毛細管電泳與電色譜

（一）分離原理膠束：表面活性劑在水中的濃度達到其臨界膠束濃度時，可形成膠束（一）分離原理（一）分離原理（1）保留因子t0

在膠束中無保留的中性物質(zhì)的遷移時間tmc膠束的遷移時間t溶質(zhì)的遷移時間t0和tmc的測定t0

一般用甲醇或二甲基亞砜作為標記物測定tmc

用疏水性極強的中性物質(zhì)蘇丹III測定（2）分離因子（3）分離度毛細管電泳中常用的表面活性劑毛細管凝膠電泳

CapillaryGelElectrophoresis毛細管凝膠電泳是在毛細管中填充凝膠或其它篩分介質(zhì)而建立起來的一種電泳分離分析法。篩分介質(zhì)：聚丙烯酰胺凝膠瓊脂糖凝膠Hydrolink膠高聚物溶液分離對象：生物大分子如蛋白質(zhì)、DNA片段等主要貢獻：分析化學(xué)家研究和發(fā)明了96通道毛細管電泳快速測序儀(高效分離技術(shù))毛細管凝膠電泳分離原理一些生物大分子如DNA和被SDS飽和的蛋白質(zhì)分子，其電荷/質(zhì)量之比與分子大小無關(guān)，電泳淌度幾乎相同，用CZE模式很難分離。在含有篩分介質(zhì)的毛細管中，這些分子在電場作用下電泳，受到的阻力不同，遷移速度有差異。DNA片段分離DNA片段分離DNA片段分離21-2毛細管電色譜毛細管電色譜是毛細管電泳與高效液相色譜的融合技術(shù)。毛細管色譜柱+電驅(qū)動流動相壓力驅(qū)動和電驅(qū)動流型的比較毛細管電色譜的特點分離效率比HPLC高選擇性比毛細管電泳高毛細管電色譜的分類按毛細管柱的類型分類填充柱毛細管電色譜開管柱毛細管電色譜連續(xù)床毛細管電色譜按流動相驅(qū)動的方式分類電滲流驅(qū)動的毛細管電色譜電滲流和壓力聯(lián)合驅(qū)動的毛細管電色譜毛細管電色譜儀毛細管電泳儀加壓裝置梯度系統(tǒng)電滲流和壓力聯(lián)合驅(qū)動的毛細管電色譜儀梯度系統(tǒng)電滲流和壓力聯(lián)合驅(qū)動的毛細管電色譜儀一、毛細管電色譜的基本原理毛細管電色譜中的電滲流溶質(zhì)的遷移速度分離效率（一）毛細管電色譜中的電滲流電滲：指在電場作用下，毛細管中或固相多孔物質(zhì)內(nèi)，液體沿固體表面移動的現(xiàn)象。填充毛細管中電滲流速度E電場強度；

流動相介電常數(shù)；流動相粘度；與填充有關(guān)的無量綱因素（0.4-0.7）(二)溶質(zhì)的遷移速度分離效率H=A+B/u+Cu與HPLC相比，A，C較小分離效率由于多數(shù)采用小粒徑填料（1.5-3m)渦流擴散項和傳質(zhì)阻力項較小對理論塔板高度的貢獻主要來自分子擴散項采用柱上檢測，死體積小****CEC分離效率高*****二、毛細管電色譜實驗條件的選擇操作電壓緩沖溶液pH值背景電解質(zhì)濃度有機溶劑三、毛細管電色譜柱開管柱化學(xué)鍵合、吸附溶膠-凝膠填充柱拉制法填充法連續(xù)床柱（整體柱）填充過程整體柱的制備硅膠整體柱：四甲氧基硅烷(TMOS)、水溶性聚合物聚環(huán)氧乙烷(PEO)及催化劑乙酸，在0℃下攪拌形成溶膠，在40℃下水解和縮聚生成凝膠，經(jīng)陳化、堿處理擴孔、干燥和焙燒后制成硅膠整體柱。有機聚