熒光效率儀使用方法

熒光效率儀使用方法第一頁，共五十三頁，2022年，8月28日一、快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)曲線

1.簡介

將暗適應(yīng)的綠色植物或含有葉綠素的部分組織突然暴露在可見光下之后就會觀察到，植物綠色組織發(fā)出一種暗紅色，強度不斷變化的熒光，熒光隨時間變化的曲線稱為葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)曲線。第二頁，共五十三頁，2022年，8月28日O點J點I點P點第三頁，共五十三頁，2022年，8月28日植物發(fā)出的熒光強度隨時間而變化，在從暗適應(yīng)到暴露在光下時，熒光強度先上升然后下降。一般情況下，剛暴露在光下時的最低熒光定義為O點，熒光的最高峰定義為P點，快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)曲線指的就是從O點到P點的熒光變化過程，主要反映了PSII的原初光化學(xué)反應(yīng)及光合結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)和狀態(tài)等的變化，而下降的第四頁，共五十三頁，2022年，8月28日階段主要反映了光合碳代謝的變化，隨著光合碳代謝速率的上升，熒光強度逐漸下降（Krause和Weis，1991）。連續(xù)激發(fā)式熒光儀（如Handy-PEA

）主要是通過短時間照光后熒光信號的瞬時變化反映暗反應(yīng)活化前PSII的光化學(xué)變化，它具有相當(dāng)高的分辨率，所以能夠從O-P上升過程中捕捉到更多的熒光變化信第五頁，共五十三頁，2022年，8月28日息，如O-P變化過程中的另外兩個拐點（J點和I點）。從照光后的10μs到5min內(nèi)不同時間的熒光信號都能被按時記錄。在對快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)曲線作圖時，為了更好地觀察J點和I點，結(jié)果得到O-J-I-P誘導(dǎo)曲線。植物快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)曲線中包含著大量關(guān)于PSII反應(yīng)中心原初光化學(xué)反應(yīng)第六頁，共五十三頁，2022年，8月28日的信息（Forceetal，2003；Lazár，2006），通過對曲線熒光參數(shù)的分析，可以知道植物不同發(fā)育時期光合結(jié)構(gòu)的變化。為了能更好地反映動力學(xué)曲線和被測樣品材料的關(guān)系，Strasser和Strasser（1995）以生物膜能量流動為基礎(chǔ)，通過計算能量流和能量比率來衡量在給定物流狀態(tài)下樣品材料內(nèi)部變化，建立了高度簡

第七頁，共五十三頁，2022年，8月28日化的能量流動模型圖。依照能量流動模型，天線色素（Chl）吸收的能量（ABS）的一部分以熱能和熒光（F）的形式耗散掉，另一部分則被反應(yīng)中心（RC，在JIP-test中RC指有活性的反應(yīng)中心）所捕獲（TR），在反應(yīng)中心激發(fā)能被轉(zhuǎn)化為還原能，將QA還原成QA-，后者又可以被重新氧化，從而產(chǎn)生電子傳遞（ET），把傳遞

第八頁，共五十三頁，2022年，8月28日的電子用于固定CO2或其它途徑。在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來的數(shù)據(jù)處理稱為“JIP-test”。JIP-test為我們提供了被測樣品材料的大量信息?？焖偃~綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)曲線包含豐富和復(fù)雜的信息。第九頁，共五十三頁，2022年，8月28日二、Handy-PEA使用說明第十頁，共五十三頁，2022年，8月28日第十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日4.用配備的暗適應(yīng)夾，對葉片進(jìn)行充分的暗適應(yīng)。將葉片夾入暗適應(yīng)夾中，關(guān)閉適應(yīng)夾上的金屬遮光片，暗適應(yīng)10分鐘以上。第十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日5.將探頭置于暗適應(yīng)夾上的圓形槽之中，確保探頭與暗適應(yīng)夾緊密接觸，無光線進(jìn)入。用手按緊探頭與暗適應(yīng)夾，拉開適應(yīng)夾上的金屬遮光片。第十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日6.按下探頭一側(cè)的遙控按鈕，或從菜單中選擇測定功能進(jìn)行測定。7.待儀器測定完畢后（大約1秒），記錄測定數(shù)據(jù)的編號，然后點擊OK。使用上下光標(biāo)選擇是否保存數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)保存完畢點擊OK即可進(jìn)入下一次測定。第十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日三、數(shù)據(jù)傳輸與保存1.將儀器與計算機連接，點擊on/off打開儀器。2.雙擊打開數(shù)據(jù)傳輸軟件第十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日出現(xiàn)下圖第十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊圖片進(jìn)入第十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日從HPEA中傳出數(shù)據(jù)第十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日如果要輸入的數(shù)據(jù)是第100-200個，應(yīng)在Firstfile中輸入100，在Lastfile中輸入200，然后點擊Transfer。第十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日傳輸完畢，點擊“Close”第二十頁，共五十三頁，2022年，8月28日保存數(shù)據(jù)第二十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日保存文件，自定義文件名第二十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊OK，完成數(shù)據(jù)保存。在對話框中輸入描述數(shù)據(jù)的字符，字符不超過250個即可。第二十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日如何打開保存文件？打開傳輸軟件，點擊第二十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日在文件夾中找到目標(biāo)文件，打開即可第二十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊OK，即可打開文件查看數(shù)據(jù)。第二十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日四、BiolyzerHP3使用說明雙擊打開BiolyzerHP3分析軟件第二十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊close第二十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊圖片第二十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊第三十頁，共五十三頁，2022年，8月28日選擇文件第三十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日注意，此處可能出現(xiàn)錯誤！正確如下，可點擊“是”第三十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日錯誤如下，出現(xiàn)原因是：測定數(shù)據(jù)存在異常數(shù)值，在傳輸軟件HPEA中將異常數(shù)值刪除即可。第三十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日用HPEA傳輸軟件打開出現(xiàn)錯誤的文件，選中異常數(shù)值，右鍵點擊Cutselectedlines即可，然后再次保存數(shù)據(jù)。第三十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日打開文件后，點擊下圖中的“大腦”圖標(biāo)第三十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日工具欄功能增加，變?yōu)榈谌摚参迨摚?022年，8月28日選中待處理的數(shù)據(jù)第三十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日如果要保存數(shù)據(jù)，點擊“Tools”第三十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日出現(xiàn)下圖第三十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊上圖中的紅圈處的下拉箭頭，選擇“MS-ExcelFile”第四十頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊“YES”第四十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日選擇路徑，保存文件。用Excel可打開文件第四十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日如果想進(jìn)一步看數(shù)據(jù)之間的差異，選擇不同的模式處理你的數(shù)據(jù)，具體可供選擇的有如下紅色圓圈中的模式：第四十三頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊紅圈中的按鈕可看到O-J-I-P圖第四十四頁，共五十三頁，2022年，8月28日第四十五頁，共五十三頁，2022年，8月28日利用右上角“Plotsettings”可設(shè)定一些參數(shù)。第四十六頁，共五十三頁，2022年，8月28日如：X和Y軸范圍第四十七頁，共五十三頁，2022年，8月28日點擊紅圈中的圖標(biāo)第四十八頁，共五十三頁，2022年，8月28日可以做出下圖第四十九頁，共五十三頁，2022年，8月28日并得到大量數(shù)據(jù)第五十頁，共五十三頁，2022年，8月28日五、應(yīng)用實例李鵬民,高輝遠(yuǎn),RetoJ.Strasser(2005).快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)分析在光合作用研究中的應(yīng)用.植物生理學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)報,31(6):559-566(重點參閱此文)許珍,李鵬民,高輝遠(yuǎn),董樹亭,王空軍,張吉旺(2007).玉米不同朝向葉片原初光化學(xué)反應(yīng)日變化的差異.

作物學(xué)報,33(8):1375-1379孫山,王少敏,王家喜,高輝遠(yuǎn)(2008).黑暗中脫水對‘金太陽’杏離體葉片和功能的影響.園藝學(xué)報,35(1):1-6以上是一些中文應(yīng)用實例，可用于入門學(xué)習(xí)。更多應(yīng)用實例可根據(jù)需要自行查閱。第五十一頁，共五十三頁，2022年，8月28日結(jié)語以上是對熒光效率儀的簡單介紹，還有很多功能有待大家在使用過程中去開發(fā)和利用。由于它具有獲得信息量大、操作簡便、易于重復(fù)等特點，所以是深入研究光合作用原初反應(yīng)的一種有力而便捷的工具。第五十二頁，共五十三頁，2022年，8月28日參考文獻(xiàn)ForceL,CritchleyC,vanRensenJJS.2003.Newfluorescenceparametersformonitoringphotosynthesisinplants.PhotosynthRes,78:17~33KrauseGH,WeisE.1991.Chlorophyllfluorescenceandphotosynthesis:thebasics.AnnuRevPlantPhysiolPlantMolBiol,42:313~349LazárD.2006.Thepolyphasicchlorophyllafluorescencerisemeasuredunderhighintensityofexcitinglight.FunctionalPlantBiology,33:9~30StrasserBJ,StrasserRJ