能源化工管理化學化工分析辦法選擇

化學化工分析方法選擇-研發(fā)分析方法開發(fā)初探作者:金屬元素前言作為一名分析工作者來說,如何把工作做好有關(guān)氣相色譜(GC)和高效液相色譜(HPLC)以及化學分析(CA)的資料,書籍有很多很多,有關(guān)于分謝謝閱讀析方法選擇的知識也介紹了很多,其中很多內(nèi)容雖然很詳細,但我們在實踐中有時總是力不從心,究其原因是對儀器分析,化學分析綜合講述謝謝閱讀的文章或資料較少,感謝閱讀,希望能帶給很多人帶來幫助,感謝閱讀您可直接留言或發(fā)送看法至郵箱limengdalian@163.comqq:444548487.共同學習共同進謝謝閱讀步。第一章一般的,我把化學化工研發(fā)過程中用于原料、中控和產(chǎn)品的定性、定量檢測或?qū)τ谝殉墒?指感謝閱讀已有藥典或國標規(guī)定的或已經(jīng)過驗證的)謝謝閱讀析特點：1、研發(fā)分析沒有現(xiàn)成的分析方法，絕大部分靠分析人員自己摸索有時經(jīng)過數(shù)月也未必找到滿意的方法，難度大是其特點之一。精品文檔放心下載2、在現(xiàn)在市場競爭如此激烈的今天工作速度與效率顯的尤為重要，工藝研發(fā)已將產(chǎn)品作出，而分析方法尚未找好而影響了進度，不合理精品文檔放心下載的分析方法甚至影響準確度使工藝研發(fā)陷入誤區(qū)導致發(fā)貨延期、退貨等進而影響企業(yè)競爭力?？梢妷毫Υ笫茄邪l(fā)分析另一特點。.3精品文檔放心下載產(chǎn)品及工藝變換頻繁,要求分析方法不斷變換以適應新工藝新產(chǎn)品要求不斷優(yōu)化與改變。4、研發(fā)分析更注重產(chǎn)品的純度對工藝的影響。精品文檔放心下載,感謝閱讀一定的效率；并節(jié)約成本安、簡單。這幾點就要求分析人員具備非常扎實的基本功,與較為豐富的分析基礎(chǔ)知識和實踐操作技能。第二章精品文檔放心下載研發(fā)分析方法開發(fā)的一般思路1,常規(guī)分析中我們接觸最頻繁應最為廣泛的即氣相色譜(GC)和高效液相色譜(HPLC)以及化學分析(CA)同時感謝閱讀很多方法也非常成熟為大家所認可很多成為藥典或國標中的方法,并且很多分析室都具備常規(guī)化學分析所用試劑,器皿以及氣相色譜儀、液謝謝閱讀相色譜儀等。1但是針對于價格較為昂貴的儀器以及其分析室配備就為許多小型或投入較少的分析室所望而卻步了，比如說原子吸收、核磁共振、紅外光

譜儀、氣（液）質(zhì)聯(lián)用等，莫說如此就光氣相色譜及液相色譜的各種檢測器，其昂貴的價格就令我們只得甘心僅擁有最常用的FID(GC用)、

UV(HPLC用)。其實這并不要緊硬件不足，我們完全可以依靠我們的經(jīng)驗及技術(shù)盡力彌補。下面詳細說一下分析方法的開發(fā)思路。2

1、綜合分析物質(zhì)的物料物性。分析一化學物質(zhì)純度，就必須借助文獻、化工詞典等盡可能多的掌握其物料物性，其中可能存在的有

機物或無機物甚至其一般的化學合成工藝以及化工用途，這些都會對你的分析用很多幫助。試想一下我們連其基本資料都沒搞清楚還說分

析數(shù)據(jù)可靠，那真是不可思議了。精品文檔放心下載2、然后根據(jù)以上資料綜合考慮是采用氣相色譜(GC)還是高效液相色譜(HPLC)亦或化學分析(CA)，就選擇哪種分析方式上要考慮是否

適合同時兼顧準確度，速度，成本，安全，簡便等因素。當然有些物質(zhì)三種方法都可分析那就必須考慮采用那種方法更合適。

3、方法的驗證。下面舉例說明開發(fā)方法思路，由于一些研發(fā)工藝的保密性我們只舉例些常用的化工原料來說明：精品文檔放心下載如特戊酸含量的分析：一、查明物料物性。中文名稱:三甲基乙酸別名：三甲基醋酸，新戊酸，2.2-二甲基丙酸英文名：Pivalicacid;Trimethylaceticacid;2,2-Dimethylpropanoicacid;Neopentanoicacid精品文檔放心下載分子式:C5H10O2分子量:102.13CAS編號：75-98-9分子結(jié)構(gòu)：外觀(純品)：無色、無味液體（或無色結(jié)晶）沸點(常壓下):163-164℃熔點:33-35℃相對密度：（20/4℃）0.905折射率：1.393性質(zhì)描述:特戊酸有一定的腐蝕性，微溶水，易溶于醚、醇。易溶于乙醇、乙醚，溶于水。精品文檔放心下載生產(chǎn)方法:1.異丁醇和甲酸在濃硫酸作用下反應得叔戊酸。2.謝謝閱讀5MPa5MPa5-15℃攪拌15min。感謝閱讀分取三氯甲烷層，用無水硫酸鈉干燥、蒸餾，收集65-70℃（2.67kPa）餾分，得純度為97%的三甲基乙酸。收率74%。精品文檔放心下載3.叔丁醇與甲酸（98%）在濃硫酸存在下反應制得。用途:用于生產(chǎn)烯烴聚合引發(fā)劑TBPP的原料，也用于生產(chǎn)聚氯乙烯的穩(wěn)定劑和香料的原料等。戊酸為農(nóng)藥、醫(yī)藥、染料中間體，用于感謝閱讀高檔涂料聚合引發(fā)劑、感光材料、香料、潤滑油等。二、分步分析方法選擇與比較。在此我們首先了解氣相色譜(GC)與高效液相色譜(HPLC)的區(qū)別與聯(lián)系。精品文檔放心下載精品文檔放心下載等）是一致的。不同點：1謝謝閱讀不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物及高聚物。2、流動相的不同。氣相色譜以氣體為流動相（如N2、H2、He等）而高效液相色譜以液體為流動相（正相以正己烷、四氫呋喃、氯感謝閱讀仿等反相以水、乙腈、甲醇等）。3、流動相傳輸動力不同。氣相色譜以高壓鋼瓶盛裝以高壓直接推動氣體流動而高效液相色譜以高壓泵推動液體流動。感謝閱讀415m30cm精品文檔放心下載效液相色譜柱柱效確遠高于氣相色譜柱。氣相色譜柱無路是極性還是非極性的一般耐高溫（極性柱可耐高溫達250-280℃而非極性柱更是感謝閱讀耐高溫達300-320℃）而高效液相色譜柱一般只能在50℃以下使用。精品文檔放心下載5、分離原理不同。氣相色譜主要依靠物質(zhì)沸點不同進行分離，只有兩種物質(zhì)沸點較為接近時，才通過改變色譜柱極性來達到分離目精品文檔放心下載的即物質(zhì)的極性不同是氣相色譜得以分離的次要原因。而高效液相色譜只依靠物質(zhì)的極性不同來實現(xiàn)分離目的的。謝謝閱讀6、檢測器不同。氣相色譜根據(jù)檢測原理的不同，檢測器可分為濃度型檢測器（concentrationsensitivedetector）和質(zhì)量型檢測器感謝閱讀（massflowratesensitivedetector）。濃度型檢測器的電信號大小與組分的濃度成正比，如熱導池檢測器和電子捕獲檢測器等。質(zhì)量型精品文檔放心下載檢測器的電信號大小與單位時間內(nèi)進入檢測器的某組分的質(zhì)量成正比，如氫火焰離子化檢測器和火焰光度檢測器等。1）按原理可分為光精品文檔放心下載學檢測器（如紫外、熒光、示差折光、蒸發(fā)光散射）、熱學檢測器（如吸附熱）、電化學檢測器（如極譜、庫侖、安培）、電學檢測器精品文檔放心下載（電導、介電常數(shù)、壓電石英頻率）、放射性檢測器（閃爍計數(shù)、電子捕獲、氦離子化）以及氫火焰離子化檢測器。謝謝閱讀我們再來了解一下儀器分析(主要指氣相色譜和高效液相色譜)與化學分析的區(qū)別與聯(lián)系。謝謝閱讀很多儀器分析要借助化學分析的一些處理手段來處理樣品，而化學分析很多操作有被儀器分析所取代。分析化學是研究物質(zhì)的組成、精品文檔放心下載狀態(tài)和結(jié)構(gòu)的科學，它包括化學分析和儀器分析兩大部分。二者的區(qū)別主要有：精品文檔放心下載一、分析的方法不同：聲、熱等物理量而得到分析結(jié)果，而測量這些物理量，一般要使用比較復雜或特殊的儀器設(shè)備，故稱為“儀器分析”。儀器分析除了可用于

定性和定量分析外，還可用于結(jié)構(gòu)、價態(tài)、狀態(tài)分析，微區(qū)和薄層分析，微量及超痕量分析等，是分析化學發(fā)展的方向。

二、儀器分析與化學分析的特點不同：謝謝閱讀1.gmLmg級降低到

儀器分析的L級，甚至更低。而化學分析適合常量分析。謝謝閱讀2.儀器分析選擇性好。很多的儀器分析方法可以通過選擇或調(diào)整測定的條件，使共存的組分測定時，相互間不產(chǎn)生干擾。化學分析精品文檔放心下載干擾較大，一般通過掩蔽等方法加以消除。3.儀器分析操作簡便，分析速度快，容易實現(xiàn)自動化。而化學分析多為手工操作相對麻煩。謝謝閱讀4.儀器分析相對誤差較大?；瘜W分析一般可用于常量和高含量成分分析，準確度較高，誤差小于千分之幾。多數(shù)儀器分析相對誤差感謝閱讀較大，一般為5%，不適用于常量和高含量成分分析。5.儀器分析儀器分析需要價格比較昂貴的專用儀器。而化學分析成本較低一般小型分析室都能開展。謝謝閱讀三、儀器分析與分析化學的關(guān)系：二者之間并不是孤立的，區(qū)別也不是絕對的嚴格的。a.儀器分析方法是在化學分析的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。許多儀器分析方法中的式精品文檔放心下載樣處理涉及到化學分析方法（試樣的處理、分離及干擾的掩蔽等）；同時儀器分析方法大多都是相對的分析方法，要用標準溶液來校對，感謝閱讀b.精品文檔放心下載備?；瘜W方法和儀器方法是相輔相成的。在使用時應根據(jù)具體情況，取長補短，互相配合。精品文檔放心下載四、學習掌握的目標不同：化學分析主要的內(nèi)容為：數(shù)據(jù)處理與誤差分析、四大滴定分析法、重量分析法。學習化學分析要求掌握其基本的原理和測定方法，精品文檔放心下載建立起嚴格的“量”的概念。能夠運用化學平衡的理論和知識，處理和解決各種滴定分析法的基本問題，包括滴定曲線、滴定誤差、滴定突精品文檔放心下載躍和滴定終點的判斷，掌握重量分析法分析化學中的數(shù)據(jù)處理與誤差處理。正確掌握有關(guān)的科學實驗技能，具備必要的分析問題和解決問精品文檔放心下載題的能力。儀器分析涉及的分析方法是根據(jù)物質(zhì)的光、電、聲、磁、熱等物理和化學特性對物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、信息進行表征和測量，學習儀器分析精品文檔放心下載要求掌握的現(xiàn)代分析技術(shù)，牢固掌握各類儀器分析方法的基本原理以及儀器的各重要組成部分，對各儀器分析方法的應用對象及分析過程謝謝閱讀要有基本的了解?？梢愿鶕?jù)樣品性質(zhì)、分析對象選擇最為合適的分析儀器及分析方法。儀器分析法是以物質(zhì)的物理性質(zhì)或化學性質(zhì)為基礎(chǔ)精品文檔放心下載感謝閱讀另一類是利用溶液的電化學性質(zhì)的分析方法如電重量分析法、電滴定分析法等。儀器分析法的優(yōu)點是快速、靈敏度高，操作比較簡單，但感謝閱讀一般不適用于常量組分的測定。化學分析法是以物質(zhì)的化學反應為基礎(chǔ)的分析方法，主要有重量分析法和滴定分析法等。謝謝閱讀現(xiàn)在我們知道了氣相色譜、高效液相色譜和化學分析的區(qū)別與聯(lián)系后就可以進行方法的選擇與開發(fā)了。精品文檔放心下載鑒于我們考慮兼顧準確度，速度，成本，安全，簡便等因素我們選擇方法的思路是能進行氣相色譜分析的不進行高效液相色譜分析精品文檔放心下載能進行儀器分析的不進行化學分析。所以特戊酸分析首先考慮氣相色譜分析。從特戊酸先前所查的資料和氣相色譜分析要求可知進行氣相感謝閱讀色譜分析是完全可能的。第二章氣相色譜分析方法選擇下面就氣相色譜分析條件的選擇作一介紹。載氣的選擇：要了解各種載氣性質(zhì)以及與檢測器的匹配情況。感謝閱讀R感謝閱讀λ＝λ7-2λ＝λ感謝閱讀[一般小于3×10W／(m·K)]謝謝閱讀峰。若選用氫氣為載氣，可獲得較高的檢測靈敏度，而且不出倒峰，但不安全，并且有一定的還原性做有些物質(zhì)時要特別的注意。氦氣惰謝謝閱讀性較好各方面比較都很理想，但價格較貴現(xiàn)國內(nèi)很難買到。綜合來說在小型實驗室來說氮氣為載氣還是不錯的選擇，如果要求苛刻、不計謝謝閱讀成本那必選氦氣。如做痕量分析并所做物質(zhì)性質(zhì)穩(wěn)定的話選氫氣較為理想。精品文檔放心下載由速率方程式可知，流速對柱效的影響很大，因踏板高度H與分子擴散項中的流速成反比，而與傳精品文檔放心下載質(zhì)阻力項中的流速成正比，故必定有一個最佳流速，能使H達到最小，謝謝閱讀柱效最高。以不同流速下測得的塔板高度H速u為橫坐標作圖，可謝謝閱讀得H－u21-5點，塔板高度H最小感謝閱讀（H最小u最圖21-5H－u關(guān)系曲線佳感謝閱讀在實際工作中，為了縮短分析時間，通常控制的流速稍高于最佳流速。感謝閱讀根據(jù)速率理論和速率方程可以選擇不同的載氣，以便提高柱效。比如，當載氣流速較大時，傳質(zhì)阻力項對柱效能謝謝閱讀的影響是主要的，應選使C值變小的載氣。相對分子質(zhì)量小的載氣，如H2、He等，因為組分在載氣中有較大的擴散精品文檔放心下載系數(shù)，減小傳質(zhì)阻力，有利于提高柱效；當載氣流速較小時，分子擴散項對柱效能的影響是主要的，應選擇使B值變精品文檔放心下載小的載氣。相對分子質(zhì)量較大的載氣，如N2、Ar等，因使組分在載氣中有較小的擴散系數(shù)（見21.2.2謝謝閱讀擴散，有利于提高柱效。氣化溫度的選擇：氣化溫度的選擇應以保證試樣能迅速氣化且不分解為準。適當提高氣化溫度對感謝閱讀分離及定量都有利。一般選擇的氣化溫度比柱溫高20℃70℃。感謝閱讀柱溫的選擇柱溫是一個非常重要的操作變量，直接影響分離效能和分離速度。首先要考慮每種固定液都有一定的使用溫度。精品文檔放心下載柱溫不能高于固定液的最高使用溫度，以免固定液揮發(fā)流失。謝謝閱讀柱溫對組分分離的影響較大，提高柱溫使各組分的揮發(fā)程度接近，不利于分離，所以，從分離的角度考慮，宜采謝謝閱讀精品文檔放心下載選擇柱溫的原則是保證使難分離的組分能達到較好分離效果的前提下，選擇盡可能低的柱溫，但以保留時間適宜，峰感謝閱讀形正常為限。通常歸一化方法選擇程序升溫較好，而內(nèi)外標選擇恒溫就可以。謝謝閱讀進樣時間和進樣量選擇：進樣速度應盡可能快，否則會因試樣原始寬度的變大，而造成色譜峰的擴張，甚至使峰變形。一般當用感謝閱讀注射器或氣體進樣閥進樣時，要求在一秒鐘內(nèi)完成進樣。進樣量應保持在使峰面積或峰高與進樣量成正比的范圍內(nèi)。檢測器性能不同，允謝謝閱讀許的進樣量也不同。液體試樣一般進樣0.11μL，氣體試樣一般進樣0.110mL。精品文檔放心下載色譜柱選擇：增加柱長可提高分離效果。但柱長過長，使分析時間延長。所以在滿足一定分離度的條件下，應選用盡可能短的色譜柱。填充柱的精品文檔放心下載柱內(nèi)徑一般為36mm，毛細管柱的內(nèi)徑0.10.5mm。感謝閱讀固定液的用量選擇：擔體的表面積較大時，固定液用量可多些，允許的進樣量也相應增加。但從速率方程式的傳質(zhì)項中可知，為了減謝謝閱讀小液相的傳質(zhì)阻力，應使固定液的液膜厚度盡可能薄。但固定液液膜太薄，則允許的進樣量也就越少。因此固定液的用量要根據(jù)具體情況感謝閱讀決定。固定液的配比選擇：（指固定液與擔體的質(zhì)量比）一般為5100到25100。擔體的比表面積越大，固定液用量的比例可越高。謝謝閱讀擔體的性質(zhì)和粒度選擇：若擔體的比表面積大，孔徑分布均勻，則固定液易分布均勻，從而可加快傳質(zhì)過程，提高柱效。故應該選感謝閱讀用顆粒小且均勻的擔體，并盡可能填充均勻，以減少渦流擴散，提高柱效。但粒度過小，填充不易均勻，會使柱壓降增大，對操作不利。精品文檔放心下載一般對46mm的柱管，選用6080目或80100目的擔體較為合適。精品文檔放心下載常用色譜柱為SE-30、OV-1、OV-101二甲基硅氧烷非極性DB-l、HP-1、CP-Sil5CB、SPB-1、007-1、Rtx-1、BP-1......烴類、胺類、酚類、農(nóng)藥、謝謝閱讀PCBs、揮發(fā)油、硫化物等SE-54、SE-525％苯基，1％乙烯基甲基硅氧烷非極性DB-5、HP-5、CPSil8CB、SPB-5、、Rtx-5、BP-5......藥物、芳烴類、酚、酯、生精品文檔放心下載物堿、鹵代烴OV-17017％氰甲基，7％苯基甲基硅氧烷中等極性DB-1701、HP-1701、BP-10、CPSil19CB、Rtx-1701、SPB-1701......藥物、農(nóng)藥、精品文檔放心下載除草劑、TMS、糖OV-1750％苯基甲基硅氧烷中等極DB-17、HP-50、SP2250、CP-Sil19、Rtx-50、SPB-50......藥物、農(nóng)藥、甾類等精品文檔放心下載PEG-20M聚乙二醇20M極性DB-WAX、HP-Wax、CarbowaxSUPELCOWAX10、CPWAX52CB......醇類、酯、醛類、溶劑、單芳、精謝謝閱讀油等FFAP聚乙二醇20M對苯二甲酸的反應產(chǎn)物極性DB-FFAPHP-FFAPNuk01、SP-1000......醇、酸、酯、醛、腈感謝閱讀XE-60、25％氰乙基甲基硅氧烷中極性酯、硝基化合物精品文檔放心下載OV-22525％氰乙基，25％苯基甲基硅氧烷中極性DB，225、HP-225、SP-2330、SPB-225、CP-SIL43CB脂肪酸酯、PUFA、Aldito]精品文檔放心下載OV-21050％三氟丙基硅氧烷極性DB210、Rtx200......極性化合物、有機氯化合物謝謝閱讀OV-27550％三氟丙基硅氧烷強極性DB210、SP2401、Rtx200......極性化合物、感謝閱讀一、固定液非極性：SE30*，OV101，SE54*中極性：OV17，XE60*，OV1701*極性：PEG20M*，F(xiàn)FAP*，DEGS*二、柱內(nèi)經(jīng)（mm）0.2~0.25柱效高、負荷量低、流失小0.3~0.35負荷量大于毛細口徑柱60%，柱效低精品文檔放心下載0.53~0.6大口徑毛細柱，負荷量近似填充柱，總柱效遠遠超過填充柱，分析速度快謝謝閱讀三、柱長（m）短柱10~15米分離少于10個組份的樣品中長柱20~30米分離10~15個組份的樣品感謝閱讀長柱50米以上分離50個組份以上的樣品四、液膜厚度（μm）薄液膜0.1~0.2μm低負荷量、高沸點化合物標準液膜0.25~0.33μm一般標準毛細柱分析謝謝閱讀厚液膜0.5~1μm符合量較大，低沸點樣品特厚液膜1~5μm取代填充柱，分析沸點200℃以下復雜樣品感謝閱讀氣相色譜檢測器選擇：熱導池檢測器（TCD）thermalconductivitydetector謝謝閱讀最成熟的檢測器之一。氫火焰離子化檢測器（flameionizationdetecter）屬于質(zhì)量型檢測器。它對大感謝閱讀多數(shù)含碳有機化合物有很高的檢測靈敏度，比熱導池檢測器的靈敏度高幾個數(shù)量謝謝閱讀1012g結(jié)構(gòu)簡單，響應快，穩(wěn)定性氫火焰離子化檢測器應用較多這

里介紹一下其結(jié)構(gòu)和作用原理，氫火焰離子化檢測器的主要部分是離子室。離子

21-8柱的被測組分與載氣在氣體入口處與氫氣混合后一同經(jīng)毛細管噴入離子室，氫氣

在空氣的助燃下，經(jīng)引燃后燃燒，在燃燒所產(chǎn)生的高溫火焰（約2100測有機物組分電離成正負離子。因為在氫火焰附近設(shè)有收集極（正極）和極化極

150~300V的極化電壓，形成直流電場，所以產(chǎn)生的謝謝閱讀圖21-8氫火焰離子化檢測器離子室示意圖正負離子在收集極和極化極的電場作用下，做定向運動形成電流。此電流大小與精品文檔放心下載進入離子室的被測組分的含量之間存在定量關(guān)系。但一般在氫火焰中，物質(zhì)的電離效率很低，大約每50萬個碳原子中，只有一個碳原子謝謝閱讀被電離，因此產(chǎn)生的電流很微弱，需經(jīng)放大器放大后，才能在記錄儀上得出色譜峰。精品文檔放心下載謝謝閱讀如CO、CO2、H2S謝謝閱讀（2）氫氣流量選擇：氫氣流量的大小將直接影響氫火焰的溫度及火焰中的電離過程。若氫氣流量太小，火焰溫度太低，則被測組精品文檔放心下載分分子電離的數(shù)太少，產(chǎn)生的電流信號小，檢測靈敏度低，且易熄火。但若氫氣流量太大，會使噪聲變大，故必須控制氫氣的流量。當用謝謝閱讀N2作載氣時，一般控制H2和N2的流量比為1:1~1:1.5。在最佳氫氮比時，檢測器不僅靈敏度高，而且穩(wěn)定性好。謝謝閱讀（3）空氣流量選擇：空氣是助燃氣體，并為組分電離成正離子提供氧氣?？諝饬髁吭谝欢ǚ秶鷥?nèi)，對響應值有影響。當空氣流量較謝謝閱讀小時，靈敏度也較低。但當空氣流量達到某一值后，對響應值幾乎不產(chǎn)生影響。一般氫氣與空氣的流量比為1:10。感謝閱讀（4）極化電壓選擇：在氫火焰中電離產(chǎn)生的離子，只有在電場的作用下，才能向兩極定向移動產(chǎn)生電流，而且極化電壓與檢測器的謝謝閱讀響應值有關(guān)。當增加極化電壓時，開始階段響應值增加，而后會趨向一個穩(wěn)定值。此后繼續(xù)增加極化電壓，檢測器的響應值幾乎不變。一精品文檔放心下載般選擇極化電壓為100~300V之間。（5氫火焰離子化檢測器的使用溫度應控制在80~200℃的范圍內(nèi)。在此溫度范圍內(nèi)，靈敏度幾乎相同。但在80℃精品文檔放心下載以下時，靈敏度顯著下降，一般選擇較高溫度（280-300℃）。感謝閱讀氣相色譜定量方法選擇：1.歸一化法歸一化法適用于試樣中所有組分全部流出色譜柱，并在色譜圖上出現(xiàn)所有組分色譜峰的情況。假設(shè)試樣中有ｎ感謝閱讀分別為m1m2mn，各組分含量的總和為m，則試樣中任一組分i的質(zhì)量分數(shù)wi（normalizationmethed公式計算如下精品文檔放心下載2.內(nèi)標法當只需測定試樣中某幾個組分的含量或試樣中的組分不能全部出峰時，可采用內(nèi)標法（internalstandardmethed。測定原理是取一定精品文檔放心下載量的純物質(zhì)作為內(nèi)標物，加入到準確稱取的試樣中，然后測得色譜圖。根據(jù)內(nèi)標物和試樣的質(zhì)量及相應的峰面積來計算被測組分的含量。精品文檔放心下載設(shè)被測組分i的質(zhì)量為mi，稱取的試樣質(zhì)量為m，試樣中加入的內(nèi)標物質(zhì)量為ms，則感謝閱讀，兩式相除整理后可得被測組分i的質(zhì)量分數(shù)wi為此法可認為是簡化的內(nèi)標法。如果稱量同樣量m的試樣，加入固定量ms的內(nèi)標物，則式（2125）中項為一常數(shù)，即謝謝閱讀·常數(shù)（2127）可見，被測組分的質(zhì)量分數(shù)wi與Ai/As成正比。若wi對Ai/As作圖21-9所示。精品文檔放心下載根據(jù)此直線關(guān)系，采用標準曲線法定量十分方便。制作標準曲線時，先將欲測組分的純物質(zhì)配成不同濃度的標準溶液。取一定量的標準溶液感謝閱讀和內(nèi)標物，混合后進樣分析，測得Ai和AsAi/As對標準溶液濃精品文檔放心下載測出試樣中被測組分與內(nèi)標精品文檔放心下載物的峰面積比Ai/As精品文檔放心下載此法不必測出校正因子，消除了某些操作條件的影響，也不需要嚴格定量進樣，適合于液體

試樣的分析。另外，此法與內(nèi)標法相比可減少稱量樣品和計算數(shù)據(jù)的麻煩，適用于工廠質(zhì)量控謝謝閱讀圖21-9內(nèi)標標準曲線制分析。4.外標法外標法(externalstandardmethed)是用欲測組分的純物質(zhì)來制作標準曲線的方法。具體方法是取被測組分的純物質(zhì)配成一系列不同濃度謝謝閱讀的標準溶液，分別取一定量進行色譜分析，得出相應的色譜峰。繪制峰面積（或峰高）對相應濃度的標準曲線。然后在同樣操作條件下，謝謝閱讀謝謝閱讀當試樣中被測組分濃度變化不大時，可不必作標準曲線，而用單點校正法測定，即配制一個與被測組分含量十分接近的標準溶液，感謝閱讀精品文檔放心下載，由于ws與As均為已知，故可令ki=ws/As，則可得精品文檔放心下載wi=ki·Ai式中ki為組分i的單位峰面積質(zhì)量分數(shù)的校正值。只要測得Ai值，利用ki值，由上式即可求出被測組分的質(zhì)量分數(shù)。謝謝閱讀外標法操作方便，計算簡單，但對操作條件的穩(wěn)定性和進樣量的重現(xiàn)性要求比較高，否則會影響結(jié)果的準確性。感謝閱讀30感謝閱讀般100多元吧）如果你的實驗室，是GMP管理模式的，或者對分析室成本控制不是很苛刻，那就首選進口針吧。耐用，定量準確。感謝閱讀1、根據(jù)上面資料分析特戊酸性質(zhì)比較穩(wěn)定,(GC)分析。我們選擇以下條件：感謝閱讀1.方法提要本方法適用于特戊酸含量的測定。2.儀器設(shè)備：儀器：GC-Agilent7890色譜柱：HP-1（30m×0.32mm×0.5μm）謝謝閱讀檢測器：FID3.測試條件：柱溫：80℃（1min）12℃/min-280℃(5min)謝謝閱讀汽化室：280℃檢測室：300℃載氣：N2流速：1.5ML/MIN分流比：1：20燃燒氣：H2助燃氣：空氣300ml/min尾吹氣：30ml/min運行時間：20min4.樣品制備：直接進樣0.6ul。5.定量方法：面積歸一化。由譜圖我們可以得到以下信息：如果樣品中含有大分子羧酸，由于沸點很高，則很難出峰。感謝閱讀克服這個缺點可以選擇做高效液相色譜(HPLC)。第三章液相方法選擇那就象氣相色譜分析一樣首先對色譜分析條件的選擇作一介紹。謝謝閱讀1、流動相的選擇：反相色譜的流動相通常以水作基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量的能與水互溶的極性調(diào)整劑，如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性調(diào)整劑的性質(zhì)及其精品文檔放心下載所占比例對溶質(zhì)的保留值和分離選擇性有顯著影響。一般情況下，甲醇-水系統(tǒng)已能滿足多數(shù)樣品的分離要求，且流動相粘度小、價格低，精品文檔放心下載-感謝閱讀外185~205nm處檢測的要求，因此，綜合來看，乙腈-水系統(tǒng)要優(yōu)于甲醇-水系統(tǒng)。在分離含極性差別較大的多組分樣品時，為了使各組感謝閱讀分均有合適的k值并分離良好，也需采用梯度洗脫技術(shù)。反相色譜中，如果要在相同的時間內(nèi)分離同一組樣品，甲醇/水作為沖洗劑時謝謝閱讀其沖洗強度配比與乙腈/水或四氫呋喃/水的沖洗強度配比有如下關(guān)系：謝謝閱讀C乙腈＝0.32C2甲醇＋0.57C甲醇C四氫呋喃＝0.66C甲醇C為不同有機溶劑與水混合的體積百分含量。100%甲醇的沖洗強度相當于89%的乙腈/水或66%的四氫呋喃/水的沖洗強度。精品文檔放心下載乙腈的毒性是甲醇的5倍，是乙醇的25倍。價格是甲醇的6~7倍。感謝閱讀由于硅膠表面的硅輕基(SiOH)謝謝閱讀沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如:正己烷(Hexane)、氯仿(Choroform)、二氯甲烷(MethyleneCloride)等。謝謝閱讀正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有極性官能團胺基團，如(NH2，APS)和氰基團(CN，CPS)的鍵合相填料。感謝閱讀由于硅膠表面的硅輕基(SiOH)或其他極性基團極性較強，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小，即極性較弱的組份最先被沖精品文檔放心下載洗出色譜柱。2、流動相ph的選擇：大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2－7.5，盡量不超過該色譜柱的pH范圍,一般的C18柱PH值范圍都在2-8，精品文檔放心下載流動相的PH值小于2時，會導致鍵合相的水解.采用反相色譜法分離弱酸（3≤pKa≤77≤pKa≤8pH謝謝閱讀值，以抑制樣品組分的解離，增加組分在固定相上的保留，并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對于弱酸，流動相的pH值越小，感謝閱讀組分的k值越大，當pH值遠遠小于弱酸的pKa值時，弱酸主要以分子形式存在；對弱堿，情況相反。分析弱酸樣品時，通常在流動相中謝謝閱讀加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液；分析弱堿樣品時，通謝謝閱讀常在流動相中加入少量弱堿，常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。注：流動相中加入有機胺可以減弱堿性溶質(zhì)與殘余硅謝謝閱讀醇基的強相互作用，減輕或消除峰拖尾現(xiàn)象。所以在這種情況下有機胺（如三乙胺）又稱為減尾劑或除尾劑。精品文檔放心下載3、波長選擇：首先在可見紫外分光光度計上測量樣品液的吸收光譜，以選擇合適的測量波長，如最靈敏的測量波長并避開其它物精品文檔放心下載質(zhì)的干擾。從紫外光譜中還可大體知道在HPLC中的響應值，如吸收度小于0.5時，HPLC測定的面積將會很小。要了解紫外吸收光譜原理感謝閱讀了紫外—可見吸收光譜基礎(chǔ)知識①同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應的波長稱為最大吸收波長λmax精品文檔放心下載②不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax則不同。精品文檔放心下載③吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。感謝閱讀電子能級間躍遷的同時，總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬感謝閱讀譜帶?！梢姽庾V是由π→π＊和n→π＊躍遷產(chǎn)生的。這兩種躍遷均要求有機物分子中含有不飽和基團。這類含有π鍵的不精品文檔放心下載飽和基團稱為生色團。簡單的生色團由雙鍵或叁鍵體系組成，如乙烯基、羰基、亞硝基、偶氮基—N＝N—、乙炔基、腈基—C三N等。謝謝閱讀助色團：有一些含有n電子的基團(如—OH、—OR、—NH２、—NHR、—X等)，它們本身沒有生色功能(不能吸收λ>200nm的光)，但當謝謝閱讀n—π共軛作用，增強生色團的生色能力(吸收波長向長波方向移動，且吸收強度增加)謝謝閱讀色團。有機化合物的紫外—n感謝閱讀生躍遷；σ→σ＊躍遷飽和烷烴的分子吸收光譜出現(xiàn)在遠紫外區(qū)；吸收波長λ<200nm；例：甲烷的λmax為125nm,乙烷λmax為135nm。感謝閱讀只能被真空紫外分光光度計檢測到；作為溶劑使用；n→σ＊躍遷所需能量較大。吸收波長為150～250nm，大部分在遠紫外區(qū)，近紫外區(qū)仍不易觀察到。含非鍵電子的飽和烴衍生物感謝閱讀(含N、O、S和鹵素等雜原子)均呈現(xiàn)n→σ*躍遷。謝謝閱讀π→π＊躍遷所需能量較小，吸收波長處于遠紫外區(qū)的近紫外端或近紫外區(qū)，εmax一般在104L·mol－1·cm－1以上，屬于強吸收。謝謝閱讀（1）不飽和烴π→π*躍遷乙烯π→π*躍遷的λmax為162nm，εmax為:1×104L·mol-1·cm－1。K帶——共軛非封閉體系的p→p*躍遷謝謝閱讀共軛烯烴中的→*共軛烯烴（不多于四個雙鍵）*躍遷吸收峰位置可由伍德沃德——菲澤規(guī)則估算。max=基+nii感謝閱讀基-----是由非環(huán)或六環(huán)共軛二烯母體決定的基準值；謝謝閱讀無環(huán)、非稠環(huán)二烯母體：max=217nm羰基化合物共軛烯烴中的→*①Y=H,Rn→*180-190nm→*150-160nmn→*275-295nm②Y=-NH2,-OH,-OR等助色基團K帶紅移，R帶蘭移；R帶max=205nm；10-100③不飽和醛酮K帶紅移：165250nmR帶蘭移：290310nm芳香烴及其雜環(huán)化合物苯：E1帶180184nm；=47000E2帶200204nm=7000苯環(huán)上三個共扼雙鍵的→*躍遷特征吸收帶；B帶230-270nm=200→*與苯環(huán)振動引起；含取代基時，B帶簡化，紅移。羰基雙鍵與苯環(huán)共扼：K帶強；苯的E2帶與K帶合并，紅移；取代基使B帶簡化；氧上的孤對電子：R帶，躍遷禁阻，弱max（nm）max苯254200甲苯261300間二甲苯2633001，3，5-甲苯266305六甲苯272300有機化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩLλmax和吸收強度發(fā)生變化:精品文檔放心下載λmax向長波方向移動稱為紅移，向短波方向移動稱為藍移(或紫移)。吸收強度即摩爾吸光系數(shù)ε增大或減小的現(xiàn)象分別稱為增色效應謝謝閱讀或減色效應立體結(jié)構(gòu)和互變結(jié)構(gòu)的影響。溶劑的影響非極性→極性n→*躍遷：蘭移；；→*躍遷：紅移；；4、檢測器選擇：（1）紫外檢測器應用最廣，對大部分有機化合物有響應。特點：靈敏度高；線形范圍高；流通池可做的很小（1mm×10mm，容積8μL精品文檔放心下載對流動相的流速和溫度變化不敏感；波長可選，易于操作；可用于梯度洗脫。（2）示差折光檢測器（differentialrefractiveindexdetector）感謝閱讀除紫外檢測器之外應用最多的檢測器；可連續(xù)檢測參比池和樣品池中流動相之間的折光指數(shù)差值。差值與濃度呈正比；謝謝閱讀靈敏度低、對溫度敏感、不能用于梯度洗脫；偏轉(zhuǎn)式、反射式和干涉型三種；（2）熒光檢測器（fluorescencedetector）高靈敏度、高選擇性；對多環(huán)芳烴，維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應；謝謝閱讀5、HPLC色譜柱選擇：常用色譜柱有：PinnacleⅡC18同KromasilC18感謝閱讀羰基，脂肪酸，甘油酯，脂溶性維生素，酞酸鹽，類固醇PinnacleⅡC8同KromasilC8精品文檔放心下載與C18柱相似，但對憎水成分時間比C18短PinnacleⅡCyano反相和正相柱。比正相硅膠柱穩(wěn)定。分析炸藥，類固醇

PinnacleⅡPhenyl聚和芳香烴，聚合芳香族脂肪酸謝謝閱讀PinnacleⅡAmino單、雙糖類成分，配以等度分析和視差折光檢測器

PinnacleⅡSilica正相分離，中等比表面感謝閱讀AllureC18對增水性和弱極性保留值最強，分析炸藥和類固醇

AllureBasix藥物和其它含胺集團成分分析謝謝閱讀AllureAcidix酸性藥物，非衍生氨基酸，烴基，磺酸基，含磷物分離

AllureSilica極性正相保留值高，比表面積大，B型硅膠填料

UltraC18羰基，脂肪酸，苯胺，巴比妥，脂溶性維生素，酞酸鹽，類固醇，PTH氨基酸

UltraaqueousC18反相極性保留值高，適應90％以上水性流動相

UltraIBD極性和非極性混合樣品分析專用柱感謝閱讀UltraC8高純，堿性鈍化反相柱，應用廣泛，LC/MS

UltraC4縮氨酸和小蛋白分析，柱穩(wěn)定精品文檔放心下載UltraC1可代替UltraODS或辛烷柱極性物質(zhì)分析

UltraCyano堿性藥物，類固醇和其它堿性物質(zhì)分析謝謝閱讀UltraPhenyl聚合芳烴，烴，嘌呤，嘧啶，極性芳烴，脂肪酸謝謝閱讀UltraAmino單、二糖等糖類，酯類、苯胺、殺蟲劑。弱陽離子交換劑感謝閱讀UltraPFP有機鹵素化合物功能團的分類先導分析精品文檔放心下載UltraSilica正相分離，高比表面B型硅膠謝謝閱讀KromasilC4同PinnacleⅡC4感謝閱讀溶于正己烷用硅膠的正相模式#1溶于有機溶用鍵合相的正相模式劑或乙腈和乙腈：水#22000用鍵合相的反相模式#3溶于四氫呋喃

凝膠滲透（小分子）#4溶于水非離子型用鍵合相的反相模式#5樣品用離子化控制的鍵合相的反相模式#6離子型用離子對試劑的鍵合相的反相模式#7用硅膠的正相模式#8離子交換模式#9溶于有機溶凝膠滲透色譜#10劑分子量〉2000凝膠過濾色譜#11用大孔填料的離子交溶于水換模式#12用大孔填料的反相模式#13下面簡單介紹幾種常用色譜柱的資料以供參考正相、反相和極性膠聯(lián)柱使用手冊（ChrompackHPLCNormal-,ReversedphaseandPolarbondedcolumns）精品文檔放心下載注意：此色譜柱填充的是改性硅膠材料。向柱內(nèi)導入堿性溶劑（pH>7.0pH<2.0感謝閱讀你要充分地熟悉這本手冊講述的內(nèi)容。未正確地使用不能享受保修待遇。謝謝閱讀簡介：此柱填充的是反相或者極性膠聯(lián)型態(tài)的硅膠基質(zhì)材料的硅膠。硅膠形態(tài)的柱子用于正相（非水）條件。精品文檔放心下載反相（C8，C18，ODS，RP-8和RP-18謝謝閱讀極性膠聯(lián)型（APS，diol，CN和NH2精品文檔放心下載件下，這是因為柱子在特定的條件下，固定相的性質(zhì)會發(fā)生變化，所以在其他的條件下，會影響柱效。也不建議將硅膠柱用在反相精品文檔放心下載謝謝閱讀1．在開始分析工作以前，柱子必須經(jīng)過正確的老化。一個沒有正確老化的柱子可能會帶來問題，諸如很差的柱效或者感謝閱讀分離情況發(fā)生變化等等。A．在反相條件下老化：要老化這類柱子，首先要使用乙腈或者甲醇淋洗，然后你選用的洗脫液進行平精品文檔放心下載感謝閱讀精品文檔放心下載最后再使用正常流速。B精品文檔放心下載可能是需要的。使用的溶劑可能是水飽和的或者是無水的。干燥柱子可以使用無水的二氯甲烷。C謝謝閱讀謝謝閱讀子里的溶劑相混溶。如果這些溶劑不能混溶，必須先使用一個合適的緩沖溶劑進行沖洗。感謝閱讀2．洗脫液：一定不要使用pH低于2或者高于7的緩沖液，這是由于它們會改變固定相的性質(zhì)。極性鍵合柱最好使用在3到5之謝謝閱讀間。在使用以前，洗脫液要進行脫氣，以及使用0.5微米的濾膜過濾，以免發(fā)生檢測和泵送問題。精品文檔放心下載一定要在開始使用系統(tǒng)以前檢查水溶液中有否微生物生長，否則你的柱子會堵塞，柱壓會升高到無法接受的水平。謝謝閱讀3．流量和壓力柱內(nèi)徑（毫米）流速（ml/min）最佳最高2.00.21.03.00.42.04.61.04.010.04.718.0注意：最高壓力：不銹鋼柱：4500psi；玻璃柱：3000psi精品文檔放心下載增加流速或者降低流速要采取小的間隔變化以防止填充床的擾動。精品文檔放心下載0，等待洗脫液完全流出柱子為止（2感謝閱讀拆除柱子而沒有等待壓力的降低會損壞柱子。高柱壓的產(chǎn)生一般是由于不正確地使用柱子的結(jié)果。使用保護柱（見第6節(jié)）會防止污染物沉積在分析柱上。感謝閱讀4．樣品準備保持柱子長壽的關(guān)鍵是進樣前適當?shù)牡臉悠诽幚怼Ｄ惚仨毞乐箤⑹杷?與流動相極性差別很大的化合物泵入色譜柱，不管是來自精品文檔放心下載流動相還是樣品。特別地，要禁止導入顆粒雜質(zhì)。這些最終都會造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。謝謝閱讀5．保護柱ChromSep柱我們建議使用正確型號的感謝閱讀ChromSep保護柱。這個柱子的填充材料與用于分析的色譜柱的材料相似。當柱壓增高的或者觀察到柱效降低的時候就需要更換保謝謝閱讀護柱了。對于常用不銹鋼柱，我們建議使用相同型號的ChromguardHighEfficiency(10X3.0mm)或HighCapacity（高容精品文檔放心下載量）柱(50X3.0mm)。6．進樣量和濃度精品文檔放心下載注射了太大體積或太濃的樣品會使峰展寬或者峰融合。柱尺寸最大樣品體積長度*內(nèi)徑250×2.0mm±10μl200×3.0mm±15μl250×4.6mm±50μl250×10.0mm±250μl7．溫度HPLC柱最好在柱溫箱中使用。重復性取決于溫度控制。最佳的溫度與特定的應用有關(guān)。溫度影響洗脫液流動的線速度。在使用謝謝閱讀ChromSep玻璃柱的時候，一定要調(diào)節(jié)流速使壓力保持在3000psi以下。謝謝閱讀8．貯存一定不要在柱子內(nèi)充滿緩沖液或者其他含鹽類的洗脫液的情況下貯存色譜柱。貯存溶劑應當含有至少20%的有機溶劑，以防止有謝謝閱讀細菌的生長。9．柱效損失的可能原因1．額外的峰展寬。當使用小直徑或者長度較短的柱子時，峰展寬的情況可能比較明顯。要保證管路的長度和內(nèi)徑都保持最小。檢感謝閱讀查進樣體積和檢測器檢查池體積是否適用于柱體積。2．洗脫的平衡時間不夠。3．不正確柱溫。4．不正確的修正濃度。5．床壓縮。使用了過大的洗脫流速。將柱子反向，使用低流速。感謝閱讀10.柱效喪失和/或高背壓1．謝謝閱讀感謝閱讀更換進口過濾器或者篩板。2．微生物在洗脫液中生長。倒轉(zhuǎn)柱子，嘗試以反向的流動來將污染物沖洗出柱子。更換進口過濾器或者篩板。感謝閱讀3．有蛋白質(zhì)脂肪，油脂污染或者極性化合物等污染。再生柱子（見第12謝謝閱讀11.再生1．再生反相色譜柱首先倒轉(zhuǎn)柱子。以大約最佳流速的40%的流速沖洗柱子大約45-60分鐘，使用的溶劑的順序要按照水—

甲醇—異丙醇—二氯甲烷—異丙醇—甲醇—水進行。柱子轉(zhuǎn)回正常方向，使用分析所用洗脫液平衡。精品文檔放心下載注意：在使用另外的淋洗方法的時候，一定要先用水開始沖洗以去除緩沖液，保證其后的洗脫液可以混溶。

2．再生硅膠柱：首先倒轉(zhuǎn)柱子。以大約最佳流速的40%的流速沖洗柱子大約45-60分鐘，使用的溶劑的順序要按照異辛烷

（或己烷）—乙酸乙酯—干燥的異辛烷（或己烷）進行。柱子轉(zhuǎn)回正常方向，使用分析所用洗脫液平衡。謝謝閱讀3.再生極性鍵合柱：取決于使用的條件，可以使用反相的條件，也可以使用硅膠柱的條件。感謝閱讀注意：絕對不要使用酮類或醛類沖洗氨基柱，因為可能與固定相發(fā)生反應。四氫呋喃作為替代可以使用。精品文檔放心下載陰離子交換柱使用手冊（ChrompackHPLCIonoSpherAColumns）謝謝閱讀注意：ChrompackIonoSpherA色譜柱填充的是改性硅膠材料。向柱內(nèi)導入堿性溶劑（pH>6.5）或酸性溶劑（pH<2.5）會溶解硅膠材料精品文檔放心下載導致柱子損壞。在使用這個柱子之前，你要充分地熟悉這本手冊講述的內(nèi)容。謝謝閱讀簡介：ChrompackIonoSpherA柱填充硅膠基質(zhì)的強陰離子交換材料，含有季胺功能團。特別設(shè)計用于使用常規(guī)HPLC分析有機和無機陰感謝閱讀離子。1.色譜柱老化在開始分析工作以前，柱子必須經(jīng)過正確的老化。一個沒有正確老化的柱子可能會帶來問題，諸如很差的柱效或者分離情況發(fā)生變化精品文檔放心下載等等。要老化這類柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去離子水。再用你選用的洗脫液進行平衡。謝謝閱讀謝謝閱讀2.洗脫液推薦在這類柱上使用的洗脫液要求低電導，或者UV吸收的緩沖液，例如磷酸緩沖液，pH范圍從2.5到6.5。精品文檔放心下載1mM謝謝閱讀留時間，檢測或定量結(jié)果。洗脫液在使用以前要脫氣，并用0.45微米濾膜過濾，防止發(fā)生檢測和泵送問題。謝謝閱讀一定要在開始使用系統(tǒng)以前檢查有否微生物生長，否則你的柱子會堵塞，柱壓會升高到無法接受的水平。謝謝閱讀3.流量和壓力柱內(nèi)徑（毫米）流速（ml/min）最佳最高2.00.21.03.00.42.04.61.04.010.04.718.0注意：最高壓力：不銹鋼柱：4500psi；玻璃柱：3000psi謝謝閱讀增加流速或者降低流速要采取小的間隔變化以防止填充床的擾動。精品文檔放心下載0，等待洗脫液完全流出柱子為止（2感謝閱讀拆除柱子而沒有等待壓力的降低會損壞柱子。高柱壓的產(chǎn)生一般是由于不正確地使用柱子的結(jié)果。使用保護柱（見第6節(jié)）會防止污染物沉積在分析柱上。精品文檔放心下載4、樣品準備：保持柱子長壽的關(guān)鍵是進樣前適當?shù)牡臉悠诽幚?。你必須防止將疏水?與流動相極性差別很大的化合物泵入色譜柱，謝謝閱讀不管是來自流動相還是樣品。特別地，要禁止導入顆粒雜質(zhì)。這些最終都會造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。謝謝閱讀5、保護柱一定要使用保護柱，因為樣品和洗脫液污染可能會造成柱壓力的增高而且影響選擇性。對于ChromSep柱我們建議使用ChromSepAnion感謝閱讀交換保護柱。當柱壓增高的或者觀察到柱效降低的時候就需要更換保護柱了。對于常用不銹鋼柱，我們建議使用ChromguardAnion謝謝閱讀exchangeHighEfficiency（高效）柱(10X3.0mm)或HighCapacity（高容量）柱(50X3.0mm)。謝謝閱讀6、進樣量和濃度柱尺寸最大樣品體積長度*內(nèi)徑250×2.0mm±10μl200×3.0mm±15μl250×4.6mm±50μl250×10.0mm±250μl當樣品的洗提強度比洗脫液低（在柱樣品預濃縮）的時候，更高的樣品量也可以注射。感謝閱讀7、溫度：ChrompackIonoSpherA柱可以在室溫環(huán)境使用。為了提高柱子的穩(wěn)定性，建議不要在40°C以上使用。感謝閱讀8、貯存：在貯存柱子以前，建議先用去離子水，然后用甲醇沖洗。一定不要在柱子內(nèi)充滿緩沖液或者其他含鹽類的洗脫液的謝謝閱讀情況下貯存色譜柱。9、檢測靈敏度：對于使用鄰苯二甲酸緩沖液作為洗脫液的陰離子的檢測，以下幾種方法可用：·折光檢測·電導檢測·紫外檢測感謝閱讀鄰苯二甲酸緩沖液對所有三種檢測方法都是特別好的，因為鄰苯二甲酸緩沖液具有高的折光性，相對低的電導率和紫外吸收性質(zhì)。檢測波精品文檔放心下載長取決于要檢測的離子。10．系統(tǒng)峰：當你使用ChrompackIonoSpherA柱的時候，系統(tǒng)峰可能會出現(xiàn)。通常一個餾分既溶劑在前面，第二個餾分應當是硫精品文檔放心下載pH。位置取決于流動相的PhpH會使系統(tǒng)峰向前移動。在我們的實驗中pH值在感謝閱讀3.8-4.3之間最佳。11．柱效損失的可能原因額外的峰展寬。要保證管路的長度和內(nèi)徑都保持最小。洗脫的平衡時間不夠。不正確的洗脫液pH或洗脫液的離子強度。洗脫液中存在不正確離子。固定相污染。a.高柱壓伴隨分辨率降低。1．顆粒物積聚在燒結(jié)物或者填充物床上。（a）樣品來源---過濾或離心（b）洗脫液來源---過濾洗脫液，封閉洗脫液容器。精品文檔放心下載（c）系統(tǒng)來源---沖洗整個系統(tǒng)管路和泵；安裝在線系統(tǒng)過濾器。感謝閱讀2．蛋白質(zhì)類物質(zhì)的積聚（a）微生物在樣品中生長。3．微生物在洗脫液中生長。b.正常柱壓伴隨柱效降低1．有機污染（a）樣品中有脂肪，油脂，脂質(zhì)。固定相的表面被覆蓋。謝謝閱讀（b）從樣品中帶來的不確切的有機物或未正確制備的洗脫液。精品文檔放心下載（c）在洗脫液制備完成以后帶入洗脫液中的非特定有機物，例如在運輸時從大氣中帶來。精品文檔放心下載12.對于糾正污染問題的可能有效的操作3．準備新鮮的洗脫液精品文檔放心下載當用0.2到0.4微米的濾膜過濾，在使用以前要脫氣。感謝閱讀4．色譜柱再生要進行色譜柱的再生工作a．首先使色譜柱反向b．以0.4ml/min的流速用1M硝酸銨洗脫30ml。謝謝閱讀c．以0.4ml/min的流速用40：60（v：v）的甲醇/水洗脫30ml。感謝閱讀d．以0.4ml/min的流速用異丙醇洗脫30ml。精品文檔放心下載e．以0.4ml/min的流速用水洗脫30ml。謝謝閱讀f．以0.4ml/min的流速用洗脫液洗脫30ml。精品文檔放心下載g．將柱子轉(zhuǎn)回正常方向。陽離子交換柱使用手冊（ChrompackHPLCIonoSpherCColumns）精品文檔放心下載注意：ChrompackIonoSpherC色譜柱填充的是改性硅膠材料。向柱內(nèi)導入堿性溶劑（pH>6.5）或酸性溶劑（pH<2.5）會溶解硅膠材料感謝閱讀導致柱子損壞。在使用這個柱子之前，你要充分地熟悉這本手冊講述的內(nèi)容。謝謝閱讀簡介：ChrompackIonoSpherC柱填充硅膠基質(zhì)的強陽離子交換材料，含有磺酸鹽功能團。特別設(shè)計用于使用常規(guī)HPLC分析有機和無機感謝閱讀陽離子。在開始分析工作以前，柱子必須經(jīng)過正確的老化。一個沒有正確老化的柱子可能會帶來問題，諸如很差的柱效或者分離情況感謝閱讀發(fā)生變化等等。要老化這類柱子，首先要使用甲醇淋洗，然后使用去離子水。再用你選用的洗脫液進行平衡。精品文檔放心下載感謝閱讀pH范圍從2.5到6.5，其中精品文檔放心下載有乙二胺作為洗脫陽離子。絕對不能使用水楊酸緩沖液，因為水楊酸分解產(chǎn)物會改變固定相的性質(zhì)。洗脫液在使用以前要脫氣，并用0.5感謝閱讀微米濾膜過濾，防止發(fā)生檢測和泵送問題。一定要在開始使用系統(tǒng)以前檢查有否微生物生長，否則你的柱子會堵塞，柱壓會升高到無法接精品文檔放心下載受的水平。流量和壓力柱內(nèi)徑（毫米）流速（ml/min）最佳最高2.00.21.03.00.42.04.61.04.010.04.718.0注意：最高壓力：不銹鋼柱：4500psi；玻璃柱：3000psi精品文檔放心下載增加流速或者降低流速要采取小的間隔變化以防止填充床的擾動。如果你想更換柱子，要降低流量至0，等待洗脫液完全流出柱子為止精品文檔放心下載（2拆除柱子而沒有等待壓力的降低會損壞柱子。高柱壓的產(chǎn)生一般是由于不正確地使用柱子的結(jié)果。使用保護柱（見第6節(jié)）精品文檔放心下載會防止污染物沉積在分析柱上。樣品處理保持柱子長壽的關(guān)鍵是進樣前適當?shù)牡臉悠诽幚怼Ｄ惚仨毞乐箤⑹杷?與流動相極性差別很大的化合物泵入色譜柱，不管是來自流動相感謝閱讀還是樣品。特別地，要禁止導入顆粒雜質(zhì)。這些最終都會造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。精品文檔放心下載保護柱一定要使用保護柱，因為樣品和洗脫液污染可能會造成柱壓力的增高而且影響選擇性。對于ChromSep柱我們建議使用ChromSepCation謝謝閱讀交換保護柱。當柱壓增高的或者觀察到柱效降低的時候就需要更換保護柱了。對于常用不銹鋼柱，我們建議使用ChromguardCation精品文檔放心下載exchangeHighEfficiency（高效）柱(10X3.0mm)或HighCapacity（高容量）柱(50X3.0mm)。感謝閱讀進樣量和濃度柱尺寸最大樣品體積長度*內(nèi)徑250×2.0mm±10μl200×3.0mm±15μl250×4.6mm±50μl250×10.0mm±250μl當樣品的洗提強度比洗脫液低（在柱樣品預濃縮）的時候，更高的樣品量也可以注射。感謝閱讀溫度：ChrompackIonoSpherC柱可以在室溫環(huán)境使用。為了提高柱子的穩(wěn)定性，建議不要在40°C以上使用。感謝閱讀在貯存柱子以前，建議先用去離子水，然后用甲醇沖洗。一定不要在柱子內(nèi)充滿緩沖液或者其他含鹽類的洗脫液的情況下貯存色譜謝謝閱讀柱。檢測靈敏度：對于陽離子的檢測，建議進行電導率的測定,使用前面提到的低電導洗脫液。精品文檔放心下載柱效損失的可能原因6．額外的峰展寬。要保證管路的長度和內(nèi)徑都保持最小。謝謝閱讀7．洗脫的平衡時間不夠。8．不正確的洗脫液pH或洗脫液的離子強度。9．洗脫液中存在不正確的陰離子。制備新鮮的洗脫液。10．固定相污染。a.高柱壓伴隨分辨率降低。4．顆粒物積聚在燒結(jié)物或者填充物床上。（a）樣品來源---過濾或離心（b）洗脫液來源---過濾洗脫液，封閉洗脫液容器。精品文檔放心下載（c）系統(tǒng)來源---沖洗整個系統(tǒng)管路和泵；安裝在線系統(tǒng)過濾器。感謝閱讀5．蛋白質(zhì)類物質(zhì)的積聚（a）微生物在樣品中生長。（b）微生物在洗脫液中生長。b.正常柱壓伴隨柱效降低2．有機污染（a）樣品中有脂肪，油脂，脂質(zhì)。固定相的表面被覆蓋。謝謝閱讀（b）從樣品中帶來的不確切的有機物或未正確制備的洗脫液。精品文檔放心下載（c）在洗脫液制備完成以后帶入洗脫液中的非特定有機物，例如在運輸時從大氣中帶來。謝謝閱讀對于糾正污染問題的可能有效的操作5．準備新鮮的洗脫液精品文檔放心下載當用0.2到0.4微米的濾膜過濾，在使用以前要脫氣。感謝閱讀6．色譜柱再生要進行色譜柱的再生工作a．首先倒轉(zhuǎn)色譜柱b．以0.4ml/min的流速用1M硝酸銨洗脫30ml。感謝閱讀c．以0.4ml/min的流速用40：60（v：v）的甲醇/水洗脫30ml。感謝閱讀d．以0.4ml/min的流速用異丙醇洗脫30ml。感謝閱讀e．以0.4ml/min的流速用水洗脫30ml。感謝閱讀f．以0.4ml/min的流速用洗脫液洗脫30ml。感謝閱讀g．將柱子轉(zhuǎn)回正常方向。色譜流動相的種類及特性表溶劑的種類及溶劑強度參數(shù)ε名稱溶劑強度ε名稱溶劑強度ε名稱溶劑強度ε謝謝閱讀全氟烴0.25氯仿0.40正丁醇0.70戊烷0丙酮0.50二甲基亞砜0.75己烷0.01甲乙酮0.51正丙醇0.82庚烷0.01二氧六環(huán)0.56乙醇0.88CCl40.18四氫呋喃0.57甲醇0.95感謝閱讀苯0.32乙酸乙酯0.58乙酸1.00甲苯0.29硝基乙烷0.60乙二醇1.11感謝閱讀乙醚0.38硝基甲烷0.64甲酰胺-二氯甲烷0.42乙睛0.66水-常見物質(zhì)官能團的極性順序烷基〈鹵素〈（F〈Cl〈Br〈I醚〈硝基〈睛〈叔胺〈酯〈酮〈醛〈醇〈酚〈伯胺〈酰胺〈羧酸〈磺酸。由此可判斷出謝謝閱讀峰順序。1HPLC的色譜分離機理：疏溶劑理論在反相沖洗色譜中，鍵合固定相，C8和C18屬于非極性的；而流動相，水與乙腈或水與甲醇都屬于極性的。各種溶質(zhì)在色譜系統(tǒng)中精品文檔放心下載的保留或流出順序不同主要是它們的性質(zhì)不同：如分子大小及官能團不同；空間構(gòu)形不同；溶解度及極性不同，極性流動相中，溶質(zhì)精品文檔放心下載與固定相相互作用；非極性溶質(zhì)和溶質(zhì)的非極性部分與極性流動相相排斥并取向有機鍵合層，在它們之間產(chǎn)生疏水空穴，同時形成一精品文檔放心下載種締合物。這種締合物結(jié)合力的大小與溶質(zhì)的表面積和分子偶極矩的大小及極性強度有關(guān)；也與流動相表面張力，介電常數(shù)有關(guān)。感謝閱讀由以上基礎(chǔ)知識資料可選以下HPLC色譜條件：1、方法提要：本方法適用于特戊酸中控的分析。2、方法來源：金屬元素編制3、檢測儀器和試劑：儀器：HPLC1200色譜柱：HypersilODS2（200mm×4.6mm×5μm）精品文檔放心下載色譜純乙腈，超純水,H3PO4。4、測試條件：柱溫：40℃流速：1ml/min檢測器：UV=210nm進樣量：1.0ul運行時間：25min流動相（梯度程序）：T（min）流動相A（乙腈）流動相B(0.1%H3PO4)感謝閱讀0505013901015901015.0150502550505、流動相制備：脫氣并濾后使用。6、樣品制備：取約15mg樣品溶于25ml流動相中。精品文檔放心下載7、定量方法：扣除空白峰后，面積歸一化。從峰型以及出峰時間可認為方法可行，但如果樣品中含大量水或有機溶劑時，做高效液相色譜(HPLC)就不能說明真實含量了，這時感謝閱讀可考慮做化學分析。第四章化學分析方法選擇下面介紹化學分析方法選擇：先回顧一下化學分析法基礎(chǔ)知識。精品文檔放心下載一、化學分析法以物質(zhì)的化學反應為基礎(chǔ)的分析方法，主要有重量分析法和滴定分析法等。精品文檔放心下載1.重量分析法根據(jù)某一化學計量反應：X＋R＝P（待測組分）（試劑）（反應產(chǎn)物）從反應產(chǎn)物（P）的量來計算待測組分（X）的量。如果反應產(chǎn)物是沉淀，則稱量沉淀重量，從而計算待測組分的含量。感謝閱讀２.滴定分析法（容量分析法）根據(jù)某一化學計量反應：X＋R＝P（待測組分）（試劑）（反應產(chǎn)物）將已知準確濃度的試劑（R）溶液滴加到待測溶液中，直到所加的試劑恰好與待測組分按化學計量反應為止，根據(jù)試劑溶液精品文檔放心下載的濃度和體積計算待測組分的含量。3．重量分析法和滴定分析法的選擇：謝謝閱讀采用。滴定分析法操作簡單、快速，使用的儀器簡單，測定結(jié)果也較高，因此，應用比較廣泛。精品文檔放心下載二、試樣的分析過程，一般包括下列幾個環(huán)節(jié)：1.取樣；2.試樣的分解；3.測定；4.計算分析結(jié)果，并對測定結(jié)果作出評價。精品文檔放心下載取樣在實際工作中，要分析的對象往往是很大量的很不均勻的。而分析時所取的試樣量是很少的。因此，在分析以前，首先要保證感謝閱讀所取的試樣具有代表性。常用的縮分為四分法。在一般的分析工作中，先要將試樣分解，制成溶液，而后測定。試樣的分解是分析工作中感謝閱讀的重要步驟之一。在分析試樣時應注意下列幾點：（1）試樣分解必須完全；（2）試樣分解過程中，待測組分不應損失；（3）不應引入精品文檔放心下載待測組分和干擾物質(zhì)；（41.用水、酸、堿等溶劑處理。2.用謝謝閱讀適當?shù)娜軇┡c試樣在高溫下熔融三、測定方法的選擇和干擾的消除測定方法不同，干擾情況也不同。以測定某硅酸鹽中Fe2O3的含量為例說明。硅酸鹽的主要成分為SiO2、Fe2O3、Al2O3、感謝閱讀CaO、MgO、TiO2等。用下列幾種方法測定，由于測定方法不同，溶液中存在的其它離子對Fe3+測定的干擾情況是不同的。精品文檔放心下載滴定分析很很需要，下面做一介紹（1（一）酸堿滴定法以酸堿反應為基礎(chǔ)的滴定分析法。一般酸、堿以及能和酸、堿直接或間接發(fā)生質(zhì)子轉(zhuǎn)移的物質(zhì)可用酸堿滴定法測定。感謝閱讀（二）配位滴定法以配位反應為基礎(chǔ)的滴定分析法。（三）沉淀滴定法利用沉淀反應的分析法。目前應用最廣的是生成難溶銀鹽的反應，稱為銀量法。精品文檔放心下載（四）氧化還原滴定法以氧化還原反應為基礎(chǔ)的滴定分析法。（21.按一定的反應式定量進行(99.9%以上)；2.快(或可加熱、催化劑)；3.有適當?shù)姆椒ù_精品文檔放心下載定終點(指示劑)。置換滴定：用K2Cr2O7標定Na2S2O3(KI精品文檔放心下載返滴定、間接滴定（3一、基準物質(zhì)：用以直接配制標準溶液或標定溶液濃度的物質(zhì)謝謝閱讀1.組成與化學式相符(H2C2O4·2H2O、NaCl);精品文檔放心下載2.試劑純度>99.9%;3.穩(wěn)定(Na2CO3、CaCO3、Na2C2O4等）精品文檔放心下載二、常用的基準物質(zhì)有下列幾類：1.酸堿滴定法中常用的鄰苯二甲酸氫鉀，草酸，碘酸氫鉀，碳酸和硼砂等。精品文檔放心下載2.配位滴定法中常用Cu，Zn，Pb等金屬，有時也用碳酸鈣，氧化鎂等。感謝閱讀3.沉淀滴定法中應用最廣的銀量法，基準物為NaCl或KCl。謝謝閱讀4.氧化還原滴定法中常用K2Cr2O7、As2O3以及Cu、Fe等純金屬感謝閱讀5.常用試劑級別級別1級2級3級生化試劑中文名優(yōu)級純分析純化學純英文標志GRARCPBR標簽顏色綠紅藍咖啡色三.標準溶液的配制:標準溶液具有準確的濃度。配制方法有兩種：1.感謝閱讀溶液的濃度。如直接配制：K2Cr2O7、KBrO32.標定法。先稱取一定量試劑配成接近所需濃度的溶液，然后用基準物質(zhì)測定它的準確濃度。這種操作叫做標定。如標定法配制：感謝閱讀NaOH、HCl、EDTA、KMnO4、I3-舉例：酸標準溶液:HCl(HNO3,H2SO4)配制：用市售HCl(12mol·L-1),HNO3(16mol·L-1),H2SO4(18mol·L-1)稀釋.感謝閱讀標定：1.Na2CO3,270-300℃烘1hr,MO或MR+溴甲酚綠(△);2.硼砂(Na2B4O7·2H2O（NaH2BO3+2H3BO3),感謝閱讀60%相對濕度保存,防失水.pHep=5.1,MR.謝謝閱讀NaOH標準溶液的配制與保存配制:濃NaOH(飽和,含量約50%,約19mol·L-1)中Na2CO3沉淀除去,再用煮沸除去CO2的去離子水稀釋至所需濃度謝謝閱讀標定:1.鄰苯二甲酸氫鉀(KHC8H4O4),Mr=204.2，pKa2=5.4,PP,稱小樣,平行3份.感謝閱讀2.草酸(H2C2O4·2H2O),Mr=126.07，pKa1=1.25,pKa2=4.29,PP,稱大樣.精品文檔放心下載保存:濃溶液裝在帶堿石灰[Ca(OH)2]的瓶中,從虹吸管中取;稀溶液注意用橡皮塞塞緊.謝謝閱讀滴定方法的選擇：【一】酸堿滴定法(1)(2)反應過程簡單,(3)可以從酸堿平衡關(guān)系估計反應進感謝閱讀行的程度；(4)滴定過程中溶液的H+發(fā)生改變,有多種指示劑可供選擇指示化學計量點的到達謝謝閱讀對于酸堿的定義：按布朗斯臺德的酸堿定義，凡能給出質(zhì)子（H+）的物質(zhì)是酸，凡能接受質(zhì)子的物質(zhì)是堿。謝謝閱讀常用緩沖溶液的配制方法1.按比例加入HA和A(NaAc+HAc,NH4Cl+NH3);精品文檔放心下載2.溶液中[H+]大,加過量A-,溶液中[OH-]大,加過量HA;3.溶液中有HA,可加NaOH中和一部分,溶液中有A-,可加HCl中和一部分.緩沖溶液濃度的計算方法有:緩沖容量法、緩沖溶液pH計算式法、及摩爾分數(shù)法.謝謝閱讀（一）酸堿滴定法指示劑的選擇1、酸堿指示劑的作用原理酸堿指示劑是有機弱酸或有機弱堿，它們的共軛酸堿對具有不同結(jié)構(gòu)，因而呈現(xiàn)不同顏色。改變?nèi)芤旱膒H值，指示劑失去或得感謝閱讀到質(zhì)子，結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，引起顏色的變化。例如甲基橙是一種雙色指示劑，在溶液中有下式平衡和相應的顏色變化，增大溶液的精品文檔放心下載[H+]Hin表示指示劑的酸式型體，其顏色稱為酸色，In-表示指示劑的堿式型體，其顏色稱為堿色。指示劑在溶液中建立下感謝閱讀式平衡：HInH++In-KHIn是指示劑的離解常數(shù)，簡稱指示劑常數(shù)。溶液呈現(xiàn)的顏色取決于[In-]/[HIn]KHIn是謝謝閱讀常數(shù)，因此[In-]/[HIn]決定于溶液的[H+]。由于人眼對顏色的分辨能力有一定限度，只有當pH值從pKHln-1到pKHln+1時,可以謝謝閱讀明顯地看導指示劑從酸色變到堿色。這個范圍稱為指示劑的變色范圍.感謝閱讀2、影響指示劑變色范圍的因素影響指示劑變色范圍的因素是多方面的.對單色指示劑,指示劑的濃度有較大影響．對雙色指示劑，指示劑的濃度不會影響指示劑感謝閱讀的變色范圍。但是如果指示劑用量過多，會使色調(diào)變化不明顯，同時指示劑本身也要消耗滴定劑，因而引入誤差．溫度對指示劑變色范圍謝謝閱讀也有影響。當溫度改變時，指示劑的離解常數(shù)和水的質(zhì)子自遞常數(shù)都有改變，指示劑的變色范圍也隨之改變。謝謝閱讀酸堿指示劑Acid-baseIndicators序號(No.)名稱(Name)pH變色范圍(pHtransitioninterval)酸色(Acidcolor)堿色(Basecolor)pKa濃度(Concentration)1甲基紫（第一次變色）0.13～0.5黃綠0.80.1%水溶液感謝閱讀2甲酚紅（第一次變色）0.2～1.8紅黃-0.04%乙醇（50%）溶液感謝閱讀3甲基紫（第二次變色）1.0～1.5綠藍-0.1%水溶液精品文檔放心下載4百里酚藍（第一次變色）1.2～2.8紅黃1.650.1%乙醇（20%）溶液精品文檔放心下載5茜素黃R（第一次變色）1.9～3.3紅黃-0.1%水溶液精品文檔放心下載6甲基紫（第三次變色）2.0～3.0藍紫-0.1%水溶液感謝閱讀7甲基黃2.9～4.0紅黃3.30.1%乙醇(90%)溶液謝謝閱讀8溴酚藍3.0～4.6黃藍3.850.1%乙醇（20%）溶液精品文檔放心下載9甲基橙3.1～4.4紅黃3.400.1%水溶液精品文檔放心下載10溴甲酚綠3.8～5.4黃藍4.680.1%乙醇（20%）溶液謝謝閱讀11甲基紅4.4～6.2紅黃4.950.1%乙醇（60%）溶液感謝閱讀12溴百里酚藍6.0～7.6黃藍7.10.1%乙醇（20%）感謝閱讀13中性紅6.8～8.0紅黃7.40.1%乙醇（60%）溶液謝謝閱讀14酚紅6.8～8.0黃紅7.90.1%乙醇（20%）溶液謝謝閱讀15甲酚紅（第二次變色