臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)

物學(xué)檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)(sop)Ⅰ高壓鍋使用的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）實(shí)驗(yàn)室名項(xiàng)目編號(hào)制定日期稱檢驗(yàn)科高壓鍋的使用檢驗(yàn)科2006年06月06日【目的】確保高壓效果的可靠性?！具m用范圍】蒸氣式高壓鍋?！驹揝OP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任。【操作方法】1．將水加到高壓鍋內(nèi)至其刻度線，將欲滅菌物品放入鍋內(nèi)，關(guān)閉鍋門，擰緊螺絲且確認(rèn)已經(jīng)封閉。2．打開排氣閥。3．打開蒸汽開關(guān)，向鍋內(nèi)輸入蒸汽或接通電源，使產(chǎn)生蒸汽。40.05mPa時(shí)，關(guān)閉排氣閥。5．觀察壓力表，當(dāng)壓力升至0.15mPa時(shí)，開始計(jì)時(shí)。6．壓力達(dá)0.15mPa后，可調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥，減少進(jìn)氣量，維持壓力且使其穩(wěn)定在0.15mPa。電加熱時(shí)，可切斷電源，維持壓力持續(xù)15分鐘，至多不超過30分鐘，否則營養(yǎng)物質(zhì)破壞。7．關(guān)閉進(jìn)氣閥門或切斷電源，讓鍋內(nèi)物品自然冷卻，不可馬上打開排氣閥，以免發(fā)生意外。8．待鍋內(nèi)壓力降為零時(shí)，可打開鍋蓋，取出物品。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅱ培養(yǎng)箱使用的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科06年06月06日準(zhǔn)【目的】確保培養(yǎng)箱溫度恒定?！具m用范圍】各種類型隔水式、溫度設(shè)定為27℃、35℃、42℃、56℃培養(yǎng)箱?！驹揝OP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！静僮鞣椒ā?2．從注水口先將隔水箱內(nèi)的水注滿到浮標(biāo)要求的位置。3．將溫度調(diào)節(jié)旋扭調(diào)至所需溫度，然后將電源開關(guān)撥至“開”處。4．每次使用時(shí)應(yīng)在培養(yǎng)箱頂部插入標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)，監(jiān)測實(shí)際溫度。5．培養(yǎng)箱工作溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在±10C以內(nèi)。6．培養(yǎng)箱正面貼有溫度記錄表，記錄每天上班和下班時(shí)溫度，如溫度超出正常范圍，指示該溫度的刻度應(yīng)劃上紅圈，且把修正溫度記錄下來。7．培養(yǎng)箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅲ培養(yǎng)基制備的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期檢驗(yàn)科培養(yǎng)基的制備檢驗(yàn)科06年06月06日【目的】保證培養(yǎng)基的質(zhì)量?！具m用范圍】使用成品培養(yǎng)基干粉制備各種分離培養(yǎng)基?！驹揝OP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！静襟E】1.在玻璃容器中加入所需蒸餾水的二分之壹量，然后放入壹定量培養(yǎng)基干粉，補(bǔ)足水量，輕輕攪拌以促進(jìn)溶解。2.校正pH：高壓滅菌前可用pH計(jì)或精密pH試紙校正培養(yǎng)基的pH。3.分裝：液體培養(yǎng)基壹般在滅菌前分裝，分裝時(shí)應(yīng)注意每管的分裝量不應(yīng)高于試管的2/3。瓊脂平板是在培養(yǎng)基高壓滅菌后冷至50-600C時(shí)再傾注平板。4.質(zhì)量檢查[1]無菌試驗(yàn)：將制好的培養(yǎng)基在350C孵育過夜，判定是否滅菌合格。[2]效果檢驗(yàn)：按不同的培養(yǎng)要求，接種相應(yīng)的菌種，觀察細(xì)菌的發(fā)育、菌落形態(tài)、色素、溶血等特征，判斷培養(yǎng)基是否符合要求。5.保存：液體培養(yǎng)基及瓊脂平板須在40C保存，壹般不超過7天，如用塑料袋密封至多保存2周。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅳ革蘭染色的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒?yàn)室名項(xiàng)目編號(hào)制定日期稱檢驗(yàn)科革蘭染色檢驗(yàn)科06年06月06日【目的】確保染色結(jié)果清晰可靠。【該SOP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！驹噭?.結(jié)晶紫溶液A液：結(jié)晶紫2g95%乙醇20mlΒ液：草酸銨0.8g蒸餾水80ml使用前24小時(shí)將A液Β液混合后，過慮后裝入試劑瓶內(nèi)備用。2.碘液碘1g碘化鉀2g蒸餾水300ml3.脫色液：95%乙醇4.復(fù)染液儲(chǔ)存液：沙黃2.5g95%乙醇100ml應(yīng)用液：儲(chǔ)存液10ml蒸餾水90ml【方法】1.待檢標(biāo)本用無菌生理鹽水涂片，經(jīng)自然干燥或火焰固定。2.加結(jié)晶紫液染1分鐘，清水沖去染液。3.加碘液染1分鐘，清水沖去染液。4.加95%乙醇脫色液，不時(shí)搖動(dòng)約10-30分鐘，至紫色已脫落為至，水沖洗。5.30分鐘，水沖洗。6.待涂片自然干燥后，油鏡鏡檢。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅴ抗酸染色的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒?yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期檢驗(yàn)科抗酸染色檢驗(yàn)科06年06月06日【目的】確保染色結(jié)果清晰可靠?！痉椒ā浚ㄒ唬A性復(fù)紅染色法【試劑】1、萋納石炭酸復(fù)紅溶液堿性復(fù)紅乙醇飽和溶液10ml5%石炭酸溶液90ml2、脫色劑濃鹽酸3ml95%乙醇97ml3、復(fù)染液（呂弗勒美藍(lán)液）美藍(lán)乙醇飽和溶液30ml10%氫氧化鉀0.1ml蒸餾水100ml【染色步驟】1、切不可沸騰。染52、加脫色劑，不時(shí)搖動(dòng)坡片至無紅色脫落為至，水洗。3、加復(fù)染液，染0.5-1分鐘。4、干后鏡檢。分枝桿菌呈紅色，背景為藍(lán)色。注：奴卡菌、放線菌標(biāo)本染色時(shí)，脫色劑改用2%硫酸水溶液。（二）金胺O-羅丹明Β染色法【染劑】1、羅丹明Β液：羅丹明Β0.1g加蒸餾水100ml；2、0.1%金胺O液：金胺O0.1g加蒸餾水95ml，再加入純石炭酸5ml，混勻。3、3%鹽酸酒精。4、稀釋美藍(lán)液：呂弗勒美藍(lán)液10ml，加蒸餾水90ml，混勻?！痉椒ā?、涂片固定后加第1液30-90分鐘。2、棄去第1液后加第2液染15分鐘。3、用第3液脫色1-2分鐘，水洗。4、滴加第4液染30分鐘，水洗，待干，熒光鏡檢?！窘Y(jié)果】抗酸菌在暗背景中呈現(xiàn)金黃色熒光。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅵ血培養(yǎng)標(biāo)本采集的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒?yàn)室名項(xiàng)目編號(hào)制定日期稱檢驗(yàn)科血培養(yǎng)標(biāo)本的采集檢驗(yàn)科06年06月06日【目的】指導(dǎo)血液標(biāo)本的正確采集。【該SOP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！静襟E】1.選擇壹適當(dāng)?shù)撵o脈穿刺處，先以70%酒精擦拭。2.再用棉簽沾取2%碘酊涂于欲作靜脈穿刺處，讓其干后再用70%酒精擦拭。3.全部手續(xù)再作壹此（如必要）4.用壹支無菌的21號(hào)針頭和10ml針筒抽空（成人約抽取10ml血液，小孩約抽取1-5ml5.血液抽出后，立即注入血液培養(yǎng)瓶，馬上充分混勻后，再送入檢驗(yàn)。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅶ血液及骨髓微生物學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期檢驗(yàn)科血液及骨髓微生物學(xué)檢檢驗(yàn)科06*年06月06日驗(yàn)【目的】保證血（骨髓）培養(yǎng)結(jié)果的正確性?！驹揝OP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！緦?shí)驗(yàn)條件】培養(yǎng)箱或厭氧培養(yǎng)箱（或厭氧罐）或全自動(dòng)血培養(yǎng)儀?！静僮鞒绦颉浚ㄒ唬?biāo)本采集嚴(yán)格無菌技術(shù)取血液10ml（兒童血液1-5ml0.5-1ml注入血培養(yǎng)瓶后立即送實(shí)驗(yàn)室，注入?yún)捬跗繒r(shí)要注意勿將注射器內(nèi)的空氣注入瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶在送試驗(yàn)室前，不可放冰箱暫存。（二）培養(yǎng)1.實(shí)驗(yàn)室接到血培養(yǎng)瓶后，放350C孵育。2.經(jīng)過12-18小時(shí)，350C孵育后，在血平板或巧克力平板上盲傳壹次。3.盲傳后繼續(xù)孵育，每日早晨觀察有無細(xì)菌生長，直至第7天。4.無細(xì)菌生長表現(xiàn)的培養(yǎng)瓶，在觀察的7天中，最少應(yīng)做2次盲目傳種。5.全自動(dòng)血培養(yǎng)儀培養(yǎng)時(shí)，待其儀器報(bào)警，涂片、接種；若儀器未報(bào)警，5天后盲種，仍為陰性，才能報(bào)告。（三）分離鑒定1.盲傳陽性或肉眼可見生長現(xiàn)象，直接涂片做革蘭染色，所見結(jié)果應(yīng)及時(shí)報(bào)告臨床醫(yī)師。2.根據(jù)涂片結(jié)果，如為壹種細(xì)菌生長，則直接以增菌液做鑒定實(shí)驗(yàn)；如有倆種或多種細(xì)菌同時(shí)生長，則必須經(jīng)過分離培養(yǎng)，以獲得純菌種后做鑒定。3.細(xì)菌鑒定要做到種的鑒定。（四）藥敏實(shí)驗(yàn)1.根據(jù)涂片結(jié)果，直接以培養(yǎng)瓶內(nèi)的增菌液做直接藥物敏感性測試，爭取在較短時(shí)間內(nèi)得出初步結(jié)果，供臨床醫(yī)師作為治療的參考。2.標(biāo)本經(jīng)平板分離純培養(yǎng)后，做標(biāo)準(zhǔn)化藥敏實(shí)驗(yàn)正式報(bào)告給臨床?！窘Y(jié)果的判斷】1.疑有細(xì)菌生長者，經(jīng)涂片、革蘭染色鏡檢后，電話通知主管醫(yī)師。2.任何時(shí)候平板上長出單個(gè)菌落，應(yīng)立即完成鑒定就及標(biāo)準(zhǔn)化藥敏實(shí)驗(yàn)，且發(fā)出報(bào)告，報(bào)告形式為“XXX細(xì)菌生長，藥敏實(shí)驗(yàn)報(bào)告形式為“XXX敏感”等。3.培養(yǎng)37“經(jīng)7日培養(yǎng)無細(xì)菌生長。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06*年06月06日保證質(zhì)量評(píng)價(jià)的準(zhǔn)確可靠?！咀饔谩竣幟粼囼?yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序?qū)嶒?yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期檢驗(yàn)科藥敏試驗(yàn)檢驗(yàn)科06年06月06日壹、K—B法【目的】保證紙片擴(kuò)散法藥敏結(jié)果的可靠性?！静牧稀浚ㄒ唬┡囵B(yǎng)基Mueller-HintonHTMGC瓊脂＋1％特定的生長因子，只適合淋病奈瑟菌；Mueller-Hinton瓊脂＋5％羊血，只適合鏈球菌。（二）藥敏紙片抗菌藥物紙片直徑約為6.0-6.35mm，每片的吸水量約20ml。（三）質(zhì)控菌株K-Β法質(zhì)量控制用菌株常規(guī)用：金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853。（四）菌液比濁管接種菌液濃度為1.5x108/ml，相當(dāng)于0.5的麥?zhǔn)媳葷峁?。【方法?.制備接種菌液：挑選瓊脂平板上，形態(tài)相同的菌落移種于M-H液體培養(yǎng)基中，置350C溫箱中孵育4小時(shí)，校正濁度，或用接中環(huán)挑取菌落，置浮于生理鹽水中振蕩混勻后和標(biāo)準(zhǔn)化濁管比濁，調(diào)整濁度和比濁管相同。2.M-H60最后沿平皿周邊繞倆圈，保證涂布均勻。3.貼紙片：待平板上的水分被瓊脂完全吸收后（約15貼在瓊脂平板表面，且用鑷尖輕壓壹下，使其貼平。每張紙片間距不少于24mm，紙片中心距平皿邊緣不少于15mm。4.350C孵平板，最好單獨(dú)擺放，不超過2個(gè)疊在壹起，孵育18-24小時(shí)后，讀取結(jié)果。5.判定結(jié)果：培養(yǎng)后取出平板，用游標(biāo)卡尺測量抑菌環(huán)的直徑，抑菌環(huán)的邊緣以肉眼見不到細(xì)菌明顯生長為限，然后根據(jù)抑菌環(huán)直徑大小、NCCLS判斷細(xì)菌的敏感性，且加以記錄。二、稀釋試驗(yàn)【目的】1.為了決定抗生素的最低抑菌濃度（MIC2.為了決定抗生素殺菌能力，或?qū)嶒?yàn)倆種之上抗生素對細(xì)菌的協(xié)同作用或?qū)棺饔??！痉椒ā浚ㄒ唬┤鉁♂屧囼?yàn)1.適用情況：[1]血液培養(yǎng)。[2]病人對適當(dāng)治療方法無效。[3]免疫機(jī)能障礙病人[4]病人經(jīng)治療后復(fù)發(fā)者。2.培養(yǎng)基的選擇：壹般細(xì)菌用調(diào)節(jié)好陽離子的M-HCAMHB不動(dòng)桿菌、葡萄球菌、腸球菌、霍亂弧菌；某些挑剔性細(xì)菌則根據(jù)其生長的營養(yǎng)M-HHTMCAMHB＋2－5％凍融馬血，適合肺炎鏈球菌以及以外的鏈球菌。3.肉湯的連續(xù)稀釋：[1]將各種抗微生物藥物庫存液稀釋成200ug/ml或200u/ml。[2]取10支無菌試管，寫上編號(hào)1-10，為壹組每種抗生素需壹種。[3]自第2管至10管各加入無菌肉湯1。0[4]將各實(shí)驗(yàn)藥分別加1.0ml至第1管及第2管，將第2管混勻后移取0.1ml至第3管，同樣操作，倍比稀釋至第910管不加抗生素作為陽性生長對照。[5]另外準(zhǔn)備僅含肉湯的試管，作為陰性對照。4.細(xì)菌的接種[1]每支試管接種1.0ml105-106個(gè)細(xì)菌/ml0.5個(gè)麥?zhǔn)蠞岫仍儆萌鉁?：200然后接種1.0ml至每支試管內(nèi)。[2]接種后每支試管含混合液，抗生素濃度為512ug（u）-O.125ug（u[3]102倍稀釋，最后的濃度為10；5；2.5；0.6；0.3；0.15；0.08；及0.04ug/ml。5.培養(yǎng)和結(jié)果的判斷在350C溫箱中培養(yǎng)16-20陰性對照管則應(yīng)清澈。以抗生素能抑制細(xì)菌生長管的最低濃度為其MIC值。6.測量最低殺菌濃度（MBC）把無菌生長的每壹試管吸0.1ml加到500C的胰蛋白胨肉湯（Trypticsoybroth,TSA）20ml混合均勻后分別倒平板，培養(yǎng)48-72小時(shí)后計(jì)算菌落數(shù)，和1：200稀釋原菌液作傾注獲得的細(xì)菌數(shù)相比，減少99.9％，其最小抑菌濃度為可得到抗生素的MBC0.00157.質(zhì)控：利用NCCLS建議的標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)控。（二）微量肉湯稀釋敏感實(shí)驗(yàn)手工法：原理和試管稀釋方法相同。具體操作是在含有96小孔的小塑料培養(yǎng)盤進(jìn)行，每壹孔可裝0.1ml量，每壹盤可同時(shí)作數(shù)種抗生素的數(shù)種不同濃度，另2孔作為陽性和陰性對照。儀器法：配制儀器Minidiluter或MIC-2000（美國）Dynatechlabortories，Alexandria，VA）自配或購買現(xiàn)成的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基。（三）瓊脂稀釋法1此法和肉湯稀釋實(shí)驗(yàn)原理相同，但又有其優(yōu)點(diǎn)：①可同時(shí)實(shí)驗(yàn)許多菌株，利用多點(diǎn)接種儀可同時(shí)接種多個(gè)菌株到壹系列含有各種不同抗生素濃度的平板。②可檢測是否污染：由細(xì)菌在平板上生長的特性判斷。③可對肉湯稀釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果不佳的挑剔性細(xì)菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2.M-H瓊脂，它適合腸桿菌科、銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌、葡萄球菌、腸球菌、霍亂弧菌；對挑剔的細(xì)菌可加入相應(yīng)的營養(yǎng)物，如巧克力、動(dòng)物血、5%脫纖維血或冷凍動(dòng)物血等，如HTM瓊脂，只適合嗜血桿菌；GC瓊脂＋1Mueller-Hinton瓊脂＋5％羊血，只適合肺炎鏈球菌以外的鏈球菌。3.抗生素稀釋和平板的配制。4.平板的接種：[1]每壹試驗(yàn)菌株需調(diào)整濃度至0.5麥?zhǔn)蠞岫?。[2]平板點(diǎn)接種可用定量接種杯（0.001ml同時(shí)作5ATCC25922、大腸埃希菌ATCC35218、金黃色葡萄球菌ATCC29213、糞腸球菌ATCC29212。5.待接種菌液被完全吸收后，倒置培養(yǎng)在350C溫箱內(nèi)。6.16-20小時(shí)后，首先見不含抗生素的對照平板，必須有壹株生長，然后見各實(shí)驗(yàn)平板，凡能完全抑制細(xì)菌生長的抗生素最低濃度即為MIC值。操作人員部門主管質(zhì)量負(fù)責(zé)人姓名唐玉貞檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科日期06年06月06日Ⅸ藥敏實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)操作實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期檢驗(yàn)科藥敏實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控檢驗(yàn)科06年06月06日制【目的】保證藥敏報(bào)告的準(zhǔn)確性，可靠性及重現(xiàn)性。【該SOP變動(dòng)程序】本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任壹使用本SOP的工作人員提出，且報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任?！具m用范圍】瓊脂紙片擴(kuò)散法?！痉椒ā恳?、培養(yǎng)基紙片擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)必須使用M-H瓊脂培養(yǎng)基，因?yàn)樗缓种苹前匪幬?，而其他種類培養(yǎng)基可能含有和磺胺藥拮抗的物質(zhì)，使其抑菌環(huán)變小。1.PH的時(shí)間或溫度都需遵照規(guī)定，2.新的粉狀脫水培養(yǎng)基打開時(shí)，要附廠商、編號(hào)、日期、及打開者的姓名。3.無菌實(shí)驗(yàn)：每壹批配好的培養(yǎng)基其中抽取5%的量在350C或其他適合的溫度下隔夜培養(yǎng)，觀察有無菌落生長。4.若是新購的培養(yǎng)基必須觀察其顏色和透明度，若有沉淀、渾濁或脫水的現(xiàn)象都必須丟棄，新配好的M-H培養(yǎng)基，用塑料袋包好，儲(chǔ)藏于40C的水箱內(nèi)，防水蒸發(fā)。5.平板所含培養(yǎng)基的量太多或太少均不宜，如Mueller—Hintonagar的高度不可超過4mm6.定期檢測培養(yǎng)基的有效性，且對結(jié)果加以記錄，以便能隨時(shí)發(fā)現(xiàn)問題。7.培養(yǎng)基要在有效期內(nèi)使用。二、試劑鑒定細(xì)菌實(shí)驗(yàn)所用的紙條或紙片，儲(chǔ)藏于冰箱時(shí)，須附干燥劑，且須注意所標(biāo)明的有效期限。紙片購入時(shí)須作陽性和陰性對照以檢查其是否有效，以后可每周做壹次。三、抗生素粉末和抗生素紙片檢查室診斷過程中所用抗生素粉末必須保持干燥，置冰箱儲(chǔ)藏，若其制成高濃度-140C或-140C解凍，未用完的就應(yīng)丟棄。若抗生素粉末用于稀釋試驗(yàn)時(shí)，須限已知MIC的微生物作對照。作藥敏用的抗生素紙片應(yīng)放干燥劑且貯存于-140C或-140C以下，若情況不允許，除了penicillinscephalosporins及oxacillin紙片仍必須冰凍外，其余可置每天在作藥敏試驗(yàn)時(shí)，最好同時(shí)取已知敏感的微生物質(zhì)控菌株作對照，來測驗(yàn)紙片的功效。四、裝備1．培養(yǎng)箱、冰箱等裝備于每天早上上班時(shí)須記錄溫度且校正，使用過程中應(yīng)注意溫度有無變化。2．CO2培養(yǎng)箱，要確保其所含的CO2量。31600C干燥箱中加熱1-2且同時(shí)于缸中放入生物指示劑可確定是否絕對無氧。五、操作人員素質(zhì)操作者應(yīng)熟悉藥敏試驗(yàn)的規(guī)范步驟，尤其要注意其影響因素，如：接種菌的且要使接種菌在平板上分布均勻；紙片間距要合適等。六、結(jié)果判讀紙片擴(kuò)散敏感性試驗(yàn)只適用于快速生長菌，不可用于緩