植物染色體帶型分析

關于植物染色體帶型分析第1頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四1、了解染色體帶型分析的有關概念。2、了解染色體C-帶顯色技術。3、學會植物染色體C-帶分析方法。一、實驗目的第2頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四二、實驗原理染色體是遺傳物質的載體，如果染色體發(fā)生變化了，生物的外在性狀必然發(fā)生變化。染色體數(shù)目的變化比較容易察覺，但是染色體結構和組成成分的變化就比較難以發(fā)現(xiàn)。染色體顯帶技術使不可察覺的染色體結構和成分變化轉變?yōu)榭梢远勘硎龅膸妥兓?。染色體分帶技術：染色體經(jīng)物理、化學因素處理后，再進行染色，使其呈現(xiàn)特定的深淺不同帶紋（band）的方法。染色體分帶技術可分為兩大類，一類是產(chǎn)生的染色帶分布在整個染色體和長度上，如Q、G和R帶；另一類是局部性的顯帶，它只能使少數(shù)特定的帶或結構染色，如C、T和N帶等。第3頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四第4頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四其中C-帶主要顯示著絲粒附近的異染色質，故稱為C-帶，其他異染色質均可顯示。染色體經(jīng)酸（HCl）、堿[Ba(OH)2]和緩沖鹽溶液（2×SSC）處理后，再以Giemsa染液染色而顯示的帶型。它包括染色體C-帶結構特征、C-帶位置、染色強度，異染色質含量等。作為細胞分類學指標，染色體C-帶核型可以從不同層次上反映其生物類群間的分類關系。染色體C-帶在同一屬內有一明顯而恒定的C-帶結構模式，往往構成“標志性C-帶帶紋”，由此可以進行屬級分類單元的比較。第5頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四材料：經(jīng)C-分帶技術處理得到的黑麥染色體的圖片。器具：顯微鏡、測微尺、毫米尺、鑷子、剪刀、繪圖紙、圓規(guī)、鉛筆等。三、儀器與材料第6頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四四、實驗說明植物C帶主要包括四種帶型：1、著絲粒帶（centromericband，C），是指著絲粒及其附件的帶。2、中間帶（intercalaryband，I），分布于染色體著絲粒至末端之間的帶。3、末端帶（telomericband，T），位于染色體的末端的帶。4、核仁縊痕帶（nucleolaronstrictionband，N），是指核仁染色體特殊的帶型，位于核仁組織中心區(qū)。第7頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四C帶分類方法：1、完全帶類型：處理染色后，同時出現(xiàn)四種帶型。2、不完全帶類型：只顯示三種以下的帶類別。aCIN型：缺乏末端帶類型。bCTN型：不具有中間帶類型。cTN型：只有末端帶和縊痕帶。dN型：只有縊痕帶。第8頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四第9頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四四、實驗程序1、測量圖片上的每條染色體的相對長度，進行核型分析。2、分析每條染色體C-帶位置。3、每對同源染色體上相對應的C-帶是否純合，即在某一特定位置相配對的兩條染色體是否都具有帶紋，帶紋大小、染色程度是否一致，如不一致，則按雜合計。第10頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四

4、各染色體C-帶帶紋的著色程度。在同樣的處理程序下，染色體組中各染色體C-帶帶紋上存在恒定的深淺不同的著色反應，它表示C-帶結構異染色質在質上的差異?？梢运募壉硎痉ǎ禾貜姡喝旧珮O深；強：染色較深；中：染色程度中等；弱：染色極淡。5、根據(jù)以上C-帶各項統(tǒng)計結果，描述各染色體的C-帶特征，并據(jù)此繪制出黑麥染色體C-帶帶型示意圖。第11頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四[重要實驗步驟]：在觀察染色體C-帶型時，同時要考慮染色體長度、著絲粒位置等核型特征。第12頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四[實驗注意事項]

：帶型辨別是要考慮到因制片、分帶處理而導致的帶型可能出現(xiàn)的變化。另外染色體排隊時也要從大到小，短臂向上、長臂向下，各染色體的著絲粒排在一條直線上。第13頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四例如節(jié)節(jié)麥C-帶第14頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四排隊：模式圖：第15頁，共17頁，2023年，2月20日，星期四對各染色體的描述1D：短臂具有端帶及亞端帶，長臂具有兩條不太明顯的中間帶。2D：短臂具有端帶及明顯的近著絲粒帶，長臂具端帶及兩條小的中間帶。3D：短臂顯示端帶及亞端帶。4D：短臂具有端帶及近著絲粒帶，長臂具有1條明顯的特征帶。5D：是節(jié)節(jié)麥中唯一一組隨體染色體，短臂具有端帶和1條中間帶，隨體經(jīng)C-分帶后不易觀察。6D：為等臂染色體，長臂