標(biāo)準(zhǔn)解讀
《GB/T 36871-2018 豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),旨在提供一種能夠同時(shí)檢測三種對養(yǎng)豬業(yè)構(gòu)成威脅的病毒的方法:豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(PEDV)以及豬輪狀病毒(PoRV)。該標(biāo)準(zhǔn)適用于疑似感染這些病原體的豬只樣本中相關(guān)病毒核酸的定性檢測。
標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)描述了從樣品采集到結(jié)果分析的整個(gè)流程,包括但不限于:
- 樣品類型及保存條件;
- RNA提取的具體步驟與所需試劑;
- RT-PCR反應(yīng)體系構(gòu)建,如引物設(shè)計(jì)原則、濃度選擇等;
- PCR擴(kuò)增程序設(shè)置;
- 結(jié)果判定依據(jù)。
通過采用特異性引物對目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增,并利用凝膠電泳技術(shù)來觀察特定大小片段的存在與否,從而實(shí)現(xiàn)對上述三種病毒的同時(shí)篩查。此外,《GB/T 36871-2018》還提供了實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制措施建議,確保檢測過程中的準(zhǔn)確性和可靠性。
此標(biāo)準(zhǔn)為獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室工作人員提供了標(biāo)準(zhǔn)化的操作指南,有助于提高診斷效率,及時(shí)采取防控措施以減少經(jīng)濟(jì)損失。
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....
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 2018-09-17 頒布
- 2019-04-01 實(shí)施
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GB/T 36871-2018豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法-免費(fèi)下載試讀頁文檔簡介
ICS11220
B41.
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T36871—2018
豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒和
、
豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法
MultilexRT-PCRtodetectorcinetransmissibleastroenteritisvirus
ppg,
porcineepidemicdiarrheavirusandporcinerotavirus
2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施
國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布
中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會
GB/T36871—2018
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出
。
本標(biāo)準(zhǔn)由全國動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口
(SAC/TC181)。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位華中農(nóng)業(yè)大學(xué)中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心
:、。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人何啟蓋庫旭鋼張坤陳芳洲范盛先孟憲榮陳品姜雯陳煥春
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T36871—2018
豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒和
、
豬輪狀病毒多重RT-PCR檢測方法
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬傳染性胃腸炎病毒豬流行
(porcinetransmissiblegastroenteritisvirus,TGEV)、
性腹瀉病毒和豬輪狀病毒的多重
(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)(porcinerotavirus,PoRV)
檢測方法
RT-PCR。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬傳染性胃腸炎病毒豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒的核酸檢測
、。
2縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
豬傳染性胃腸炎病毒
TGEV:(porcinetransmissiblegastroenteritisvirus)
豬流行性腹瀉病毒
PEDV:(porcineepidemicdiarrheavirus)
豬輪狀病毒
PoRV:(porcinerotavirus)
逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
RT-PCR:-(reversetranscription-polymerasechainreaction)
磷酸鹽緩沖液
PBS:(phosphatebuffersaline)
電泳緩沖液
TAE:(tris-acetate-ethylenediaminetetraaceticacidbuffer)
半數(shù)細(xì)胞感染量
TCID50:(mediantissuecultureinfectivedose)
核糖核酸
RNA:(ribonucleicacid)
焦碳酸二乙酯
DEPC:(diethylpyrocarbonate)
3試劑和儀器設(shè)備
除另有規(guī)定外所用試劑均為分析純提取所用試劑應(yīng)使用無酶的容器分裝
,。RNARNA。
31儀器
.
311生物安全柜
..。
312高速冷凍離心機(jī)
..。
313組織勻漿器或研缽
..。
314儀
..PCR。
315水平電泳槽
..。
316凝膠成像系統(tǒng)
..。
317紫外透射儀
..。
318冰箱
..2℃~8℃。
319冰箱
..-20℃。
3110單道微量移液器等規(guī)格
..(0.5μL~10μL、10μL~50μL、20μL~200
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