第三章實驗動物飼養(yǎng)與應用條件的標準化

第三章

實驗動物飼養(yǎng)與應用條件的

標準化

蔣靈芝意義實驗動物飼養(yǎng)與應用條件標準化的意義：保證實驗動物的質量和動物實驗結果的正確性。豚鼠：特點是毛短而光滑，生長快，抗病力強，繁殖性能好。廣泛用于藥物學、傳染病學、免疫學、營養(yǎng)學、耳科學等各項醫(yī)學及生物學的研究中。SD大鼠：白色，產仔多，生長發(fā)育較Wistar大鼠為快，對疾病的抵抗力尤以呼吸道疾病的抵抗力強。自發(fā)腫瘤發(fā)生率較低，對性激素感受性高。C57BL/6J小鼠：黑色，對放射物質耐受性強，但照射后肝癌發(fā)生率高。眼畸形，對結核桿菌有耐受性嗜酒精性高，是腫瘤學、生理學、遺傳學研究常用品系。Lewise大鼠：近交系大鼠，白化，對誘發(fā)自身免疫心肌炎高度敏感，可誘發(fā)過敏性腦脊髓炎、過敏性關節(jié)炎和自身免疫復合物血管球性腎炎等立刻移植多種腫瘤，高脂肪食物容易引起肥胖癥。

C57BL/6J小鼠新西蘭兔第一節(jié)實驗動物的環(huán)境包括飼養(yǎng)環(huán)境和實驗環(huán)境。實驗動物的環(huán)境——圍繞動物的所有條件。分自然因素和人為因素兩方面。見書上Ｐ３７頁。（一）控制環(huán)境的重要意義R=（A+B+C）×D±ER代表實驗動物總的反應。A實驗動物物種的反應。B實驗動物品種或品系的特有反應。C個體差異。D表示環(huán)境影響。E代表實驗誤差。D與R呈正比，說明環(huán)境因素起主要作用。（二）環(huán)境因素對實驗動物的影響1.環(huán)境溫度：哺乳動物為恒溫動物，最適溫度18-29Co，溫度通過改變機體新陳代謝影響實驗動物的生命體征。不同動物適應不同的最適溫度，不同溫度對動物實驗結果的影響不同。2.濕度：大氣中水分的含量。有絕對濕度和相對濕度之分。絕對濕度：每立方米的空氣中含水分的量。相對濕度：在特定溫度下，空氣中實際含水量與該溫度的飽和含水量的百分比值。通常用相對濕度表示。動物體溫受環(huán)境溫度、相對濕度、氣流速度的共同影響。3.氣流：氣流能夠調節(jié)環(huán)境的溫度和濕度。氣流影響皮膚水分的蒸發(fā)和散熱。氣流過大或過小對實驗動物均有影響。飼養(yǎng)室的換氣次數以10-20次/h最好。4.光照：包括照度、光線波長、光照時間，明暗交替時間的規(guī)律性。紅光：0.77-0.62微米；綠光：0.58-0.49微米；

藍光：0.49微米-.

藍光比紅光更能促進動物的性成熟。5.噪聲：噪聲對實驗動物的影響非常復雜。造成心理和生理的不利影響，嚴重噪聲還可以導致動物的死亡。室內噪聲控制在60分貝以下。6.空氣潔凈度：指室內空氣中的塵埃顆粒、微生物、有害氣體三個方面的污染程度。污染源很多，包括實驗動物自身排除的廢物。我國對空氣潔凈度分級見書上P43頁。第二節(jié)實驗動物設施定義：生產實驗動物和從事實驗動物的建筑物及設備。實驗動物設施根據其功能和使用目的不同在國標中將其分為實驗動物繁育、生產設施和動物實驗設施。

實驗動物繁育、生產設施（LaboratoryAnimalFacility）是指用于實驗動物繁育、生產的建筑物、設備以及運營管理在內的總和。動物實驗設施（AnimalExperimentalFacility）是指以研究、試驗、教學、生物制品和藥品生產等為目的，進行實驗動物飼育、試驗的建筑物、設備以及運營管理在內的總和。一、實驗動物設施的分類（一）按微生物控制程度分類（二）按設施功能分類（三）按設施的平面布局分類（四）按屏障設施內氣流組織形式分類（二）按設施功能分類（一）按微生物控制程度分類1．普通環(huán)境實驗動物的生存環(huán)境直接與外界大氣相通。飼料、飲水要符合衛(wèi)生要求，墊料要消毒，有防野鼠、防蟲設施。是飼養(yǎng)普通級實驗動物的場所，亦稱普通級動物設施。

2．屏障環(huán)境實驗動物生存在與外界隔離的環(huán)境內。進入實驗動物生存環(huán)境的空氣須經凈化處理，其潔凈度相當于10，000級。進入屏障內的人、動物及物品如飼料、水、墊料和實驗用品等均需有嚴格的微生物控制，通常稱SPF級動物設施。

3．隔離環(huán)境實驗動物生存在與外界完全隔離的環(huán)境內。進入實驗動物生存環(huán)境的空氣須經凈化處理，其潔凈度相當于100級。人不能直接接觸動物。進入隔離系統(tǒng)內的動物和物品都要經過嚴格的凈化和／或滅菌處理。是飼養(yǎng)無菌級，SPF級實驗動物或進行同級動物實驗的場所，通常也稱無菌設施。（二）按設施功能分類1．實驗動物生產設施：主要用于各種實驗動物品種（品系）的保種、育種、繁殖、生產、育成、供應的設施。2．動物實驗設施：主要以動物實驗或以動物為原材料進行臨床前藥物研究、藥品和生物制品等的檢定以及特殊品系的培育、保種、繁殖的設施。3．特殊實驗動物設施：包括感染動物實驗設施和應用放射性物質或其他特殊化學物質等進行動物實驗的設施。（三）按設施的平面布局分類1．無走廊式；此類設施一般面積較小，能最大限度地利用空間，用于飼養(yǎng)單一品種或以實驗為主的設施。一般用于小型動物研究或改造作為臨時動物房。由于人流物流交叉，進出路線交叉，而且污染物品容易影響潔凈物品的清潔度，一般為普通級動物設施。

2．單走廊式；有效面積充分利用，為實驗動物的生產、實驗提供最大空間。缺點是無法將污染區(qū)和清潔區(qū)分隔開來，形成動物糞便、廢棄物與清潔物品的運行交叉，人流物流交叉，易受到污染。國內外已經廣泛采用此類設計，但必須加強管理，方能安全運行。

3．雙走廊式；是常用的一種實驗動物屏障設施類型。可有效地分割清潔區(qū)和污物區(qū)。作為亞屏障和屏障設施使用，比較容易控制微生物的危害。缺點是有效利用面積減小。

4．三走廊式；動物隔離良好，人員、動物、物品進入有專門通道，可有效避免污物和潔凈物品交叉行走，人員物品進出互不影響，可以大量長期飼養(yǎng)實驗動物，但空間利用率低，而且投資大維持費用高。（四）按屏障設施內氣流組織形式分類按屏障設施內氣流組織形式可劃分為單流式、亂流式、輻流式和混合式。一般為亂流式屏障設施，單流式、輻流式和混合式一般較少使用。亂流式屏障設施也稱為非單向流潔凈室，是指氣流以不均勻的速度成不平行的流動，伴有回流或渦流的潔凈室。其原理是依靠送風氣流不斷稀釋室內空氣把室內污染逐漸地排出。表示亂流潔凈室的技術性能指標主要有以下三項：（1）換氣次數換氣次數越多，空氣潔凈度越高，能量消耗也越大。（2）氣流組織其作用是確保均勻地送風和回風，充分發(fā)揮干凈氣流稀釋作用，單個風口要有足夠的擴散作用，全室風口布置均勻，數量盡可能多一些，以盡量減少渦流和氣流回旋。（3）自凈時間指潔凈室從污染狀態(tài)回復到正常穩(wěn)定狀態(tài)的能力，越短越好，一般不超過30分鐘。屏障設施

是指一個相對密閉的實驗動物設施環(huán)境，設有恒溫、恒濕和除菌換氣系統(tǒng)。要求送入空氣的潔凈度達10000級，室內保持正壓，具有嚴格的微生物控制系統(tǒng)，用以飼養(yǎng)清潔級或SPF級動物。屏障設施的布局屏障設施一般分為清潔區(qū)、污染區(qū)和外部。

凡是進入該設施內的物品均需經過消毒滅菌處理，人員經過專門培訓，進入清潔區(qū)前經淋浴，更換無菌衣帽，遵循嚴格的操作規(guī)程和管理制度，保證屏障內不被污染。一般應根據設施內產生的污染物的特點，采取行之有效的方法。如用水洗法可除去氣體中的氨、細菌和塵埃，用酸堿洗凈法或用活性炭、硅膠等吸附劑可以除去惡臭成分。在國際上除少數國家外，一般都不用清潔級這個概念。最初是由于我國經濟還不夠發(fā)達，總體基礎設施條件、人們的觀念、科學素質等比較落后的情況下提出的。隨著我國經濟的發(fā)展，科學水平的提高，與國際交流的增加，科研人員今后將越來越多的采用SPF級動物進行實驗。第三節(jié)實驗動物籠器具1.隔離器隔離器，層流柜2.籠具:有兔籠、大鼠籠、小鼠籠、豚鼠籠、倉鼠籠、犬籠、猴籠、貓籠、層流架、動物專用電子秤、耳號鉗、固定器、解剖臺等。62220240000020980403飲水設備:大、小鼠的飲水瓶多用不銹鋼或無毒塑料瓶,規(guī)格250-500ml.定期清洗、消毒。無菌飲水機，是安裝了一層超濾膜濾去0.5微米以上的懸浮顆粒、細菌、真菌。用紫外線照射，殺死病毒。第四節(jié)實驗動物的飼料、飲水、墊料一、飼料1.飼料：實驗動物的飼料應該富含蛋白質、糖類、脂肪、維生素、礦物質，同時保證每天足夠的飲用水。2.飼料的種類：按物理性狀分：粉狀、顆粒狀、膨化飼料。按來源分動物性飼料與植物性飼料。按營養(yǎng)特性分：粗飼料、青綠飼料、能量飼料、蛋白飼料、礦物質飼料、維生素飼料、添加劑。3.飼料的質量要求：1）原料來源清楚；沒有污染，符合國家衛(wèi)生許可標準。2）儲存要保持通風干燥，防止霉變。3）飼料加工及生產過程中注意消毒滅菌。4）成品包裝要嚴密，防止污染。5）飼料配方科學合理，符合飲食習慣。二、飼料配合技術（一）名詞定義1.飼料：能被動物利用，且在合理飼養(yǎng)的情況下不發(fā)生有害現象，有利于動物營養(yǎng)的物質。2.日糧：指一只實驗動物一晝夜所采食的飼料總量。3.飼糧：指按日糧中各種飼料的合理比例配制成的混合飼料。4.配合飼料：按一定的飼料配方配制成的多種飼料混合料。（二）飼料營養(yǎng)素對動物實驗結果的影響1.通過實驗動物進食量而影響實驗結果。2.影響動物的生長發(fā)育而影響實驗結果。3.影響動物生理生化指標而影響實驗結果。4.影響動物營養(yǎng)而影響實驗