高效液相色譜法習(xí)題答案

.word...word..第二十章高效液相色譜法思考題和習(xí)題1.簡述高效液相色譜法和氣相色譜法的主要異同點(diǎn)?！獦狱c(diǎn)：均為高效、高速、高選擇性的色譜方法，兼具別離和分析功能，均可以在線檢測不同點(diǎn)：分析對(duì)象及X圍流動(dòng)相的選擇操作條件GC能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品，占有機(jī)物的20%流動(dòng)相為有限的幾種“惰性"氣體，只起運(yùn)載作用，對(duì)組分作用小加溫常壓操作HPLC溶解后能制成溶液的樣品，高沸點(diǎn)、高分子量、難氣化、離子型的穩(wěn)定或不穩(wěn)定化合物，占有機(jī)物的80%流動(dòng)相為液體或各種液體的混合。它除了起運(yùn)載作用外,還可通過溶劑來控制和改良別離。室溫、高壓下進(jìn)展2?何謂化學(xué)鍵合相？常用的化學(xué)鍵合相有哪幾種類型？分別用于哪些液相色譜法中？采用化學(xué)反響的方法將固定液鍵合在載體外表上，所形成的填料稱為化學(xué)鍵合相。優(yōu)點(diǎn)是使用過程不流失，化學(xué)性能穩(wěn)定，熱穩(wěn)定性好，適于作梯度淋洗。目前常用的Si-0-Si-C型鍵合相，按極性分為非極性，中等極性與極性三類。①非極性鍵合相：常見如ODS鍵合相，既有分配又有吸附作用，用途非常廣泛，用于分析非極性或弱極性化合物；②中等圾性鍵合相：常見的有醚基鍵合相，這種鍵合相可作正相或反相色譜的固定相，視流動(dòng)相的極性而定：③極性鍵合相：常用氨基、氰基鍵合相，用作正相色譜的固定相，氨基鍵合相還是別離糖類最常用的固定相。3?什么叫正相色譜？什么叫反相色譜？各適用于別離哪些化合物?正相色譜法：流動(dòng)相極性小于固定相極性的色譜法。用于別離溶于有機(jī)溶劑的極性及中等極性的分子型物質(zhì)，用于含有不同官能團(tuán)物質(zhì)的別離。反相色譜法：流動(dòng)相極性大于固定相極性的色譜法。用于別離非極性至中等極性的分子型化合物。4?簡述反相鍵合相色譜法的別離機(jī)制。典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動(dòng)相組成的色譜體系。固定相，常用十八烷基〔ODS或C18〕鍵合相；流動(dòng)相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色譜系統(tǒng)，用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大于固定相的流動(dòng)相組成。反相鍵合相外表具有非極性烷基官能團(tuán)，及未被取代的硅醇基。硅醇基具有吸附性能，剩余硅醇基的多寡，視覆蓋率而定。對(duì)于反相色譜的別離機(jī)制目前，保存機(jī)制還沒有一致的看法，大致有兩種觀點(diǎn)，一種認(rèn)為屬于分配色譜，另一種認(rèn)為屬于吸附色譜。分配色譜的作用機(jī)制是假設(shè)混合溶劑〔水十有機(jī)溶劑〕中極性弱的有機(jī)溶劑吸附于非極性烷基配合基外表，組分分子在流動(dòng)相中與被非極性烷基配合基所吸附的液相中進(jìn)展分配。吸附色譜的作用機(jī)制可用疏溶劑理論來解釋。這種理論把非極性的烷基鍵合相，看作是在硅膠外表上覆蓋了一層鍵合的十八烷基的"分子毛"，這種"分子毛'有強(qiáng)的疏水特性。當(dāng)用水與有機(jī)溶劑所組成的極性溶劑為流動(dòng)相來別離有機(jī)化合物時(shí)，一方面，非極性組分分子或組分分子的非極性局部，由于疏溶劑作用，將會(huì)從水中被"擠"岀來，與固定相上的疏水烷基之間產(chǎn)生締合作用，其結(jié)果使組分分子在固定相得到保存。另一方面，被別離物的極性局部受到極性流動(dòng)相的作用，使它離開固定相，減小保存值，此即解締過程，顯然，這兩種作用力之差，決定了分子在色譜中的保存行為。一般說來，固定相上的烷基配合基或被別離分子中非極性局部的外表積越大，或者流動(dòng)相外表X力及介電常數(shù)越大，那么締合作用越強(qiáng)，分配比k'也越大，保存值越大。不難理解，在反相鍵合相色譜中，極性大的組分先流岀，極性小的組分后流岀。5?離子色譜法、反相離子對(duì)色譜法與離子抑制色譜法的原理及應(yīng)用X圍有何區(qū)別？離子色譜法(IonChromatography):用離子交換樹脂為固定相，電解質(zhì)溶液為流動(dòng)相。以電導(dǎo)檢測器為通用檢測器。試樣組分在別離柱和抑制柱上的反響原理與離子交換色譜法一樣。離子色譜法是溶液中陰離子分析的最正確方法，也可用于陽離子分析。反相離子對(duì)色譜法(IPC或PIC):反相色譜中，在極性流動(dòng)相中參加離子對(duì)試劑，使被測組分與其中的反離子形成中性離子對(duì)，增加k和tR，以改善別離。適用于較強(qiáng)的有機(jī)酸、堿。反相離子抑制色譜：在反相色譜中，通過參加緩沖溶液調(diào)節(jié)流動(dòng)相PH值，抑制組分解離，增加其k和tR，以到達(dá)改善別離的目的。適用于極弱酸堿物質(zhì)〔pH=3~7弱酸；pH=7~8弱堿；兩性化合物〕6?親和色譜的別離機(jī)制是什么？有何特點(diǎn)?傳統(tǒng)的觀念認(rèn)為親和色譜是基于配基-配體親和反響的原理，利用色譜的差速遷移理論，實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的別離，僅僅是一種組分別離的選擇性過濾法。然而，這一理論是建立在配基-配體親和作用是均相反響和宏觀平衡態(tài)熱力學(xué)的根底上的。但是，實(shí)際上目標(biāo)分子在兩相間分配系數(shù)過大，且在固定相上的吸附等溫線多不呈線性。所以，關(guān)于生物大分子在親和色譜中的保存機(jī)制及色譜過程數(shù)學(xué)模型的研究一直是一個(gè)相對(duì)薄弱的環(huán)節(jié)，有待進(jìn)一步的完善.親和色譜具有較高的專屬性，經(jīng)其別離，純化，濃集后的生物樣品具有較高的純度，大大降低了后續(xù)測定(如HPLC)時(shí)的背景噪音，進(jìn)而使得后續(xù)測定具有極高的靈敏度。7?速率理論方程式在HPLC中與在GC中有何異同？如何指導(dǎo)HPLC實(shí)驗(yàn)條件的選擇？解:液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素為渦流擴(kuò)散、流動(dòng)的流動(dòng)相傳質(zhì)、滯留的流動(dòng)相傳質(zhì)以及柱外效應(yīng)。在氣相色譜中徑向擴(kuò)散往往比擬顯著，而液相色譜中徑向擴(kuò)散的影響較弱，往往可以忽略。另外，在液相色譜中還存在比擬顯著的滯留流動(dòng)相傳質(zhì)及柱外效應(yīng)。在高效液相色譜中，對(duì)液液分配色譜，VanDeemter方程的完整表達(dá)形式為H2點(diǎn)：卜「■-_：；+□二:：一八一I■.由此，HPLC的實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)該是：①小粒度、均勻的球形化學(xué)鍵合相；②低粘度流動(dòng)相，流速不宜過快；③柱溫適當(dāng)。8?試討論影響HPLC別離度的各種因素，如何提高別離度？色譜填充性能液相色譜柱別離性能的優(yōu)劣，是由固定相粒度、柱長、由柱內(nèi)徑和填充狀況決定的柱壓降這三個(gè)參數(shù)度決定的。這三個(gè)參數(shù)度也決定了樣品組分的保存時(shí)間，保存時(shí)間不僅與色譜過程的熱力學(xué)因素k有關(guān)，還直接與決定柱效與別離度的柱性能參數(shù)及流動(dòng)相的黏度有關(guān)，這些參數(shù)都是影響色譜別離過程動(dòng)力學(xué)的重要因素。但在高效液相色譜中，別離柱的制備是一項(xiàng)技術(shù)要求非常高的工作，一般都是購置商品柱，很少自行制備。流動(dòng)相及流動(dòng)相的極性液相色譜中，改變淋洗液組成、極性是改善別離的最直接因素。液相色譜不可能通過增加柱溫來改善傳質(zhì)。因此大多是恒溫分析。流動(dòng)相選擇在液相色譜中顯得特別重要，流動(dòng)相可顯著改變組分別離狀況。流速流速大于0.5cm/s時(shí)，H~u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速，柱效提高不是很大。但在實(shí)際操作中，流量仍是一個(gè)調(diào)整別離度和出峰時(shí)間的重要可選擇參數(shù)。9?試討論反相HPLC的別離條件的選擇。反相HPLC法是以外表非極性載體為固定相，以比固定相極性強(qiáng)的溶劑為流動(dòng)相的一種液相色譜別離模式。反相HPLC色譜中樣品的保存值主要由固定相比外表積、鍵合相種類和濃度決定，保存值通常隨鏈長增長或鍵合相的疏水性增強(qiáng)而增。溶質(zhì)保存值與固定相外表積成正比，當(dāng)其他條件一樣時(shí)，溶質(zhì)在低外表積色譜柱上的保存值短。樣品的保存值也可以通過改變流動(dòng)相組成或溶劑強(qiáng)度來調(diào)整，溶劑強(qiáng)度取決于有機(jī)溶劑的性質(zhì)和其在流動(dòng)相中的濃度。10?在正、反相HPLC中流動(dòng)相的強(qiáng)度是否一樣？在正相色譜中，由于固定相是極性的，所以溶劑極性越強(qiáng)，洗脫能力也越強(qiáng)，即極性強(qiáng)的溶劑是強(qiáng)溶劑。在反相色譜中，由于固定相是非極性的，所以溶劑的強(qiáng)度隨溶劑的極性降低而增加，即極性弱的溶劑是強(qiáng)溶劑。11?什么叫梯度洗脫？它與GC的程序升溫有何異同？在一個(gè)分析周期內(nèi)，按一定程序不斷改變流動(dòng)相的組成或濃度配比，稱為梯度洗提。是改良液相色譜別離的重要手段。梯度洗提與氣相色譜中的程序升溫類似，但是前者連續(xù)改變的是流動(dòng)相的極性、pH或離子強(qiáng)度，而后者改變的溫度。程序升溫也是改良?xì)庀嗌V別離的重要手段。12．蒸發(fā)光散射檢測器的原理及特點(diǎn)是什么？蒸發(fā)光散射檢測器〔EvaporativeLight-scatteringDetector］是通用型檢測器，可以檢測沒有紫外吸收的有機(jī)物質(zhì)，如人參皂苷、黃芪甲苷等。―、ELSD原理恒定流速的色譜儀〔高效液相、逆流色譜、高效毛細(xì)管電泳等〕洗脫液進(jìn)入檢測器后，首先被高壓氣流霧化，霧化形成的小液滴進(jìn)人蒸發(fā)室(漂移管，drifttube)，流動(dòng)相及低沸點(diǎn)的組分被蒸發(fā)，剩下高沸點(diǎn)組分的小液滴進(jìn)入散射池，光束穿過散射池時(shí)被散射，散射光被光電管接收形成電信號(hào)，電信號(hào)通過放大電路、模數(shù)轉(zhuǎn)換電路、計(jì)算機(jī)成為色譜工作站的數(shù)字信號(hào)——色譜圖。二、特點(diǎn)1．洗脫液需要霧化，所以霧化氣流的純度和壓力會(huì)影響檢測器的信噪比。2?流動(dòng)相要蒸發(fā)掉，所以不能使用不易揮發(fā)的物質(zhì)來調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值?？梢酝ㄟ^蒸發(fā)溫度的調(diào)節(jié)來使比被測物質(zhì)沸點(diǎn)低的組分蒸發(fā)。在不使被測物質(zhì)蒸發(fā)的前提下，溫度越高，流動(dòng)相蒸發(fā)越完全，色譜圖基線越好、信噪比越高。如果被測物質(zhì)沸點(diǎn)接近或低于流動(dòng)相的蒸發(fā)溫度，那么無法檢測；不過，100%的水做流動(dòng)相，蒸發(fā)室溫度也才設(shè)為150攝氏度，沸點(diǎn)比水低的有機(jī)物質(zhì)完全可以用氣相色譜儀進(jìn)展別離檢測了。由于流動(dòng)相和溶劑蒸發(fā)了，使用ELSD檢測器收集的色譜圖一般沒有溶劑峰；而且梯度洗脫沒有折光視差效應(yīng)，一般不會(huì)岀現(xiàn)基線漂移。檢測光散射變化，所有進(jìn)入到散射池的物質(zhì)都可被檢測，而且響應(yīng)值只與物質(zhì)的量有關(guān)。濃度跟峰面積不成線性，分別取自然對(duì)數(shù)后成線性。13?常用的HPLC定量分析方法是什么？哪些方法需要用校正因子校正峰面積？哪些方法可以不用校正因子？常用的HPLC定量分析方法有：

外標(biāo)法：外標(biāo)工作曲線法、外標(biāo)一點(diǎn)法、外標(biāo)二點(diǎn)法等內(nèi)標(biāo)法：內(nèi)標(biāo)工作曲線法、內(nèi)標(biāo)一點(diǎn)法、內(nèi)標(biāo)二點(diǎn)法、內(nèi)標(biāo)比照法等使用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法時(shí)，可以不必測定校正因子，其它方法須要用校正因子校正峰面積14．指出苯、萘、蒽在反相色譜中的洗脫順序并說明原因。三者極性順序從大到小是苯、萘、蒽，因此在反相色譜中的洗脫順序?yàn)楸?、萘、蒽，苯最先出峰?5?宜用何種HPLC方法別離以下物質(zhì)？〔1〕乙醇和T醇；〔2〕BA2+和S「2+；〔3〕正戊酸和正T酸；〔4〕高摩爾質(zhì)量的葡糖昔?！?〕正相鍵合相色譜法〔2〕離子交換色譜法〔3〕離子對(duì)色譜法〔4〕空間排阻色譜法16?欲測定二甲苯的混合試樣中對(duì)-二甲苯的含量。稱取該試樣llO.Omg,參加對(duì)-二甲苯的對(duì)照品30.0mg,用反相色譜法測定。參加對(duì)照品前后的色譜峰面積（mm"值為，對(duì)-二甲苯：A40.0,a'104.2；對(duì)對(duì)間-二甲苯：A141.8，A'156.2。試計(jì)算對(duì)-二甲苯的百分含量。〔20.0%〕間間40.0/141.8A/A40.0/141.8m=Am對(duì)——間=30.0x=22.1(mg)對(duì)對(duì)A/A-A/A104.2/156.3-40.0/141.8對(duì)間對(duì)間22.1①%=x100%=20.1%對(duì)110.017?廿算例2中烘雌醇的校正因子及含量?！?.02,0.0369mg/片〕m/A0.035x17?廿算例2中烘雌醇的校正因子及含量。〔3.02,0.0369mg/片〕m/A0.035x10/(2.442x106)?=?炔==3.02炔m/A0.0733x10/(6.578x105)A試樣含炔雌醇的量m=f-m?-快=3.02x0.0733x10x炔炔sA6.578x105sm每片含炔雌醇的量x60.3=0.0369(mg/片)732.8ss2.442x10618?測定黃苓顛粒中的黃苓素的含量，實(shí)驗(yàn)方法同例1。測得對(duì)照品溶液〔5.98g/ml〕和供試品溶液的峰面積分別為：706436和458932，求黃芩顆粒中黃芩素的含量?！?.55%〕ACx10-6x10x50B%=―試x—對(duì)黃苓素A0.1255對(duì)458932x7064365.98x10-6x10x500.1255x100%=1.55%19?測定生物威試樣中黃連威和小檗威的含量，稱取內(nèi)標(biāo)物、黃連威和小檗威對(duì)照品各0.2000g配成

混合溶液。測得峰面積分別為3.60,3.43和4.04CM2。稱取0.2400g內(nèi)標(biāo)物和試樣0.8560g同法配制成

溶液后，在一樣色譜條件下測得峰面積為4.16,3.71和4.54CM2。廿算試樣中黃連威和小檗威的含量?！颤S連堿26.2%，小檗堿27.3%〕

用校正因子法計(jì)算ssm黃^黃=生=四=105m/AA3.43ss黃360—0.8914.04(C%)=黃3黃xm=37更105x02400(C%)=黃Am4.160.8560(C%)(C%)=小屮xm=氣！嚴(yán)x冊x100%=27-3%4.1620．計(jì)算在反相色譜中甲醇-乙腈-水(60:10:30)的強(qiáng)度因子。如果改用四氫呋喃-甲醇-水，水的含量不變，為了保持一樣洗脫強(qiáng)度，甲醇的比例是多少?(2.12，68.7%)20．計(jì)算在反相色譜中甲醇-乙腈-水(60:10:30)的強(qiáng)度因子。如果改用四氫呋喃-甲醇-水，水的含量不變，為了保持一樣洗脫強(qiáng)度，甲醇的比例是多少?(2.12，68.7%)S=S申+S申+S申=3.0x0.60+3.2x0.10+0x0.30=2.12混甲甲乙乙水水水含量不變，設(shè)改變?nèi)軇┖?甲醇的比例是X,則3.0xX+4.5x(0.7-X)+0x0.30=2.12X=0.687=68.7%21.用15cm長的0DS柱別離兩個(gè)組分。柱效n=2.84x104m-測得t°=1.31min；組分的tr1=4-10min；tR2=445min°⑴求％、人、°、R值。⑵假設(shè)增加柱長至30cm，別離度R可否達(dá)1-5?(⑴k=2.13、k=2.40、a=1.13、R=1.33,(2)R=1.88，能)12t't—tk=-RT=t't—tk=-RT=-R101tt001t't—tk=-R2=02t0ka=rkna—1kR=xx2—4a1+k2t'413=2.131.31空亠=2.40t0240=1.132.131.31<2.84x104x0.151.13-12.40xx=1.331.131+2.40R2R2L1.332胃R2=1-88R2L'R2222增加柱長至30cm分離度能達(dá)到1.5

高效疲相哲錯(cuò)實(shí)磴技術(shù)問談解答1、高蠻灌孫邑譜罡如何實(shí)現(xiàn)高效、快速、靈戲的?解:迂專引酉理血匚技才:丄的成戲門宙眶香工上英色.左十，城匸的高0、三速叮2耳馳禹旳曲上，*旳5—10凹超斑上正珥人翅藝乜改.篦航連皿「2?&史、業(yè)旳…吒堆片、；；':幾學(xué)唸;戈!器.黒高唸;更.門也壯典滲利衛(wèi)譜曲r?-..Ami達(dá)到高敦、忸逋、靈矽。2.與氣相邑譜法孫比高效液相色簪有哪些憂點(diǎn)和r足?解：氣相邑譜的片析對(duì)冢罡在校退T具有一定的揮發(fā)■性i對(duì)熟穩(wěn)定購物歩。固此它只限于分析T體和沸點(diǎn)■低的忙合輛或揮發(fā)■性的衍主乩血高回護(hù)怕看E］丁"破體詐対毛I(xiàn)仃八史;利打的呵由左選戶冊:壬v牠T右一三紇按解豚二廠■i立桂粘芽：S?□［:郛握言■二*冃，卑九也訂于祁些沖盧丈-比"2；電、糾乜言工蓋M仁廣砌.位垃,?心叮匸丁右.葛于埜化二轉(zhuǎn)、執(zhí)再定性差的天熬產(chǎn)靭竽在前已知的育機(jī)化臺(tái)物中,只有20%^品可不經(jīng)優(yōu)學(xué)處豐而戢?？吹赜脷庀嗌珕釠@離，B0騙的育機(jī)化合輛更用高散灤相色譜丹析。弓相色譜中謊動(dòng)相是情性的，它對(duì)組丹沒有忙用力，儀起運(yùn)載作用、而高奴海相色譜的流動(dòng)相不僅起運(yùn)載柞用r而且流動(dòng)相對(duì)組廿有一定親合力，可以通過改變流動(dòng)相種類和組成握高廿離的迭舞性，另外可作漩動(dòng)相的優(yōu)合物多』選擇余劃廣0習(xí)=7口至i亍寸，高隸蘋塑邑:晉紇上一個(gè)口點(diǎn)壬毘二的回吹rt轉(zhuǎn)音X，J史F-言器哎匸匕子三曲，門“Jk言日二忙臨旳蛆創(chuàng)攵集=回快是定量的,可臥用來提逐和制備具有足醇純度的單一輒恥高效液相邑譜不足的是,日前檢測器的靈敏度不及弓相色譜=巫須特別注M柱外效應(yīng)啊柱效率頂色譜:井鑫的影響?囂試比較弓相色譜與獨(dú)相色譜的H-u曲線'廿析產(chǎn)生不同的廂因°IH：從團(tuán)可看出,汽相邑譜和潘相魚譜得到的M曲練飛狀迥然不同，漩動(dòng)相的詵速對(duì)柱效的影響也不#?在S相色譜的H-u曲浜上.，令換右貓曲丟￡土頁蘭名巴級(jí)右晟氏占，過”：吐敷最E悵高最心：Ti速嚴(yán)芻”花月巨-剳卜u曲找,r±】匚瓷壬菸汽底左増加的現(xiàn)象，由于昂桂謊速趙近于窣，一般觀察不到員低板高相對(duì)應(yīng)的員哇浣速。在正常的情況下』詵速降低』板高H思是腔低的，遠(yuǎn)與弓相色諂明且不同亠在汽相邑譜中養(yǎng)動(dòng)相漬速塔大，拄如呈直線腔惟』而在液相自譜中「洗動(dòng)相逝速増大，柱效平娠降爍*苴主靈J?因是逆■相哲譜的流動(dòng)相対液休，渣相的護(hù)散系數(shù)Dm很小」通第懼為弓相擴(kuò)散系數(shù)的10421心分之一』所以分子護(hù)飯項(xiàng)在誼u時(shí)也不起爭丈作用、因此浹相邑語H_u曲線未龍出現(xiàn)鍛速P$Mr扳髙塔加現(xiàn)象a到高速吋，雖幣柱內(nèi)線速提高』唱國走相和渝動(dòng)相的傳質(zhì)都胡很快進(jìn)行，前Hu曲線上升韁慣。-.簡述潮目色諾中引起色語峰擴(kuò)展的主更因甌如何減少詔帶擴(kuò)張*扭高枉效?解；潘相色譜中引起魚譜烽擴(kuò)展的主要因薰內(nèi)渦詵擴(kuò)豈.流諂相傳質(zhì)’停留沆罰相傳質(zhì)E柱外效應(yīng)。在渝相魚譜中要減屮譜帶擴(kuò)張，提高柱SL要牆少續(xù)料顆粧直徑』襯小境料禮穴深度，提高裝填的均勻性」釆用低牯度溥別作淡動(dòng)相，沛速盡可衲氐同時(shí)要盡可龍爰用死作積轉(zhuǎn)4、的進(jìn)徉器*檢測器，接咲和傳輸菅絨等。乩為什么要提出折合委數(shù)賄何特點(diǎn)?審:為ii=u言代.質(zhì)環(huán)'工件x機(jī)巨〒連:WGddng穴兒市刊刊同，壇充臥f.才金世克dp『、同,RrfrH-u曲練■?同.A.J-q魚譜巾，培板高度是粒度的函數(shù)』為了比輕不向苗詡茶件下的板高H.提出折合拿數(shù)，自括折合按高、折合流速、折合拄長亠其特點(diǎn)是對(duì)于不同粒度的域斛能得到相同的日一山曲賤，因此可以在相同的條件下比較不同填料的柱玻。G色詡長度為15E1,戟體粒虞為E一另一鳥柱長為購im載休粒度切Dm，兩柱的柱敷相等嗎?解：拗折合桂長為30000,E柱的折合柱繪也為帥叫0』表明組分在兩抿柱內(nèi)從柱九口到出口都經(jīng)過3DD0X■戟怵顆粒，兩柿的柱5S相等「入何謂梯度滯洗,適用于哪些樣曷的分析孑與程序升溫有什么不同0草：誦冗期;」辺占7TH哥二掛匚上.刊FtlllTMkmpH|巨蘭庁龍愷曰三迄嚴(yán)［?？盏pTT忌■■圭「訛|、=,片.呵乍童時(shí)間短、擁拼不増'茗至重番的組廿』保留時(shí)間過長而峰形扁平的組分茯得很好的井臥特別適合樣品中坦廿的k值范圍狠宜的復(fù)親樣品的丹析「梯虞沸沸十井類儀行相色譜的程序升溫』兩者的目的相同?不同的足程序升溫足通過程序改變柱逞*而液相色譜定迪過改變詵動(dòng)相組咸*極性、pH儈來適到改變曲目的。乩淒動(dòng)相対卄么英箭先脫戶瀟用的脫氣方注有哪幾種?腿：：&］列匚：.亍缽〒本芥禮「.；”.=戊廠命.三:口井廿加炸.U.眄？〒中污先-T7-T.目》=：靛口1,一疋切!|;活輕F譜劑中的氣萍進(jìn)入色諸在時(shí)『可能與瀟動(dòng)祁或固定祁塩生化學(xué)反應(yīng);謂解氣悻還會(huì)引起英些萍品的氫化降解.對(duì)井冉和廿析結(jié)果芾來謠差*因此，快用前吃以頁進(jìn)行脫弓處哩a當(dāng)用的脫弓法有味下幾種：〔uiimw｛弓法;門〕抽吸脫吒注;心）吹歳朋弓法;（4〕起聲浹振蕩脫氣法。乩按固定相孔徑犬小分類，酒相色憎固定相有哪幾類?旨肖什么特性及適用范國？解：從固罡相的孔隙深虞考慮』洛祁邑諾固罡相廿E表面夢孔辿潼殼型評(píng)全夢孔型（全孔型）兩類"裘面參孔型固定相寥孔層I?度小JL試，相對(duì)死體楓小，出曜迅速，桂效高」新粒較犬』溢遺性奸』由于孔潔，梯度港詵時(shí)，當(dāng)流動(dòng)相成分改變后,孔內(nèi)外浚動(dòng)相成分龍迅速達(dá)到平衡，機(jī)械強(qiáng)度高，裝柱容易』其不足的是由于務(wù)孔慝障鹿屮，因而柱容量屮，最大允許樣品蚩賀到限制，適用于比較簡單的徉呂分析及快速分析a蘭左二蘭同二？丨，已丁期二和乳二L必很沬?:速夏較久工衣巨”杯巧；憶心二:一時(shí)沅匸=冃寸寸|r左只卩：1軻也;n晟丿芮.二亍可蟲呈人,請人允評(píng)呻；屋〒犬頁務(wù)*炸HJ化■世總埴刖r十芒i剤-II比.兀乜予丁H棧乍比；I.和存I?.士〒和「華匕療、itp固定相特別有利于痕蚩組廿及寥組分復(fù)雜泯合糊的廿離廿析*10、什么叫化學(xué)yjafettf?與浹一液包詩相比有何優(yōu)點(diǎn)？解;通過優(yōu)學(xué)反應(yīng)，將固罡沖鍵合到載體表面』此種固走相稱為優(yōu)學(xué)磁合固定相;丟用化學(xué)鍵合固走相的邑謹(jǐn)法，稱対化學(xué)龍合魚"與液一漁廿配色譜相比，鍵合皆譜建的王要優(yōu)點(diǎn):卩〕化學(xué)毬合固定相常緬:在使用過程中不流失。總］適宜用棉度獅沸"⑶適含于k范囤很寬的樣品。円）由于雀合到栽體表頁它胡團(tuán)』尿可是非楓性的』也可是按性的，囲此應(yīng)用面廣?11、（選擢題）在液相魚譜中，常用作固運(yùn)相合相基休的物底是人廿子端艮畦肢匚範(fàn)址鋁［＞一活世炭卑；E.UE：”要恥成乂學(xué)鎮(zhèn)士d寧均,阡月的甘匡駅柑&仃某種F7反二送件,卜二f匚衛(wèi)山2?丁忙屮I門計(jì)亞旨門汀戯匚，戸許.：：.：二尋-三丫|.活y官能團(tuán)。12、高敕港tl色盾柱有哪幾種類型?細(xì)徑柱有什乂憂點(diǎn)?解:高效戒相色譜注丈孩可廿為三種類型：內(nèi)徑小于2mm的稱九細(xì)營徑或徵營徑柱;內(nèi)徑在2-5mm范圍內(nèi)的罡常烈高效液相邑譜桂;內(nèi)徑大于5ee的一牆衲半制備在或制備柱*細(xì)菅輕柱的主要優(yōu)點(diǎn)是：〔□廿禹效能亂（2）潼動(dòng)相爆桂潼速抵，消耗蚩少「（羽可采用李種檢測尋，愼于聯(lián)用（CLCMS,CLC^TIR）.⑷采用細(xì)而擔(dān)的毛細(xì)管拄可以聶高分曲速度丄實(shí)現(xiàn)恢速芬析?

爍什么叫良相色譜?試從固罡相，溢動(dòng)相、澆出友庫■■渣動(dòng)相扱性的斃響等幾十方面比較正相和反相的區(qū)別"解：澆動(dòng)相的櫃■性比固罡相的櫃性強(qiáng)的邑譜體孫叫反相邑譜。側(cè)如S十八烷基硅膠鍵合相（005肪固左相，厲甲卿水作渣動(dòng)相』罡典型的反相色譜.正相色譜和反相邑諳過兩種按作模式的主要雖別見下表:IE相和更相邑譜的區(qū)另憂較項(xiàng)目正相色譜反蔣色譜同"II㈡加I渣出次＜溢動(dòng)相極性的筆響楹愷非（弱）扱fl獲性組労k±片-I詹+:.硏小非（弱朋性獲-I櫃性組另k小片-I嗇匕冊丿14*種液相色諳澆功相有何要求?解：用作犧相色譜澆勁相的溜利，耳死度和化學(xué)特性塾頃滿足色譜過程中蠱定性和重復(fù)性的要求.對(duì)徉品要有一罡的潺解昶±h粘度小』址學(xué)穩(wěn)定性好，避免發(fā)生不可迦的化學(xué)吸溥剖應(yīng)與檢測器相匹配』不干洼所便坤檢測器的工作，制備色譜的溜利應(yīng)不干擾對(duì)片離各組舟的回收"喘此洪外，選擇的溥剖對(duì)所給罡的樣品組廿具有含適的櫃性和良好的選攆世°在15（]也nm硅肢柱澆動(dòng)相九已協(xié)甲^（150：外紫外檢測器邑譜棗件下井禽而熾先嵐判斷収下組井的岀醴歡藏再什直？解：在絡(luò)罡的色譜殺件T,組廿E先岀區(qū)坦井AM出1臥U畦肢為固罡相』己烷/甲酣口切：2｝九漬動(dòng)相，謹(jǐn)體鏡詬正相色譜』樣品的樹生朋出在正相邑譜體東楹性小的組廿先岀醴」極性大的組井后出嶂，所踐出嶂嵐序?yàn)锽先出，A后出"fiTk,ff杲紡；下氓簾盯間力30Ein,汕輿找岡口帝*血腳乂w試牯円和旦種冷m：謹(jǐn)組分的惺留時(shí)間？為什么？薛；込二奈廠11■向池譜■=采*■+戈't滾丨，；注"f摘出弋呆昌q：4r“.心廿I耳繪■凹丟f噸y.行卡I:沁養(yǎng)計(jì)心亍029.04&.0,38,因此覽用潯剖強(qiáng)度姿數(shù)丈于甲琵的己BL可維恵誦化臺(tái)物的保留時(shí)間「17x在高敘港相色譜中』組丹和謠劑井子之間存在1即幾種作用土I?鮮；幾在色題力*忸接作用、氫鋰作I和介電-冃等E3種忙用力。10H.'■.足溜剖按性童數(shù)與溜劇馮強(qiáng)度?■■；■Z間T壬丸-U::]?解：聶剖幷子與潯質(zhì)曲子"魚敷力*偶按作用力、氮鍵作用力邁仆電作用力四種萬式進(jìn)彳亍相互作用的能力稱打分于的'■扱■性”』潯剖的這種能力以溝剖根性姿數(shù)P來示』尸値越大，溥剖的根性越強(qiáng)°潯捌退度抬用作i心帥孑溥剖?工；吩從魚譜柱上洗脫下來的能土I°潯剖退度直接與潺劑的梃性有關(guān)，而且蔭不同色譜體聚而婪，在正相邑諳體孫中，菇制桓世增抑，療組井從桂上洗KH下來的能力增皿即何越大的濬亂逞劑強(qiáng)度越犬。在反相邑譜中，溥剖極性;耐小，使組井從桂上詵脫下來的能力增加』即P邀小的濬那潯剖強(qiáng)度越十、i趴預(yù)測在正申悒譜丄反相色譜■'■-/.：I-組舟繭I.U七.T.解：在正相邑譜怵孫中組分的出曜灰序尢：櫃性弱的組分』在盜動(dòng)相中潛解度棧九因此k值小‘先出蠅。楹性強(qiáng)的組舟，在固定相■I的潯解度菽丸』因此k值大,后I.垢.在反相色譜中組井的出嶂友庫為：接性弱的組井在固定相上的落解度犬』k值大，后出幢，相反扱性強(qiáng)的組分在溢動(dòng)相中落解度犬』kfSd^所"先出（S*20、在DOS固宦相上，厲耳醉為連寸TI，某組井&;分配容xld=1.2,如門扈睹為洼寸TI-其國加礎(chǔ)毎少？為卄2?解:據(jù)題童為反相色譜體亂k值增如在反相色譜庫軽中』溢動(dòng)相由甲醉孌為乙為溥訓(xùn)櫃性塗數(shù)由5.壤為5,乩增加了，但組分在盜動(dòng)相中的謠解度反而對(duì)小‘所以k值増圮由1衛(wèi)增丈為224。2b在反相邑譜中，浚動(dòng)相從4（毗W/V）甲酯一水改孌対朋％（V/V）甲審一衣，冋俎分的謂整保留值將改變多少？州十嘗？（P1甲番=b.l.U5.1）提示:對(duì)于由潯別4和日組戰(zhàn)的二元混臺(tái)滝劑」其按性可表示為Pab'=dP,a-+hPb*武中語％分別為潯劑辭H丄47.口;汕?中的井如解：杷KHt配比時(shí)，混音滝劑的祗性為卩］'=0.16x5.1+0.6x10.2=8.16swwae尤時(shí)，混合潯利的極性.'P2fO.6k5.1+C.斗；<KL2=7,1丄P2=RT-P2'=7.M-8.16=1.02根據(jù)反琳色諸悸盂.-.t.7ll=-v.J^.和?回rri肌I：i孑制:「冋加，?哼P出孑1/3.222、某色錯(cuò)體系釆用工5%三筑甲烷F正己烷対違動(dòng)相』上現(xiàn)組分井高孑E連;二，憩通過改孌茨動(dòng)相的選擡■性來改售分高迭擇世■■選^.-^1/Li訂二丄-川■■祀：問（rchcbzj.i,r<^=5.i）提示:潼動(dòng)相選擇性的改變是迪過煤持譜劑強(qiáng)廈不變時(shí)改寰流動(dòng)相組成來實(shí)觀的』改變前流動(dòng)相A/B和段變后的諜動(dòng)相A/C的組咸有F列關(guān)驀:解:25%的CHO37正己烷與37%乙曲正i1.<■：的濬訊強(qiáng)度相竽,但對(duì)樣占.的分萬選笹性不同。2J.什幺叫離子魚譜7庫:在假交換容蚩的分離柱上,井離拝品直子,而在高交換容蚩的抑制柱上通過化學(xué)反應(yīng),把具有髙電導(dǎo)的瀆動(dòng)相銬吏為悵電導(dǎo)FT：看日|.弋吁就可"在由號(hào)椅叫器I不苻禹弔?「伍〒曲|三味弐號(hào)約“刖.蛙沖耒I汁卻「門羽卩護(hù),號(hào)1；；譏討ITi約玉丄=獻(xiàn)理卜刁塔丁W"、為什么摩膠色譜中任可組分的分配系數(shù)業(yè)煩符音口如杲K>喘明什么冋題?解：悶為坦分的少配寒豹亍K=O^Cm■C￡與5廿別対詛井在固定相和茨動(dòng)相中的敢度，當(dāng)分子直徑衣于固定時(shí)兒徑時(shí)，此時(shí)Cm=0,.-.K=0.當(dāng)井子直徑吵于孔徑時(shí)』組井向孔隙內(nèi)邃動(dòng)相擴(kuò)亂達(dá)到平銜時(shí)，一半組丹在孔隙內(nèi)，一半在孔隙外，此時(shí)K=ld若分子宜徑介于以上兩種根限悄況之間，K一走介刊與1之間.可見在灘舷色譜中「任何組疔的分配系數(shù)7?0<K^Lt如果K》l,這塩明此時(shí)的分商方式已不是純粹的星腌邑語,苴井海過程受到其他作用力（如喝附）的芟配。25、某人用護(hù)膠魚譜；'x-盒祭物樣品「分ir.'qJ瀕產(chǎn)，他也甕違動(dòng)相的坦成后，井蔥IB況丸為誼4,玄種說法對(duì)匕丄|?■:'.?解：這種說法不對(duì)?在凝腔自譜中詵動(dòng)相只起運(yùn)載的作用，不能依室改變說動(dòng)相的性盾和組咸來改善邑惜體系的選擇性a茂膠邑錯(cuò)II迪用巴飛油:_去亍miH走F門兀ulM狂馴IU-,尸衛(wèi)已F節(jié)冃勺的刊習(xí)打二卻。.回冋'芳丈喘汕相爼威“T砲悟況<.'迪進(jìn)"是F可能的°Z&-（選擇題〕浹相爸鑿中迪用型檢測器是A.紫外喝收檢測器日.示差折光檢測器嘲導(dǎo)池檢測器D.更光檢測器膵:BL示差U比險(xiǎn)測器.九D為選擇性檢測豁幼氣相色譜中通用檢測器。27.為了測定鄰氮基苯圖中徹蚩雜盾苯氮，現(xiàn)肖下列固定相：硅膠、OD6律合札下列流功相：水一甲臥異面瞇一己烷』應(yīng)迭用唧種固定:相.澆動(dòng)相？為卄么?解：鄰氨基苯酎屮微童雜質(zhì)苯氨測了,為了艮好行離」應(yīng)讓苯氨先出庭,由于苯氨的擾性彳于鄰氨基苯酎』因出也采用正相魚譜法』應(yīng)選硅膠溝固主相「異丙謎一己烷為涵動(dòng)相。2S-.在aDStU合1E罡相」甲曹一水為瀟動(dòng)相時(shí)試判斷四種叢并二矗殺蘢的出峰順序■:為件么?馨；h譜孑吟為心］衛(wèi)戶.譜倩柬，在0］阿啟體別盼：］；*、，n±l.li.孑UH庇；.加十N豆J-2—1-西、用多孔崔版為國定相［流動(dòng)相為四氫咲喃，井禹以F各組井，試判斷各組廿的出蜂順序*為卄幻解：屣膠魚譜組分的出幄枝序是握據(jù)分子尺寸尢小，尢的先出惟.故出噓坎數(shù)為n=9、氐7o30.廿離含陋類和季覆接的樣品，臥0.2MHCI04落液為固定相，以丁裁一二氟甲烷一己烷為流動(dòng)相，已知組井島的棵宙時(shí)間為&.2rrnT死時(shí)何為社伽乩在另一報(bào)拄上，苴他殺件均不改變,只將HOO4的沫庭增加一倍，間組片島在第二根柱上的移動(dòng)連率『是在第一根1-I的幾倍?解：從題音分析知，該題分離裘型是正相離子對(duì)芭譙,因此監(jiān)與KBP的關(guān)粟為:A在第二視桂I的稼動(dòng)速率是第一視從的1.7?倍"高敷液相色譜常見問題與解答聞讀層數(shù)：E34岌布時(shí)何：；I；-］i2015:13:311何謂反擁柱、正相柱？竊“反相擠和“正相”的軽是液相色諸袪早期提出的舷，當(dāng)時(shí)褪合相色譜^尚未出現(xiàn)，固定相破徐覆在載怵表面，根為流失，対此科學(xué)家對(duì)流動(dòng)相使用給出了臺(tái)理的建訛流動(dòng)相機(jī)性與固極性應(yīng)具有較大差別，以堿少固定液流失。固定相極性弱于癇動(dòng)相時(shí)的確相色譜袪被稱為反相色普宙固定相極性翌于戲動(dòng)相時(shí)的液相色譜注被稱為正相色借氐盡管目前樓合相色譜柱己成帥主益，但這一概急在色譜方鎧開發(fā)、預(yù)測出舞順序等方面耳有重薜意義。由上面的介紹可知具體的色譜方法、色譜柱屬于正相還是反相不収取決于固定相根性，同時(shí)還取決于濟(jì)動(dòng)相根性.CLS（硅膠犍合+A烷基硅烷）、C8（硅膠鉗合辛基硅烷）、PH（硅膠錐合苯基硅烷）等邑譜柱.由于固定相極性極憾比目前已知的任何癇動(dòng)相的極性都要低，因而是標(biāo)推的反相柱；Sili^（硅膠八WH2〔硅fl潔音気丙基6珈〕具有較高的極性，主要用于分離帶有極性基團(tuán)的化合物，所用流動(dòng)相的極性通常悵于這些固定相，因而是標(biāo)港的正槨丄.口f〔啣交樋合購丙基）的極性適中，當(dāng)謊動(dòng)相根性起過CNH右它屬于反相柱*反之則是正相柱"2色諸性規(guī)格對(duì)令折結(jié)果會(huì)產(chǎn)生柯種鏗響皆答匕色借杠內(nèi)徑?jīng)Q定割.樣量，載拝量弓內(nèi)徑的平方成正比；色借￡長度卻塔板數(shù)咸正比，與朽壓航正比，粒徑影響鍋號(hào)擴(kuò)散祗粒徑趣小涓流擴(kuò)檢相趣小，柱體趣高，粒徑與柱敢近畑反比I粒徑趣小，壓力也起大，壓力與粒徑的平方成反比.填料孔徑對(duì)分析對(duì)彖的分子量有限制?當(dāng)孔徑為分析物尺寸的5倍以上時(shí).分析物才餡廝」通過孔隙.孔徑處于加％20A的色譜柱適用于湖對(duì)分子童小于LQtm的分析籾孔徑為3曲A的色譜柱可以満足分子童處于10000以上的大分子化皆枚分析"

'?、液相邑諾分析屮如何』翻略;倚離刪答.下式為芳高度計(jì)算公式R.=1/4(A護(hù))0-1〉［Kf(K+1)］EfficietK1)Selecrhi^C^paciiyAS(Efficiency：反映色譜柱性能■柱總高.分離度越加在其他條慚亙定的熾兄下.塔扳數(shù)増加一倍■分離度儀摘帥如操柞中*可通過下面商種方式増加塔板數(shù)進(jìn)而擔(dān)高分離直H-.使用長柱或雙柱串聯(lián)，但也會(huì)使分離時(shí)間大丈延自其二?便用細(xì)粒徑填斜的色普出但這需要耐更高壓力的液相色譜系統(tǒng)"相比之下潔者更為可取"八選捋性(selectivity)是指色譜柱喘動(dòng)相體系分離兩,Nt合糊的能力*選擇性主要與固定相、謊動(dòng)相組成及柱蠱等因素有關(guān)，與保閨值也密切相矣捷中固宜相和濟(jì)動(dòng)相組成戟響較大匚以最常見的反相模式為例，反相柱｛包括C1亂臥PH等)是以分配非用對(duì)化合物進(jìn)行保留的,一同：1合物的分離是基于它們在犍合相與謊動(dòng)相中分配系數(shù)的差異*如果兩種卅合物的水溶性、在烷炷-水沐系的分配系數(shù)等方面存在明顯差異,那么這些^合物通常議物用反相柱達(dá)到分離畀附對(duì)具有苯壞的化合物具有特硃保留.正相橈式H硅膠柱、脅壬卜.気基柱與帶有極性基團(tuán)的此■合物之間存在極性相互作用，對(duì)北合物的基團(tuán)具有選擇性常常用于結(jié)構(gòu)類似物、異構(gòu)林化合物的分離.濟(jì)動(dòng)相方面"降低濟(jì)動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度通?？梢允锶蛛x度I而有機(jī)濬劑類型也會(huì)影咱分離，比如反相條件N己槪呷酹的選搟性就存在很大差異，這種差異霓要在實(shí)踐中損怠但無論如何*多種蔣劑類型帶給我們更母的實(shí)現(xiàn)詒■離的可能.R隨著容量因子詢増大，分離度也隨之增仙，這種影響在k值較低時(shí)非常明顯，當(dāng)k值大于側(cè)時(shí)吐值増加對(duì)分離度的影響就不再顯著，這就告誡無眾則地堤高怡酬犬分離度是段有意女的.博加犍合相密度能勺握高k値5捌改變鍵合基團(tuán)類型也胃:改變k也嗆［］在反相芭譜中，隨著撻合相硯嶺廉度的增加，咖逐詢增大.-1色謂堆的嶂靜是僞樣肅量的”有何規(guī)定”理論上講，色譜峰應(yīng)符合高斯曲線分布，然而實(shí)際上任何色譜蜂都劉裔斯曲線分布存在一定的偏離，亦即車對(duì)稱。蜂拖屋可朋不對(duì)稱旦子(As)或USP拖足曰子(If)來衡品顯然不對(duì)稱因子的說鉉更帯蹴因?qū)澮卦挿宕嬖谇把?、完芙?duì)稱、施尾—種形態(tài)“Ffe兌，制藥行業(yè)隊(duì)USP拖屋因子作為評(píng)測標(biāo)準(zhǔn).而其他行迪燼采馬2來利罡蜂形.對(duì)于藥物分析.通持有明禎的規(guī)定.Tf應(yīng)處于某一范囤玄|弓?巴如我國藥典規(guī)走某些藥韌的掩尾因子圧社于0.95^.05±臥其他行業(yè)尚無較肉明確的現(xiàn)定“5彳|么#梯度執(zhí)脫？卅么怙禰下攤用梯度汛脫？樂為了改善分析結(jié)果,更巴附需要連續(xù)改變涼前相中吝榕劑組分的比例臥歸改變制相的極性，使每個(gè)分析組分都有合適的容量因子k.扌i使樣品種的所有蛆分可在最短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)最桂分離,這科詵脫方式稱為梯度洗脫.梯度洗脫可在下別情刑中發(fā)揮重要作用,A祀等度下稠較寬k值的多種祥品分析。B大分子樣品分析。C樣品含有強(qiáng)煤留的干擾物”在目標(biāo)卅合物岀峰后設(shè)置梯度洗脫"將干找物洗脫匕來"以免其議響下一次數(shù)據(jù)來集.D分祈方袪建立時(shí),不知道耳洗脫悄況，使用梯度詵脫找出耳較優(yōu)的洗脫親件。

6何情封皓？封端的意義是什去？硅膠表面的硅趕基（Si：■[]..密度那卩通如,由于空間檢収的存在，硅烷優(yōu)鎮(zhèn)合反應(yīng)最多只目毀誌誼的硅羥基,超過-半的d箋墓是活性硅羥皋這陛硅羥基與化合物的極性基團(tuán)存在板性相互作用和離孑文換作用，為化合糊的保留増加了不被期望的作用力，往在咅影響峰骸用短噸硅僥〔如三甲基氟硅熾確合沽性的硅輕旻，可甜減叮電至消相種影響，這種操作被稱為封惴：±丄“）>封端癥的意又抑制了特異性吸附,提高了色譜峰的對(duì)稱性并改善了分離敢果:在一定程屢上掩蔽了硅腔表面，使其女曲融環(huán)撓的耐受性憎強(qiáng)$誦過空間位陰掩蓋了鍵合反應(yīng)形成的Si-0-Si^,|+其對(duì)酸，曲甜耐受性増卷:可能會(huì)軫II"，中極性樣品的選鮒。丫桿氐揭細(xì)曲合相埸陷柱味繪陷是扌龜譜柱使用段時(shí)間葩譜柱人.1]it的柱；產(chǎn)生可見的空爛.A空隙的存在増丈了死體機(jī)會(huì)導(dǎo)致邑譜柱柱效下隆。造成柱床攝陷的原因如下;其色譜柱填裝時(shí)的圧力過低.填裝不緊密.在高壓下使用一段時(shí)間,開始出現(xiàn)空障I其—操作壓力超岀邑譜柱填料的耐壓值.導(dǎo)致填料顆椀碎產(chǎn)生空障I其三，濟(jì)動(dòng)相■■潘解填料導(dǎo)致空障岀如鏈合相塌陷是指由I隠動(dòng)相根性與鎮(zhèn)合相極性相差丈大.鏈合相無迭在謊動(dòng)相中充分伸展而倒伏、纏結(jié)在一起■出喑通cistm^親件I-..11廳r會(huì)導(dǎo)致'■】詣柱對(duì)化合料的保留環(huán)h..S糸統(tǒng)壓力升高的煉因技排除使用耆通過觀察儀器的系統(tǒng)監(jiān)：測拿握系統(tǒng)的壓力.如果發(fā)現(xiàn)圧力偏高.瑋要立即認(rèn)為“柱壓高了J因?yàn)橄到y(tǒng)圧力通常由柱前壓如色譜柱壓力和濟(jì)誦池壓力協(xié)合而成"此時(shí)正確的他法是[在操作條件下，測定系統(tǒng)壓力，得臥總I卸下色譜杜在相同條杵下?測定柱前壓力,得到P前;用兩通將泵濟(jì)岀管路與濟(jì)通池連接,在換作條件下”測定壓力,得到P（前+后）“通過?I宜戲拶匕才高是來自桿弘h?I宜戲拶匕才高是來自桿弘h肖桿厲已；。拄前壓傳髙^p41>irPa）在建過濾器堵塞S洗或血換在娃過池署中前站扳圧力升髙的履抿聿沐因建盍動(dòng)相或祥品中含肓血體雜辰訝路堵塞更抿堵峑管路柱啟壓偏琵（PS>1MPa）旋謹(jǐn)?shù)豔染或堵密用不同抜性的多柜曙劑體系沖洗源迪池和強(qiáng)操留物質(zhì)"為了澀邑問世反臭出規(guī).應(yīng)僭網(wǎng)知匚兩點(diǎn)：1涼動(dòng)相鶴祥品浴聲路堵窒甕換堵窒雅路色湃柱壓力謹(jǐn)漸升高顆程朵簡在畀極或柱頭積累用不同扱性劇多種溶劑體系再生色園柱；反方向沖莊色譜柱；潔洗或更換倚械；世換柱頭污染前填料液的過述一這要到位；2在色譜柱前安裝強(qiáng)諜留性物質(zhì)在柱頭填料上積舉色満柱壓力原祥品含有較多強(qiáng)族留物對(duì)祥品進(jìn)行有效前處理；憨升高質(zhì)政未經(jīng)過濾；遛沖盛析出確保緩沖溶液和有機(jī)相互容；從有機(jī)相皮誇緩沖洛液的腸胡相轉(zhuǎn)喪時(shí)，用含水較鬲的涙合落劑過液.1>上就心股姿宵云裝煒?biāo)_￡如劇吃門M戶乜，.土：護(hù)哥后元卅9冷汩工卞匕i螢L冋超薈U三如戶也9系統(tǒng)比力小穩(wěn)i通常情況下,泵壓的變動(dòng)值擔(dān)過了0.511河系統(tǒng)壓力就厲干石租定的范疇"導(dǎo)致系統(tǒng)壓力卞穩(wěn)亢的最直接原因?yàn)榱鲃?dòng)相流量和組成輸岀的不穏定，而導(dǎo)致疣動(dòng)相輸岀不穩(wěn)定的原因通簾包拾落劑互容性較差、系統(tǒng)帰淋系撫存在氣泡罠及胸鑽系軌部件3作失效等等。下面將介紹排除-羸統(tǒng)壓力用'的方注

觀臬混會(huì)流動(dòng)相的互容性1不互容/「改變混合流動(dòng)相細(xì)成+確保.各細(xì)分可李」「處于反相按式向心相模式轉(zhuǎn).換的境況k.廠Fr^>用異丙醇或丙胡怏時(shí)間過渡L.」k.'檢査泵頭后的排空閥是否處'.于關(guān)閉狀態(tài).IXf\“>將排空閥關(guān)閉|ZLJ'恰杳親頭和各接口處址否漏‘.液K是zl/'泵頭漏液’山換噺封圈：摟L口斕藏,坐新連接^3^觀察吸液管線中是評(píng)氣泡］是$舊刖臨驚；.i力皿.尤畢后?關(guān)閉捋空斶*」大弟氣泡持續(xù)進(jìn)入吸濾器沾洗或更換吸濾霍oe~5K"流龜遠(yuǎn)低于設(shè)定值或無液［本'.流出'沽洗或更換入口和出口甲向M」l—~y<s>'檢代比例閥的丄作是竹屁!足'.￡僅限干低壓梯壓HPLC.否:IZ維修或更換比例閥f穩(wěn)走込士導(dǎo)數(shù)基冷f穩(wěn)豈腫耦?|i收化袞唆，所樣拽并妄定或嘟箭?：［川八更測?::元匸一I、咗匕皂舌穩(wěn)譏忙甲卜穩(wěn)譏—十】彤叭好屮弋.io耳紙不秒定基找不穩(wěn)定是指邑借曲線在較氏時(shí)間范圍內(nèi)對(duì)響應(yīng)值的喇度較尢朗偏離.通常包括基黑移（單方向〕、基線起伏（規(guī)律的上下起伏「區(qū)域?qū)挾葮O大的色譜峰三種情捉

n尼現(xiàn)象k基馥粽移3甜被動(dòng)W\fWw\A\/二就邑詣峰—?a/\貳甲基線卜嵋7同時(shí)小咗―+取忙潔坯鼻：―+應(yīng)：’曲排占，即空+R&.信按卜齊鬥茁方法甬序汨"其口米至WI'■1減歸luJ胃身■IT^.Lk/JilX^J，kAHH』上/J^Ply.AbA2L1J7卄旦乜擔(dān)廿半丿上人I二?頃丁貝「衣屮口J打伍￡門7卄旦勺灌移（A）梆盛洗羸鳳正増現(xiàn)敦涯動(dòng)相未迖劃平藺延孫茶越牠測的時(shí)間，疣動(dòng)牆平衡基線律叢混合器涯合不均勻更換混舎器蚤元流動(dòng)相中某一紹分含量太th如愛平是疑廈洗脫*應(yīng)先褂溶劑混動(dòng)泵輜出精度這平到姜求合.使用單泉輸液(B)樣品中強(qiáng)保密或分于■范風(fēng)較寬每分折一定數(shù)遂的祥品，朗用髄連廐的邑iff峰(C)的污竦物逵人雑測器品濬液渣流色謐柱道洗巻祥針和迸樣麗涼邇池污染用不同祓性的昭刑分別清先盤通池流動(dòng)相純度較低徒用HPLCgJ苗劑和純麼較離的韁沖菱動(dòng)相變質(zhì)更換溢動(dòng)相基戰(zhàn)起伏與盞動(dòng)相旋蚩、比咧飼館定性之問的關(guān)系較大.所以當(dāng)笊址畀卓時(shí)，應(yīng)先錚罵穴動(dòng)咱的總國：具次濕蜃不艙定也立這戍棊經(jīng)超棧；另訃,井折的祥品酒苒不是完美的.帝金有一些不玻預(yù)期的發(fā)保留化合物存在.爲(wèi)廿析時(shí)同的椎穆械緩慢洗出，也衣使果哇平規(guī)刖地:喬11噪聲J1盤噪聲（basElinenoise]=由檢測器輸出與被測樣品組骨無關(guān)的無規(guī)則端信號(hào),在特定靈敢度Ml啟應(yīng)單位表示?？煞譃楦叽T噪聲和短周期噪戸?卻“對(duì)于光借型檢刪器.噪蘆的正常響應(yīng)値處于0.000005V"I.■■".■￥之間（裁考Shimadzn的HPL（戒器），高于此值,即可認(rèn)為噪聲偏高「輾聲升高時(shí),先按|，1驟排查流動(dòng)相問題（流動(dòng)相在所選波悅下有強(qiáng)吸］,IX:選擇其他最大吸收波長（如果］.收」.有的話）確認(rèn)流動(dòng)相是再含仃吸收值.較大的添加劑選擇具右相胡效果但吸收值“校低的添加劑「確認(rèn)所用溶劑和試劑魁苻為“（HPLC級(jí)建至更高級(jí)別?「將溶劑和試劑換詵HPLC級(jí)或「.嘆上級(jí)別丿咆卿配制流動(dòng)相流動(dòng)相是否浙鮮（尤苴是水溶”咆卿配制流動(dòng)相I液）,^5^流動(dòng)相足否經(jīng)有效脫氣」\（采用有效IBT［方式對(duì)流動(dòng)相1/1進(jìn)彳r脫氣流動(dòng)相足否經(jīng)有效脫氣噪聲升高時(shí)，若流動(dòng)相沒有問題應(yīng)排查儀器的問題査石光源的挾用時(shí)間是否趙出奸僉是更換斯光源査石光源的挾用時(shí)間是否趙出奸僉是更換斯光源枝疋波長「用不同極性的多種溶劑沖洗］

系統(tǒng)（包括在線過濾器、進(jìn)樣「器、色譜林流通池）‘柱性能下隆柱性能下眸的一個(gè)重要現(xiàn)気就是在保留時(shí)間基本不發(fā)生變牝的情況下.邑譜埠的區(qū)域?qū)挾让黠@増犬:忙罔-EEEI1可能凰因解決汀送柱外死怵祺大更換內(nèi)羥理小、悵度理樹的連擾管;格連接管與色譜桂連接疥密；細(xì)徑出使用體積較小的蠱通池為桂色謂柱拭超較哥柱％L應(yīng)對(duì)爸路連揉嚴(yán)榕把關(guān)，帶保死體積牧?。粸闊v柱在屋運(yùn)莖的時(shí)間內(nèi)像色譜思柱涿塌阻無怎拔復(fù)填料被潦動(dòng)相瀋蝕而流応人口莊庫層堰阻用同型填料填補(bǔ).柱效可部分恢豐持較高柱性能*孟動(dòng)相的讎度韋過注一定雯制總，女裝燥護(hù)桂、盡董不在頂端條件下操作?祎握或柱頭堵基或拄頭喙陽了強(qiáng)保留化合物（拌隧匡力升高）冃強(qiáng)芋脫詁用溝決咸史換砰檢；挖出污集填科「地?fù)Q潔凈填料專在特異性呱附胖齬拖尾）采用低pH疽抑制、封端頃料、加入競爭劑樣晶落劑的浣説旅力強(qiáng)于慢犀迭覘旌力低的常劑潯斛，最垛慢用流動(dòng)相流動(dòng)相涪解，禪品過戰(zhàn)障仮進(jìn)樣誡圧或進(jìn)樣體積域展更區(qū)芯展更伴腿堆袍伴晞峰貳延13保留時(shí)間亜現(xiàn)性莖當(dāng)保留時(shí)間的偏差超過臥可嘆認(rèn)為保留時(shí)間的重現(xiàn)性差.對(duì)干某-特左的廿析，保留時(shí)間主要竟涼動(dòng)相組亦流氫溫度畑固定招影響.當(dāng)保留時(shí)間發(fā)生明品變優(yōu)時(shí).應(yīng)從這幾方面人手■:A由濟(jì)動(dòng)相造成的保留時(shí)間不穩(wěn)定多元瓷藥相比俁不穩(wěn)定流動(dòng)相比例不精確配制大量蔗動(dòng)相以裁少誤墨澀含就動(dòng)旄細(xì)分申斥一組分較低，多元泉輸出時(shí)誤蔓較犬如果孟址揺國;先產(chǎn)“應(yīng)預(yù)克稈溫勁相泓合有機(jī)坦分揮養(yǎng)將儲(chǔ)涯器適當(dāng)塞詡亢當(dāng)pH謂節(jié)劑的酸瑕斡天耒按規(guī)定調(diào)節(jié)pH泵輸曲節(jié)穩(wěn)是雄幔比例関、柱基桿等韶件流量不穂定疲遙器堵塞清洗或更換相應(yīng)都井；對(duì)流動(dòng)昭和樣品嚴(yán)單向閥堵垂稻過濾在馥垃謔器堵塞慕頭世入％泡對(duì)泵頭排吒.對(duì)盞動(dòng)相銳臨攥谿S液查出漏點(diǎn)，統(tǒng)修流閒相未平贏平衡時(shí)間較短延疑乎銜時(shí)間至基鐡利壓力平埋柱渡不櫓定未安裝柱潴霜安裝柱湍箱B由圃定相造成的保鳥時(shí)XI不穩(wěn)定滋動(dòng)栩pH值范岳超出允許值祎用pH值耐受蟲強(qiáng)的色墻程；褂pH僮渥定在九許范圍內(nèi)流動(dòng)粕棍性與鍵舍將將懇太大*犍舍用壬送在浣動(dòng)相申展開（比虹純水沖洗普謹(jǐn)C訶柱）用弱檢性溶劑早題可都分慷復(fù)同定榕理附壷屎留性恙廣對(duì)樣品進(jìn)行純牝址堆；安蕓探尹柱：安司根性裁痢沖洗；與某些此合翰產(chǎn)堂不可逆給合］選擇性我生改變因定福上的棊些作用位點(diǎn)減少或改變專柱*14峰冊不理想理想朗色諳峰湮循正態(tài)分布.應(yīng)謹(jǐn)符合高斯曲損，是完美而對(duì)稱的峰形〔如圖打；沖而由于憶合籾性質(zhì)的特殊性、色樹三故障、操作條件等問題存在，峰形可能會(huì)不對(duì)稱*前延CB）或拖屋CO°燧形前延(B)祥呂過馥降飛祥品邀啓巫少進(jìn)存輝稅樣品溶劑虞運(yùn)遠(yuǎn)超過流動(dòng)相由干祥詰塑過大，跟肓的層檢不足以保滸爹親的眸品.臥以總良葫一帚分樣品廨不到保留.隨流動(dòng)箱龍?jiān)诹垦a(bǔ)面.fe倍峰的前半寵活就吏衍更犬，嚴(yán)護(hù)時(shí)奈前分叉n盡衙進(jìn)樣呈腹小"逗材品茗劑還益祭改孌盤動(dòng)栩組旗r尤其是祥品溶劑洗底強(qiáng)迪較丈時(shí)：施瓷撓的浴劑盤加快鄙甘拝品在色蔚拄中的移動(dòng)姓度*便堆電汪匯怪落劑的的洗脫逼盛與胚動(dòng)相接降低進(jìn)樣｛*積在色語理論中.鷹插容塑荒認(rèn)為是無眼的，熬面固是相的探留書雖的晴薦在眾翼*.斷以忑祈F于現(xiàn)實(shí)對(duì)醴出的啟逛；同祎.色譜理論從未粵TSil樣品溶劑討流詢相的影晌，因?yàn)槁曎⑸系南槠缝鹫J(rèn)為足不具有俸護(hù)的，所以這墨現(xiàn)買對(duì)理慢的又一次偏妄*中藥成分分折項(xiàng)目中.捉取溶刑通帯為乙專甲醇、乙酸乙酯等洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)吐辭h此時(shí)家妙唏品榕劑的洗脫強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過摘相"的情況，力遼免前延峰出現(xiàn)，可l；x用通過“疥動(dòng)祁稀釋揑邨r前藺穢進(jìn)樣依積”的方式。味形拖屋（C?可證眾兇*?R解決:辦法暉品與固足相之同有在次蛆擅亙件匍比如賈年化笞物與科膠耳航間存在飯性相互作甲和庫倫力導(dǎo)特舁性作用力養(yǎng)用塡耕悄性較野刖色曙柱；nn人竟?fàn)巹ū热缛野悖簩⒌蚿H值下操作；片析陣子型比音物時(shí)，怎云相附口耳值設(shè)置平當(dāng)對(duì)于弱觀或翳真.就勵(lì)桂pH值辿于化2植的p民±2之面?胡需態(tài)、未解雋態(tài)在化合栩魚融申的比例均超迥1%迪盍胡相pH值比代合物的旳高或低2牛嚟位以上緩沖海港的緩沖客址緩沖客蜀不靈.可第轟型樣品的存在形式不唯不夠-.保留性也有瞪別.引起噸斥提胚緩沖廊滾逑麼；裁少樣品呈；塑用緩沖客量殺大的鹽；瑋板堵堊或拄扶肓染渦沆擴(kuò)趟將諧大清読色譜拄更攥篩板或柱頭填料填料回定相水解亶參的甌性瓏團(tuán)顯?！碧佤ㄐ宰饔昧埣覫S鬼鏗鬼為'GhostLzikl，恥抹知來涼的色譜的的統(tǒng)椒可能來遍A7H牌決辦注迸坯餌;專案毎沫分祈的祥品在迭稈冊中磯留舒折復(fù)寺耳晶時(shí)，鶴空分柝屋淆法進(jìn)祥櫥色睛拄污染更雜樣品中存在強(qiáng)保風(fēng)組分，它們會(huì)被緩慢洗脫下攣，出峰時(shí)間尋無規(guī)律安裝保護(hù)注，并定期清洗色譜柱流謹(jǐn)池污染潦通池喙附了某些化舍物，愍后逐新械洗脫下來定期清洗系統(tǒng)駆轉(zhuǎn)器污染曖渝槪上桂主物滋繪產(chǎn)主了污染物琨利潯染曙度下，即換劑中雜質(zhì)含*樓高，它們也暹一韜同的遠(yuǎn)卡'疲洗下乘，貝總坍迎噪瀉；梯度洗卷時(shí)，塩初沼劑左睨強(qiáng)廈弱.藩刑中的雜質(zhì)箍保留，時(shí)券浴刑強(qiáng)度堆加雜廣逐浙被洗脫下采追樣髙注度溶劑和試劑；透樣低職收值的潘加刑；不悽用長吋問再取的薯制16氣袍峰氣泡峰是指攜帶r池的疥動(dòng)相通過檢測器時(shí)禪到的咱應(yīng)檢遞里的氣泡可自歸動(dòng)琳中釋放的空氣也可能是有機(jī)相遇水熱熱而會(huì)釋放的有機(jī)涪劑分子，氣泡嘩柱柱具有較高的響應(yīng)直區(qū)域競度僅為數(shù)稅出烽時(shí)間和相應(yīng)値比較有規(guī)律（如下郵。誦常貝有光譜型檢測戢才會(huì)出氣泡牟解決辦快匚解決辦法；脫氣便用參元梯度時(shí)，靈種組分進(jìn)行脫氣，排除它們構(gòu)解的空氣;對(duì)于預(yù)先風(fēng)合的譜刑，鳳合后脫氣，排臨勰的空前因放折而揮厳出的有機(jī)溶劑分子;前面的脫氣方式對(duì)于預(yù)先很合好的混合榕劑.基本可以達(dá)到消除氣泡峰的目的i但對(duì)十W種噸匡劑在儀器中痕合的情撫.棍合后溶劑體系放熱存在簪在的氣泡.三箭動(dòng)相疣出色譜柱時(shí).壓強(qiáng)驟誠,簪在的氣泡溢出.披檢測器檢測到.対了防止這一間題出現(xiàn)，應(yīng)在檢刪器岀口連接一段內(nèi)徑較細(xì)的管路,使既動(dòng)相邇過檢測器時(shí)，評(píng)境壓強(qiáng)較高.氣泡難陽益出”可嘆避免氣泡峰;:氏同相萃耿苗見間護(hù)與解件1固圳萃取拽術(shù)需見術(shù)語目標(biāo)化合軸CAimedCompounds')；想要從復(fù)雜的樣品基質(zhì)中分離岀來的化■合厠i基質(zhì)(Matrix).目標(biāo)化合厠所處的樣品環(huán)境,基質(zhì)中誦常含有犬量干擾較h干擾物:“皿z工Cconpounds).彩響目標(biāo)化合物射斤或籠鯛對(duì)分析搜蠱造成福害的化■合物誦常是對(duì)基質(zhì)中除目標(biāo)此合物抄卜所有比合物的統(tǒng)稱;吸附劑(Sorbent)E固相萃職柱中削填充物,能龜從樣品幣額中選#性地萃取某些優(yōu)合物;吸附容量CC^ity)；在特定案仲卜，—世質(zhì)量吸附刑能夠保留的出合枚(包括目標(biāo)化合物和部分干擾物)的總眉量;選擇性(SeleCtivity)；吸附劑區(qū)別對(duì)待目標(biāo)化合物和所有耳它樣品組分的能力，也就是保留目標(biāo)化合厠而排除其他組■廿的能'J.哥朗選B性可＜爆7更隹朗禪腺果;胡；榕液中質(zhì)子(W)議度的負(fù)丼數(shù).該值越＜J灤明將液中質(zhì)子的液度越大I懷，：酸性優(yōu)合物解離常數(shù)1'＜-：的負(fù)對(duì)埶邃值越小酉吏性優(yōu)合物的解離性越專當(dāng)樣品萍液的胡值與璉“目等時(shí).忘解離態(tài)化合物與解離態(tài)^合物蔽度相等f疔析人員也常用呱a表示堿性卅合物的解離性.怛此時(shí)的哪a值表示的是減性北合物共覘酸的解離常數(shù)的貢對(duì)覿該值趣繪明減性卅合物結(jié)合質(zhì)子的能力越強(qiáng),誠性也趣強(qiáng)!相互作用〔Interact訕),在特定的化學(xué)環(huán)境4兩種化學(xué)輛質(zhì)之間{比如目標(biāo)化合郞貶附劑之何、目標(biāo)化合郞諸劑分子之間〕岌生的吸引或判斤等作用力;非極性相互作用(Mon-PoLnrLntcrnction)■目標(biāo)化合物上的非極性官能團(tuán)亍非極性幀附劑之間的作用力,這種作用力在極性曙刖壞境尢耳是水開境中才龍較好阿,因而也荊疏朮相互作用，比如術(shù)環(huán)境中，鄰苯甲釀翳裘化合物與口8之間的作用/'.I；極性相互作用(Pol^rIntact!on)=目標(biāo)吃■合韌上的極性官能團(tuán)與吸附劑上的板性官能團(tuán)之間的作用力,這種作用力在弱極性或非極性潯劑環(huán)境Ft能較妹朗林現(xiàn);離子琳互作用(TnnInteraction)：離子型￡扌標(biāo)化合物上的離子官能團(tuán)與吸附劑上帝有相反電荷的官能團(tuán)之間的庫倫力,次級(jí)相互作用dsd呵IntEctitm〕；對(duì)于反.相硅膠縫合吸附劑,題粒表面馬余的硅趕基吉與極性化合韌發(fā)生極性相互作用，笄且部分硅賢基解褪后玄與刪優(yōu)合物笈主離子相互作:II,相對(duì)于耳闊性相互作可這些作用力處于次曼地位,因而蹄為況聶相互化用。枕我相互怔用是反相硅膠吸時(shí)劑所不期望的，通?？梢酝ㄟ^封端扶朮血如pins)加限消除:活化O心ation「也稲容劑仏U叭合適的涪劑使吸PH刑上的官^團(tuán)展開*并除去吸附劑上可能存在的干找物，對(duì)于反相吸附劑常常用中等極性濬劑〔血D甲醇〕.正相吸附劑常常用弱極性或耳漲性濬劑(比如己烷〕F平衝［Equilibriun.「除去活化潮快上樣創(chuàng)潔適宜的落劑環(huán)境.所用溶劑通常與樣品落液的落劑一致,對(duì)于離子交換柱?如果樣品是堿性比合輛瓚議中往往需要加入聆如果樣品為酸性化合物平衡液中往往需要如人堿保留(RcImtiDn),當(dāng)樣品溶液通過吸附利與某些化合物的作用力超過后看2翻啲作用力時(shí)，這些化合物就會(huì)被吸附列固定，該過程稱為保留，淋滸5八=〕：上肯=?部分干找榻.目標(biāo)化合轉(zhuǎn)同時(shí)被趣需要加入合適的諸液以最大可帥除去干擾物而不影IH］標(biāo)化合物的保留.通常情況\IJI樣時(shí)的樣品榕劑產(chǎn)士卜誠響叵收率,但洗脫強(qiáng)度較大的'締」能最大程度地去除干扌娥.違擇f#洗衆(zhòng)時(shí)需要在叵收率和淨(jìng)優(yōu)藏果間找到':衝點(diǎn);洗脫(ElmianJ:讓洗脫能力較強(qiáng)的濬劑通過喰附劑，打斷吸附劑與被保留的化合韌之間的作用力，使這些化合物隨溶劑中流出；漁常楕況下，戢剛好烷脫目標(biāo)代合物的洗脫漕劑是最隹選擇，此日咖的干擾物最少，選擇詵脫液時(shí)也壽要在回收率和掙化效果間找至平祐點(diǎn)I穿逸tBreakthroug}:；吸附劑的操留能力較弱或卅合輛的質(zhì)量起過吸附齊熔量時(shí).在丄樣過程部分或全部目標(biāo)化合物未被怩留即涼岀＜1柱的現(xiàn)畐該現(xiàn)象屬于操作事故，應(yīng)邀免發(fā)生°

親水親脂下術(shù)"親7K'親脂平冏"（丁■hophilicLipophiLicBalamcEjEiLB）,起初用l「.哀示"表面勺舌I生劑分子中的親水呈團(tuán)占J親油三團(tuán)的平循關(guān)系也己初,“親朮親脂平斷”理金祓引人5FE,苴填斜基質(zhì)為鑒合牧IC比如聚苯乙烯】，基質(zhì)貝有親脂性?與口E功龍類似具有反相探留功能;毬后在聚音輛基質(zhì)上錐■合極性基團(tuán).比如毗戦酮,具有親水性，逆基團(tuán)能毎増淫填料對(duì)極性化合物的保留罷力,井使填料?！龀謻X可潤濕性囲止柱床干渦握高了結(jié)果穩(wěn)定憐迪日科按推出的FrcELutFLSM貝親煜團(tuán)〔毗咯般基團(tuán)）和羽水基團(tuán)（二乙烯基苯）.對(duì)極性化合牧I和喩性化合物均有較好的保留,具有親水親月抨衝的持血與之相同的小柱還有醍1讓凹OasisHLBo親水親甬平衛(wèi)小柱一般具有臥下特點(diǎn)'A真正的通用也對(duì)■親水物質(zhì)^親脂物質(zhì)具有均術(shù)的保留能力，應(yīng)用領(lǐng)懸蓋了非極性、弱極性樞性化合物,克服了口￡吸附劑對(duì)極劉合物探留較差的缺點(diǎn);F更高的穗定件；具有水可潤濕性"填般牯化呂即使柱床干涸,吸附劑對(duì)目標(biāo)物的保留也不會(huì)發(fā)生變比;■更寬的州值適幷范圍IPLS的基質(zhì)角有機(jī)聚合物而非硅膠"在州0-14的范國內(nèi)表現(xiàn)超定.而硅膠犍合吸附劑只有在"5的范囿也是穩(wěn)定的FD更高的吸附容量;可保留更參的目標(biāo)物,有效地防1E了“穿遙現(xiàn)當(dāng)'的發(fā)生?提高了重現(xiàn)性,E不存在衿刪互作用::I雌-1吸附制的表面存在未鏈臺(tái)的硅羥基"對(duì)蒯優(yōu)合物的保留較強(qiáng).用硅膠縫合吸附劑處理磁性化合料?回收率通耗艱PLS是有機(jī)聚合物基質(zhì)的吸附劑?環(huán)存在轅塑相互作用?用尸諛性化合物能夠得到滿意的結(jié)果。3匕杯物淫冇惻收或回收率他在初完整的識(shí)操非中*目標(biāo)花合物可融會(huì)存在于樣品諸獨(dú)濟(jì)出液、緡洗液、詵脫液或吸附劑中,「’冃標(biāo)軸沒有回收或回收率療現(xiàn)現(xiàn)發(fā)生時(shí)”可向樣品海應(yīng)加入標(biāo)然后進(jìn)行完整的那操柞井將樣品濟(jì)出液、淋洗液和洗脫液分別收輛扮折.首先確罡目標(biāo)化合搐存在于哪一盼?進(jìn)而確罡問題來自F列耶一壞節(jié);aLh物在吸附劑上的保留不足：B目標(biāo)物未械完全洗脫iA當(dāng)超過砒的目標(biāo)卅合物出現(xiàn)在樣品謊出液或輔饒液時(shí)即可斷定“目標(biāo)化合物在吸瞞壯的保留不足”.下面是具體匱因的改龍辦法;具體躱因改返辦;去具體躱因g標(biāo)物tt-吸附劑上保留不足=>SFE柱選擇不合適二^>g標(biāo)物tt-吸附劑上保留不足=>SFE柱選擇不合適二^>樣話濬劑和沐洗液的洗脫運(yùn)復(fù)過議樣品溶液低積或濃廈過寄發(fā)空，穿逮沒程佞好地對(duì)3PE拄進(jìn)行預(yù)處理運(yùn)擇對(duì)目標(biāo)物方明顯較強(qiáng)保留的SPE柱薛低桔嘉落劑涼洗液的洗脫強(qiáng)度降低祥鳥壘或增加填料質(zhì)雖加入請劑進(jìn)行活化和平衡r-省目標(biāo)化合物在樣品翩便流岀液和淋洗漫巾宋出現(xiàn)而詵脫液巾収有少世或未出現(xiàn)時(shí)*可判斷"目標(biāo)物未皴完全洗脫”.下面杲具煉原因的改進(jìn)那法「目

標(biāo)目

標(biāo)耒被完全洗具體原固改進(jìn)毎法小柱對(duì)化合物保留太強(qiáng)、選擇對(duì)目標(biāo)物找不到合適的洗脫溶粥穽冨稍弱的SPE柱況損液洗脫曇滾革當(dāng)■=^>捉蔦詵脫液醐址鋭強(qiáng)段洗脫液協(xié)積太小塔大洗説液體■積C如果目標(biāo)優(yōu)■合物在洗脫^中正常岀現(xiàn)那么回收率不足的間題應(yīng)該來自樣品前處理的其憶環(huán)節(jié)口改逬辦法!=>0PE前的據(jù)取敢率不足1=二>選擇合適的提取溶劑其他環(huán)節(jié)前處垛步驟農(nóng)鸞瑣,

目標(biāo)物化合物損失I適當(dāng)簡化前處理過程目標(biāo)物揮發(fā)性較強(qiáng)］

其他環(huán)節(jié)前處垛步驟農(nóng)鸞瑣,

目標(biāo)物化合物損失I適當(dāng)簡化前處理過程目標(biāo)物揮發(fā)性較強(qiáng)］

在濃縮歩驟損失調(diào)整濃縮方式目標(biāo)化合物在前處理講制壞通中分鯨皇告目標(biāo)化合物的穩(wěn)定性,渦整溶加目標(biāo)化合物在前處理講制壞通中分鯨皇告目標(biāo)化合物的穩(wěn)定性,渦整溶加改進(jìn)辦法1樣前.柱床干涸重新活化井平窗吸附劑填裝松散,蓿掖岀現(xiàn)矚桿匕擦貸！云E小相于二杠床樣品辛裱流速過快降低范通常來說流速低干匕nLGi址E］結(jié)果是穏定的扎潮七模式的改進(jìn)通常而言采用保留目標(biāo)化合軸的模式比探留雜質(zhì)的模式凈化效果妬如果正在分折的頂目齒某一種或某一類化合物分析.最好是來用探留目標(biāo)優(yōu)合勒的渤滋式；舉卜簡單的側(cè)子?同樣是分析蔬菜中的多菌靈和噬菌靈〔—類堿性農(nóng)藥），使用陽離子交換柱可'乂專i性地棵留這些農(nóng)菊.使它們基本與干擾韌完全分離，而使用正相吸附■劑或石墨優(yōu)轄進(jìn)行帰留干擾物的操作併屮：孔干找物除去，仍有載多干找物存留"另外,如果開止一.〔「町柱可用于目標(biāo)代合物的凈化時(shí)，應(yīng)挑選選B■飾的卿射劑;選難預(yù)離子交換〉正相〉反乳B帶洗鞭和洗脫液的憂化對(duì)于反相模式和正和祺比應(yīng)在不戟響回收率的前提下,増大淋詢輸脫朮強(qiáng)度并降低洗脫液的洗脫強(qiáng)度。曰疔反相模式，可將目標(biāo)比■合物的水榕液上樣，然后依枝用氷_'：-■20H.30S.=：?5加蜩、測、：4、100K的甲醇水濬植洗脫?分■別收集洗脫液分析.建立淋捉曲繡找岀目標(biāo)化合枚彼詵脫時(shí)的■■濬劑林系，淋洗鍍中甲醇的含量應(yīng)稍低于目標(biāo)化合物恰妊被洗脫時(shí)的將劑體聚而洗脫謹(jǐn)中甲醇的舍量應(yīng)稍高于目標(biāo)化合物恰好被完全洗說時(shí)的榕劑體棗爭屯甲醇不議撫脫目標(biāo)優(yōu)合厠時(shí),應(yīng)試驗(yàn)甲醉-甲基叔.丁基醐^合濬彼的洗脫曲線I對(duì)于某些甌不溶于水也^褶于甲醇的離子型此合物,可以在榕刑體條中加人酶或煩對(duì):正相依系，可將U桁■■■■_合物的正己腳壯樣，然.后依慶I.5%.-,r^=、、.30$?、r瞬?對(duì).60S、r、、SO$、妙■10CTS的正己撓甲基叔丁基飆椿^洗脫?分別收集洗脫液分析*建立淋洗曲戟.找出目標(biāo)優(yōu)合樹謝脫時(shí)的泊劑林系.淋洗^中甲基叔T基醜的含童應(yīng)稍低于目標(biāo)比倉物恰蜉就洗脫時(shí)的濬列體禮西洗脫液中I基飆】基醋的舍宣應(yīng)稍高于目標(biāo)吃合物恰奸襁完全洗脫時(shí)的溶劑體系C對(duì)￡匹柱進(jìn)行合理的處理SPE柱中的吸附劑可能存在少量干擾物.有效地活化可霞避免這些干擾軸進(jìn)人洗脫液,活優(yōu)濬鞭應(yīng)選擇整個(gè)操作中洗脫強(qiáng)度毘強(qiáng)的灣劑體孤在反相模式中，從樣品浴臣到詵脫謹(jǐn)王曼涉圧血甲醇水轄浪,所以活比榕液應(yīng)選擁甲醇,當(dāng)目標(biāo)灼物需要用甲醉-甲基叔丁基醐昆臺(tái)液洗脫時(shí)，活化沼液應(yīng)選甲基叔丁基酩在反相模武中，從樣品落液^洗脫液主要涉及0^-100N正己垸-甲基叔丁基蜀溶懣所以活化落獨(dú)應(yīng)選扯甲基昶丁基醛.可能原因改進(jìn)辦柱肝丘汙復(fù)宦有H鳥穎總士圧.堵吏了詒忙上樣前對(duì)樣品溶^進(jìn)行直右或過濾嚕晶芒牯買土高用合適的落劑曲樣品進(jìn)行稀釋SFE枉際太高，對(duì)蹄的阻力過丈叩用固相萃取儀.TT在液騒岀口磁枉液休入口加壓氣荊休謂常見間郢■解答1壬細(xì)曽樁的老化捉忙老優(yōu)的目的；P睢謂柱的固定相鍛常是以徐產(chǎn)的形式分市在柱管管壁內(nèi)側(cè)（毛細(xì)管樁）輔樣面〔填充柱）上的.對(duì)十—郢Lr相色譜柱?外層固定相與載休的結(jié)合往往校弱,在高溫下使用合緩慢垃失，造成基線起伏和噪聲升高，為了避免這一現(xiàn)象發(fā)牛-可煩先在較高溫度下〔F為魚i首柱的最高耐受溫度）加熱一段時(shí)間，使結(jié)臺(tái)較弱的固定相揮發(fā)出去.從而使后面的分析不受T抓此外,對(duì)使用時(shí)間較喪的氣相邑譜柱可進(jìn)冇邑優(yōu)操也可以疏主色詣柱中找留的存染隊(duì)搟色譜柱柱溫升至恒定溫度*通常為其溫度上限.特粕況下*可加熱至高于是高操作溫直R-前飛左右，但是T.T能超過色譜柱的溫直上限.那樣卿損壞色譜柱"此外汗要將程序升溫的速直設(shè)定的太慢?當(dāng)達(dá)到老化溫度后*記錄井觀察基線I.倔放犬基塚及便容晶觀瓠初始階段，基線應(yīng)持綾上升,在到達(dá)老伽度后5-口船中幵始下陥并且合持期3090分瓠當(dāng)達(dá)到卜固定的值盒基線就合穩(wěn)定下來。如果在肝小