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最新國家開放大學電大《植物生理學》形考任務4試題及答案最新國家開放大學電大《植物生理學》形考任務4試題及答案形考作業(yè)4提交實驗報告植物生理學實驗報告實驗題目葉綠素a、葉綠素b含量測定日期班級姓名【實驗目的】熟習在未經分別的葉綠素溶液中測定葉綠素a和葉綠素b的方法及其計算【實驗原理】?葉綠素提取液中同時含有葉綠素a和葉綠素b,兩者的汲取光譜雖有不一樣,但又存在著顯然的重疊,在不分別葉綠素a和葉綠素b的狀況下同時測定葉綠素a和葉綠素b的濃度,可分別測定在663nm和645nm(分別是葉綠素a和葉綠素b在紅光區(qū)的汲取峰)的光汲取,而后依據Lambert-Beer定律,計算出提取液中葉綠素a和葉綠素b的濃度。?A663=82.04ρa+9.27ρb(1)?A645=16.75ρa+45.60ρb(2)公式中ρa為葉綠素a的濃度,ρb為葉綠素b濃度(單位為g/L),82.04和9.27分別是葉綠素a和葉綠素b在663nm下的比汲取系數(濃度為1g/L,光路寬度為1cm時第1頁共4頁的吸光度值);16.75和45.60分別是葉綠素a和葉綠素b在645nm下的比汲取系數。即混雜液在某一波長下的光汲取等于各組分在此波長下的光汲取之和。將上式整理,能夠獲得下式:?ρ(3)?ρ(4)將葉綠素的濃度改為mg/L,則上式變成:?ρ(5)?ρ(6)ρT=ρa+ρb=8.02A663+20.21A645(7)?ρT為葉綠素的總濃度【實驗器械】1、實驗儀器:分光光度計、離心計、天平、剪刀、研缽、漏斗、移液管2、實驗藥品:丙酮、碳酸鈣3、實驗資料:植物葉片:①陸生花生:水生花生②小葉黃楊新葉:小葉黃楊老葉【實驗步驟】1、色素的提取取新鮮葉片,剪去粗大的葉脈并剪成碎塊,稱取0.5g放入研缽中加純丙酮5ml,少量CaCO3和石英砂,研磨成勻漿,再加80%丙酮5ml,將勻漿轉第2頁共4頁入離心管,并用適當80%丙酮清洗研缽,一并轉入離心管,離心5min后棄積淀,上清液用80%丙酮定容至20ml。2、測定OD值取上述色素提取液1ml,加80%丙酮4ml稀釋后轉入比色杯中,以80%丙酮為比較,分別測定663nm、645nm處的OD值。4、計算按式(5)、(6)、(7)分別計算色素提取液中葉綠素、葉綠素及葉綠素的濃度。再依據稀釋倍數分別計算每克鮮重葉片中色素的含量?!緦嶒灲Y果】水花生(陸生)水花生(水生)Ρρρ葉綠素a含量(mg/g鮮重)0.14240.22165葉綠素b含量(mg/g鮮重葉綠素總含量(mg/g鮮重珊瑚樹(新葉)珊瑚樹(成熟葉)Ρρρ葉綠素a含量(mg/g鮮重)0.20__0.2841葉綠素b含量(mg/g鮮重葉綠素總含量(mg/g鮮重第3頁共4頁【實
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