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關(guān)于實(shí)驗(yàn)酪蛋白的制備第一頁(yè),共六頁(yè),編輯于2023年,星期一一、目的要求學(xué)習(xí)從牛乳中制備酪蛋白的原理和方法。二、原理
牛奶含有半乳糖、蛋白質(zhì)、脂肪成份。蛋白質(zhì)中的酪蛋白通過(guò)等電點(diǎn)沉淀,再通過(guò)離心而獲得,糖類小分子由于處于清液中而分離,沉淀物中所含的脂肪通過(guò)有機(jī)溶劑抽提而去除,最終得到純白色、晶狀酪蛋白。第二頁(yè),共六頁(yè),編輯于2023年,星期一三、試劑與器材試劑:0.2mol/LHAc-Nabuffer、
95%乙醇、乙醚器材:離心機(jī)、水浴鍋、pH計(jì)
第三頁(yè),共六頁(yè),編輯于2023年,星期一
10mL牛奶預(yù)熱調(diào)pH至4.7室溫冷卻離心得沉淀于離心管內(nèi)懸浮離心得沉淀于離心管內(nèi)去脂肪漏斗過(guò)濾濾干洗滌洗滌(脂肪完畢)帶濾紙烘干稱重計(jì)算。40°C40°C預(yù)熱的醋酸buffer10mL邊加邊攪拌5000r/min5min4mLH2O5000r/min5min20mL乙醇5min20mL乙醇微攪動(dòng)20mL乙醇乙醚混合液(1:1)20mL乙醚60°C,4h四、操作方法第四頁(yè),共六頁(yè),編輯于2023年,星期一五、計(jì)算實(shí)際獲得百分率=╳
100%六、注意事項(xiàng)1、牛奶與緩沖液要預(yù)熱2、緩沖液要緩加緩攪3、在濾紙上樣品的脫脂過(guò)程要攪動(dòng),不得破濾紙4、實(shí)驗(yàn)環(huán)境要保持空氣流通,門窗要開(kāi)酪蛋白質(zhì)量(g)10mL
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