實(shí)驗(yàn)的1葉綠體地分離與熒光分析報(bào)告

實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案中國海洋大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告姓名：常天易 系年級(jí)：海洋生命學(xué)院 2012級(jí) 專業(yè)：生物科學(xué)科目：分子細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)號(hào)：12050011006一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）、通過對(duì)植物葉綠體的分離，了解細(xì)胞器分離的一般原理和方法2）、觀察葉綠體的間接熒光，并了解熒光顯微鏡的使用方法二、實(shí)驗(yàn)原理顆粒在離心場(chǎng)中的沉降速率取決于顆粒的大小、 形狀和密度，也同離心力以及懸浮介質(zhì)的黏度有關(guān)。在一定的離心場(chǎng)中，同一時(shí)間內(nèi)，密度和大小不同的顆粒其沉降速率不同，一次增加離心力和離心時(shí)間，就能使非均一懸浮液中的顆粒按其大小。 密度的先后分批沉降在離心管的底部分批收集，即可獲得各個(gè)亞細(xì)胞的組分。葉綠體的分離應(yīng)該在等滲溶液中進(jìn)行，以免滲透壓影響葉綠體，對(duì)其造成損傷。在熒光顯微鏡下可以觀察葉綠體的自發(fā)熒光和間接熒光。三、實(shí)驗(yàn)材料新鮮菠菜。精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案等滲溶液：0.35mol/L 氯化鈉溶液，試劑：0.01%吖啶橙(acridineorange)四、實(shí)驗(yàn)方法１、葉綠體的分離選取新鮮的菠菜葉 30.0g，放入150ml的等滲溶液中，在組織搗碎機(jī)中搗碎3min取6層紗布將溶液過濾于燒杯中，取濾液4ml在1000r/min下離心2min棄去沉淀將上清液在3000/min中離心5min，棄去上清液，沉淀即是所需的葉綠體精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案將沉淀用等滲溶液懸浮2、菠菜葉手撕片的制備①、下表皮因海綿組織較疏松，可以直接手撕下表皮的薄膜在顯微鏡下觀察。②、上表皮因柵欄組織較致密，可以用刀片將下表皮刮掉，在顯微鏡下觀察上表皮的細(xì)胞和氣孔。3、菠菜的葉綠體的觀察在普通光學(xué)顯微鏡下，將制得的手撕片放在載玻片的等滲溶液中，游離的葉綠體懸濁液點(diǎn)在在載玻片上， 輕輕地蓋上蓋玻片（防止氣泡產(chǎn)生），即可觀察。在熒光顯微鏡下，將游離葉綠體懸濁液的的標(biāo)本放在熒光顯微鏡下，先后用綠光、藍(lán)光對(duì)其進(jìn)行照射，在電腦上觀察其產(chǎn)生的自發(fā)熒精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案光。向手撕片的標(biāo)本、游離葉綠體懸濁液的的標(biāo)本中加入1-2滴0.01% 吖啶橙染液，先后用綠光、藍(lán)光對(duì)其進(jìn)行照射，在電腦上觀察其產(chǎn)生的間接熒光。五、