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華南師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告專(zhuān)業(yè):生物科學(xué)課程名稱(chēng):動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型:驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師:黃俊棍專(zhuān)業(yè):生物科學(xué)課程名稱(chēng):動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型:驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師:黃俊棍實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目:家兔尿生成的影響因素實(shí)驗(yàn)時(shí)間:2013年5月28日實(shí)驗(yàn)評(píng)分:實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)輸尿管、膀胱插管技術(shù)和尿液收集的方法;了解神經(jīng)和體液因素對(duì)尿量的調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)原理尿生成的過(guò)程包括腎小球的濾過(guò)、腎小管和集合管的重吸收和分泌三個(gè)過(guò)程。凡能影響上述過(guò)程的任何因素,均可影響尿的生成并可引起尿量及尿的性質(zhì)、成分的改變。本實(shí)驗(yàn)以家兔為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,采用膀胱插管術(shù)收集并記錄尿量,主要觀(guān)察不同因素或藥物對(duì)尿量的影響。實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物:家兔試劑:生理鹽水、20%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、腎上腺素、垂體后葉素、20%甘露醇。器材:手術(shù)器械、生理信號(hào)采集系統(tǒng),壓力傳感器、注射器實(shí)驗(yàn)步驟1.家兔麻醉:稱(chēng)重、麻醉:2%戊巴比妥鈉,2ml/kg,耳緣靜脈注射。固定:仰臥位固定氣管插管術(shù):剪毛、中線(xiàn)剪開(kāi)頸部皮膚(6~7cm)、鈍性分離頸部肌肉等組織,暴露氣管、氣管穿線(xiàn)、軟骨環(huán)上做T形切口、棉簽去氣管中的血塊、插氣管插管,結(jié)扎。分離右側(cè)迷走神經(jīng),穿線(xiàn)備用泌尿系統(tǒng)插管一一全身抗凝:靜脈注射肝素,注射劑量10mg/kg(1ml/kg)A、 輸尿管插管:分離兩側(cè)輸尿管,各穿2棉線(xiàn)備用;一側(cè)輸尿管結(jié)扎近膀胱端一一結(jié)扎處往上做1/2切口——向上插管一一綁線(xiàn)、動(dòng)脈夾固定。B、 膀胱插管:分離兩側(cè)輸尿管;輸尿管下穿線(xiàn),結(jié)扎與尿道連接的位置;用大注射針頭刺破膀胱壁,從穿孔處將插管插入膀胱內(nèi),結(jié)扎并固定,如膀胱未充盈,可先注射生理鹽水,讓膀胱壁變薄儀器連接,觀(guān)察正常尿量改變影響因素.快速注射30ml生理鹽水,記錄尿量變化。.靜脈注射腎上腺素0.2~0.3ml,記錄尿量變化。.靜脈注射20%葡萄糖15ml,記錄尿量變化。靜脈注射垂體后葉素(2單位),觀(guān)察尿量變化靜脈注射10%NaSO4(4ml),觀(guān)察尿量變化刺激右側(cè)迷走神經(jīng)5?10秒,觀(guān)察尿量變化靜脈注射20%甘露醇,觀(guān)察尿量變化實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖1家兔正常情況尿量圖正常情況下,家兔無(wú)尿液生成。圖2注射生理鹽水后家兔尿量變化圖注射生理鹽水后家兔尿量稍有增加。圖3注射腎上腺素后家兔尿量變化圖注射腎上腺素后家兔尿量減少。圖4注射葡萄糖后家兔尿量變化圖注射葡萄糖可使家兔尿量顯著增加圖5注射垂體后葉素家兔尿量變化圖注射垂體后葉素后家兔尿量顯著減少圖6注射N(xiāo)a2SO4后家兔尿量變化圖
注射N(xiāo)a2SO4家兔尿量顯著增加
圖7刺激迷走神經(jīng)家兔尿量變化圖
刺激家兔迷走神經(jīng)后尿液的生成量減少。圖8注射甘露醇家兔尿量變化圖注射甘露醇使尿液生成量增加。討論與分析靜脈快速注射生理鹽水使血漿滲透壓降低,血液經(jīng)過(guò)腎小球時(shí)的濾過(guò)率增加,而且腎小球血漿流量也增加,原尿生成增加,同時(shí)血容量增加,可刺激容量感受器,血壓升高可刺激壓力感受器,增加抑制抗利尿激素的分泌和釋放,使遠(yuǎn)端腎小管和集合管對(duì)水的重吸收減少。要排除體內(nèi)過(guò)多水分以維持血容量的正常,所以最后尿液生成量增加。腎上腺素可興奮血管平滑肌上的a-腎上腺素能受體,引起血管收縮,外周阻力增加,同時(shí)對(duì)心臟起到正性變時(shí)、變力和變傳導(dǎo)作用,從而導(dǎo)致血壓上升,尿量減少。并且去甲腎上腺素可同時(shí)興奮腎入球小動(dòng)脈和出球小動(dòng)脈,但前者收縮更明顯,腎血流量減少,腎小球毛細(xì)血管血壓下降,腎小球的有效濾過(guò)壓下降,尿生成減少。靜脈注射葡萄糖,由于腎小管對(duì)葡萄糖的重吸收具有一定限度(腎糖閾160?180mg/ml),實(shí)驗(yàn)中葡萄糖的注射量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其腎糖閾,經(jīng)腎小球?yàn)V出的大量葡萄糖不能被腎小管上皮細(xì)胞全部重吸收,小管液中葡萄糖含量增多,滲透壓增高,妨礙了腎小管特別是近球小管對(duì)水的重吸收,小管液中的Na+濃度被稀釋而降低,故Na+的重吸收也減少,氯化鈉及水的排出均增加,水隨葡萄糖一起排出,尿量增加,稱(chēng)為滲透性利尿。注射垂體后葉素(催產(chǎn)素和ADH),ADH與遠(yuǎn)曲后段,集合管上皮上的受體結(jié)合后,可增加管腔膜上的水通道,提高腎遠(yuǎn)端小管和集合管上皮細(xì)胞的對(duì)水通透性,從而促進(jìn)水的吸收,使得重吸收水增多而使尿量減少。注射N(xiāo)a2SO4后家兔尿量顯著增加。原因是在腎小管中,SO『-離子僅有少部分被重吸收,而在近端小管前半段,Na+的重吸收量最大,注射過(guò)多的硫酸鈉,會(huì)導(dǎo)致腎小管內(nèi)的SO「-離子與Na+離子濃度過(guò)高,滲透壓高,提高了小管液中溶質(zhì)濃度,阻礙近曲小管對(duì)水的吸收,導(dǎo)致尿量增多。刺激迷走神經(jīng),尿量大大減少,甚至可出現(xiàn)暫時(shí)無(wú)尿。刺激迷走神經(jīng)外周端,其末梢釋放乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上的M受體向結(jié)合,改變離子通道的通透性和心肌動(dòng)作電位,引起心臟活動(dòng)抑制,導(dǎo)致心腧出量的減少,血壓下降,腎小球有效濾過(guò)壓下降,腎小球?yàn)V過(guò)率下降,尿液濾過(guò)減少,最后引起尿量的減少。血壓下降還可以反射性地引起交感神經(jīng)興奮,導(dǎo)致入球小動(dòng)脈
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