制種技術(shù) 菌種培養(yǎng)基

制種技術(shù)——菌種培養(yǎng)基一、（一）概念及要求概念人工配制的適于菌種生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)--培養(yǎng)基要

求營養(yǎng)種類、比例、水分、pH適宜；

保持無菌狀態(tài)。返回本節(jié)類

型天然：天然有機(jī)物

合成：已知成分的化學(xué)藥品

半合成：混合物原料

來源狀態(tài)液體：營養(yǎng)液固體固體：天然固體原料，如木屑、棉籽殼

固化：加1.5%~2%瓊脂表面形狀斜面培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基（二）培養(yǎng)基的類型返回本節(jié)返回本節(jié)各級菌種的培養(yǎng)基（一）母種培養(yǎng)基1.通用配方2.配制過程PDA馬鈴薯200g、葡萄糖20g

瓊脂15~20g、水1000m1返回本節(jié)煮沸20min，取定量濾液配制馬鈴薯濾液濾液沸時加入，融后加余料加其它后再融化瓊脂調(diào)解pH分裝試管、平皿，勿污管口，控制裝量分裝試管準(zhǔn)備滅菌扎捆裝高壓鍋10%NaOH或HCL返回本節(jié)母基滅菌與擺斜面返回本節(jié)母種培養(yǎng)基配方有多個可以選擇主料土豆200g+麩皮10--30g+玉米粉10--20g,葡萄糖20g

輔料硫酸鎂和磷酸二氫鉀各0.5gVC110mg，1000ml配方（%）土豆絲或片+麥麩煮制取濾汁---定容

輔料加入溶于水后繼續(xù)煮制瓊脂溶化

分裝試管或平皿配制多種

綜合培養(yǎng)基

返回本節(jié)PDA+返回本節(jié)（二）原種、栽培種培養(yǎng)基主料棉籽殼87，麥麩10輔料白糖1，石灰1，過磷酸鈣1配方（%）棉殼、麥麩干混

余料溶于水后澆入主料

清水翻拌至含水量配制1.種類

(1)棉籽殼培養(yǎng)基返回本節(jié)主料麥粒、玉米粒等98%輔料石膏粉1%,碳酸鈣或石灰1%調(diào)pH

與分裝

pH：一般為8.0左右

原種培養(yǎng)基裝大口瓶

栽培種培養(yǎng)基裝菌種袋外緊內(nèi)松，上緊下松配方（%）顆粒洗凈，1%石灰水泡脹

文火煮沸15~20min

晾至無明水后拌入余料配制(2)麥粒培養(yǎng)基返回本節(jié)其他類型的培養(yǎng)基⑶鋸末菌種培養(yǎng)基⑷液體菌種培養(yǎng)基（見后面內(nèi)容）⑸短枝條菌種培養(yǎng)基⑹棉籽殼、鋸末綜合菌種培養(yǎng)基原種、栽培種玉米芯培養(yǎng)料配方配方一：玉米芯85%、麩皮10%、過磷酸鈣1%、石灰3%、蔗糖0.5%、尿素0.5%；拌料時加水：使料含水量60%（手捏料團(tuán)估計法：手指縫隙有水跡不流水）或料：水=1：1.2－1.5配方二：雜木屑63%、玉米芯10%、豆秸10%、麩皮10%、米糠2%、過磷酸鈣1%、石灰2%、蔗糖1.5%、尿素0.5%；料：水=1：1.5－1.6原種、栽培種雜木屑培養(yǎng)料配方配方三：玉米芯60%、豆秸12%、棉籽殼12%、麩皮10%、玉米面1%、過磷酸鈣1%、石灰3%、蔗糖1%、料：水1：1.2－1.5配方四：玉米芯60%、豆秸12%、花生秧12%、麩皮10%、玉米面1%、過磷酸鈣1.5%、石灰3%、蔗糖0.5%；拌料時加水：使料含水量60%或料：水=1：1.2－1.5原種、栽培種綜合培養(yǎng)料配方原種、栽培種培養(yǎng)料配方和配制步驟相同1.按配方稱量2.加水拌料3.裝袋或裝瓶4.滅菌5.接種操作6.培養(yǎng)管理

配方和配制步驟可以相同，只是重復(fù)操作擴(kuò)大數(shù)量（三）原種、栽培種培養(yǎng)基的滅菌高壓滅菌1.5kg/cm2（0.15Mpa、128.1℃）滅菌1~2h

返回本節(jié)常壓滅菌100℃滅菌10-16h左右→再悶12h要求攻頭、控中、保尾返回本節(jié)接種---培養(yǎng)二級原種三級栽培種的培養(yǎng)料配方可以相同，重復(fù)操作擴(kuò)大數(shù)量固體菌種與液體菌種的特點固體菌種：1，棉籽殼木屑菌種；2，麥粒菌種傳統(tǒng)的較常用的菌種，培養(yǎng)時間1-2個月液體菌種：母種培養(yǎng)基不加凝固劑——瓊脂而制成可以大規(guī)模工廠化生產(chǎn)的菌種，培養(yǎng)時間5-7天可以生產(chǎn)一批。但不便運輸和長期保存。（四）、液體菌種培養(yǎng)基

1.液體菌種制備液體菌種制備的目的是大量繁殖足夠數(shù)量的、健壯的、高純度的菌絲體。⑴斜面菌種制備制備方法（培養(yǎng)基配方和操作步驟）同試管斜面母種的制備，在此不再多講了。⑵搖瓶菌種制備

液體菌種培養(yǎng)基如同母種培養(yǎng)基

主要操作步驟：稱量→煮制→分裝→滅菌→無菌檢驗→接種→振蕩培養(yǎng)管理思考題：液體菌種培養(yǎng)基如同母種培養(yǎng)基的配制，二者的區(qū)別在哪里？1.是否加凝固劑（常用的凝固劑是什么？）2.培養(yǎng)與固體菌種不同⑵搖瓶種子制備

主要操作步驟：稱量→煮制→分裝→滅菌→無菌檢驗→接種→振蕩培養(yǎng)或攪拌培養(yǎng)生長快，周期短，每批只需5-7天及可終止培養(yǎng)使用。振蕩培養(yǎng)的作用分散菌絲體形成菌絲球狀有利于氧氣供應(yīng)攪拌型發(fā)酵罐2.種子罐和發(fā)酵罐一級種子罐通常為50-100L，二級種子罐為500-1000L。

又稱深層發(fā)酵。分散菌絲體形成菌絲片段狀有利于氧氣供應(yīng)適宜大規(guī)模供氧培養(yǎng)，不同于厭氧發(fā)酵，為有氧發(fā)酵。規(guī)?；囵B(yǎng)的發(fā)酵罐智能調(diào)控發(fā)酵