血凝實(shí)驗(yàn)真菌檢查法

關(guān)于血凝實(shí)驗(yàn)真菌檢查法第一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三1、血凝試驗(yàn)

（1份/人）2、真菌檢查法（1份/人）3、真菌大小培養(yǎng)觀察4、觀察梅毒螺旋體形態(tài)（示教）5、性病防治（錄像）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三掌握真菌檢查實(shí)驗(yàn)原理及方法掌握血凝實(shí)驗(yàn)原理及方法

熟悉螺旋體及支原體形態(tài)學(xué)觀察方法

二、教學(xué)目的及教學(xué)要求第三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三（一）、病毒血凝實(shí)驗(yàn)原理：某些病毒由于表面有由糖蛋白組成的血凝素（HA），在一定條件下，能與某些動(dòng)物或人的紅細(xì)胞表面的糖蛋白受體結(jié)合產(chǎn)生凝集，稱為紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)或血凝試驗(yàn)，能形成血凝現(xiàn)象的病毒有：流感病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、乙腦病毒等。第四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三操作步驟試管號(hào)123456789生理鹽水（ml）1:10病毒液（ml）0.50.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25+0.250.25--病毒稀釋度1∶101∶201∶401∶801∶1601∶3201∶6401:1280對(duì)照0.5%雞紅細(xì)胞懸液（ml）每管0.25ml

搖勻后，靜置室溫30-60min,觀察結(jié)果棄去0.25ml*觀察結(jié)果時(shí)要輕拿、勿搖動(dòng)第五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三血凝試驗(yàn)結(jié)果判定結(jié)果觀察：凝集特別顯著：“＋＋＋＋”凝集現(xiàn)象次之：“＋＋＋”凝集清楚可見：“＋＋”稍顯凝集者：“＋”血凝效價(jià)：呈“＋＋”凝集時(shí)的最高稀釋度為最終滴度。第六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三意義檢查病毒的存在。滴定病毒的血凝效價(jià)，采用一定的病毒量進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)，通常采用4個(gè)血凝單位。第七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三（二）、真菌檢查法（1份/人）

概念：真菌是一大類具有細(xì)胞壁和典型細(xì)胞核不含葉綠素，不分根、莖、葉的真核細(xì)胞型微生物。分類：?jiǎn)渭?xì)胞和多細(xì)胞第八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三單細(xì)胞真菌：呈圓形或卵圓形常見于酵母菌，類酵母菌以出芽方式繁殖。卵圓形G+，著色不一可見假菌絲白假絲酵母第九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三多細(xì)胞真菌形態(tài)菌絲孢子第十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三真菌基本形態(tài)單細(xì)胞真菌：白假絲酵母，卵圓形，革蘭染色陽性，著色不一，可見假菌絲。多細(xì)胞真菌：絲狀菌或霉菌，有菌絲和孢子。煙曲霉白假絲酵母第十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三菌落特征:

酵母型真菌類酵母型真菌

絲狀菌落單細(xì)胞多細(xì)胞第十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三

酵母型菌落類酵母型菌落第十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三酵母型菌落類酵母型菌落第十四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三真菌的菌落白假絲酵母：菌落圓形，較大，白色菌落底層有假菌絲多細(xì)胞真菌：觀察氣生菌絲，營養(yǎng)菌絲，表面隆起，淺溝及菌落基底顏色。白假絲酵母(血平板)黃曲霉第十五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三1、營養(yǎng)要求不高，常用沙保弱培養(yǎng)基培養(yǎng)。2、生長緩慢，培養(yǎng)1—4周才出現(xiàn)典型菌落。3、培養(yǎng)溫度為22--28℃，但某些深部真菌最適生長溫度為37℃。4、最適酸堿度為PH4.0—6.0。5、濕度要求較高。真菌培養(yǎng)特性第十六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三原理直接涂片檢查用顯微鏡直接檢查標(biāo)本中有無菌絲及孢子的存在，對(duì)皮膚絲狀菌的感染可作初步診斷，本法簡(jiǎn)單迅速易行。

第十七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三

材料

標(biāo)本:腳皮等試劑:10％KOH

器具:玻片、鑷子、酒精燈等第十八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三方法

KOH透明法（1）取腳皮少許于玻片上，加二滴10%K0H溶液，覆蓋一蓋玻片，置火焰上微微加熱，以加速角質(zhì)溶解，使標(biāo)本透明，然后微微加壓，使成薄片，并需驅(qū)去氣泡，用吸水紙吸去周圍溢液，（如為毛發(fā)標(biāo)本，切忌加熱加壓過甚，以保持毛發(fā)原形為宜，便于觀察真菌與毛發(fā)的關(guān)系）顯微鏡檢查。（2）將已制備的標(biāo)本片，先用低倍鏡檢查，然后再用高倍鏡證實(shí)第十九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三注意：蓋玻片傾斜45度慢慢蓋上，不能產(chǎn)生氣泡！標(biāo)本片制備第二十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三真菌檢查鏡下觀報(bào)告：“找到菌絲或孢子”“找到發(fā)外孢子”“找到發(fā)內(nèi)菌絲”第二十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三

（三）、支原體支原體是一類沒有細(xì)胞壁，呈多形性，能在無生命的培養(yǎng)基中生長繁殖的最小微生物。大小介于細(xì)菌和病毒之間。普通染色不易著色，用Giemsa染色著色較淺。革蘭染色為陰性。營養(yǎng)要求較高，需要在含10～20%馬血清和酵母浸液的培養(yǎng)基上生長。最適的pH7.8～

8.0.生長緩慢,在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)2～3天后才出現(xiàn)菌落。典型的菌落呈“荷包蛋”狀，中心厚邊緣薄的菌落形態(tài)。菌落表面呈顆粒狀第二十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三

觀察支原體集落第二十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期三第二十四頁，共二十六頁，編輯于202