天然藥物化學(xué)改-5-2

第5章黃酮類化合物Flavonoids----黃酮類的檢識和鑒定1第五章黃酮類化合物概述1黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和分類2黃酮類化合物的理化性質(zhì)3黃酮類化合物的提取和分離4黃酮類化合物的檢識和結(jié)構(gòu)鑒定52一、黃酮類化合物的檢識1、顏色：多呈黃色2、母核檢識：鹽酸-鎂粉反應(yīng)：黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）四氫硼鈉反應(yīng)：二氫黃酮（醇）類3、取代基團(tuán)檢識：鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)

3-OH、5-OH黃酮鑒別氨性氯化鍶反應(yīng)鄰二酚羥基4、色譜檢識:硅膠TLC聚酰胺TLC紙層析（PC）理化檢識3黃酮類化合物的檢識和結(jié)構(gòu)鑒定第一相展開采用醇性展開劑如:BAWn-BuOH:HOAc:H2O=4:1:5上層TBAt-BuOH:HOAc:H2O=3:1:1水飽和n-BuOH層析行為:Rf值:苷元>單糖苷>雙糖苷一般:苷元在0.70以上，而苷則小于0.7。分配作用第二相展開采用水性展開劑

如：2~6%HOAc水溶液3%NaCl水溶液HOAc:濃HCl:H2O=30:3:10層析行為:連接糖鏈越長,Rf越大(>0.5);苷元Rf較小，有的留在原點(diǎn)。吸附作用ABCDABCD苷元苷元紙色譜5雙向PC

第I向醇性展開劑第II向水性展開劑（BAW、TBA、水飽和正丁醇）（2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl）

正相色譜

反相色譜固定相（水）極性>流動(dòng)相（**有認(rèn)為是吸附原理）？？

Rf規(guī)律：極性小的化合物Rf大極性大的化合物Rf大

苷元（0.7以上）>單糖苷>雙糖苷（0.7以下）苷元中，平面型分子>非平面型分子Rf規(guī)律與左邊相反母核相同，2-OH>3-OH>4-OH>5-OH黃酮苷元的分離鑒別黃酮苷及花色素類6黃酮類化合物的檢識和結(jié)構(gòu)鑒定紙層析（PC）：采用雙向紙層析。

層析檢查方法：

①觀察熒光,用紫外光燈照射看到有色斑點(diǎn)，NH3處理

產(chǎn)生明顯的色變。

②用2%AlCl3甲醇液噴霧,UV燈下呈亮黃色熒光斑點(diǎn)。紙色譜7苯甲酰基帶II：220~280nm桂皮?；鶐：300~400nmUV（二）不同類型黃酮的UV基本特征9兩者UV光譜圖形相似，但帶I位置不同。整個(gè)母核上氧取代程度越高，則帶I將向長波方向位移（紅移）。

（二）不同類型黃酮的UV基本特征a.b.1、黃酮黃酮醇10帶II吸收峰為主峰，

帶I很弱，常在主峰的長波方向有一肩峰。c.

d.245-270nm270-295nm2、異黃酮、二氫黃酮二氫黃酮醇（二）不同類型黃酮的UV基本特征11峰形帶II（240~285nm，苯甲酰系統(tǒng)）帶I（300~400nm，桂皮酰系統(tǒng)）類型取代240-285304-350黃酮類OH取代可以使相應(yīng)的帶I或II紅移，Ｂ環(huán)具有３’,4’羥基，帶II為雙峰328-385黃酮醇類（3-OR）352-385黃酮醇類（3-OH）245-270300-400異黃酮類B環(huán)OH和OMe對帶I影響不大270-295二氫黃酮220-270340-390查爾酮類2’-OH使帶I紅移370-430橙酮類帶I有3-4個(gè)小峰（二）不同類型黃酮的UV基本特征4、總結(jié)13（三）診斷試劑在結(jié)構(gòu)測定中的應(yīng)用1、常用的診斷試劑：甲醇鈉(NaOCH3)醋酸鈉(NaOCOCH3)醋酸鈉/硼酸(NaOCOCH3/H3BO3)三氯化鋁(AlCl3)三氯化鋁/鹽酸(AlCl3/HCl)14診斷試劑在結(jié)構(gòu)測定中的應(yīng)用（1）NaOMe：堿性強(qiáng)，酚OH易形成鈉鹽。PhOHPhO-Na+，從而增加電子云密度和流動(dòng)性紅移。（2）NaOAc：

未熔融:堿性較弱，只能使黃酮母核上酸性較強(qiáng)的酚OH解離而使UV譜紅移。

熔融：堿性,表現(xiàn)出與NaOMe類似的效果。15診斷試劑在結(jié)構(gòu)測定中的應(yīng)用（4）AlCl3分子中有3-OH，5-OH，鄰二酚OH時(shí)，可與Al3+絡(luò)合，引起吸收峰紅移。鋁絡(luò)合物穩(wěn)定性：

黃酮醇3-OH＞黃酮5-OH＞二氫黃酮5-OH＞鄰二酚OH＞二氫黃酮醇3-OH（5）AlCl3/HCl：鄰二酚OH和二氫黃酮醇3-OH在酸性條件下不與AlCl3絡(luò)合172、診斷試劑對黃酮類化合物UV譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系診斷試劑帶II帶I歸屬NaOCH3紅移40-60nm,強(qiáng)度不降示有4’-OH紅移50-60nm,強(qiáng)度下降示有3-OH,

但無4’-OH吸收譜隨時(shí)間延長而衰退示有對堿敏感的取代方式NaOAc（未熔融）紅移5-20nm在長波一側(cè)有明顯肩峰示有7-OH示有4’-OH，但無3或7-OHNaOAc（熔融）紅移40-65nm強(qiáng)度下降示有4’-OH吸收譜隨時(shí)間延長而衰退示有對堿敏感的取代方式18診斷試劑帶II帶I歸屬NaOAc/H3BO3紅移5-10nm示A環(huán)有鄰二酚羥基，但不包括5,6-二羥基紅移12-30nm示B環(huán)有鄰二酚羥基AlCl3及AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖

=AlCl3譜圖

示結(jié)構(gòu)中無鄰二酚羥基AlCl3/HCl譜圖

≠AlCl3譜圖

示結(jié)構(gòu)中可能有鄰二酚羥基帶I或Ia紫移30-40nm示B環(huán)有鄰二酚羥基帶I或Ia紫移50-65nm示A、B環(huán)上均有鄰二酚羥基AlCl3/HCl譜圖

=CH3OH譜圖

示無3-或5-OHAlCl3/HCl譜圖

≠CH3OH譜圖

示可能有3-或5-OH帶I紅移35-55nm示只有5-OH帶I紅移60nm示只有3-OH帶I紅移50-60nm示可能同時(shí)有3-和5-OH帶I紅移17-20nm除5-OH外，還有6-含氧取代2、診斷試劑對黃酮類化合物UV譜圖的影響及結(jié)構(gòu)的關(guān)系19練習(xí)----由UV光譜推斷結(jié)構(gòu)CH3OHNaOCH3AlCl3AlCl3/HClCH3OHNaOCOCH3NaOCOCH3/H3BO3259,266sh,299sh,359272,327,410275,303s