內(nèi)分泌激素的實驗室檢測課件

內(nèi)分泌激素的實驗室檢查檢驗科吳偉平2016年1月甲亢實驗室檢查（一）血清總甲狀腺素(TT4)T4全部由甲狀腺產(chǎn)生，每天約產(chǎn)生80～100μg。血清中99.96%的T4以與蛋白結(jié)合的形式存在，其中80%～90%與TBG結(jié)合。TT4測定的是這部分結(jié)合于蛋白的激素，所以血清TBG量和蛋白與激素結(jié)合力的變化都會影響測定的結(jié)果。妊娠、雌激素、急性病毒性肝炎、先天因素等可引起TBG升高，導致TT4增高；雄激素、糖皮質(zhì)激素、低蛋白血癥、先天因素等可以引起TBG降低，導致TT4減低。如果排除上述因素，TT4穩(wěn)定、重復性好，仍然是診斷甲亢的主要指標。（三）血清游離甲狀腺素(FT4)、

游離三碘甲腺原氨酸(FT3)游離甲狀腺激素是實現(xiàn)該激素生物效應的主要部分。盡管FT4僅占T4的0.025%，F(xiàn)T3僅占T3的0.35%，但它們與甲狀腺激素的生物效應密切相關(guān)，所以是診斷臨床甲亢的首選指標。但因血中FT4、FT3含量甚微，測定方法學上許多問題尚待解決，測定的穩(wěn)定性不如TT4、TT3。此外，目前臨床應用的檢測方法都不能直接測定真正的游離激素水平。（四）促甲狀腺激素（TSH）血清TSH濃度的變化是反映甲狀腺功能最敏感的指標。血清TSH測定技術(shù)經(jīng)歷了放射免疫法(RIA)、免疫放射法(immunoradiometricassay，IRMA)后，目前已經(jīng)進入第三代和第四代測定方法，即敏感TSH(sTSH)(檢測限0.01mU/I.)和超敏TSH測定方法（檢測限達到0.005mU/L）。免疫化學發(fā)光法(ICMA)屬于第四代TSH測定法，成人正常值為0.3～4.8mU/L。sTSH成為篩查甲亢的第一線指標，甲亢時的TSH通常小于0.1mU/L。sTSH使得診斷亞臨床甲亢成為可能，因為后者甲狀腺激素水平正常，僅有TSH水平的改變。傳統(tǒng)的應用TRH刺激試驗診斷不典型甲亢的方法已經(jīng)被sTSH測定所取代。（五）（131）I攝取率（131）I攝取率是診斷甲亢的傳統(tǒng)方法，目前已經(jīng)被sTSH測定技術(shù)所代替。（131）I攝取率正常值（蓋革計數(shù)管測定）為3小時5%～25%，24小時20%～45%，高峰在24小時出現(xiàn)。甲亢時（131）I攝取率表現(xiàn)為總攝取量增加，攝取高峰前移。本方法現(xiàn)在主要用于甲狀腺毒癥病因的鑒別：甲狀腺功能亢進類型的甲狀腺毒癥（131）I攝取率增高；非甲狀腺功能亢進類型的甲狀腺毒癥↑（131）I攝取率減低。此外（131）I攝取率用于計算（131）I治療甲亢時需要的活度。（七）TSH受體刺激抗體(TSAb)是診斷GD的重要指標之一。與TRAb相比，TSAb反映了這種抗體不僅與TSH受體結(jié)合，而且這種抗體產(chǎn)生了對甲狀腺細胞的刺激功能。測定原理：目前反應體系中培養(yǎng)的靶細胞是轉(zhuǎn)染了人類TSH受體的中國倉鼠卵巢細胞(CHO細胞)，測定指標是細胞培養(yǎng)液中的cAMP水平。TSAb與CHO細胞表面的TSH受體結(jié)合，通過腺苷酸環(huán)化酶cAMP途徑產(chǎn)生生物學效應，即cAMP水平增加。85%～100%的GD新診斷患者TSAb陽性，TSAb的活性平均在200%～300%。甲減實驗室檢查（一）血紅蛋白多為輕、中度正細胞正色素性貧血。（二）生化檢查血清甘油三酯、總膽固醇、LDL-C增高，HDL-C降低，同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)增高，血清CK、LDH增高。（三）血清甲狀腺激素和TSH血清TSH增高、TT4、FT4降低是診斷本病的必備指標。在嚴重病例血清TT3和FT3減低。亞臨床甲減僅有血清TSH增高，但是血清T4或T3正常。亞急性甲狀腺炎實驗室檢查根據(jù)實驗室結(jié)果本病可以分為三期，即甲狀腺毒癥期、甲減期和恢復期。①甲狀腺毒癥期：血清T3、T4升高，TSH降低，（131）I攝取率減低（24小時<2%）。這就是本病特征性的血清甲狀腺激素水平和甲狀腺攝碘能力的“分離現(xiàn)象”。出現(xiàn)的原因是甲狀腺濾泡被炎癥破壞，其內(nèi)儲存的甲狀腺激素釋放進入循環(huán)，形成“破壞性甲狀腺毒癥”；而炎癥損傷引起甲狀腺細胞攝碘功能減低。此期血沉加快，可>100mm/小時。②甲減期：血清T3、T4逐漸下降至正常水平以下，TSH回升至高于正常值，（131）I攝取率逐漸恢復。這是因為儲存的甲狀腺激素釋放殆盡，甲狀腺細胞正在處于恢復之中。③恢復期：血清T3、T4、TSH和（131）I攝取率恢復至正常。原發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能功能減退癥1.基礎(chǔ)血、尿皮質(zhì)醇、尿17-羥皮質(zhì)類固醇測定常降低，但也可接近正常。2.ACTH興奮試驗靜脈滴注ACTH25U，維持8小時，觀察尿17-羥皮質(zhì)類固醇和（或）皮質(zhì)醇變化，正常人在興奮第一天較對照日增加1～2倍，第二天增加1.5～2.5倍?？焖俜ㄟm用于病情較危急，需立即確診，補充糖皮質(zhì)激素的患者。在靜注人工合成ACTH(1～24)0.25mg前及后30分鐘測血漿皮質(zhì)醇，正常人血漿皮質(zhì)醇增加276～552nmol/L。對于病情較嚴重，疑有腎上腺皮質(zhì)功能不全者，同時用靜注（或靜滴）地塞米松及ACTH，在注入ACTH前、后測血漿皮質(zhì)醇，如此既可進行診斷檢查，又可同時開始治療。3.血漿基礎(chǔ)ACTH測定明顯增高，超過55pmol/L，常介于88～440pmol/L（正常人低于18pmol/L），而繼發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能減退者，ACTH濃度降低。原醛實驗室檢查（一）血、尿生化檢查①低血鉀：一般在2～3mmol/L，嚴重者更低。低血鉀往往呈持續(xù)性，也可為間歇性。早期患者血鉀正常。②高血鈉：血鈉一般在正常高限或略高于正常。③堿血癥：血pH和CO↓2結(jié)合力為正常高限或略高于正常。④尿鉀高：在低血鉀條件下(低于3.5mmol/L)，尿鉀仍在25mmol/24h以上。（二）尿液檢查①尿pH為中性或偏堿性；②尿比重較為固定而減低，往往在1.010～1.018之間，少數(shù)患者呈低滲尿；③部分患者有蛋白尿，少數(shù)發(fā)生腎功能減退。原醛實驗室檢查（三）醛固酮測定血漿醛固酮濃度及尿醛固酮排出量受體位及鈉攝入量的影響，立位及低鈉時升高。原醛癥中血漿、尿醛固酮皆增高。正常成人參考值：血漿醛固酮臥位時50～250pmol/L，立位時80～970pmol/L（血漿醛固酮pmol/L換算成ng/dl時除以27.7）；尿醛固酮于鈉攝入量正常時6.4～86nmol/d，低鈉攝入時47～122nmol/d，高鈉攝入時0～13.9nmol/d。原醛癥伴嚴重低血鉀者，醛固酮分泌受抑制，血、尿醛固酮增高可不太嚴重，而在補鉀后，醛固酮增多更為明顯。嗜鉻細胞瘤實驗室檢查（一）血、尿兒茶酚胺及其代謝物測定持續(xù)性高血壓型患者尿兒茶酚胺及其代謝物香草基杏仁酸(vanillylmandelicacid，VMA)及甲氧基腎上腺素(metanephrine，MN)和甲氧基去甲腎上腺素(normetanephrine，NMN)皆升高，常在正常高限的兩倍以上，其中MN、NMN的敏感性和特異性最高。陣發(fā)性者平時兒茶酚胺可不明顯升高，而在發(fā)作后才高于正常，故需測定發(fā)作后血或尿兒茶酚胺，后者可以每毫克肌酐量或以時間單位計排泄量。攝入咖啡、可樂類飲料及左旋多巴、拉貝洛爾（柳胺芐心定）、普萘洛爾（心得安）、四環(huán)素等藥物可導致假陽性結(jié)果；休克、低血糖、高顱內(nèi)壓可使內(nèi)源性兒茶酚胺增高。嗜鉻細胞瘤實驗室檢查正常參考值：尿TMN(MN+TMN)為1.5～4.6μmol/d(0.3～0.9mg/d)；血漿NMN為90～570pmol/L(18～102pg/ml)；血漿MN為60～310pmol/L(12～61pg/ml)；尿VMA為5～44μmol/d(1～8mg/d)；去甲腎上腺素：血漿為380～2365pmol/L(65～400ng/L)，尿為59～470nmol/d(10～80μg/d)；腎上腺素：血漿為0～380pmol/L(0～70ng/L)，尿為0～109nmol/d(0～20μg/d)；尿兒茶酚胺為13～42μg/d。

泌乳素瘤實驗室檢查催乳素瘤患者血清PRL一般＞200μg/L，若＞300μg/L則可肯定，但<200μg/L時應檢查有無藥物（酚噻嗪、三環(huán)類抗抑郁劑、甲氧氯普胺、α甲基多巴、雌激素等）的作用、原發(fā)性甲狀腺功能減退癥、慢性腎衰竭和下丘腦病變等腺垂體功能減退癥實驗室檢查腺垂體功能情況可通過對其所支配的靶腺功能狀態(tài)來反映。（一）性腺功能測定女性有血雌二醇水平降低，沒有排卵及基礎(chǔ)體溫改變，陰道涂片未見雌激素作用的周期性改變;男性見血睪酮水平降低或正常低值，精液檢查精子數(shù)量減少，形態(tài)改變，活動度差，精液量少。（二）腎上腺皮質(zhì)功能24小時尿17-羥皮質(zhì)類固醇及游離皮質(zhì)醇排量減少，血漿皮質(zhì)醇濃度降低，但節(jié)律正常，葡萄糖耐量試驗示血糖低平曲線。腺垂體功能減退癥實驗室檢查（三）甲狀腺功能測定血清總T↓4、游離T↓4均降低，而總T↓3、游離T↓3可正?；蚪档?。（四）腺垂體分泌激素如FSH、LH、TSH、ACTH、GH、PRL均減少，但因垂體激素呈脈沖式分泌，故宜相隔15～20分鐘連續(xù)抽取等量抗凝血液3次，等量相混后送檢測。同時測定垂體促激素和靶腺激素水平，可以更好地判斷靶腺功能減退為原發(fā)性或繼發(fā)性。對于腺垂體內(nèi)分泌細胞的儲備功能可采用興奮試驗，如GnRH、TRH、CRH、GHRH等下丘腦激素來探測垂體激素的分泌反應。腺垂體聯(lián)合興奮試驗(TRH、GnRH、胰島素低血糖）結(jié)果若低于正常，有判斷意義，但正常低值也屬異常。應當指出，有時結(jié)果可與正常重疊，ACTH試驗對于判別原發(fā)性或繼發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能減退癥有重要意義。胰島素低血糖激發(fā)試驗忌用于老年人、冠心病、有驚厥和黏液性水腫的患者。甲旁亢實驗室檢查（一）血血清總鈣多次超過2.75mmol/L或血清游離鈣超過1.28mmol/L應視為疑似病例.如同時伴有維生素D缺乏，腎功能不全或低白蛋白血癥，血清總鈣可不高，但血清游離鈣是增高的。血清磷一般均降低，但在腎功能不全時血清磷可不低。血清堿性磷酸酶常增高，在骨骼病變比較顯著的患者尤為明顯。血氯常升高，血HCO3↑常降低，可出現(xiàn)代謝性酸中毒。（二）尿尿鈣常增加，但由于PTH降低鈣的清除率，當血清鈣低于2.87mmol/L時，尿鈣增加可不明顯。尿磷常增高，由于飲食等因素的影響，診斷意義不如尿鈣增多。尿cAMP增加，但注射外源性PTH后，尿cAMP不再進一步增加。尿羥脯氨酸常增加，與血清堿性磷酸酶增高一樣，均提示骨骼明顯受累。甲旁減實