且易得的標準的動物。應用：廣泛用于生物醫(yī)學研究各領域的要求不是十分嚴格的實驗。第五十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3.無特定病原體動物

specificpathogenfreeanimal(SPFA)

指經(jīng)嚴格的微生物和寄生蟲控制，飼育在屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)中，經(jīng)檢測其體內外無質量標準規(guī)定的特定病原微生物和寄生蟲存在，但可帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。（除清潔動物應排除的病原體和寄生蟲外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原體和寄生蟲。）

SPF動物來源于無菌動物。第五十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第五十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第六十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日無特定病原體動物的特性及應用特性：不攜帶對實驗有干擾的病原體的高標準的動物，無任何疾病的臨床癥狀，價格合適，來源容易。應用：廣泛應用于生物醫(yī)學研究的各個領域。第六十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4.無菌動物

germfreeanimal(GFA)

概念:指在隔離系統(tǒng)中飼育的，經(jīng)檢測體內外無可檢出的任何微生物和寄生蟲的動物。培育:無菌動物原種是在無菌條件下進行剖腹產，然后由人工喂乳或無菌“奶媽”動物代乳飼育而成。第六十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日隔離系統(tǒng)第六十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

主要特征：一般特征：增重慢、成熟晚、產仔少、壽命長。解剖生理特征：主要表現(xiàn)在消化系統(tǒng)（腸壁薄、微絨毛細）。免疫學特征：淋巴結與脾臟發(fā)育不良。

應用：

微生物學寄生蟲學研究；免疫學研究；腫瘤學研究；老年學研究；營養(yǎng)學研究；放射醫(yī)學研究；心血管疾病研究；毒理和藥理學研究等。無菌動物的特性及應用第六十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日5、悉生動物（已知菌動物）gnotobioticanimal(GNA)

在隔離系統(tǒng)中飼育的，經(jīng)檢測其體內外僅有經(jīng)人工有計劃接種的已知的微生物或寄生蟲的動物。

根據(jù)所接種的已知菌種類，分為單菌、雙菌、三菌和多菌動物。第六十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日無特定病原體動物和悉生動物的區(qū)別無特定病原體動物體內外排除了哪些微生物和寄生蟲是知道的。悉生動物體內外攜帶那些微生物和寄生蟲是知道的。第六十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日我國實驗動物等級的設定小鼠、大鼠：清潔級、SPF級、無菌級豚鼠、地鼠、兔：普通級、清潔級、

SPF級、無菌級犬、猴：普通級、SPF級第六十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日無菌動物、無特定病原體動物

和普通級動物優(yōu)缺點比較項目無菌動物SPF動物普通動物傳染病無無有或可能有寄生蟲無無有或可能有試驗結果明確明確有疑問應用動物數(shù)少量少量多或大量統(tǒng)計價值很好可能好不準確長期實驗可能好可能好困難死亡率很少少高長期實驗存活率約100％約90％約40％實驗的準確設計可能可能不可能實驗結果的討論價值高中低第六十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日各種等級動物的相互關系第六十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、實驗動物微生物與寄生蟲監(jiān)測

為了防止實驗動物群中微生物和寄生蟲的污染，確保實驗動物微生物學質量，必須建立一套監(jiān)測手段，定期對動物群或飼養(yǎng)設施的環(huán)境進行檢測。

必須從“引種運輸飼養(yǎng)管理”認真操作、嚴格管理第七十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1、檢測內容及意義1、外觀檢查精神狀態(tài)、運動情況、體表有無異常、生產能力和哺乳情況、排糞是否正常、采食與飲水等。2、定期對各級實驗動物群進行微生物學、寄生蟲學檢測，以確定各級實驗動物是否符合原定級別；另一方面避免科學工作者誤用不合適的動物，避免人獸共患病病原體感染飼養(yǎng)人員或實驗工作人員，保障這些人員的健康。3、對實驗動物飼養(yǎng)設施的監(jiān)測，為確證這些設施能否控制微生物污染提供依據(jù)。第七十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日4、對引進的實驗動物進行檢疫，避免病原體入侵原有的動物群。5、對患病動物進行病因學診斷并積累對動物疾病的認識和收集菌株或毒株，為診斷試劑和疫苗的制備，提供菌株或毒株。第七十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日第七十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日中華人民共和國國家標準

實驗動物微生物學等級及監(jiān)測

GB14922.2-2011Laboratoryanimal─Microbiologicalstandardsandmonitoring

表1小鼠、大鼠病原菌檢測項目第七十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表2豚鼠、地鼠、兔病原菌檢測項目第七十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表4小鼠、大鼠病毒檢測項目第七十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表5豚鼠、地鼠、兔病毒檢測項目第七十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

中華人民共和國國家標準GB14922.1—2011

實驗動物寄生蟲學等級及監(jiān)測

Laboratoryanimal—Standardsandmonitoringforparasitology__________________________________________________________________表1小鼠和大鼠寄生蟲學檢測指標第七十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日表2豚鼠、地鼠和兔寄生蟲學檢測指標第七十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日2、檢測方法國家推薦性標準《實驗動物微生物學檢測方法1～4》GB/T14926.1～14926.64－2001《實驗動物寄生蟲學檢測方法》GB/T18448.1～18448.10－2001第八十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實驗動物病毒學檢測方法目前我國對實驗動物病毒學檢測通常使用血清學方法，包括：1）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）2）免疫熒光試驗（IFA）3）免疫酶染色試驗（IEA）4）血球凝集（HA）和血球凝集抑制（HI）試驗第八十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實驗動物細菌學檢測方法通常采用細菌分離和培養(yǎng)方法。根據(jù)培養(yǎng)基上菌落特征，將分離到的可疑菌落作生化鑒定。1）檢測人員的實際工作經(jīng)驗，直接影響到其對檢測結果的判斷準確性。2）對部分細菌，如沙門氏菌，支原體等已開展血清學方法檢測。3）泰澤氏病原體不能在人工培養(yǎng)基上生長，目前還以病變組織壓片鏡檢進行檢測，并結合病理學檢查結果作出判斷。第八十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日實驗動物寄生蟲檢測方法通常在光學顯微鏡下查找寄生蟲的蟲體、蟲卵或孢子。對人獸共患的弓形蟲，則采用各種血清學的方法進行檢測。第八十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日3、檢測頻率

普通級動物：每三個月至少檢測動物一次。清潔動物：每三個月至少檢測動物一次。無特定病原體動物：每三個月至少檢測動物一次。無菌動物：每年檢測動物一次。每2-3周檢查一次動物的生活環(huán)境標本和糞便標本。第八十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日

群體大?。ㄖ唬?/p>

取樣數(shù)量<100>5100—500>10>500>204、取樣方法5、取樣數(shù)量

每個隔離器2只。第八十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日6、結果判定

如有一只動物的一項指標不符合該等級標準要求，則判為不符合該等級標準。第八十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日練習第八十七頁，共一百零二頁，2022年，8月28日1.品種、品系——是實驗動物分類的基本單位。作為實驗動物的一個品種或品系，應具備相似的外貌特征、獨特的生物學特性、穩(wěn)定的遺傳性能、具有共同遺傳來源和一定的遺傳結構等條件。2.近交系動物——經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成的動物品系，品系內所有的個體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先，該品系動物稱為近交系動物。3.亞系——育成的近交系在長期的保種過程中由于基因突變、殘余雜合基因、遺傳污染等原因而導致部分遺傳組成改變而形成的新的近交系，稱為原近交系的亞系。4.支系——育成的近交系由于飼養(yǎng)環(huán)境改變或人工技術處理，如代乳、胚胎移植、冷凍保存等，導致某些生物學特性的改變而形成的新的近交系，相對于原來的近交系或亞系，稱為支系。5.同源突變近交系——簡稱同源突變系，是指某個近交系在某基因位點上發(fā)生突變而分離、培育出來的新的近交系。它和原近交系的差異只是突變基因位點上帶有不同的基因，而其他位點上的基因完全相同。第八十八頁，共一百零二頁，2022年，8月28日6.同源導入近交系——簡稱同源導入系，是指通過基因導入的方法將一個目的基因導入某個近交系的基因組內而培育出的新的近交系。它與原近交系比較，只是一個染色體片段的差異(一個或幾個基因的差異)。7.分離近交系——是在培育近交系的同時，采取一定的交配方法，迫使個別基因位點上的基因處于雜合狀態(tài)而培育出來的新的近交系。如果同源突變近交系的突變基因為雜合狀態(tài)，則其遺傳組成特征與分離近交系相同，只是培育方法不同。8.重組近交系動物——是在兩個近交系雜交生育雜種一代之后，雜種一代互交生育雜種二代，從雜種二代中隨機選擇個體配對，再連續(xù)進行20代以上的全同胞兄妹交配而培育出的近交系動物。通常從多對雜種二代中平行培育出一系列重組近交系。9.雜種F1代動物——是由兩個不同的近交系雜交而生育的第一代雜種動物，稱為雜種F1代動物。雜種F1代動物的基因組成大都是雜合的，但各個體具有相同的表型和基因型。10.封閉群動物——以非近親交配方式進行繁殖生產的一個實驗動物群體，在不從其外部引入新個體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上，稱為一個封閉群。該群體動物稱為封閉群動物。第八十九頁，共一百零二頁，2022年，8月28日11.遺傳概貌——是指用各種方法和技術對實驗動物品種或品系的遺傳特性進行檢測后的數(shù)據(jù)總匯，即品種或品系基因標記表型的總匯。12.無菌動物(GFA)——是指在隔離系統(tǒng)飼育的，經(jīng)檢測體內外無可檢測出的任何微生物和寄生蟲的動物。13.悉生動物(GNA)——又稱已知菌動物或已知菌叢動物，是指在隔離系統(tǒng)飼育的，經(jīng)檢測其體內外僅有經(jīng)人工有計劃接種的已知的微生物或寄生蟲的動物。14.無特定病原體動物(SPFA)——是指在屏障系統(tǒng)或隔離系統(tǒng)飼育的，經(jīng)檢測其體內外無質量標準規(guī)定的特定病原微生物和寄生蟲存在，但可攜帶有非特定的微生物和寄生蟲的動物。15.清潔動物(CLA)——也稱清潔普通動物，是指原種群為屏障系統(tǒng)中的SPF動物或剖宮產動物，飼養(yǎng)在亞屏障系統(tǒng)中的其體內外不帶有質量標準規(guī)定的人畜共患病病原體或動物傳染病病原體的動物16.普通動物——是指未經(jīng)嚴格的微生物和寄生蟲控制，飼養(yǎng)在開放系統(tǒng)中的其體內外不帶有質量標準規(guī)定的主要人畜共患病和動物烈性傳染病病原體的動物。第九十頁，共一百零二頁，2022年，8月28日二、判斷是非1.種是實驗動物學分類的基本單位。(×)2.C57BL/6是近交系小鼠的一種品種。(×)3.A/He(F87)是指近交到87代由Heston培育的A品系的亞系。(√)4.近交系小鼠由于飼養(yǎng)環(huán)境改變或某些技術性處理(如胚胎移植)而發(fā)生某些生物學特性改變，由此改變的生物學特性都是可以遺傳的。(×)5.近交系小鼠的近交系數(shù)應大于98.6%。(√)6.同源突變近交系與同源導入近交系的不同之處在于與原來那株近交系相比較，前者是一個染色體片段的差異，后者是一個位點單個基因的差異。(×)7.當同源突變近交系和分離近交系相同位點的突變基因都為雜合狀態(tài)時，區(qū)別兩者的方法是看培育過程。(√)8.重組近交系動物是由雜種F1代動物兄妹近交20代以上培育而成的。（×）9.兩個不同的近交系動物雜交，可培育出兩個不同的雜種F1代動物。(√)10.采用生化位點方法對近交系小鼠進行遺傳監(jiān)測，應當采用不同的技術同時對各條染色體上的多個基因位點進行檢測。(√)第九十一頁，共一百零二頁，2022年，8月28日三、填空1.根據(jù)基因組成特點，將實驗動物分為近交系、突變系、雜種F1代和封閉群等4類。2.作為一個品種或品系，應具備相同的外貌特征、獨特的生物學特性、穩(wěn)定的遺傳性能、具有共同遺傳來源和一定的遺傳結構等條件。3.用兩個不同的近交系分別作母系或父系進行雜交，可產生兩種雜種一代。這兩種雜種一代的區(qū)別在于Y染色體和母性因素。4.當被檢測的遺傳性狀與遺傳概貌不一致時，可以考慮遺傳污染、遺傳漂變、基因突變等原因。5.按照微生物寄生蟲控制程度，國際上將實驗動物分為無菌動物(GFA)、悉生動物(GNA)、無特定病原體動物(SPFA)和普通動物等四類。6.按照微生物寄生蟲控制程度，我國將實驗動物分為四級，即一級為普通動物、二級為清潔動物、三級為無特定病原體動物、四級為無菌動物。7.廣義的悉生動物包括無菌動物、已知菌動物和無特定病原體動物；狹義的悉生動物即已知菌動物。第九十二頁，共一百零二頁，2022年，8月28日四、單項選擇1.下列情況可形成亞系的是(D)A、引種到另一實驗室B、受精卵或胚胎移植C、冷凍保存D、在兄妹交配40代之前分離2.下列情況可形成支系的是(D)A、同一品系處于分離或基因突變B、殘余雜合基因分離或基因突變C、遺傳污染D、卵巢移植3.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于近交系的是(A)A、C3H(F130)B、B6D2F1C、N：NIHD、BALB/c-nu／nu4.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于近交系亞系的是(B)A、NZB(F95)B、C57BL/6JC、C3HfC57BLD、C57BL/6J∥Lac5.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于同源導入近交系的是(C)A、N：NIH-nu/nuB、C57BL/6J-bg/bgC、B10·129-H-126D、DW-dw/+第九十三頁，共一百零二頁，2022年，8月28日6.根據(jù)命名原則，下列小鼠中屬于重組近交系的是(B)A、AKRB、AKXDC、D2B6F1D、(NZBXNZW)F17.同一品種或品系中，各個體的基因型均不相同的實驗動物是(B)A、近交系動物B、封閉群動物C、雜種一代動物D、重組近交系動物8.同一品種或品系中，各個體的遺傳組成均等地來自于兩個親本的實驗動是(C)A、重組近交系動物B、分離近交系動物C、雜種一代動物D、單親純合二倍體動物9.人類多基因遺傳研究、藥物篩選，宜選用的實驗動物是(D)A、近交系動物B、突變系動物C、雜種一代動物D、封閉群動物10.基因分離、基因連鎖、基因功能分析，宜選用的實驗動物是(C)A、雜種一代動物B、封閉群動物C、重組近交系動物D、遠交種動物第九十四頁，共一百零二頁，2022年，8月28日11.BALB/c小鼠基礎群中由于殘余雜合基因的分離，造成BALB/c小鼠遺傳組成的改變，稱之為(B)A、遺傳污染B、遺傳漂變C、基因突變D、遺傳突變12.下列情況，移植物被排斥的是(B)A、H-2a／H-2a小鼠的皮膚移植給H-2a／H-2b小鼠B、A品系雄鼠皮膚移植給A品系雌鼠C、親代小鼠的皮膚移植給F1代小鼠D、F2代小鼠的皮膚移植給F1代小鼠13.按體內外攜帶微生物寄生蟲種類數(shù)量從多到少排列，下列哪一項是正確的(B)A、無菌動物、無特定病原體動物、清潔動物、普通動物B、普通動物、清潔動物、無特定病原體動物、無菌動物C、悉生動物、無菌動物、清潔動物、普通動物D、普通動物、悉生動物、清潔動物、無菌動物14.飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)設施中的實驗動物是(C)A、無菌動物B、悉生動物C、無特定病原體動物D、普通動物15.飼養(yǎng)在隔離系統(tǒng)設施中的實驗動物是(A)A、無菌動物B、無特定病原體動物C、清潔動物D、普通動物第九十五頁，共一百零二頁，2022年，8月28日16.下列細菌中為清潔級小鼠體內必須排除的是(D)A、金黃色葡萄球菌B、肺炎鏈球菌C、綠膿桿菌D、沙門菌17.下列細菌中為普通級小鼠體內必須排除的是(D)A、金黃色葡萄球菌B、肺炎鏈球菌C、多殺巴桿菌D、沙門菌18.GN動物與SPF動物比較，下列哪一項是正確的(A)A、GN所帶菌種是已知的，SPF是未知的B、GN所帶菌種是未知的，SPF是已知的C、GN和SPF所帶菌種均是已知的D、GN和SPF所帶菌種均是未知的19.下列近交系中，僅在某一染色體片段與原來那株近交系不同的是(B)A、同源突變近交系B、同源導入近交系C、分離近交系D、重組近交系20.SPF動物可獲得的途徑是(A)A、GF→GN→SPFB、GN→GF→SPFC、GN→CL→SPFD、GF→CV→SPF第九十六頁，共一百零二頁，2022年，8月28日21.重組近交系與雜種一