標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 36848-2018《鱷梨日斑類(lèi)病毒檢疫鑒定方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在為檢測(cè)和鑒定鱷梨日斑類(lèi)病毒提供科學(xué)、準(zhǔn)確的方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣本采集到實(shí)驗(yàn)操作的一系列流程和技術(shù)要求，適用于植物檢疫機(jī)構(gòu)及相關(guān)部門(mén)對(duì)鱷梨及其繁殖材料中是否感染有鱷梨日斑類(lèi)病毒進(jìn)行檢測(cè)。

標(biāo)準(zhǔn)首先明確了適用范圍，即針對(duì)的是鱷梨（Persea americana Mill.）以及與之相關(guān)的植物材料中的鱷梨日斑類(lèi)病毒（Avocado sunblotch viroid, ASBVd）。隨后，介紹了所需的主要儀器設(shè)備如RT-PCR儀等，并列出了用于提取RNA、反轉(zhuǎn)錄成cDNA以及后續(xù)擴(kuò)增所需的試劑清單。

在采樣部分，標(biāo)準(zhǔn)指定了如何正確選擇代表性樣品以確保檢測(cè)結(jié)果的有效性和可靠性；同時(shí)，也給出了保存條件及運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)注意的事項(xiàng)，保證樣本質(zhì)量不受影響。接下來(lái)是詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明，包括總RNA的提取、cDNA合成、特異性引物設(shè)計(jì)原則以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)體系建立等內(nèi)容。通過(guò)這些步驟可以獲得目標(biāo)片段的擴(kuò)增產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)鱷梨日斑類(lèi)病毒的存在與否做出判斷。

此外，還特別強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的質(zhì)量控制措施，比如設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照來(lái)驗(yàn)證整個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度與特異性。最后，標(biāo)準(zhǔn)還提供了結(jié)果分析指南，幫助使用者根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)作出準(zhǔn)確結(jié)論。

此標(biāo)準(zhǔn)為我國(guó)鱷梨產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供了技術(shù)支持，在防止外來(lái)有害生物入侵方面發(fā)揮著重要作用。


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....

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  • 現(xiàn)行
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  • 2018-09-17 頒布
  • 2019-04-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36848—2018

鱷梨日斑類(lèi)病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofAvocadosunblotchviroid

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

鱷梨日斑類(lèi)病毒檢疫鑒定方法

GB/T36848—2018

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽(yáng)區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20189

*

書(shū)號(hào)

:155066·1-61332

版權(quán)專(zhuān)有侵權(quán)必究

GB/T36848—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共

:、、

和國(guó)山東出入境檢驗(yàn)檢疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張永江鄭耘張京萱辛言言向均盧小雨

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T36848—2018

鱷梨日斑類(lèi)病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了鱷梨日斑類(lèi)病毒逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和往復(fù)雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳

(RT-PCR)

的檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于可能攜帶鱷梨日斑類(lèi)病毒的植物及其果實(shí)的檢疫鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3基本信息

中文名鱷梨日斑類(lèi)病毒

:

學(xué)名Avocadosunblotchviroid

:

縮寫(xiě)

:ASBVd

分類(lèi)地位鱷梨日斑類(lèi)病毒科Avsunviroidae鱷梨日斑類(lèi)病毒屬Avsunviroid

:()()。

鱷梨日斑類(lèi)病毒的其他信息參見(jiàn)附錄

A。

4方法原理

根據(jù)在寄主植物上的癥狀進(jìn)行初步判定根據(jù)其自然狀態(tài)和變性后的不同結(jié)構(gòu)分子

ASBVd;RNA

在聚丙烯酰胺凝膠電泳中遷移率的差異進(jìn)行往復(fù)雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳

(Return-Polyacrylamide

檢測(cè)根據(jù)基因組特征進(jìn)行檢測(cè)通過(guò)電泳條帶大小進(jìn)行結(jié)果

GelElectrophoresis,R);RT-PCR,

判定

。

5儀器設(shè)備及設(shè)施用具及試劑

、

51儀器設(shè)備及設(shè)施

.

天平感量高速冷凍離心機(jī)計(jì)儀電泳儀電泳槽凝膠成像系統(tǒng)隔離檢疫溫

(0.001g)、、pH、PCR、、、、

室恒溫水浴低溫冰箱等

、、。

微量移液器研缽離心管花盆

(2μL、10μL、20μL、100μL、200μL、1000μL)、、(1.5mL、2.0mL)、、

消毒土等

。

52RT-PCR檢測(cè)試劑

.

除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合

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