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文檔簡介

分光光度法主要應(yīng)用于測定試樣中微量組分的含量。

①靈敏度高。常用于測定試樣中1-10-3%的微量組分;

②準(zhǔn)確度較高。分光光度法為2-5%(1-2%);比色法的相對誤差為5-10%,

③應(yīng)用廣泛。大多無機(jī)離子和許多有機(jī)化合物都可以直接或間接地用比色法或分光光度法進(jìn)行測定;

④操作簡便、快速,儀器價格適中,用途廣。分光光度法的特點(diǎn):(1)標(biāo)準(zhǔn)(工作)曲線當(dāng)入射光波長及吸收池光程一定時,吸光度A與吸光物質(zhì)的濃度c呈線性關(guān)系。以某物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度c為橫坐標(biāo),以吸光度A為縱坐標(biāo),繪出A-c曲線,稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同條件下測定待測溶液的吸光度,即可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求得待測溶液的濃度。定量方法標(biāo)準(zhǔn)(工作)曲線圖:Ac標(biāo)準(zhǔn)工作曲線A樣C樣偏離朗伯-比耳定律的原因1.非單色光引起偏離2.比爾定律的局限性引起偏離3.化學(xué)因素引起偏離4.其它因素測定樣品時要在同樣條件下,測定其吸光度A,從工作曲線上查出待測液的濃度。在一定條件下,工作曲線應(yīng)為一條直線。工作曲線應(yīng)定期校準(zhǔn)。當(dāng)條件有變動時,如儀器經(jīng)過檢修、更換光源、更換標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑(如顯色劑)重新配制,都應(yīng)重新繪制工作曲線。(2).標(biāo)準(zhǔn)對照法(比較法)若試樣中只有被測組分在λmax處有吸收,且符合朗伯-比耳定律,則配制一與待測樣品濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在相同條

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