UPLC-QTOFMS在相關(guān)研究方向的應(yīng)用課件

UPLC-QTOFMS在

相關(guān)研究方向的應(yīng)用

報(bào)告人：印敏安捷倫1260液相色譜-G6530三級四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用儀（UPLC-QTOF）

前言液相色譜用戶現(xiàn)在又有了新的需求；首先是改進(jìn)生產(chǎn)力的需求，因?yàn)榇罅康臉悠沸枰诤芏痰臅r(shí)間內(nèi)完成，例如代謝組學(xué)分析；其次是在生化樣品及天然產(chǎn)物樣品的分析中，樣品的復(fù)雜性對分離能力提出了更高的要求；第三是在與MS及MS/MS等檢測技術(shù)聯(lián)用時(shí)，對連接的質(zhì)量提出了更高的要求。簡而言之，我們需要“更快地得到更好的結(jié)果”

UPLC色譜柱粒度1.7μm，傳統(tǒng)5μm粒度UPLC色譜柱長50mm，傳統(tǒng)150-250mmUPLC最佳流量0.2-0.5ml/min，傳統(tǒng)0.8-1ml/min與傳統(tǒng)的高效液相色譜（HPLC）相比，UPLC具有以下優(yōu)勢：1.高分離度（ultraresolution）2.高速度（ultraspeed）3.靈敏度（sensitivity）UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍

使用更少的樣品（更適合含量低的樣品，如藥物代謝，激素等）檢測時(shí)間短（更適合易降解的樣品,如農(nóng)藥殘留）消耗更少的溶劑分離效果更好（更適合復(fù)雜體系）新的自動(dòng)進(jìn)樣器適合微量多孔板（方便蛋白多肽分析）安捷倫1260UPLC的優(yōu)勢質(zhì)譜的應(yīng)用色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀已經(jīng)成為有機(jī)化合物常規(guī)檢測中的必備工具，廣泛應(yīng)用于環(huán)保領(lǐng)域的有機(jī)污染物檢測藥物研究生產(chǎn)質(zhì)控的進(jìn)出口環(huán)節(jié)法庭科學(xué)中對燃燒爆炸現(xiàn)場調(diào)查，殘留物檢驗(yàn)石油化工食品安全(添加劑、塑化劑、農(nóng)藥、抗生素）競技體育中興奮劑檢測Agilent6500系列精確質(zhì)量四極桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(Q-TOF)系統(tǒng)提供了您所需要的輪廓譜分析、鑒定、表征，對定量低分子量化合物和生物分子更具信心。Q-TOF系統(tǒng)尤其擅長MS和MS/MS分析，對蛋白質(zhì)、代謝物、雜質(zhì)檢測），不用犧牲圖譜采集速率而獲得高分辨率。飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)（TOF-MS）是一種新型質(zhì)譜技術(shù),具有質(zhì)量范圍寬、分辨率和質(zhì)量測量精度較高、靈敏度高、分析速度快的特點(diǎn)

（1）氣化的離子，在電場的作用下經(jīng)過傳輸毛細(xì)管（同時(shí)隔離外部常壓與質(zhì)譜內(nèi)部高真空），進(jìn)入skimmer，再到八極桿透鏡（離子光學(xué)組件，聚焦作用，進(jìn)一步去除溶劑和中性分子）。（2）然后到四級桿，質(zhì)量過濾器，選擇某些離子通過或全部通過。離子在碰撞池裂解，六級桿捕獲碎片。隨機(jī)運(yùn)動(dòng)離子經(jīng)過beamshaper，再用pulsar形成脈沖離子流。（因?yàn)門OF是脈沖型的，而電噴霧的離子流是連續(xù)的，所以要給一個(gè)脈沖電壓）（3）脈沖離子在飛行管內(nèi)縱向飛行，經(jīng)反射后到達(dá)多通道板檢測器。板上，不同的位置接收不同m/z的離子（相同的電勢能轉(zhuǎn)化為動(dòng)能，zV=1/2mv2，質(zhì)量越大，速度越慢,強(qiáng)度與離子的濃度有關(guān))。舉例1，未知化合物的結(jié)構(gòu)鑒定高分辨質(zhì)譜給出精確分子量（小數(shù)點(diǎn)后4位）根據(jù)分子量自動(dòng)計(jì)算分子式從數(shù)據(jù)庫中搜索化合物名稱和結(jié)構(gòu)

舉例2，中藥指紋圖譜中藥復(fù)雜體系，多組分研究皂苷等類型無紫外吸收活性物質(zhì)檢測MS檢測器靈敏度更高無標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，各組分的結(jié)構(gòu)鑒定應(yīng)用于藥材的鑒別，中藥提取物和有效部位質(zhì)量控制，中藥復(fù)方的質(zhì)量控制等舉例3，藥物代謝研究由于血液樣品試樣提供量少，基質(zhì)復(fù)雜，在此混合物中分析某種微量成分(通常為(g/mL或ng/mL水平)并加以鑒別，常常是對分析化學(xué)家的挑戰(zhàn)樣品藥物代謝產(chǎn)物復(fù)雜人參皂苷的代謝物研究

舉例5，植物生理中蛋白組學(xué)的研究

病原菌脅迫的植物蛋白質(zhì)組學(xué)研究

Chen等進(jìn)行了水稻懸浮細(xì)胞表達(dá)抗病基因Xa21質(zhì)膜蛋白質(zhì)組分析，以鑒定參與抗水稻白葉枯病(X.oryzaepv.Oryzae)早期防御反應(yīng)的質(zhì)膜蛋白成分。質(zhì)譜鑒定了11個(gè)預(yù)測在植物防御中起作用的蛋白質(zhì)，有9個(gè)推定的質(zhì)膜相關(guān)蛋白質(zhì)，H+-ATPase、蛋白質(zhì)磷酸化酶、過敏反應(yīng)誘導(dǎo)蛋白(OsHIR1)、prohibitin(OsPHB2)、鋅指蛋白(zincfinger)和C2結(jié)構(gòu)域蛋白、USP及熱震驚蛋白。

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析鹽脅迫下植物激素的含量變化

舉例7，植物檢疫的應(yīng)用輪枝菌是一類分布廣,寄主范圍寬,形態(tài)變異大,對作物產(chǎn)量可造成巨大損失的一類真菌建立了輪枝菌6個(gè)種19個(gè)菌株的TOFMS檢測的蛋白指紋圖譜數(shù)據(jù)庫據(jù)此,成功地實(shí)施了對輪枝菌的TOFMS檢測。該方法具有簡便、快速(僅僅幾分鐘)、高通量、高靈敏等優(yōu)點(diǎn)在植物檢疫領(lǐng)域?qū)⒕哂泻芎玫膶?shí)用價(jià)值和十分誘人的發(fā)展前景。

舉例10,花色素的測定花色素結(jié)構(gòu)多樣，易聚合，結(jié)構(gòu)易受環(huán)境影響發(fā)生變化LC-MS方法是花色素定性和定量分析的主要手段

山東大學(xué)藥學(xué)院季梅等，用LC-MS方法,檢測大澤山玫瑰香紅葡萄皮中主要花色苷有15種。山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院李偉等利用LC-MS方法從黒粒小麥麩皮中分離鑒定出9種不同的花色苷類化合物。徐州工程學(xué)院食品工程學(xué)院王衛(wèi)東等，利用LC-MS方法從黑莓中分離鑒定出四種花色苷。質(zhì)譜

應(yīng)用質(zhì)譜可以投稿的SCI期刊0.485Spectroscopy

0.604JournalofAnalyticalChemistry

1.340EuropeanJournalofMassSpectrometry

1.526AnalyticalSciences

2.061GeostandardsandGeoanalyticalResearch

2.117InternationalJournalofMassSpectrometry

2.289PureandAppliedChemistry

2.695RapidCommunicationsinMassSpectrometry

2.719Spectrochimica

ActaPartB-AtomicSpectroscopy3.272Analyst

3.290Talanta

3.391JournaloftheAmericanSocietyforMassSpectrometry

3.411JournalofMassSpectrometry

3.435JournalofAnalyticalAtomicSpectrometry

3.757Analytica

Chimica

Acta

5.214AnalyticalChemistry

6.546TrACTrendsinAnalyticalChemistry

10.623MassSpectrometryReviews

測試成本1、試劑費(fèi)和處理樣品耗材2、儀器耗材3、電費(fèi)4、其他收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)（1）直接進(jìn)樣高分辨掃描分子量：對內(nèi)150元/進(jìn)樣，對外400元/進(jìn)樣。二級質(zhì)譜各離子模式下每進(jìn)樣加收50元。（2）液質(zhì)聯(lián)用分析：運(yùn)行時(shí)間20min以內(nèi)，對內(nèi)300元，對