維生素的測定 市賽獲獎

7.3脂溶性維生素的測定7.3.1VA的測定

維生素A存在于動物性脂肪中，主要來源于肝臟、魚干油、蛋類、乳類等動物性食品中。植物性食品中不合VA，但在深色果蔬中含有胡蘿卜素，它在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變?yōu)閂A，故稱為VA原。

原理在氯仿溶液中，VA與三氯化銻可生成藍(lán)色可溶性絡(luò)合物，在620nm波長處有最大吸收峰，其吸光度與VA的含量在一定的范圍內(nèi)成正比，故可比色測定。

適用范圍及特點(diǎn)本法適用于維生素A含量較高的各種樣品(高于5-10μg／g)，對低含量樣品，因受其他脂溶性物質(zhì)的干擾，不易比色測定。該法的主要缺點(diǎn)是生成的藍(lán)色絡(luò)合物的穩(wěn)定性差。比色測定必須在6秒鐘內(nèi)完成，否則藍(lán)色會迅速消退，將造成極大誤差。7.3.2VD的測定

維生素D是指含有抗佝僂病活性的一類物質(zhì)，具有維生素D活性的化合物約有l(wèi)0種，其中最重要的是維生素D2、維生素D3及其維生素D原。維生素D2無天然存在，維生素D2只存在于某些動物性食物中。但它們都可由維生素D原(麥角固醇和7一脫氫膽固醇)經(jīng)紫外線照射形成。

原理在氯仿溶液中，VD與三氯化銻可生成橙黃色化合物，500nm波長處有最大吸收峰，其吸光度與VD的含量在一定的范圍內(nèi)成正比，故可比色測定。7.1.3VE的測定比色法→操作簡便、靈敏度高熒光法→特異性強(qiáng)、干擾少，靈敏快速氣相色譜法

液相色譜法→簡便、分辨率高測定方法比色法原理

維生素E能將高價鐵離子還原為鐵離子，低價鐵離子與聯(lián)氮苯發(fā)生顏色反應(yīng)，可以進(jìn)行比色測定。操作步驟

皂化→純化→樣品的測定→標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制→計算7.2.2VC的測定

維生素C有抗壞血病的作用，所以又稱作抗壞血酸。維生素C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤其豐富。維生素C的測定方法很多，有滴定法、比色法、高效液相色譜法等。7.2水溶性維生素的測定7.2.2.1原理

還原型抗壞血酸可以還原染料2，6-二氯靛酚（2,6-D）。該染料在酸性溶液中呈粉紅色，在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色，被還原后顏色消失。藍(lán)色7.2.2.2試劑1.標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液：準(zhǔn)確稱取50毫克純抗壞血酸，溶于1%的草酸溶液中，并稀釋至500毫升，貯棕色瓶，冷藏保存，最好臨用時配制。

2.2%草酸溶液：草酸2克，溶于100毫升蒸餾水中。（研磨用）3.1%草酸溶液：1克草酸溶于100毫升的蒸餾水中。（定容用）4.0.01%

2，6—二氯靛酚溶液：溶50毫克2,6—二氯酚靛于300毫升含有104克

NaHCO3的熱水中，冷卻后加水稀釋至500毫升，濾去不溶物，貯于棕色瓶內(nèi)。7.2.2.3材料和器材1.新鮮蔬菜、水果2.吸量管1.0ml、10.0ml3.容量瓶25ml,100ml4.微量滴定管5ml5.天平6.研缽7.漏斗等7.2.2.4操作步驟1.樣液制備

適量稱取果蔬樣品，+2ml2%草酸(抑制抗壞血酸氧化酶)用研缽磨成漿，漏斗+脫脂藥棉過濾，濾液轉(zhuǎn)入25ml容量瓶，用1%草酸定容。

2.標(biāo)準(zhǔn)液滴定

準(zhǔn)確吸取1.0ml標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液，于100ml錐形瓶中，+1%草酸9.0ml，用微量滴定管以2,6-D滴定至淡紅色，15s不褪色即為終點(diǎn)。（由所用染料的體積計算出T值(平均值)，即1ml染料相當(dāng)于多少mg的Vc。

）3.樣液滴定

取10.0ml樣液于100ml錐形瓶內(nèi)，滴定方法同2，同時，做平行實(shí)驗(yàn)。7.2.2.5結(jié)果計算

χ=VT/m0×100式中χ：100g樣品中含Vc的質(zhì)量(mg)V：滴定時所用去染料體積(ml)T：每毫升染料能氧化Vc質(zhì)量數(shù)(mg/ml)m0：10ml樣液含樣品之質(zhì)量數(shù)(g)7.2.2.6注意事項(xiàng)1.滴定過程宜迅速，一般不超過2min，因?yàn)闃悠分心承╇s質(zhì)亦能