薄層色譜(TLC)的使用指南

TLC！薄層色譜〔TLC〕的使用指南綜述：薄層色譜〔TLC〕是一種格外有用的跟蹤反響的手段，還可以用于柱色譜分別中適宜溶劑的選擇硅膠，它們是極性很大〔標(biāo)準(zhǔn)〕或者是非極性的〔反相。流淌相則是一種極性待選的溶劑標(biāo)準(zhǔn)硅膠板?！不蚧旌先軇硺O性，不同化極性強(qiáng)的化合物會(huì)“粘”在極性的硅膠上非極性的物質(zhì)將會(huì)在流淌的溶劑相中保存較長的時(shí)間從而在板上移動(dòng)較大的距離的距離大小用Rf0～1義為：化合物距離基線〔最先點(diǎn)樣時(shí)已經(jīng)確定〕的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。薄層色譜〔TLC〕試驗(yàn)步驟：切割薄板。通常，買來的硅膠板都是方形的玻璃板，必需用鉆石在薄板的硅膠面上輕輕地標(biāo)出基線的位置〔留意不要損壞硅膠面。借助銳利的玻璃切割刀和一把引導(dǎo)尺，你便可便利地進(jìn)展玻璃切割。當(dāng)整塊玻璃被切割后，你就可以進(jìn)一步將其分成假設(shè)干獨(dú)立的小塊了?！查_頭的時(shí)候，或許你會(huì)感到有一些難度，但經(jīng)過一些訓(xùn)練以后，你〕選取適宜的溶劑體系?；衔镌诒“迳弦苿?dòng)距離的多少取決于所選取的溶劑不同會(huì)移動(dòng)，但是非極性化合物會(huì)在薄板上移動(dòng)肯定距離。相反，極性溶劑通常會(huì)將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基Rf0.15~0.85。雖然這個(gè)條件不肯定都能滿足，但這應(yīng)當(dāng)作為薄層色譜分析的目標(biāo)〔在柱色譜中，適宜的溶劑應(yīng)當(dāng)滿足Rf0.2~0.3。那么，應(yīng)中選取哪些溶劑呢？一些標(biāo)準(zhǔn)溶劑和他們的相對極性〔從LLP中摘錄〕列于如下：強(qiáng)極性溶劑：甲醇〉乙醇〉異丙醇中等極性溶劑：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非極性溶劑：環(huán)己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶劑：乙酸乙酯/己烷：常用濃度0~30%。但有時(shí)較難在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上完全除去溶劑。乙醚/戊烷體系：濃度為0~40%的比較常用。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上格外簡潔除去。乙醇/5~30%比較適宜。/5~301~2mL濾紙。此外，點(diǎn)樣器也可從加熱過的Pasteur吸管上拔下〔你可以參照UROP。在跟蹤反響進(jìn)展時(shí)，肯定要點(diǎn)上起始反響物、反響混合物以及兩者的混合物。90%的薄板長度。從開放池中取出薄板并且馬上用鉛筆標(biāo)注出溶劑到達(dá)的前沿位置。依據(jù)這個(gè)算Rf讓薄板上的溶劑揮發(fā)掉。用非破壞性技術(shù)觀看薄板。最好的非破壞性方法就是用紫外燈進(jìn)展觀看。將薄板放在紫外燈下，用鉛筆標(biāo)出全部有紫外活性的點(diǎn)。盡管在5.301中不用這種方法，但我們將承受另一常用的無損方法--〔你可以參看URO。用破壞性方式觀測薄板。當(dāng)化合物沒有紫外活性的時(shí)候，只能承受這種方法。在5.301板從加熱板上取下。RfRf溶劑體系的極性減小些條紋狀而不是一個(gè)濃度可能太高了層析，假設(shè)還是不能奏效，就應(yīng)當(dāng)考慮換一種溶劑體系。TLCRf筆記本中畫出圖樣。TLC顯色試劑顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機(jī)化合物的通專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多，本章只能列舉一些常用的顯色劑。l．通用顯色劑硫酸常用的有四種溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液與0.5-1.5mol／L硫酸銨溶液，噴后11015min，不同有機(jī)化合物顯不同顏色。0.5。0.05％高錳酸鉀溶液易復(fù)原性化合物在淡紅背景上顯黃色。溶液I：1％高錳酸鉀溶液；溶液Ⅱ：5IⅡ等量混合應(yīng)用。酸性高錳酸鉀試劑噴1.6％高錳酸鉀濃硫酸溶液(溶解時(shí)留意防止爆180oC15～20min。酸性重鉻酸鉀試劑噴5％重鉻酸鉀濃硫酸溶液，必要時(shí)150℃烤薄層。5120℃烘烤，復(fù)原性化合物顯藍(lán)色，再用氨氣薰，則背景變?yōu)闊o色。2mol／L液，則藍(lán)色加深。溶液I：1％鐵氰化鉀溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化鐵溶液；臨用前將溶液I的，現(xiàn)將在各類化合物中最常用的顯色劑列舉如下：烴類O.1g水lmL2-苯氧基乙醇lOOml200ml30％過1暗黑色。I．熒光素0.1g背景上呈黃色。③四氯鄰苯二甲酸酐檢出物：芳香烴。溶液：2％四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯(10：1)的溶液。方法：噴后置紫外光下觀看。37％O.2ml濃硫酸l0ml。醇類I．2％本品甲苯溶液；2min，將紙或薄層通過試液(Ⅱ)30s，噴水洗，趁濕通過(Ⅲ)15s，空氣枯燥，紫外燈下觀看。溶液；Ⅱ．N,N-二甲基-對苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸105oC5min。1glOOml120基苦基偕肼’檢出物：醇類、萜烯、羰基、酯與醚類。溶液：本15mg25ml1105～lOmin果：紫色背景呈黃色斑點(diǎn)。醛酮類入二氧化硫直至無色；Ⅱ．0.05mol／L氯化汞溶液；Ⅲ．O.05mol／LI1：1：10l00ml。鄰聯(lián)茴香胺檢出物：醛類、酮類。溶液：本品乙酸飽和溶液。2，4-二硝基苯肼檢出物：醛基、酮基及酮糖。溶液：I．0.4％本2mol／LO.1gl00mllmlI2mol／L溶液。結(jié)果：飽和酮馬上呈藍(lán)色；飽和醛反響慢，呈橄欖綠色；不飽和羰基化合物不顯色。繞丹寧檢出物：類胡蘿卜素醛類。溶液：I．1%～5%繞丹寧乙醇溶液；Ⅱ．2527I，再噴溶液Ⅱ，枯燥。有機(jī)酸類溴甲酚綠檢出物：有機(jī)酸類。溶液：溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml0.1mol/L5ml景產(chǎn)生黃色斑點(diǎn)。高錳酸鉀／硫酸檢出物：脂肪酸衍生物。溶液：見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。0.3噴后置紫外光(365nm2，560.1%本品的乙醇溶液。方法：噴后微溫。結(jié)果：藍(lán)色背景呈紅色。(5)酚類1Emerson(4-氨基安替比林／鐵氰化鉀(Ⅲ))檢出物：酚類、1g100ml；用乙醇稀釋至100mlI，35min，4再噴溶液Ⅱ，5再于熱然后將板置含有氨蒸氣7Boute反響檢出物：酚類、氯、溴、烷基代酚。方法：將薄層NO23～10min，8NH2氨液)處理。DDQ2％本品的甲苯溶液。TCNE0.5%～1%本品的甲苯溶液。2%本品的甲醇溶液。⑦氯化鐵檢出物：酚類、羥酰胺酸。溶液：1%～5%0.5mol／L酸呈紅色。含氮化合物①FCNP氰、胍、脲與硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。溶液：10％氫氧化鈉20min，冰箱保存數(shù)周，用前將混合液與丙酮等體積混合。②Dragendorff40ml8g20mlI及Ⅱ等量混合，置棕色瓶中作為儲藏液，用前取儲藏液lml、冰醋酸2mll0ml40.02g35ml，100ml25％氨水蒸氣的容器中,取出后于紫外燈(365nm)下觀看。10％六氯鉑酸3ml97ml6％碘化鉀溶液，混勻。臨用前配制。1g4ml1g，煮沸，逐滴參加濃硫酸直至混1l0oC馬錢子堿、秋水仙堿、罌粟堿、毒扁豆堿與有機(jī)碘化物均能檢出⑥Ehrlich(對二甲氨基苯甲醛／鹽酸)試劑檢出物：吲哚衍生物及胺50oC20min胺類5065％硝酸于乙醇100ml120oC②2，6-0.5％～2110oC10min，再用氨蒸氣處理。O.1％本品的乙醇溶液。I1.2g35ml0．95g，冷卻后加濃氨水2ml0.12g200mlI1天，過濾。4．5g12mol／L45ml500mllOml4．5％亞硝酸鈉冷溶液lOml，于OoC15min10％碳酸鈉溶液。3g1g20ml斑點(diǎn)，2h后顏色消退。假設(shè)將薄層噴水或放入飽和水蒸氣容器內(nèi)，可重現(xiàn)色點(diǎn)。5ml30min2g85％磷酸l0ml40ml30ml。方法：噴后115℃加熱l0min。8)硝基及亞硝基化合物①α3，5法：先噴溶液I0.2lOOml5：1光(254nm氨基酸及肽類O.2g乙醇l00ml110oC②茚三酮／乙酸鎘檢出物：氨基酸及雜環(huán)胺類。溶液：茚三酮1g2.5gl0ml500ml。方法：120oC20min。5%l00ml酸呈不同色點(diǎn)。1g1g95％異丙醇l00ml80～85“C30min。⑤茚三酮／冰醋酸檢出物：二肽及三肽。溶液：1％茚三酮吡啶溶5：1l00oC5min。中;Ⅱ．1mol／Llml，用乙醇稀釋至lOOml。方法：I110oCl0min110oCl0min，于紫外光(365nm)下觀看。甾類1055min。0.2g2ml60ml(365nm)下觀看。51105min，置紫外光(365nm)下觀看。20g20ml60ml100oC5min，20％本品的氯仿溶液。方法：噴后于100℃加熱數(shù)分鐘，紫外光長波下5mll0ml130oC5～l0min，糖類1.23g1.66gl00ml95漬。結(jié)果：己糖呈綠色、甲基戊糖呈黃綠色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。②四乙酸鉛／2，7一二氯熒光素檢出物：甙類、酚類、糖酸類溶溶液。取溶液I5ml200ml，2h5ml95mlllOoC15～20min斑點(diǎn)呈褐色。20ml85200ml85℃加熱l0min。結(jié)果：產(chǎn)生各種顏色。1，4-己醛糖、低聚糖呈藍(lán)色。-1，3-二酮)10.3g90mll0ml85％110oC15～20min。結(jié)果：日光下觀看，白色背景上呈黃色斑點(diǎn)，紫外光長波下呈藍(lán)色熒光。0.5gl0ml乙酸，再加10ml40％三氯乙酸水溶液，用乙醇稀釋至l00ml15min。結(jié)果：斑點(diǎn)呈灰棕-紅褐色。I.5ml5020ml0.5ml，加乙酰丙酮0.5ml50mll0ml，此兩種溶液均需穎配制，臨用前混合；Ⅱ.1g30ml30ml180mlI105oC5min，再噴Ⅱ，然后于90℃5min色論壇問答：1選開放劑的時(shí)候都不是很恰當(dāng)，請各位閱歷豐富的教師賜教!〔如〔如四氯化碳、石油醚、二氯甲烷等〕調(diào)整體系的極性。以得到最好的開放效果。把我的祖?zhèn)髅胤礁嬷惆蒔E(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18Rf加酸或堿，我一般乙酸和三乙胺。我用了好幾年了，都還好。不妨一試從開放的角度上來看，確實(shí)能行，假設(shè)是分別就不肯定行了分別的話只好調(diào)低一點(diǎn)Rf，還是可以的氨基酸都有專用的開放劑，常用丁醇和水，再加酸堿極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統(tǒng)極性較大的用甲醇：氯仿系統(tǒng)極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統(tǒng)拖尾可以參加少量氨水或冰醋酸〔20-30〕單用甲醇攪半個(gè)小時(shí)可不行以？還有就是我在另外一本書上看到說用乙醇好一些，由于甲醇回把硅膠里帶的雜質(zhì)也沖下來，實(shí)在不知該怎辦好，請哪位高手幫助解答解答吧。感謝先！有產(chǎn)品的一局部硅膠刮下來，用乙酸乙脂〔參考2〕浸泡，然后慮掉硅膠，把溶劑蒸干就可以了么！溫度低的話硅膠上的東西會(huì)不會(huì)掉不下來呀？還有就是用乙酸乙酯的話，極性夠嗎？能徹底把東西從硅膠上交換下來嗎？我一般用丙酮。不要加熱。用洗脫管洗脫，而不是浸泡后過濾。要加熱。刮下來的硅膠粉末加乙酸乙酯，室溫?cái)嚢?400M根本看不出雜質(zhì)。〔比方用純乙酸乙酯也不好爬起來的雜質(zhì)是不會(huì)有的，但可能會(huì)有少量硅膠帶下。我最推舉用二氯甲烷，簡潔蒸干，而且NMR的化合物還是夠了。chemie請問lanthanum其詳。洗脫管就是一個(gè)玻璃管，下面縮口，就像一個(gè)小柱子，沒活塞罷了。用純丙酮作為洗脫劑，對于通常極性〔氯仿：甲醇=4：1，硅膠H，CMC，Rf>0.2〕的物質(zhì)，均能完全洗脫。假設(shè)極性更大，請?jiān)囉眉状肌Ｌ貏e物質(zhì)由于溶解性緣由，請?jiān)囉枚燃淄?，如三萜類。我始終用砂板漏斗，更省心，硅膠粉末也不會(huì)沖下來。狹縫里的除不干凈。感覺不爽。呢？在用溶劑沖。但沒有方法，不過適用于樣品量較少的狀況。我有很多核磁都是拿板分的。不推舉使用甲醇浸泡，會(huì)有硅膠峰，氫譜高場THF1～2沙芯漏斗過濾后旋干即可。我要的是氨基酸甲酯,現(xiàn)在合成了它的鹽酸鹽,用飽和碳酸氫鈉溶液調(diào)PH到弱堿性后,無法萃取出來(用過乙醚和乙酸乙酯萃取,大局部還在水里),請教各位大俠如何解決?你不要用水，不要用碳酸氫鈉，而是用有機(jī)溶劑加三乙胺調(diào)至pH＝8－9腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃等極性大的溶劑，會(huì)把季銨鹽溶解，最好選用甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷之類的中等極性的溶劑。中根本不溶解將你的鹽酸鹽分散在乙醚中，然后通氨氣。過濾，濾餅是氯化銨，濾80％以上。C18高，再生效果如何？望作過這方面工作的教師指導(dǎo)心得。我分別的樣品后兩個(gè)點(diǎn)不易出來，加大極性時(shí)則托尾混在一起出來，打算用極性柱C18用很屢次的?；钚蕴汲c(diǎn)量少的雜質(zhì)還行，特別是脫色效果好。你的樣品沒說明性質(zhì)，不好給你建議c8,c18假設(shè)是酸或胺可以加一點(diǎn)醋酸或三乙胺承受比點(diǎn)板極性小的開放劑漸漸過.最近需要用制備型的薄層，但是以前又沒有接觸過，請問制備型薄層的ＣＭＣ黏合劑溶液的濃度多少是最好啊？？進(jìn)展制備型薄層試驗(yàn)時(shí)應(yīng)留意一些什么樣的問題?。?？？我以前在公司時(shí)做過薄層制備，現(xiàn)在在上學(xué)，可能記得不是太清：應(yīng)當(dāng)2.5-5/1000，簡潔地說，就是2.5-5克CMC1000ML略微加熱，或不加熱，用電磁攪拌后，盡量地溶解，可以直接用，最好過濾一下，不過過濾很慢，要有急躁哦！我記得我們以前白天讓水泵始終抽濾，不管它，而去做別的試驗(yàn)！20X20CMCMC〔比方說用量比硅膠1CMC溶液3M20X20CM的玻璃20+60ML乙醇，再攪拌，然后鋪板，使之均勻鋪在玻璃板上，在空氣中自然涼干，然后在100就行了！不知道我記憶是否出錯(cuò)，如是，請?jiān)噶浚×抗腆wNaOH1202〕0.6%的縮甲基纖維素水溶液，待混合均勻后再抽濾。3〕在抽濾好的縮甲基纖維素參加硅膠〔留意要有熒光的哦化學(xué)純就可以0.6%的比例是比較好的CMC3g5g)CMC-Na1500mL1000mL60-70數(shù)天，讓少量絮狀物沉降。留意，無法過濾?！睵TLC〕50-200mg20*30cm板單面用洗衣粉刷洗干凈，干凈面朝下晾干，避開落灰塵。稱取硅膠,或30g)CMC45mL90mL)，充分研磨均勻。徒手鋪板或用鋪板器鋪板，一般徒手鋪得較厚〔需30g硅膠，鋪板器鋪得較薄〔需15g硅膠。如用鋪板器，可以一次鋪數(shù)塊。鋪好的薄層陰干過夜，可直接用，必10512一種特地為了純化少量樣品的PTLC：10*20cm5g5-20mgptlccmc－Nacmccm