VB注射液鑒別實(shí)驗(yàn)教學(xué)

1維生素B12注射液的定性鑒別及定量分析

1、導(dǎo)入新課

先強(qiáng)調(diào)維生素B12的重要性——常用于治療貧血癥，還可對(duì)神經(jīng)炎有一定的療效。那么我們?nèi)绾螜z測(cè)某種藥物含有維生素B12？若有，含量是多少呢？這節(jié)課我們就利用紫外-可見分光光度計(jì)對(duì)維生素B12注射液進(jìn)行定性鑒別和定量分析。實(shí)驗(yàn)原理

定性鑒別定量分析3、課堂小結(jié)注意事項(xiàng)結(jié)果討論⑴

掌握定性鑒別的方法和吸光系數(shù)法的定量方法。⑵

熟悉紫外-可見分光光度計(jì)的操作方法。⑶了解含量測(cè)定、標(biāo)示量的百分含量的計(jì)算方法。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：含鈷的卟啉類化合物臨床用途：控制貧血、輔助治療神經(jīng)炎二、實(shí)驗(yàn)原理361nm550nm278nm維生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm與550±1nm三波長(zhǎng)處有吸收峰。A361

/A550=3.15~3.45A361/A278=1.70~1.88吸光系數(shù)法1、以蒸餾水作為空白參比，測(cè)定待測(cè)溶液的吸光度Ax；2、計(jì)算待測(cè)溶液的吸收系數(shù)；3、計(jì)算標(biāo)示量（含量）二、實(shí)驗(yàn)原理【儀器與試劑】

1.儀器：

紫外-可見分光光度計(jì)

2.試劑：

40ug/ml維生素B12溶液三、實(shí)驗(yàn)過程1、維生素B12樣品溶液的配制：2、以蒸餾水為參比，測(cè)定樣品溶液的吸光度3、計(jì)算樣品標(biāo)示量紫外-可見分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu)光源單色器吸收池檢測(cè)器信號(hào)顯示系統(tǒng)按材料可分為玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外區(qū)。可見光區(qū)常用光源是鎢燈或碘鎢燈，波長(zhǎng)范圍是350-1000nm。紫外區(qū)常為氫燈或氘燈，波長(zhǎng)范圍是180-360nm。UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)的使用方法1.接通電源，開機(jī)預(yù)熱30分鐘UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)的使用2.調(diào)節(jié)波長(zhǎng)UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)的使用注意：手拿比色皿毛面，高度為比色皿的2/3。3.比色皿加樣，依次放入比色槽中UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)的使用4.調(diào)“100%”：光標(biāo)調(diào)到T,將參比溶液對(duì)準(zhǔn)光路，按“100%”，儀器自動(dòng)校正；完畢后顯示“100.0”，即T=100%。UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)的使用UV-2000紫外-可見分光光度計(jì)的使用5.測(cè)定吸光度：將樣品溶液對(duì)準(zhǔn)光路，儀器數(shù)值變動(dòng)；完畢后顯示即樣品溶液的吸光度。1、每調(diào)整一次波長(zhǎng)均需要用空白重新調(diào)整100%透光率。2、調(diào)整波長(zhǎng)時(shí)，最好朝一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)。3、開關(guān)比色皿暗箱時(shí)，動(dòng)作要輕。4、若吸光度值大于0.8，需把待測(cè)試液稀釋，使吸光度值在0.2~0.7范圍內(nèi)。5、比色皿的光面只可能用擦鏡紙擦拭，并只能順一個(gè)方向擦拭。6、不要在儀器上方傾倒測(cè)試樣品，以免樣品污染儀器表面，損壞儀器。7、一定要將比色皿外部所沾樣品擦干凈，才能放進(jìn)比色皿架進(jìn)行測(cè)定。注意事項(xiàng)波長(zhǎng)（nm）A峰32770.4212780.4232790.403峰23600.7613610.7783620.756峰15490.2455500.2465510.2431、定性鑒別A361

/A550=3.15~3.45A361/A278=1.70~1.88數(shù)據(jù)記錄2、定量分析樣品名稱檢驗(yàn)日期所用儀器型號(hào)檢測(cè)波長(zhǎng)測(cè)定序號(hào)123吸光度A吸光度平均值結(jié)果：含量=計(jì)算樣品標(biāo)示量（含量）

對(duì)照樣品標(biāo)示量%=90%-110%，合格數(shù)據(jù)處理結(jié)果討