
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
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文檔簡介
第一章緒論
?細胞生物學(xué)研究的內(nèi)容和現(xiàn)狀
?細胞生物學(xué)是現(xiàn)代生命科學(xué)的重要基礎(chǔ)學(xué)科
?細胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容
?當前細胞生物學(xué)研究的總趨勢與重點領(lǐng)域
?細胞重大生命活動的相互關(guān)系
?細胞學(xué)與細胞生物學(xué)發(fā)展簡史
?細胞的發(fā)現(xiàn)
?細胞學(xué)說的建立其意義
?細胞學(xué)的經(jīng)典時期
?實驗細胞學(xué)與細胞學(xué)的分支及其發(fā)展
?細胞生物學(xué)學(xué)科的形成與發(fā)展
?細胞生物學(xué)的主要學(xué)術(shù)組織、學(xué)術(shù)刊物與教科書
細胞生物學(xué)
?生命體是多層次、非線性、多側(cè)面的復(fù)雜結(jié)構(gòu)體系,
而細胞是生命體的結(jié)構(gòu)與生命活動的基本單位,有
了細胞才有完整的生命活動。
?細胞生物學(xué)是研究細胞基本生命活動規(guī)律的科學(xué),它
是在不同層次(顯微、亞顯微與分子水平)上以研究
細胞結(jié)構(gòu)與功能、細胞增殖、分化、衰老與凋亡、細
胞信號傳遞、真核細胞基因表達與調(diào)控、細胞起源與
進化等為主要內(nèi)容。核心問題是將遺傳與發(fā)育在細胞
水平上結(jié)合起來。
主要內(nèi)容
細胞結(jié)構(gòu)與功能、細胞重要生命活動:
?細胞核、染色體以及基因表達的研究
?生物膜與細胞器的研究
?細胞骨架體系的研究
?細胞增殖及其調(diào)控
?細胞分化及其調(diào)控
?細胞的衰老與凋亡
?細胞的起源與進化
?細胞工程
總趨勢
?細胞生物學(xué)與分子生物學(xué)(包括分子遺傳學(xué)與
生物化學(xué))相互滲透與交融是總的發(fā)展趨勢。
重點領(lǐng)域
令染色體DNA與蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系
一主要是非組蛋白對基因組的作用
8細胞增殖、分化、凋亡的相互關(guān)系及其調(diào)控
令細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究
◎細胞結(jié)構(gòu)體系的組裝
美國科學(xué)情報研究所(ISD1997年SCI(ScienceCitationIndex)收錄及引用
論文檢索,全世界自然科學(xué)研究中論文發(fā)表最集中的三個領(lǐng)域分別是:
?細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)(signaltransduction);
?細胞凋亡(cellapoptosis);
?基因組與后基因組學(xué)研究(genomeandpost-genomicanalysis)。
美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)在1988年底發(fā)表的一份題為《什麼是當今科研領(lǐng)域的熱門話
題?》(“Whatispopularinresearchtoday?”)的調(diào)查報告中指出,目前全球研究最熱門的是
?三種疾?。?/p>
⑥癌癥(cancer)
⑥心血管病(cardiovasculardiseases)
?愛滋病和肝炎等傳染病
(infectiousdiseases:AIDS,hepatitis)
?五大研究方向:
。細胞周期調(diào)控(cellcyclecontrol);
。細胞凋亡(cellapoptosis);
◎細胞衰老(cellularsenescence);
⑥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)(signaltransduction);
?DNA的損傷與修復(fù)(DNAdamageandrepair)
“細胞學(xué)說”的基本內(nèi)容
?認為細胞是有機體,一切動植物都是由細胞
發(fā)育而來,并由細胞和細胞產(chǎn)物所構(gòu)成;
?每個細胞作為一個相對獨立的單位,既有它“自己的”
生命,又對與其它細胞共同組成的整體的生命有所助益;
?新的細胞可以通過老的細胞繁殖產(chǎn)生。
AlbertsBetal.EssentialCellBiology.NewYorkandLondon:Garlandpublishing,Inc.1998
AlbertsBetal.MolecuarBiologyoftheCell,3rded.NewYorkandLondon:Garland
Publishing,Inc.1994
BeckerW.M.etal.TheWorldoftheCell.FourthEd.TheBenjamin/CummingsPublishing
Company.2000
GeraldKarp.CellandMolecularBiology:conceptsandexperiments,2ndEdition.Published
byJohnWiley&Sons,Inc.1999
LodishH.etal.MolecularCellBiology.4thEd.ScientificAmericanBooks,Inc.2000.
學(xué)習(xí)細胞生物學(xué)的注意點
*抽象思維與動態(tài)觀點
*結(jié)構(gòu)與功能統(tǒng)一的觀點
*同一性(unity)和多樣性(diversity)的問題
*細胞生物學(xué)的主要內(nèi)容:
基本概念與實驗證據(jù);細胞器的動態(tài)特征;
化學(xué)能的產(chǎn)生與利用;細胞的活動及其調(diào)控等
*實驗科學(xué)與實驗技術(shù)——細胞真知源于實驗室
Whatweknow//Howweknow.
第二章細胞基本知識概要
?細胞的基本概念
?非細胞形態(tài)的生命體
——病毒及其與細胞的關(guān)系
?原核細胞與真核細胞
第一節(jié)細胞的基本概念
?細胞是生命活動的基本單位
?細胞概念的一些新思考
?細胞的基本共性
第二節(jié)非細胞形態(tài)的生命體
—病毒及其與細胞的關(guān)系
?病毒的基本知識
?病毒在細胞內(nèi)增殖(復(fù)制)
?病毒與細胞在起源與進化中的關(guān)系
第三節(jié)原核細胞與真核細胞
?原核細胞(Prokaryoticcell)
?真核細胞(Eukaryoticcell)
?古細菌(Archaebacteria)
細胞是生命活動的基本單位
?一切有機體都由細胞構(gòu)成,細胞是構(gòu)成有機體的基本單位
?細胞具有獨立的、有序的自控代謝體系,
細胞是代謝與功能的基木單位
?細胞是有機體生長與發(fā)育的基礎(chǔ)
?細胞是遺傳的基本單位,細胞具有遺傳的全能性
?沒有細胞就沒有完整的生命
細胞概念的一些新思考
?細胞是多層次非線性的復(fù)雜結(jié)構(gòu)體系
?細胞具有高度復(fù)雜性和組織性
?細胞是物質(zhì)(結(jié)構(gòu))、能量與信息過程精巧結(jié)合的綜合體
?細胞完成各種化學(xué)反應(yīng);
?細胞需要和利用能量;
?細胞參與大量機械活動;
?細胞對刺激作出反應(yīng);
?細胞是高度有序的,具有自組裝能力與自組織體系。
?細胞能進行自我調(diào)控;
?繁殖和傳留后代;
細胞的基本共性
?所有的細胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌
蛋白質(zhì)構(gòu)成的生物膜,即細胞膜。
?所有的細胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA
作為遺傳信息復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的載體。
?作為蛋白質(zhì)合成的機器一核糖體,毫無例外地
存在于一切細胞內(nèi)。
?所有細胞的增殖都以一分為二的方式進行分裂。
病毒的基本知識
?病毒(virus)——核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)構(gòu)成
的核酸-蛋白質(zhì)復(fù)合體;
根據(jù)病毒的核酸類型可以將其分為兩大類:
?DNA病毒與RNA病毒
?病毒的多樣性)
?類病毒(viroid)——僅由感染性的RNA構(gòu)成;
?阮病毒(prion)——僅由感染性的蛋白質(zhì)亞基構(gòu)成;
病毒在細胞內(nèi)增殖(復(fù)制)
?病毒侵入細胞,病毒核酸的侵染
?病毒核酸的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)的合成
?病毒的裝配、成熟與釋放
病毒與細胞在起源與進化中的關(guān)系
病毒是非細胞形態(tài)的生命體,它的主要生命活動必須要在細胞內(nèi)實現(xiàn)。病毒與細
胞在起源上的關(guān)系,目前存在3種主要觀點:
?生物大分子f病毒一細胞
病毒
?生物大分子
細胞
?生物大分子f細胞f病毒
原核細胞
基本特點:
?遺傳的信息量小,遺傳福息載體僅由一個環(huán)狀DNA構(gòu)成;
細胞內(nèi)沒有分化為以膜為基礎(chǔ)的具有專門結(jié)構(gòu)與功能
的細胞器和細胞核膜。
主要代表:
?支原體(mycoplast)目前發(fā)現(xiàn)的最小最簡單的細胞;
?細菌
?藍藻又稱藍細菌(Cyanobacteria)
真核細胞
?真核細胞的基本結(jié)構(gòu)體系
?細胞的大小及其分析
?原核細胞與真核細胞的比較
真核細胞的基本結(jié)構(gòu)體系
?以脂質(zhì)及蛋白質(zhì)成分為基礎(chǔ)的生物膜結(jié)構(gòu)系統(tǒng);
?以核酸(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)為主要成分的遺傳信息表達系統(tǒng)
?由特異蛋白分子裝配構(gòu)成的細胞骨架系統(tǒng)。
細胞的大小及其分析
各類細胞直徑的比較
原核細胞與真核細胞的比較
?原核細胞與真核細胞基本特征的比較
?原核細胞與真核細胞的遺傳結(jié)構(gòu)裝置和基因表達的比較
?植物細胞與動物細胞的比較
植物細胞與動物細胞的比較
?細胞壁
?液泡
?葉綠體
古細菌
古細菌(archaebacteria)與真核細胞曾在進化上有過共同歷程
?主要證據(jù)
?進化系統(tǒng)樹
主要證據(jù)
(1)細胞壁的成分與真核細胞一樣,而非由含壁酸的肽聚糖構(gòu)成,
因此抑制壁酸合成的鏈霉素,抑制肽聚糖前體合成的環(huán)絲
氨酸,抑制肽聚糖合成的青霉素與萬古霉素等對真細菌類有強的
抑制生長作用,而對古細菌與真核細胞卻無作用。
(2)DNA與基因結(jié)構(gòu):古細菌DNA中有重復(fù)序列的存在。此外,多
數(shù)古核細胞的基因組中存在內(nèi)含子。
(3)有類核小體結(jié)構(gòu):古細菌具有組蛋白,而且能與DNA構(gòu)建成類
似核小體結(jié)構(gòu)。
(4)有類似真核細胞的核糖體:多數(shù)古細菌類的核糖體較真細菌
有增大趨勢,含有60種以上蛋白,介于真核細胞(70?84)與真
細菌(55)之間??股赝瑯硬荒芤种乒藕思毎惖暮颂求w的蛋
白質(zhì)合成。
(5)5SrRNA:根據(jù)對5SrRNA的分子進化分析,認為古細菌與真
核生物同屬一類,而真細菌卻與之差距甚遠。5srRNA二級結(jié)構(gòu)
的研究也說明很多古細菌與真核生物相似。
除上述各點外,根據(jù)DNA聚合酶分析,氨基酰tRNA合成酶
的作用,起始氨基酰tRNA與肽鏈延長因子等分析,也提供了以
上類似依據(jù),說明古細菌與真核生物在進化上的關(guān)系較真細菌類
更為密切。因此近年來,真核細胞起源于古細菌的觀點得到了加
強。
第三章細胞生物學(xué)研究方法
如何學(xué)習(xí)細胞生物學(xué)?
*抽象思維與動態(tài)觀點
*結(jié)構(gòu)與功能統(tǒng)一的觀點
*同一性(unity)和多樣性(diversity)的問題
*細胞生物學(xué)的主要內(nèi)容:
結(jié)構(gòu)與功能(動態(tài)特征);
細胞的生命活動;
*實驗科學(xué)與實驗技術(shù)一細胞真知源于實驗室
Whatweknow//Howweknow.
第三章細胞生物學(xué)研究方法
?細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法
?細胞組分的分析方法
?細胞培養(yǎng)、細胞工程與顯微操作技術(shù)
第一節(jié)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察方法
?光學(xué)顯微鏡技術(shù)(lightmicroscopy)
?電子顯微鏡技術(shù)(Electromicroscopy)
?掃描探針顯微鏡(ScanningProbeMicroscope)
掃描遂道顯微鏡(scanningtunnelingmicroscope)
第二節(jié)細胞組分的分析方法
?離心分離技術(shù)
?細胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、酶、糖與脂類等的顯示方法
?特異蛋白抗原的定位與定性
?細胞內(nèi)特異核酸的定位與定性
?放射自顯影技術(shù)
?定量細胞化學(xué)分析技術(shù)
第三節(jié)細胞培養(yǎng)、細胞工程與顯微操作技術(shù)
?細胞的培養(yǎng)
?細胞工程
一、光學(xué)顯微鏡技術(shù)(lightmicroscopy)
?普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡技術(shù)
?熒光顯微鏡技術(shù)(FluorescenceMicroscopy)
?激光共焦掃描顯微鏡技術(shù)(LaserConfocalMicroscopy)
?相差顯微鏡(phase-contrastmicroscope)
?微分干涉顯微鏡
(differentialinterferencecontrastmicroscope,DIC)
?錄像增差顯微鏡技術(shù)(video-enhancemicroscopy)
二、電子顯微鏡技術(shù)
?電子顯微鏡的基本知識
?電鏡與光鏡的比較
?電鏡與光鏡光路圖比較
?電子顯微鏡的基本構(gòu)造
?主要電鏡制樣技術(shù)
?負染色技術(shù)
?冰凍蝕刻技術(shù)
?超薄切片技術(shù)
?電鏡三維重構(gòu)技術(shù)
?掃描電鏡(Scanningelectronmicroscope,SEM)
SPM(Scanningprobemicroscope)
三、掃描遂道顯微鏡
?ScanningProbeMicroscope,SPM
(80年代發(fā)展起來的檢測樣品微觀結(jié)構(gòu)的儀器)
包括:STM、AFM、磁力顯微鏡、摩擦力顯微鏡等
原理:掃描探針與樣品接觸或達到很近距離時,即產(chǎn)生彼此間相互
作用力,如
量*力學(xué)中的隧道效應(yīng)(隧道電流)、原子間作用力、磁力、
摩擦力等,
并在計算機顯示出來,從而反映出樣品表面形貌信息、電特
性或磁特性等。
?裝置:掃描的正電陶瓷,逼近裝置,電子學(xué)反饋控制系統(tǒng)和數(shù)據(jù)
采集、處理、顯示系統(tǒng)。
?特點:(1)可對晶體或非晶體成像,無需復(fù)雜計算,且分辨本
領(lǐng)高。
(側(cè)分辨率為0.1?o.2nm,縱分辨率可達0.Olnm);
(2)可實時得到樣品表面三維圖象,可測量厚度信息;
(3)可在真空、大氣、液體等多種條件下工作;非破壞
性測量。
(4)可連續(xù)成像,進行動態(tài)觀察
?用途:納米生物學(xué)研究領(lǐng)域中的重要工具,在原子水平上揭示樣
本表面的結(jié)構(gòu)。
普通復(fù)式光學(xué)顯微鏡技術(shù)
光鏡樣本制作
分辨率是指區(qū)分開兩個質(zhì)點間的最小距離
熒光顯微鏡技術(shù)(FluorescenceMicroscopy)
?原理與應(yīng)用
?直接熒光標記技術(shù)
?間接免疫熒光標記技術(shù)
?在光鏡水平用于特異蛋白質(zhì)
等生物大分子的定性定位:
如綠色熒光蛋白(GFP)的應(yīng)用
激光共焦掃描顯微鏡技術(shù)
(LaserScanningConfocalMicroscopy)
?原理
?應(yīng)用:
排除焦平面以外光的干擾,增強
圖像反差和提高分辨率(1.4—1.7),
可重構(gòu)樣品的三維結(jié)構(gòu)。
?相差顯微鏡(phase-contrastmicroscope)
將光程差或相位差轉(zhuǎn)換成振幅差,可用于觀察活細胞
?微分干涉顯微鏡(differential-interferencemicroscope)
偏振光經(jīng)合成后,使樣品中厚度上的微小區(qū)別轉(zhuǎn)化成
明暗區(qū)別,增加了樣品反差且具有立體感。適于研究
活細胞中較大的細胞器
?錄像增差顯微鏡技術(shù)(video-enhancemicroscopy)
計算機輔助的DIC顯微鏡可在高分辨率
下研究活
細胞中的顆粒及細胞器的運動
電鏡與光鏡的比較
主要電鏡制樣技術(shù)
?超薄切片技術(shù)用于電鏡觀察的樣本制備示意圖
?負染色技術(shù)(Negativestaining)與金屬投影
染色背景,襯托出樣品的精細結(jié)構(gòu)
?冰凍蝕刻技術(shù)(Freezeetching)(技術(shù)示意圖)
冰凍斷裂與蝕刻復(fù)型:主要用來觀察膜斷裂面的蛋白質(zhì)
顆粒
和膜表面結(jié)構(gòu)。
快速冷凍深度蝕刻技術(shù)(quickfreezedeepetching)
?電鏡三維重構(gòu)技術(shù)
電與顯微術(shù)、電子衍射與計算機圖象處理相結(jié)合而形成的
具有重要應(yīng)用前景的一門新技術(shù)。
電鏡三維重構(gòu)技術(shù)與X-射線晶體衍射技術(shù)及核磁共振
分析技術(shù)相結(jié)合,是當前結(jié)構(gòu)生物學(xué)(StructuralBiology)
—主要研究生物大分子空間結(jié)構(gòu)及其相互關(guān)系的主要實驗手
段。
掃描電鏡
?原理與應(yīng)用:
?電子''探針"掃描,激發(fā)樣品表面放出二次電子,探測器收集二次電子
成象。
?CO2臨界點干燥法防止引起樣品變形的表面張
力問題
一、離心分離技術(shù)
?用途:于分離細胞器與生物大分子及其復(fù)合物
?差速離心:分離密度不同的細胞組分
?密度梯度離心:精細組分或生物大分子的分離
二、細胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、
酶、糖與脂類等的顯示方法
?原理:利用一些顯色劑與所檢測物質(zhì)中一些
特殊基團特異性結(jié)合的特征,通過顯
色劑在細胞中的定位及顏色的深淺來
判斷某種物質(zhì)在細胞中的分布和含量。
FeulgenStaining
三、特異蛋白抗原的定位與定性
?免疫酶標技術(shù)
?免疫膠體金?免疫熒光技術(shù):
快速、靈敏、有特異性,但其分辨率有限(圖)
?蛋白電泳(SDS-PAGE)
與免疫印跡反應(yīng)(Western-Blot)
?免疫電鏡技術(shù):
?免疫鐵蛋白技術(shù)
技術(shù)
應(yīng)用:通過對分泌蛋白的定位,可以確定某種蛋白的分泌動態(tài);
胞內(nèi)酶的研究;膜蛋白的定位與骨架蛋白的定位等
四、細胞內(nèi)特異核酸的定位與定性
?光鏡水平的原位雜交技術(shù)
(同位素標記或熒光素標記的探針)
?電鏡水平的原位雜交技術(shù)
(生物素標記的探針與抗生物素抗體相連的膠體金標記結(jié)合)
?PCR技術(shù)
五、放射自顯影技術(shù)
?原理及應(yīng)用:
?利用同位素的放射自顯影,對細胞內(nèi)生物大分子進行定
性、定位與半定量研究;
?實現(xiàn)對細胞內(nèi)生物大分子進行動態(tài)和追蹤研究。
?步驟:
?前體物摻入細胞(標記:持續(xù)標記和脈沖標記)
放射自顯影
六.定量細胞化學(xué)分析技術(shù)
?細胞顯微分光光度術(shù)(Microspectrophotometry)
?利用細胞內(nèi)某些物質(zhì)對特異光譜的吸收,測定這些物質(zhì)
(如核酸與蛋白質(zhì)等)在細胞內(nèi)的含量。
包括:
紫外光顯微分光光度測定法
可見光顯微分光光度測定法
?流式細胞儀(FlowCytometry)
?主要應(yīng)用:
用于定量測定細胞中的DNA、RNA或某一特異蛋白的含量;
測定細胞群體中不同時相細胞的數(shù)量;
從細胞群體中分離某些特異染色的細胞;
分離DNA含量不同的中期染色體o
一、細胞的培養(yǎng)
?動物細胞培養(yǎng)
?類型:原代培養(yǎng)細胞(primaryculturecell)
繼代培養(yǎng)細胞(sub-culturecell)
?細胞株(cellstrain)正常二倍體,接觸抑制
?細胞系(cellline)亞二倍體,接觸抑制喪失
?植物細胞
?類型:原生質(zhì)體培養(yǎng)(體細胞培養(yǎng))
單倍體細胞培養(yǎng)(花藥培養(yǎng))
?非細胞體系(cell-freesystem)
二、細胞工程
?細胞融合(cellfusion)與細胞雜交(cellhybridization)技術(shù)
?單克隆抗體(monocloneantibody)技術(shù)圖
?細胞拆合與顯微操作技術(shù)
?物理法結(jié)合顯微操作技術(shù)(圖1、圖2)
?化學(xué)法結(jié)合離心技術(shù)
?制備核體(karyoplast)和胞質(zhì)體(cytoplast)。
?其它技術(shù)
遺傳分析(mutant,knockout,knockin)
對細胞生命活動的研究成為當今生命科學(xué)發(fā)展的瓶頸
對細胞生命活動的研究成為當今生命科學(xué)發(fā)展的瓶頸
第四章細胞質(zhì)膜與細胞表面
?細胞質(zhì)膜與細胞表面特化結(jié)構(gòu)
?細胞連接
?細胞外被與細胞外基質(zhì)
第一節(jié)細胞質(zhì)膜與細胞表面特化結(jié)構(gòu)
細胞質(zhì)膜(plasmamembrane),又稱細胞膜(cel1membrane)0
細胞內(nèi)膜(intracellularmembrane);生物膜(biomembrane)
?細胞質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)模型
?膜脂一生物膜的基本組成成分
?膜蛋白
?確定膜蛋白方向的實驗程序
?光脫色恢復(fù)技術(shù)
?分子生物學(xué)技術(shù)在膜蛋白研究上的應(yīng)用
?生物膜結(jié)構(gòu)特征
?細胞質(zhì)膜的功能
?膜骨架與細胞表面的特化結(jié)構(gòu)
第二節(jié)細胞連接
?細胞連接的功能分類
?封閉連接
?錨定連接
?通訊連接
?細胞表面的粘連分子
一、胞質(zhì)膜的結(jié)構(gòu)模型
?研究簡史
?結(jié)構(gòu)模型
?生物膜結(jié)構(gòu)
結(jié)構(gòu)模型
?E.Gorter和F.Grendel(1925):
'、蛋白質(zhì)-脂類-蛋白質(zhì)〃三夾板質(zhì)膜結(jié)構(gòu)模型
?J.D.Robertson(1959年):
單位膜模型(unitmembranemodel)
?S.J.Singer和G.Nicolson(1972):
生物膜的流動鑲嵌模型(fluidmosaicmodel)
?K.Simonsetal(1997):脂筏模型(lipidraftsmodel)
FunctionalraftsinCel1membranes.Nature387:569-572
生物膜結(jié)構(gòu)
?磷脂雙分子層是組成生物膜的基本結(jié)構(gòu)成分,
尚未發(fā)現(xiàn)膜結(jié)構(gòu)中起組織作用的蛋白;
?蛋白分子以不同方式鑲嵌在脂雙層分子中或結(jié)合在其表面,膜
蛋白是賦予生物膜功能的主要決定者;
?生物膜是磷脂雙分子層嵌有蛋白質(zhì)的二維流體。
“Centraldogma“ofmembranebiology
膜的流動性
?膜脂的流動性
膜脂的流動性主要由脂分子本身的性質(zhì)決定的,脂肪酸鏈越短,
不飽和程度越高,膜脂的流動性越大。溫度對膜脂的運動有明顯的影
響。在細菌和動物細胞中常通過增加不飽和脂肪酸的含量來調(diào)節(jié)膜
脂的相變溫度以維持膜脂的流動性。在動物細胞中,膽固醉對膜的
流動性起重要的雙向調(diào)節(jié)作用。
◎膜蛋白的流動
熒光抗體免疫標記實驗
成斑現(xiàn)象(patching)或成帽現(xiàn)象(capping)
令膜的流動性受多種因素影響;細胞骨架不但影響膜蛋白的運動,
也影響其周圍的膜脂的流動。膜蛋白與膜脂分子的相互作用也是
影響膜流動性的重要因素
膜的不對稱性
?細胞質(zhì)膜各部分的名稱
?膜脂與糖脂的不對稱性
糖脂僅存在于質(zhì)膜的ES面,是完成其生理功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)
。膜蛋白與糖蛋白的不對稱性
膜蛋白的不對稱性是指每種膜蛋白分子在細胞膜上都
具有明確的方向性;
3
糖蛋白糖殘基均分布在質(zhì)膜的ES面(G0+HBH4labeling);
膜蛋白的不對稱性是生物膜完成復(fù)雜的在時間與空間上
有序的各種生理功能的保證。
二、膜脂一生物膜的基本組成成分
?成分:膜脂主要包括磷脂、糖脂和膽固醇三種類型。
?膜脂的4種熱運動方式
?脂質(zhì)體(liposome)
膜脂成分
?磷脂:膜脂的基本成分(50%以上)
⑥分為二類:甘油磷脂和鞘磷脂
令主要特征:①具有一個極性頭和兩個非極性的尾(脂肪酸鏈)
(心磷脂除外);②脂肪酸碳鏈碳原子為偶數(shù),多數(shù)碳鏈由
16,18或20個組成;③飽和脂肪酸(如軟脂酸)及不飽和脂肪
酸(如油酸);
?糖脂:糖脂普遍存在于原核和真核細胞的質(zhì)膜上(5%以下),神經(jīng)細胞糖脂含量較高;
?膽固醇:膽固醇存在于真核細胞膜上(30%以下),細菌質(zhì)膜不含有膽固醇,但某些細
菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂類。
運動方式
?沿膜平面的側(cè)向運動(基本運動方式),其擴散系數(shù)為10%m2/s;
?脂分子圍繞軸心的自旋運動;
?脂分子尾部的擺動;
?雙層脂分子之間的翻轉(zhuǎn)運動,發(fā)生頻率還不到脂分子側(cè)向交換頻率的10"。但在
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上,新合成的磷脂分子翻轉(zhuǎn)運動發(fā)生頻率很高。
脂質(zhì)體(liposome)
脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的趨勢而制備的人工
膜。
?脂質(zhì)體的類型。
?脂質(zhì)體的應(yīng)用
脂質(zhì)體的應(yīng)用
。研究膜脂與膜蛋白及其生物學(xué)性質(zhì);
。脂質(zhì)體中裹入DNA可用于基因轉(zhuǎn)移;
?在臨床治療中,脂質(zhì)體作為藥物或酶等載體
三、膜蛋白
?基本類型
?內(nèi)在膜蛋白與膜脂結(jié)合的方式
?外在膜蛋白與膜脂結(jié)合的方式
?去垢劑(detergent)
?外在(外周)膜蛋白
(extrinsic/peripheralmembraneproteins);
令水溶性蛋白,靠離子鍵或其它弱鍵與膜內(nèi)表
面的蛋白質(zhì)分子或脂分子極性頭部非共價結(jié)合,
易分離。
?內(nèi)在(整合)膜蛋白
(intrinsic/integralmembraneproteins)o
?水不溶性蛋白,形成跨膜螺旋,與膜結(jié)合緊密,
需用去垢劑使膜崩解后才可分離。
?脂質(zhì)錨定蛋白(lipid-anchoredproteins)
令通過磷脂或脂肪酸錨定,共價結(jié)合。
?膜蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)域與脂雙層分子的疏水核心的相互作用o
?跨膜結(jié)構(gòu)域兩端攜帶正電荷的氨基酸殘基與磷脂分子帶
負電的極性頭形成離子鍵,或帶負電的氨基酸殘基通過
Ca2\Mg?,等陽離子與帶負電的磷脂極性頭相互作用。
?某些膜蛋白在細胞質(zhì)基質(zhì)一側(cè)的半胱氨酸殘基上共價結(jié)
合脂肪酸分子,插入脂雙層之間,進一步加強膜蛋白與脂
雙層的結(jié)合力,還有少數(shù)蛋白與糖脂共價結(jié)合。
?去垢劑是一端親水、另一端疏水的兩性小分子,是分離與研究
膜蛋白的常用試劑。
?離子型去垢劑(SDS)和非離子型去垢劑(TritonX-100)
+
SDS:CH3-(CH2)H-0S03-Na
CH3CH3
CH3-C-CH2-C-(O-CH2-CH2)IO-OH
CH3CH3
四、確定膜蛋白方向的實驗程序
?胰酶消化法
?同位素標記法
五、光脫色恢復(fù)技術(shù)
(fluorescencerecoveryafterphotobleaching,FRAP)
?研究膜蛋白或膜脂流動性的基本實驗技術(shù)之一。
?程序:
根據(jù)熒光恢復(fù)的速度可推算出
膜蛋白或膜脂擴散速度。
?膜的流動性:生物膜的基本特征之一,
細胞進行生命活動的必要條件。
?膜的不對稱性
?膜的分相現(xiàn)象。
七、細胞質(zhì)膜的功能
?為細胞的生命活動提供相對穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境;
?選擇性的物質(zhì)運輸,包括代謝底物的輸入與代謝
產(chǎn)物的排除,其中伴隨著能量的傳遞;
?提供細胞識別位點,并完成細胞內(nèi)外信息跨膜傳遞;
?為多種酶提供結(jié)合位點,使酶促反應(yīng)高效而有序地進行;
?介導(dǎo)細胞與細胞、細胞與基質(zhì)之間的連接;
?質(zhì)膜參與形成具有不同功能的細胞表面特化結(jié)構(gòu)。
八、膜骨架與細胞表面的特化結(jié)構(gòu)
細胞質(zhì)膜常常與膜下結(jié)構(gòu)(主要是細胞骨架系統(tǒng))相互聯(lián)系,
協(xié)同作用,并形成細胞表面的某些特化結(jié)構(gòu)以完成特定的功能。
?膜骨架
?膜骨架的概念
。指細胞質(zhì)膜下與膜蛋白相連的山纖維蛋白組成的網(wǎng)架結(jié)構(gòu),
它參與維持細胞質(zhì)膜的形狀并協(xié)助質(zhì)膜完成多種生理功能。
?紅細胞的生物學(xué)特性
?膜骨架賦予紅細胞質(zhì)膜既有很好的彈性又具有較高強度。
?紅細胞質(zhì)膜蛋白及膜骨架
紅細胞質(zhì)膜蛋白及膜骨架
?紅細胞質(zhì)膜蛋白的SDS
?紅細胞膜骨架的結(jié)構(gòu)
一、細胞連接的功能分類
?封閉連接(occludingjunctions)
?緊密連接(tightjunction)
?錨定連接(anchoringjunctions)
?通訊連接(communicatingjunctions)
?間隙連接(gapjunction);
?神經(jīng)細胞間的化學(xué)突觸(chemicalsynapse);
?植物細胞中的胞間連絲(plasmodesmata)。
錨定連接(anchoringjunctions)
?與中間纖維相關(guān)的錨定連接:
。橋粒(desmosome)
◎半橋粒(hemidesmosome);
?與肌動蛋白纖維相關(guān)的錨定連接:
。粘合帶(adhesionbelt);
?粘合斑(focaladhesion)
二、封閉連接
?緊密連接是封閉連接的主要形式,存在于上皮細胞之間
?緊密連接的結(jié)構(gòu)
?緊密連接的功能
?形成滲漏屏障,起重要的封閉作用;
?隔離作用,使游離端與基底面質(zhì)膜上的膜蛋白行使各自不同的膜功能;
?支持功能
?緊密連接崎線中的兩類蛋白:
?封閉蛋白(occludin),跨膜四次的膜蛋白(60KD);
?claudin蛋白家族(現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)15種以上)
三、錨定連接
?錨定連接在組織內(nèi)分布很廣泛,在上皮組織,心肌和子宮頸等組織中
含量尤為豐富
?錨定連接的類型、結(jié)構(gòu)與功能
?錨定連接的結(jié)構(gòu)組成
錨定連接的類型、結(jié)構(gòu)與功能
?與中間纖維相連的錨定連接
令橋粒:硼接相鄰細胞,提供細胞內(nèi)中間纖維的錨定位點,形成整體網(wǎng)絡(luò),起支持和抵抗外界
壓力與張力的作用。
令半橋粒:半橋粒與橋粒形態(tài)類似,但功能和化學(xué)組成不同。它通過細胞質(zhì)膜上的膜蛋白整合
素將上皮細胞固著在基底膜上,在半橋粒中,中間纖維不是穿過而是終止于半橋粒的致密斑內(nèi)。
?與肌動蛋白纖維相連的錨定連接
令粘合帶:
I?OU^6AUA-'^6iA?laAUI,°u^aD13E0?,oA-'DopA0x'/a】1j£^ai56^15i?20nm,623JEZ0XZQAA£
(beltdesmosome)\£
令63OfOB:細胞通過肌動蛋白纖維和整連蛋白與細胞外基質(zhì)之間的連接方式。
錨定連接的結(jié)構(gòu)組成
?通過錨定連接將相鄰細胞的骨架系統(tǒng)或?qū)⒓毎c基質(zhì)相連形
成一個堅挺、有序的細胞群體。錨定連接具有兩種不同形式:
?與中間纖維相連的錨定連接主要包括橋粒和半橋粒;
?與肌動蛋白纖維相連的錨定連接主要包括粘合帶與粘合斑。
?構(gòu)成錨定連接的蛋白可分成兩類:
?細胞內(nèi)附著蛋白(attachmentproteins),將特定的細胞骨架成分
(中間纖維或微絲)同連接復(fù)合體結(jié)合在一起(desmoplakin)
?跨膜連接的糖蛋白,其細胞內(nèi)的部分與附著蛋白相連,細胞
外的部分與相鄰細胞的跨膜連接糖蛋白相互作用或與胞外
基質(zhì)相互作用。(desmoglein,desmocollin)
四、通訊連接
?間隙連接:分布廣泛,兒乎所有的動物
組織中都存在間隙連接。
?神經(jīng)細胞間的化學(xué)突觸
?存在于可興奮細胞之間的細胞連接方式,
它通過釋放神經(jīng)遞質(zhì)來傳導(dǎo)神經(jīng)沖動。
?胞間連絲:高等植物細胞之間通過胞間
連絲相互連接,完成細胞間的通訊聯(lián)絡(luò)。
?胞間連絲結(jié)構(gòu)
?胞間連絲的功能
間隙連接
?間隙連接結(jié)構(gòu)
?間隙連接的蛋白成分
?間隙連接的功能及其調(diào)節(jié)機制
?間隙連接的通透性是可以調(diào)節(jié)的
間隙連接結(jié)構(gòu)
令間隙連接處相鄰細胞質(zhì)膜間的間隙為2?3nm。
令連接子(connexon)是間隙連接的基本單位。
每個連接子由6個connexin分子組成。
連接子中心形成一個直徑約1.5nm的孔道。
◎連接單位由兩個連接子對接構(gòu)成。
間隙連接的蛋白成分
令已分離20余種構(gòu)成連接子的蛋白,屬同一蛋白家族,
其分子量26—60KD不等;
令連接子蛋白具有4個a-螺旋的跨膜區(qū),是該蛋白家
族最保守的區(qū)域。
令連接子蛋白的一級結(jié)構(gòu)都比較保守,并有相似的抗原性。
令不同類型細胞表達不同的連接子蛋白,間隙連接的孔
徑與調(diào)控機制有所不同。
間隙連接的功能及其調(diào)節(jié)機制
令間隙連接在代謝偶聯(lián)中的作用
?間隙連接允許小分子代謝物和信號分子通過,是細胞間代謝
偶聯(lián)的基礎(chǔ)
?代謝偶聯(lián)現(xiàn)象在體外培養(yǎng)細胞中的證實
?代謝偶聯(lián)作用在協(xié)調(diào)細胞群體的生物學(xué)功能方面起重要作用.
令間隙連接在神經(jīng)沖動信息傳遞過程中的作用
?電突觸(electronicjunction)快速實現(xiàn)細胞間信號通訊
?間隙連接調(diào)節(jié)和修飾相互獨立的神經(jīng)元群的行為
令間隙連接在早期胚胎發(fā)育和細胞分化過程中的作用
?胚胎發(fā)育中細胞間的偶聯(lián)提供信號物質(zhì)的通路,從而為某一
特定細胞提供它的''位置信息”,并根據(jù)其位置影響其分化。
?腫瘤細胞之間間隙的連接明顯減少或消失,間隙聯(lián)接類似
''腫瘤抑制因子”。
間隙連接的通透性是可以調(diào)節(jié)的
令降低胞質(zhì)中的pH值和提高自由Ca2+的濃度
都可以使其通透性降低
令間隙連接的通透性受兩側(cè)電壓梯度的調(diào)
控及細胞外化學(xué)信號的調(diào)控
胞間連絲
?胞間連絲結(jié)構(gòu)
相鄰細胞質(zhì)膜共同構(gòu)成的直徑20-40nm的管狀結(jié)構(gòu)
?胞間連絲的功能
令實現(xiàn)細胞間由信號介導(dǎo)的物質(zhì)有擇性的轉(zhuǎn)運;
◎?qū)崿F(xiàn)細胞間的電傳導(dǎo);
◎在發(fā)育過程中,胞間連絲結(jié)構(gòu)的改變可以調(diào)節(jié)
植物細胞間的物質(zhì)運輸。
五、細胞表面的粘連分子
同種類型細胞間的彼此粘連是許多組織結(jié)構(gòu)的基本特征。細胞與細胞間的
粘連是由特定的細胞粘連分子所介導(dǎo)的。
?粘連分子的特征與類型
?粘連分子均為整合膜蛋白,在胞內(nèi)與
細胞骨架成分相連;
?多數(shù)要依賴Ca?+或Mg2+才起作用。
?粘連分子類型及細胞間粘著方式
。類型
,粘著方式
類型
?鈣粘素(Cadherins)
?選擇素(Selectin)
?免疫球蛋白超家族的CAM(Ig-Superfamily,IgSF)
?整合素(Integrins)
?質(zhì)膜整合蛋白聚糖也介導(dǎo)細胞間的粘著。
Cadherins:
屬同親性依賴Ca2+的細胞粘連糖蛋白,介導(dǎo)依賴Ca2+的細胞粘著和從ECM
到細胞質(zhì)傳遞信號。對胚胎發(fā)育中的細胞識別、遷移和組織分化以及成體組織器
官構(gòu)成具有主要作用。(30多個成員的糖蛋白家族)
E-Cadherins(epithelial),
N-Cadherins(neural),
P-Cadherins(placental),
橋粒鈣粘素。
Selectin:
屬異親性依賴于Ca2+的能與特異糖基識
別并相結(jié)合的糖蛋白,其胞外部分具有凝
集素樣結(jié)構(gòu)域(lectin-likedomain)o
主要參與白細胞與脈管內(nèi)皮細胞之間的
識別與粘著。
P(Platelet)選擇素、E(Endothelial)選擇素
和L(Leukocyte)選擇素。
Ig-Superfamily,IgSF:
分子結(jié)構(gòu)中具有與免疫球蛋白類似的結(jié)構(gòu)域的CAM超家
族。介導(dǎo)同親性細胞粘著或介導(dǎo)異親性細胞粘著,但其粘著作
用不依賴Ca2+,其中N-CAMs在神經(jīng)組織細胞間的粘著中起
主要作用。
粘著方式
?細胞中主要的粘連分子家族
?與細胞錨定連接相關(guān)的粘連分子
?非錨定連接(nonjunctionaladhesion)的細胞粘連分子及其作用部位
與細胞錨定連接相關(guān)的粘連分子
第三節(jié)細胞外被與細胞外基質(zhì)
?基本概念
?膠原(collagen)
?氨基聚糖和蛋白聚糖
?層粘連蛋白和纖粘連蛋白
?彈性蛋白(elastin)
?植物細胞壁
一、基本概念
?細胞外被(cellcoat)又稱糖萼(glycocalyx)
?細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)
?真核細胞的細胞外結(jié)構(gòu)(extracellularstructures)
二、膠原(collagen)
?膠原是胞外基質(zhì)最基本結(jié)構(gòu)成份之一,
動物體內(nèi)含量最豐富的蛋白(總量的
30%以上)。
?常見的膠原類型及其在組織中的分布
?膠原及其分子結(jié)構(gòu)
?膠原的合成與加工
?膠原的功能
三、氨基聚糖和蛋白聚糖
?氨基聚糖(glycosaminoglycan,GAGs)
?蛋白聚糖(proteoglycan)
四、層粘連蛋白和纖粘連蛋白
?層粘連蛋白(laminin)
?纖粘連蛋白(fibronectin)
五、彈性蛋白(elastin)
?彈性蛋白是彈性纖維的主要成分;主要
存在于脈管壁及肺。
?彈性纖維與膠原纖維共同存在,分別賦予
組織以彈性及抗張性。
?彈性蛋白是高度疏水的非糖基化蛋白,具
有兩個明顯的特征:
⑥構(gòu)象呈無規(guī)則卷曲狀態(tài);
令通過Lys殘基相互交連成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
六、植物細胞壁
?植物細胞壁的組成
?植物細胞壁的功能
?增加細胞強度,提供支持功能;
?信息儲存庫的功能:產(chǎn)生多種寡糖
素作為信號物質(zhì),或抵抗病、蟲害,
或作為細胞生長和發(fā)育的信號物質(zhì)。
細胞夕卜基質(zhì)(extracellularmatrix)
?結(jié)構(gòu)組成:
指分布于細胞外空間,由細胞分泌的蛋白和多糖所構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)
?主要功能:
令構(gòu)成支持細胞的框架,負責(zé)組織的構(gòu)建;
令胞外基質(zhì)三維結(jié)構(gòu)及成份的變化,改變細
胞微環(huán)境從而對細胞形態(tài)、生長、分裂、
分化和凋亡起重要的調(diào)控作用。
令胞外基質(zhì)的信號功能
細胞外被(cellcoat)又稱糖萼(glycocalyx)
?結(jié)構(gòu)組成:
指細胞質(zhì)膜外表面覆蓋的一層粘多糖物質(zhì),實際指細胞表面與
質(zhì)膜中的蛋白或脂類分子共價結(jié)合的寡糖鏈。
?功能:
不僅對膜蛋白起保護作用,而且在細胞識別中起重要作用。
真核細胞的細胞外結(jié)構(gòu)(extracellularstructures)
常見的膠原類型及其在組織中的分布
?膠原是細胞外基質(zhì)中最主要的水不溶性纖維蛋白;
?I?HI型膠原含量最豐富,形成類似的纖維結(jié)構(gòu);
但并非所有膠原都形成纖維;
令I(lǐng)型膠原纖維束,主要分布于皮膚、肌腱、
韌帶及骨中,具有很強的抗張強度;
令I(lǐng)I型膠原主要存在于軟骨中;
令皿型膠原形成微細的原纖維網(wǎng),廣泛分布于
伸展性的組織,如疏松結(jié)締組織;
◎IV型膠原形成二維網(wǎng)格樣結(jié)構(gòu),是基膜的主要
成分及支架。
膠原及其分子結(jié)構(gòu)
?膠原纖維的基本結(jié)構(gòu)單位是原膠原;
?原膠原是由三條肽鏈盤繞成的三股螺旋結(jié)構(gòu);
?原膠原肽鏈具有Gly-x-y重復(fù)序列,對膠原纖
維的高級結(jié)構(gòu)的形成是重要的;
?在膠原纖維內(nèi)部,原膠原蛋白分子呈1/4交替平
行排列,形成周期性橫紋。
膠原的合成與加工
?前體a肽鏈在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成,并形成前原膠原(preprocollagen);
令前原膠原(preprocollagen)是原膠原的前體
和分泌形式,
◎在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成、加工與組裝,
經(jīng)高爾基體分泌;
?前原膠原在細胞外由兩種專一性不同的蛋白水解酶
作用,分別切去N-末端前肽及C-末端前肽,成為原膠
原(procollagen);
?原膠原進而聚合裝配成膠原原纖維(collagenfibril)
和膠原纖維(collagenfiber)。
膠原的功能
?膠原在胞外基質(zhì)中含量最高,剛性及抗張力強度最
大,構(gòu)成細胞外基質(zhì)的骨架結(jié)構(gòu),細胞外基質(zhì)中的其
它組分通過與膠原結(jié)合形成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體
?在不同組織中,膠原組裝成不同的纖維形式,以適
應(yīng)特定功能的需要;
?膠原可被膠原酶特異降解,而參入胞外基質(zhì)信號
傳遞的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中。
氨基聚糖
?氨基聚糖是由重復(fù)的二糖單位構(gòu)成的長鏈多糖
令二糖單位之一是氨基己糖
(氨基葡萄糖或氨基半乳糖)+糖醛酸;
令氨基聚糖:透明質(zhì)酸、4-硫酸軟骨素、6-硫酸軟骨素、
硫酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、肝素和硫酸角質(zhì)素等。
?透明質(zhì)酸(hyaluronicacid)及其生物學(xué)功能
令透明質(zhì)酸是增殖細胞和遷移細胞的胞外基質(zhì)主要成
分,也是蛋白聚糖的主要結(jié)構(gòu)組分
令透明質(zhì)酸在結(jié)締組織中起強化、彈性和潤滑作用
令透明質(zhì)酸使細胞保持彼此分離,使細胞易于運動遷
移和增殖并阻止細胞分化
蛋白聚糖
?蛋白聚糖見于所有結(jié)締組織和細胞外基質(zhì)及許多細胞表面
?蛋白聚糖由氨基聚糖與核心蛋白(coreprotein)的絲氨酸殘
基共價連接形成的巨分子
?若干蛋白聚糖單體借連接蛋白以非共價鍵與透明質(zhì)酸結(jié)合
形成多聚體
?蛋白聚糖的特性與功能
令顯著特點是多態(tài)性:不同的核心蛋白,不同的氨基聚糖;
令軟骨中的蛋白聚糖是最大巨分子之一,賦予軟骨以凝
膠樣特性和抗變形能力;
?蛋白聚糖可視為細胞外的激素富集與儲存庫,可與多
種生長因子結(jié)合,完成信號的傳導(dǎo)。
層粘連蛋白(laminin)
?層粘連蛋白是高分子糖蛋白(820KD),動物胚胎
及成體組織的基膜的主要結(jié)構(gòu)組分之一;
?層粘連蛋白的結(jié)構(gòu)由一條重鏈和兩條輕鏈構(gòu)成
?細胞通過層粘連蛋白錨定于基膜上;
?層粘連蛋白中至少存在兩個不同的受體結(jié)合部位:
?與IV型膠原的結(jié)合部位;
?與細胞質(zhì)膜上的整合素結(jié)合的
Arg-Gly-Asp(R-G-D)序列。
?層粘連蛋白在胚胎發(fā)育及組織分化中具有重要作用;
層粘連蛋白也與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移有關(guān)。
纖粘連蛋白(fibronectin)
?纖粘連蛋白是高分子量糖蛋白(220-250KD)
?纖粘連蛋白分型:
?纖粘連蛋白的主要功能:
令介導(dǎo)細胞粘著,進而調(diào)節(jié)細胞的形狀和細胞骨
架的組織,促進細胞鋪展;
令在胚胎發(fā)生過程中,纖粘連蛋白對于許多類型細
胞的遷移和分化是必須的;
令在創(chuàng)傷修復(fù)中,纖粘連蛋白促進巨噬細胞和其它
免疫細胞遷移到受損部位;
令在血凝塊形成中,纖粘連蛋白促進血小板附著于
血管受損部位。
◎血漿纖粘連蛋白是二聚體,由兩條相似的A鏈及
鏈組成,整個分子呈V形。
令細胞纖粘連蛋白是多聚體。
令纖粘連蛋白不同的亞單位為同一基因的表達產(chǎn)
物,每個亞單位由數(shù)個結(jié)構(gòu)域構(gòu)成,RGD三肽
序列是為細胞識別的最小結(jié)構(gòu)單位
◎纖粘連蛋白的膜蛋白受體為整合素家族成員之
一,在其細胞外功能區(qū)有與RGD高親和性結(jié)合部位。
植物細胞壁的組成
?纖維素分子》纖維素微原纖維(microfibril),
令為細胞壁提供了抗張強度
?半纖維素(hemicellulose):木糖、半乳糖和葡萄糖
等組成的高度分支的多糖
。介導(dǎo)微原纖維連接彼此連接或介導(dǎo)微原纖維與其
它基質(zhì)成分(果膠質(zhì))連接
?果膠質(zhì)(peclin):含有大量攜帶負電荷的糖,結(jié)合
Ca?+等陽離子,被高度水化形成凝膠
?果膠質(zhì)與半纖維素橫向連接,參與細胞壁復(fù)雜網(wǎng)架的形成。
?伸展蛋白(extensin):糖蛋白,在初生壁中含量可多達15%,
糖的總量約占65%。
?木質(zhì)素(lignin):由酚殘基形成的水不溶性多聚體。
◎參與次生壁形成,并以共價鍵與細胞壁多糖交聯(lián),大大增
加了細胞壁的強度與抗降解
第五章物質(zhì)的跨膜運輸與信號傳遞
?物質(zhì)的跨膜運輸
?細胞通訊與信號傳遞
第一節(jié)物質(zhì)的跨膜運輸
?被動運輸(passivetransport)
?主動運輸(activetransport)
?胞吞作用(endocytosis)與胞吐作用(exocytosis)
第二節(jié)細胞通訊與信號傳遞
?細胞通訊與細胞識別
?細胞的信號分子與受體
?通過細胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信號傳遞
?通過細胞表面受體介導(dǎo)的信號跨膜傳遞
?由細胞表面整合蛋白介導(dǎo)的信號傳遞
?細胞信號傳遞的基本特征與蛋白激酶的網(wǎng)絡(luò)整合信息
被動運輸(passivetransport)
?特點:運輸方向、跨膜動力、能量消耗、膜轉(zhuǎn)運蛋白
?類型:簡單擴散(simplediffusion)、協(xié)助擴散(facilitateddiffusion)
?膜轉(zhuǎn)運蛋白:
?載體蛋白(carrierproteins)通透酶(permease)性質(zhì);
介導(dǎo)被動運輸與主動運輸。
◎通道蛋白(channelproteins)具有離子選擇性,轉(zhuǎn)運速率高:
離子通道是門控的;只介導(dǎo)被動運輸
類型:電壓門通道(vollage-gatedchannel)
配體門通道(ligand-gatedchannel)
壓力激活通道(stress-activatedchannel)
主動運輸(activetransport)
?特點:運輸方向、能量消耗、膜轉(zhuǎn)運蛋白
被動與主動運輸?shù)谋容^
?類型:三種基本類型
?由ATP直接提供能量的主動運輸一
?鈉鉀泵(結(jié)構(gòu)與機制)
。鈣泵(Ca2+-ATP酶)
◎質(zhì)子泵:P-型色子泵、V-型質(zhì)子泵、『ATP酶
?協(xié)同運輸(cotransport)
由Na+-K+泵(或卬-泵)與載體蛋白協(xié)同作用,
靠間接消耗ATP所完成的主動運輸方式
?物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運與膜電位
胞吞作用(endocytosis)
與胞吐作用(exocytosis)
作用:完成大分子與顆粒性物質(zhì)的跨膜
運輸,又稱膜泡運輸或批量運f俞
(bulktransport),,屬于主動運輸。
?胞吞作用
?胞吐作用
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