葉綠素的提取和分離

試劑原理綠葉中的色素溶于有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇，而不溶于水。各種色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散得快，反之則慢。無(wú)水乙醇層析液色素提取色素分離（層析液：20份石油醚,2份丙酮和1份苯混合而成，93號(hào)汽油也可做層析液用）一、實(shí)驗(yàn)原理：第1頁(yè)/共15頁(yè)第一頁(yè)，共16頁(yè)。二、實(shí)驗(yàn)步驟：第2頁(yè)/共15頁(yè)第二頁(yè)，共16頁(yè)。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：第3頁(yè)/共15頁(yè)第三頁(yè)，共16頁(yè)。色素種類吸收光吸收光譜葉綠素（含量約占3/4）葉綠素a（藍(lán)綠色）葉綠素b（黃綠色）

類胡蘿卜素（含量約占1/4）胡蘿卜素（橙黃色）葉黃素（黃色）四、色素種類及吸收光譜：吸收藍(lán)紫光和紅（橙）光吸收藍(lán)紫光第4頁(yè)/共15頁(yè)第四頁(yè)，共16頁(yè)。五、葉綠體色素的分布和功能1、分布：葉綠體的

上。2、功能：

光能（四種色素）、

光能（只有少量特殊狀態(tài)的葉綠素a）類囊體薄膜吸收、傳遞轉(zhuǎn)化第5頁(yè)/共15頁(yè)第五頁(yè)，共16頁(yè)。考點(diǎn)1綠葉中色素的提取和分離題組一：考察實(shí)驗(yàn)選材、試劑的作用和實(shí)驗(yàn)操作：(2013·江蘇單科，5)關(guān)于葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)的操作，正確的是 (

)。 A．使用定性濾紙過(guò)濾研磨液 B．將干燥處理過(guò)的定性濾紙條用于層析 C．在劃出一條濾液細(xì)線后緊接著重復(fù)劃線2～3次 D．研磨葉片時(shí)，用體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶解色素

解析本題可排除錯(cuò)誤選項(xiàng)。色素易被濾紙吸附，故用紗布過(guò)濾，A錯(cuò)誤；每次重復(fù)畫色素濾液細(xì)線時(shí)，需等干燥后再進(jìn)行，C錯(cuò)誤；由于葉綠體中的色素不溶于水，因此研磨葉片時(shí)需用無(wú)水乙醇或丙酮，D錯(cuò)誤。

答案

B第6頁(yè)/共15頁(yè)第六頁(yè)，共16頁(yè)。易錯(cuò)警示！

1、實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)及操作目的過(guò)程注意事項(xiàng)操作目的提取色素(1)選新鮮綠色的葉片使濾液中色素含量高(2)研磨時(shí)加無(wú)水乙醇溶解色素(3)加少量SiO2研磨充分(4)加少量CaCO3保護(hù)色素，防止葉綠素被破壞(5)迅速、充分研磨防止乙醇揮發(fā)，充分溶解色素(6)盛放濾液的試管管口加棉塞防止乙醇揮發(fā)和色素氧化分離色素(1)濾紙預(yù)先干燥處理使層析液在濾紙上快速擴(kuò)散(2)濾液細(xì)線要直、細(xì)、勻使分離出的色素帶平整不重疊(3)濾液細(xì)線干燥后再畫－兩次使分離出的色素帶清晰分明(4)濾液細(xì)線不觸及層析液防止色素直接溶解到層析液中第7頁(yè)/共15頁(yè)第七頁(yè)，共16頁(yè)。題組二：考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析及實(shí)驗(yàn)誤差種類顏色含量葉綠素b胡蘿卜素葉黃素葉綠素a葉綠素

(占總量3/4)類胡蘿卜素(占總量1/4)(藍(lán)綠色)(黃綠色)(橙黃色)(黃色)注意：1.色素帶的位置代表什么？寬度呢？2.若分離得到的色素帶不明顯，可能的原因？溶解度含量第8頁(yè)/共15頁(yè)第八頁(yè)，共16頁(yè)。2、綠葉中色素提取分離異常現(xiàn)象分析:（1）收集到的濾液綠色過(guò)淺的原因分析:①未加石英砂)(二氧化硅),研磨不充分.②使用放置數(shù)天的菠菜葉,濾液色素(葉綠素太少).③一次加入大量的無(wú)水乙醇,提取濃度太低(正確做法:分次加入少量無(wú)水乙醇)。④未加碳酸鈣或者加入過(guò)少，葉綠素被破壞。（2）濾紙條色素帶重疊①濾液細(xì)線不直②濾液細(xì)線過(guò)粗（3）濾紙條無(wú)色素帶：①忘記畫濾液細(xì)線②濾液細(xì)線接觸到層析液，且時(shí)間較長(zhǎng)，色素全部溶解到層析液中。第9頁(yè)/共15頁(yè)第九頁(yè)，共16頁(yè)。紅橙綠黃藍(lán)青紫可見(jiàn)光:390-760nm不可見(jiàn)光:紫外線(5-370nm)和紅外線(750-1000000nm)光合作用利用可見(jiàn)光葉綠素a、b吸收藍(lán)紫光和紅（橙）光第10頁(yè)/共15頁(yè)第十頁(yè)，共16頁(yè)。類胡蘿卜素吸收藍(lán)紫光第11頁(yè)/共15頁(yè)第十一頁(yè)，共16頁(yè)。題組二：考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析及實(shí)驗(yàn)誤差(經(jīng)典高考題)某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體。將其葉片進(jìn)行了紅光照射光吸收測(cè)定和色素層析條帶分析(從上至下)，與正常葉片相比，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是 (

)。 A．光吸收差異顯著，色素帶缺第2條 B．光吸收差異不顯著，色素帶缺第2條 C．光吸收差異顯著，色素帶缺第3條 D．光吸收差異不顯著，色素帶缺第3條

解析葉綠體中的葉綠素a和葉綠素b主要吸收藍(lán)紫光和紅光，胡蘿卜素和葉黃素主要吸收藍(lán)紫光，所以當(dāng)水稻葉黃素缺失突變體進(jìn)行紅光照射時(shí)，光吸收差異不顯著；對(duì)正常葉片葉綠體中的色素提取后，層析的結(jié)果自上而下依次是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b，故B正確。答案

BB第12頁(yè)/共15頁(yè)第十二頁(yè)，共16頁(yè)。(經(jīng)典高考題)圖中①代表新鮮菠菜葉的光合色素紙層析結(jié)果，則圖②所示結(jié)果最有可能來(lái)自(

)。 A．水培的洋蔥葉 B．生長(zhǎng)的柳樹幼葉 C．培養(yǎng)的衣藻 D．秋冬的銀杏落葉解析新鮮菠菜葉中的光合色素種類齊全、含量豐富、完整，據(jù)圖①可知，濾紙上的四條色素帶完整，從上到下依次為胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b。圖②濾紙上的色素帶不完整，只有胡蘿卜素、葉黃素。秋冬的銀杏落葉呈黃色(或橙黃色)，這是由于低溫破壞了葉綠素所致，因此葉片中幾乎不含葉綠素。其他選項(xiàng)中的材料中都含有四種色素。答案

DD第13頁(yè)/共15頁(yè)第十三頁(yè)，共16頁(yè)。(2017全國(guó)Ⅲ)植物光合作用的作用光譜是通過(guò)測(cè)量光合作用對(duì)不同波長(zhǎng)光的反應(yīng)（如O2的釋放）來(lái)繪制的。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．類胡蘿卜素在紅光區(qū)吸收的光能可用于光反應(yīng)中ATP的合成B．葉綠素的吸收光譜可通過(guò)測(cè)量其對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收值來(lái)繪制C．光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長(zhǎng)的變化來(lái)表示D．葉片在640~660nm波長(zhǎng)光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的A第14頁(yè)/共15頁(yè)第十四頁(yè)，共16頁(yè)。謝謝您的觀看！第15頁(yè)/共15頁(yè)第十五頁(yè)，共16頁(yè)。內(nèi)容總結(jié)試劑。綠葉中的色素溶于有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇，而不溶于水。（層析液：20份石油醚,2份丙酮和1份苯混合而成，93號(hào)汽油也可做層析液用）。題組一：考