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實驗十二微生物大小測定第1頁/共12頁實驗十二微生物大小的測定

第2頁/共12頁目的要求學(xué)習并掌握用測微尺測定微生物大小的方法掌握對不同細菌細胞大小測定的分類學(xué)基本要求增強微生物細胞大小的感性認識第3頁/共12頁基本原理由于菌體很小，需在顯微鏡下測量，借助特殊的測量工具——

顯微測微尺，包括：目鏡測微尺和鏡臺測微尺鏡臺測微尺是一個在特制載玻片中央封固的標準刻尺，總長為1mm,共分為100個小格，即每一小格長度為0.01mm即10um目鏡測微尺是一塊圓形玻片，其中央刻有精確等分的刻度，有把5毫米刻成為50等分或把10毫米長度刻成100等分。測量時，將其放在接目鏡中的隔板上來測量經(jīng)顯微鏡放大后的細胞物象。第4頁/共12頁

實驗步驟裝目鏡測微尺取出目鏡，把目鏡的透鏡旋下，將目鏡測微尺刻度朝下放在目鏡鏡筒內(nèi)的隔板上，旋上目鏡透鏡，然后將目鏡插入鏡筒內(nèi)。第5頁/共12頁2校準目鏡測微尺放鏡臺測微尺：鏡臺測微尺置于載物臺上，使刻度朝上。

校準：先用低倍鏡觀察，對準焦距，視野中看清鏡臺測微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動目鏡，使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度平行，移動推動器、使兩尺重疊，再使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩刻度線完全重合，計數(shù)兩重合刻度之間目鏡測微尺的格數(shù)和鏡臺測微尺的格數(shù)。用同樣的方法換成高倍鏡和油鏡進行校正，分別測出高倍鏡和油鏡下，兩重合線之間兩尺分別所占的格數(shù)。第6頁/共12頁校準目鏡測微尺第7頁/共12頁注意：

觀察時光線不能太強，否則難以找到鏡臺測微尺的刻度換高倍鏡和用油鏡校正時，眼睛注視著鏡頭和載物臺，防止壓壞鏡臺測微尺！

計算:不同放大倍數(shù)下，目鏡測微尺每格所代表的長度：

兩重合線間鏡臺測微尺格數(shù)*10um目鏡測微尺每格長度(um)=

———————————————————

兩重合線間目鏡測微尺格數(shù)

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校正完后取下鏡臺測微尺，換上所需觀察的菌體制片,細菌用簡單染色；測定酵母菌時制成水浸片也可以用美藍染色先用低倍鏡觀察找到菌體，然后選擇合適的倍鏡觀察，在不同倍鏡觀察到的格數(shù)分別乘上校正后不同倍鏡目鏡測微尺每格所代表的長度，即為菌體的實際大?。∫话闱闆r下，細菌需用油鏡觀察，酵母菌用高倍鏡觀察即可；對于球菌就用直徑表示菌體大小，桿菌則需要分別測量細胞的寬度和長度，用寬度×長度表示細胞大小3菌體大小的測定第9頁/共12頁

實驗材料菌種：金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌釀酒酵母菌儀器：目鏡測微尺鏡臺測微尺載玻片蓋玻片顯微鏡

染液：草酸銨結(jié)晶紫呂氏堿性美藍

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