第八章動物實驗基本操作

第八章動物實驗操作技術

第一節(jié)實驗動物的抓取與固定第二節(jié)實驗動物的麻醉第三節(jié)實驗動物給藥途徑和方法第四節(jié)實驗動物采血方法當前1頁，總共56頁。第一節(jié)實驗動物的抓取與固定一、大鼠小鼠二、豚鼠三、家兔四、犬當前2頁，總共56頁。小鼠的手法捉拿當前3頁，總共56頁。大鼠的手法捉拿當前4頁，總共56頁。大、小鼠的固定當前5頁，總共56頁。二、豚鼠的捉拿和固定豚鼠的捉拿豚鼠的手法固定當前6頁，總共56頁。三、家兔的捉拿和固定家兔的捉拿家兔的手法固定當前7頁，總共56頁。四、犬的捉拿當前8頁，總共56頁。家兔手術臺固定當前9頁，總共56頁。第二節(jié)

實驗動物的麻醉一些動物實驗，特別是手術等實驗，為減少動物的掙扎、保持安靜和便于操作，常對動物采用必要的麻醉。由于動物種屬間的差異，所采用的麻醉方法和選用的麻醉劑亦有不同。當前10頁，總共56頁。一、常用的麻醉劑

氨基甲酸已酯戊巴比妥鈉乙醚當前11頁，總共56頁。（一）揮發(fā)性麻醉劑包括乙醚、氯仿等。優(yōu)點：其麻醉量和致死量差距大，所以安全度也很大，動物麻醉深度容易掌握，而且麻后蘇醒較快。缺點：對局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多，容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醉時必需有人照看，以防麻醉過深而出現上述情況。當前12頁，總共56頁。（二）非揮發(fā)性麻醉劑包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉等巴比妥類的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛等。優(yōu)點：使用方便，一次給藥可維持較長的麻醉時間，麻醉過程較平衡，動物無明顯掙扎現象。缺點：蘇醒較慢。當前13頁，總共56頁。氨基甲酸乙酯特點：藥性溫和安全度大多數動物均可使用。有致癌作用不能用于腫瘤有關的實驗;有時可降低血壓。

動物給藥途徑劑量濃度給藥量維持時間

（g/kg)﹪ml/kg

犬貓兔腹腔靜脈0.75~1.0253~42~4h豚鼠肌肉1.35207.0大小鼠腹腔1.5~2.02010當前14頁，總共56頁。戊巴比妥鈉動物給藥途徑劑量濃度給藥量維持時間

（mg/kg)﹪ml/kg犬貓兔靜脈3031.02~4h腹腔40~5031.4~1.7豚鼠腹腔40~5022.0~2.5大小鼠腹腔4522.3特點：短效麻醉劑，對動物的循環(huán)和呼吸無顯著影響。當前15頁，總共56頁。（三）中藥麻醉劑

動物實驗時有時也用到像洋金花和氫溴酸東莨菪堿等中藥麻醉劑，但由于其作用不夠穩(wěn)定，而且常需加佐劑麻醉效果才理想，故在使用過程中不能得到普及。當前16頁，總共56頁。二、動物的麻醉方法

（一）全身麻醉

1.吸入法

操作：用乙醚浸濕棉球或紗布，迅速轉入密閉容器使其揮發(fā)，然后把待麻醉動物投入，約隔4～6分鐘即可麻醉，麻醉后應立即取出。給藥過程中如發(fā)現動物的角膜反射消失，瞳孔突然放大，應立即停止麻醉?？上茸⑸浒⑼衅奉A防窒息。當前17頁，總共56頁。2.腹腔和靜脈給藥麻醉法非揮發(fā)性麻醉劑可用作腹腔和靜脈注射麻醉，操作簡便，是實驗室最常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠，較大的動物如兔、犬、猴等則多用靜脈給藥進行麻醉。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別。所以在腹腔和靜脈麻醉時，一定控制藥物的濃度和注射量。當前18頁，總共56頁。（二）局部麻醉

1.貓的局部麻醉一般應用0.5～1.0%鹽酸普魯卡因注射。粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可卡因。2.兔在眼球手術時，可于結膜囊滴入0.02%鹽酸可卡因溶液，數秒鐘即可出現麻醉。3.犬的局部麻醉用0.5～1%鹽酸普魯卡因注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可卡因。當前19頁，總共56頁。三、麻醉注意事項

1、動物麻醉前禁食10~12h,不少于5h2、虛弱和過于肥胖的動物給藥劑量應低于標準量3、靜脈注射麻醉劑應注意緩慢達到所需要的麻醉深度則停止給藥4、注意實驗動物保溫。做慢性實驗時，麻醉劑在注射前應加熱至動物體溫水平。

貓為38.6℃±1.0℃，兔為38.4℃±1.0℃，大鼠為39.3℃±0.5℃

當前20頁，總共56頁。第三節(jié)實驗動物給藥方法在動物實驗中為了觀察藥物對機體功能、代謝、形態(tài)的作用需要將藥物注入到動物的體內。一般根據動物種類和藥物劑型確定給藥的方法。當前21頁，總共56頁。一、給藥方法（一）皮下注射當前22頁，總共56頁。動物注射部位注射量犬貓大腿外側2ml豚鼠大腿內側或小腹部1ml大小鼠側下腹部0.4ml/1ml當前23頁，總共56頁。（二）皮內注射當前24頁，總共56頁。（三）肌肉注射動物注射部位注射量犬臀部2~5ml家兔大腿外側0.5~1.0ml(2ml)豚鼠大腿外側0.2~0.5ml大鼠大腿外側0.2~0.5ml小鼠大腿外側0.1~0.2ml(1ml)當前25頁，總共56頁。（四）腹腔注射當前26頁，總共56頁。注射部位左下腹部1/3處小鼠0.1~0.2ml大鼠1~3ml豚鼠2~5ml家兔5~10ml犬5~15ml當前27頁，總共56頁。（五）靜脈注射大小鼠的尾靜脈注射當前28頁，總共56頁。家兔耳部血管家兔的耳緣靜脈注射耳外緣靜脈耳中央動脈當前29頁，總共56頁。靜脈注射給藥劑量小鼠大鼠豚鼠家兔犬0.2~0.5ml1~2ml1~5ml3~10ml5~15ml當前30頁，總共56頁。（六）經口給藥各種動物一次灌胃能耐受的最大容積:小鼠為0.5~1.0ml，大鼠為4~7ml，豚鼠為4~7ml，家兔為80~150ml，犬為200~500ml。當前31頁，總共56頁。二、實驗動物用藥量的確定及計算方法

按照人與實驗動物的體表面積比例計算（一）人體表面積計算人體表面積（m2）=0.0061×身高（cm）+0.0128×體重(kg)－0.1529例：某人身高168cm，體重55kg，試計算其體表面積。解0.0061×168+0.0128×55.0.1529=1.576m2中國人平均身高：男1.70m女1.59m,體重：男67.7kg女59.6kg當前32頁，總共56頁。（二）動物體表面積計算A（體表面積，以m2計算）=K×W（體重，以g計算）2/3

10000K值人小鼠大鼠豚鼠家兔貓犬猴10.69.19.19.810.19.811.211.8當前33頁，總共56頁。計算公式A人/A動物＝B人/B動物A:體表面積（m2）

B:藥量（重量）

當前34頁，總共56頁。人和動物間按體表面積折算的等效劑量比值表

小鼠(20g)大鼠(200g)豚鼠(400g)家兔(1.5kg)貓(2.0kg)猴(4.0kg)狗(12kg)人(70kg)人(70kg)

0.00260.0180.0310.070.0780.160.821.0當前35頁，總共56頁。第四節(jié)實驗動物采血方法

實驗研究中，經常要采集實驗動物的血液和尿液進行常規(guī)檢查或某些生物化學分析，故必須掌握血液和尿液的正確采集、分離和保存的操作技術。當前36頁，總共56頁。采血量采血部位動物品種最少量血尾靜脈耳靜脈眼底靜脈叢腹壁靜脈冠、腳蹼皮下靜脈

大鼠、小鼠兔、犬、貓、豬、綿羊兔、大鼠、小鼠青蛙、蟾蜍雞、鴨、鵝最中量血后肢外側皮下小隱靜脈前肢內側皮下頭靜脈耳中央動脈頸靜脈心臟斷頭翼下靜脈頸動脈犬、猴、貓犬、猴、貓兔犬、貓、兔豚鼠、大鼠、小鼠大鼠、小鼠雞、鴨、鴿、鵝雞、鴨、鴿、鵝最大量血股動脈、頸動脈心臟頸靜脈摘眼球犬、猴、貓、兔犬、猴、貓、兔馬、牛、山羊、綿羊大鼠、小鼠不同動物采血部位與采血量的關系當前37頁，總共56頁。

常用實驗動物的最大安全采血量與最小致死采血量

動物品種最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510家兔1040犬50200猴1560當前38頁，總共56頁。一、大、小鼠采血法1.剪尾采血2.鼠尾刺血法每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3~0.5ml。當前39頁，總共56頁。

3.眼眶靜脈叢采血體重20~25g的小鼠每次可采血0.2~0.3ml；體重200~300g大鼠每次可采血0.5~1.0ml。內眼角當前40頁，總共56頁。4.心臟采血當前41頁，總共56頁。5.頸動靜脈采血當前42頁，總共56頁。6、摘眼球采血當前43頁，總共56頁。二、家兔采血法

1.耳靜脈采血當前44頁，總共56頁。2.耳中央動脈采血

當前45頁，總共56頁。3.心臟采血4.后肢脛部皮下靜脈采血5.股靜脈、頸靜脈取血當前46頁，總共56頁。三、采血注意事項1、采血室內光線充足，溫度適宜。2、采血部位采血用具應消毒。3、盛放血液的器具應清潔干燥。4、如果血液需要抗凝應預先在盛放血液的容器內加入抗凝劑。5、采血后應注意采血部位的止血、消毒。當前47頁，總共56頁。四、幾種常用血液抗凝劑的配制及使用力法（一）肝素（二）草酸鹽合劑（三）氟化鈉當前48頁，總共56頁。（一）肝素1、作用機理抑制凝血酶的活力，阻止血小板凝聚2、使用方法（1）純品肝素10mg能抗凝65ml—125ml的血液。（2）用1%肝素生理鹽水溶液制作肝素試管。當前49頁，總共56頁。（3）動物全身抗凝大鼠3.0mg/kgw家兔10mg/kgw犬5.0mg/kgw

肝素可改變蛋白質等電點，當用鹽析法分離蛋白作分類測定時，不可采用素。當前50頁，總共56頁。（二）草酸鹽合劑配制：稱取草酸銨1.2g、草酸鉀0.8g、福爾馬林0.1ml，用蒸餾水加至100ml。1、作用機理能夠沉淀血凝過程中所必需