高效液相色譜習(xí)題解答

高效液相色譜法習(xí)題一、思慮題1．從分別原理、儀器結(jié)構(gòu)及應(yīng)用范圍上簡要比較氣相色譜及液相色譜的異同點。2．液相色譜中影響色譜峰展寬的要素有哪些?與氣相色譜對比較,有哪些主要不一樣之處?3．在液相色譜中,提升柱效的門路有哪些?此中最有效的門路是什么?4．液相色譜有幾種種類?5．液-液分派色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？6．液-固分派色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？7．化學(xué)鍵合色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？8．離子互換色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？9．離子對色譜的保存機理是什么?這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中,最適合分其余物質(zhì)是什么?10．空間排阻色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？11．在液-液分派色譜中，為何可分為正相色譜及反相色譜？12．何謂化學(xué)鍵合固定相？它有什么突出的長處？13．何謂化學(xué)克制型離子色譜及非克制型離子色譜？試述它們的基來源理14．何謂梯度洗提？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？15．高效液相色譜進樣技術(shù)與氣相色譜進樣技術(shù)有和不一樣之處？16．以液相色譜進行制備有什么長處？17．在毛細管中實現(xiàn)電泳分別有什么長處？18．試述CZE的基來源理19．試述CGE的基來源理20．試述MECC的基來源理二、選擇題1．液相色譜適合的剖析對象是（）。A低沸點小分子有機化合物B高沸點大分子有機化合物C所有有機化合物D所有化合物2．HPLC與GC的比較，可忽視縱向擴散項，這主假如因為（）。A柱前壓力高B流速比GC的快C流動相鉆度較小D柱溫低3．組分在固定相中的質(zhì)量為MA(g)，在流動相中的質(zhì)量為MB（g），而該組分在固定相中的濃度為CA（g·mL－1），在流動相中濃度為CB（g·mL－1），則此組分的分派系數(shù)是()。AmA/mBBmB/mACCB/CADCA/CB。4．液相色譜定量剖析時，不要求混淆物中每一個組分都出峰的是＿。A外標標準曲線法B內(nèi)標法C面積歸一化法D外標法5．在液相色譜中，為了改良分其余選擇性，以下舉措（）是有效的？A改變流動相種類B改變固定相種類C增添流速D改變填料的粒度6．在分派色譜法與化學(xué)鍵合相色譜法中，選擇不一樣類其余溶劑（分子間作使勁不一樣），以改良分別度，主假如（）。A提升分派系數(shù)比B容量因子增大C保存時間增添D色譜柱柱效提升7．分別結(jié)構(gòu)異構(gòu)體，在下述四種方法中最適合的選擇是（）。A吸附色譜B反離子對色譜C親和色譜D空間排阻色譜8．分別糖類化合物，選以下的柱子（）最適合。AODS柱B硅膠柱C氨基鍵合相柱D氰基鍵合相柱9．在液相色譜中，梯度洗脫合用于分別（）。A異構(gòu)體B沸點鄰近，官能團相同的化合物沸點相差大的試樣D極性變化范圍寬的試樣10．在高效液相色譜中，采納254nm紫外控制器，下述溶劑的使用極限為（A甲醇210nmB乙酸乙醋260nmC丙酮330nm

）。11吸附作用在下邊哪一種色譜方法中起主要作用（

）。液一液色譜法B液一固色譜法C鍵合相色譜法D離子互換法12．當用硅膠為基質(zhì)的填料作固定相時，流動相的pH范圍應(yīng)為（）。AC1

在中性地區(qū)一14

B5D2

一8一813．在液相色譜中，提升色譜柱柱效的最有效門路是（A減小填料粒度B適合高升柱溫

）。降低流動相的流速D增大流動相的流速14．在正相色譜中，若適合增大流動相極性則（）。A樣品的k降低，tR降低B樣品的k增添，tR增添C相鄰組分的增添D對基本無影響15．用ODS柱剖析一有機弱酸混淆物樣品，以某一比率甲醇一水為流動相時，樣品容量因子較小，若想使容量因子適合增添，較好的方法是（）。A增添流動相中甲醇的比率B增添流動相中的水的比率C流動相中加人少許HAcD流動相中加人少許的氨水16．假如樣品比較復(fù)雜，相鄰兩峰間距離太近或操作條件不易控制穩(wěn)固，要正確丈量保存值有必定困難時，可選擇以下方法（）定性。A利用相對保存值定性B加人已知物增添峰高的方法定性C利用文件保存值數(shù)據(jù)定性D與化學(xué)方法配合進行定性17．液相色譜中通用型檢測器是（）。A紫外汲取檢測器B示差折光檢測器C熱導(dǎo)池檢測器D熒光檢測器18．離子色譜的主要特色是（）。高壓、高效、高速、高分辨率、高敏捷度采納柱后克制技術(shù)和電導(dǎo)檢測，特別適合離子剖析采納了陰離子專用檢測器，對陰離子剖析有高敏捷度采納紫外檢測器合柱壓衍生裝置，對離子剖析有高效19．高壓、高效、高速是現(xiàn)代液相色譜的特色，采納高壓主假如因為（）。A可加速流速，縮短剖析時間B高壓可使分別效率明顯提升C采納了細粒度固定相所致D采納了填補毛細管柱20．液相色譜的H一u曲線（）。A與氣相色譜的相同，存在著minBH隨流動相的流速增添而降落CHHDH受u影響很小隨流動相的流速增添而上漲21與氣相色譜對比，在液相色譜中（）。分子擴散項很小，可忽視不計，速率方程式由兩項構(gòu)成渦流擴散項很小，可忽視不計，速率方程式由兩項構(gòu)成傳質(zhì)阻力項很小，可忽視不計，速率方程式由兩項構(gòu)成速率方程式相同由三項構(gòu)成，二者相同22．在液相色譜中，以下檢測器可在獲取色譜流出曲線的基礎(chǔ)上，同時獲取被分別組分的三維彩色圖形的是（）。A光電二極管陣列檢測器B示差折光檢測器C熒光檢測器D電化學(xué)檢測器23．不一樣種類的有機物，在極性吸附劑上的保存次序是（）。A飽和烴、烯烴、芳烴、醚B醚、烯烴、芳烴、飽和烴C烯烴、醚、飽和烴、芳烴D醚、芳烴、烯烴、飽和烴24．氧化鋁固定相色譜柱不適合選哪一種物質(zhì)作流動相（）。A甲醇B正己烷C煤油D環(huán)烷酸25．液相色譜中不影響色譜峰擴展的要素是（）。A渦流擴散項B分子擴散項C傳質(zhì)擴散項D柱壓效應(yīng)26．在液相色譜中，常用作固定相又可用作鍵合相基體的物質(zhì)是（）。A分子篩B硅膠C氧化鋁D活性炭27．樣品中各組分的出柱次序與流動相的性質(zhì)沒關(guān)的色譜是（）。A離子互換色譜B環(huán)糊精色譜C親和色譜D凝膠色譜28．在液相色譜中，固體吸附劑合用于分別（）。A異構(gòu)體B沸點鄰近，官能團相同的顆粒沸點相差大的試樣D極性變換范圍29．為測定鄰氨基苯酸中微量雜質(zhì)苯胺，選擇下邊哪一種條件（）。A硅膠固定相，異丙醚一己烷流動相B硅膠固定相，水一甲醇流動相；CODS鍵合相，水一甲醇流動相DODS鍵合相，異丙醚一己烷流動相。30．在以硅膠為固定相的吸附柱色譜中，錯誤的說法是（）。A組分的極性越強，被固定相吸附的作用越強B物質(zhì)的相對分子質(zhì)量越大，越有益于吸附C流動相的極性越強，組分越簡單被固定相所吸附D吸附劑的活度系數(shù)越小，對組分的吸附力越大31．鍵合相的鍵合基團的碳鏈長度增添后（）。A極性減小B極性增大載樣量增大D載樣量減小32．在反相色譜法中，若以甲醇一水為流動相，增添甲醇的比率時，組分的容量因子化為（）。Ak與tR增大Bk與tR減小Ck與tR不變Dk增大，tR減小

k與保存時間

tR的變33水在下述色譜中，洗脫能力最弱（作為底劑）的是（A正相色譜法B反相色譜法C吸附色譜法D空間排擠色譜法

）。34．在以下方法中，組分的縱向擴散可忽視不計的是（A毛細管氣相色譜法B高效液相色譜法C氣相色譜法D超臨界色譜法

）。三、填空題1．高效液相色譜儀一般可分為梯度淋洗系統(tǒng)、高壓輸液泵、流量控制系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)和分別柱及檢測器等部分。2．常用的高效液相色譜檢測器主假如紫外、示差折光、熒光、電導(dǎo)和電化學(xué)檢測器等。3．高效液相色譜中的梯度洗脫技術(shù)近似于氣相色譜中的程序升溫，可是前者連續(xù)改變的是流動相的構(gòu)成與極性，而不是溫度。4．高效液相色譜柱按內(nèi)徑大小大概可分為三種種類：內(nèi)徑小于2mm的稱為細管或微管徑柱；內(nèi)徑在2-5mm范圍內(nèi)的是慣例高效液相色譜柱；內(nèi)徑大于5mm的一般成為半制備柱或制備柱。5．高效液相色譜固定相的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)的差異，使分別機理不一樣而構(gòu)成各樣色譜種類，主要有液-固吸附色譜、液-液分派色譜、排阻色譜、親和色譜和離子互換色譜等。6．在液－液分派色譜中，關(guān)于親水固定液采納流動相，即流動相的極性_______________固定相的極性稱為正相分派色譜。7．正相分派色譜合用于分別化合物、極性的先流出、極性的后流出。8．流動相常用的脫氣方法有、、和。9．高壓輸液泵是高效液相色譜儀的重點零件之一，按其工作原理分為和兩大類。10．離子對色譜分派容量（k）與萃取均衡常數(shù)（KRP）關(guān)系：正相離子對色譜；反相離子對色譜。11．離子對色譜法是把加人流動相中，被剖析樣品離子與生成中性離子對，從而增添了樣品離子在非極性固定相中的，使增添，從而改良分別成效。12．無克制離子色譜法的固定相采納離子互換樹脂，流動相是溶液，采納檢測器。13．在液相色譜中，溶質(zhì)分子與極性吸附中心的互相作用，會隨溶質(zhì)分子上官能團極性的__________或官能團數(shù)量的而增添，這會使溶質(zhì)在固定相上的保存值______。14．色譜操作時，假如超載，即進樣量超出柱容量，則柱效快速_______，峰變________。15．、、是現(xiàn)代液相色譜的明顯特色，其固定相多采用。16．高效液相色譜的發(fā)展趨向是減小和以提升柱效。17．在液相色譜中，為改良分別度并調(diào)整出峰時間，可經(jīng)過改變流動相和______的方法達到。18．在液相色譜中，速率理論方程中的項很小，可忽視不計，vanDeemter方程式可寫成。19．經(jīng)過化學(xué)反響，將鍵合到表面，此固定相當為化學(xué)鍵合固定相。20．與液一液分派色譜對比，鍵合相色譜的主要長處是化學(xué)鍵合固定相穩(wěn)固，在使用過程中；合用于；適合于k范圍寬的樣品剖析。21．液相色譜流動相應(yīng)使用黏度溶劑，可減小溶質(zhì)的，有益于提升柱效。22．在液相色譜中，色譜特別適合于分別異構(gòu)體，洗脫方式合用于分別極性變化范圍寬的試樣。23．以O(shè)DS鍵合固定相，甲醇一為流動相時，該色譜條件為色譜。24．用凝膠為固定相，利用凝膠的與被分別組分分子間的相對大小關(guān)系，而分別、剖析的色譜法，稱為空間排阻（凝膠）色譜法。凝膠色譜的選擇性只好經(jīng)過選擇適合的來實現(xiàn)。25．在正相色譜中，極性的組分先出峰，極性的組分后出峰。四、正誤判斷1．液一液色譜流動相與被分別物質(zhì)互相作用，流動相極性的細小變化，都會使組分的保存值出現(xiàn)較大的改變。（）2．利用離子互換劑作固定相的色譜法稱為離子互換色譜法。（）3．紫外汲取檢測器是離子互換色譜法通用型檢測器。（）4．檢測器性能利害將對組分分別產(chǎn)生直接影響。（）5．色譜歸一化法只好合用于檢測器對所有組分均有響應(yīng)的狀況。（）6．高效液相色譜合用于大分子，熱不穩(wěn)固及生物試樣的剖析。（）7．高效液相色譜中往常采納調(diào)理分別溫度和流動相流速來改良分別成效。（）8．離子互換鍵合固定相擁有機械性能穩(wěn)固，可使用小粒度固定相和高柱壓來實現(xiàn)快速分別。（）9．離子色譜中，在剖析柱和檢測器之間增添了一個“克制柱”，以增添洗脫液本底電導(dǎo)。（）10．在液相色譜中為防止固定相的流失，流動相與固定相的極性差異越大越好。（）11．正相分派色譜的流動相極性大于固定相極性。（）12．反相分派色譜適于非極性化合物的分別。（）13．高效液相色譜法采納梯度洗脫，是為了改變被測組分的保存值，提升分別度。（）14．液相色譜柱一般采納不銹鋼柱、玻璃填補柱。（）15．液相色譜固定相往常為粒度5～10m。（）16．示差折光檢測器是屬于通用型檢測器，適于梯度淋洗色譜。（）17．離子互換色譜主要采納有機物作流動相。（）18．體積排阻色譜所用的溶劑應(yīng)與凝膠相像，主假如防備溶劑吸附。（）19．在液一液色譜中，為改良分別成效，可采納梯度洗脫。（）20．化學(xué)鍵合固定相擁有優(yōu)秀的熱穩(wěn)固性，不易吸水，不易流失，可用梯度洗脫。（）21．液相色譜的流動相又稱為淋洗液，改變淋洗液的構(gòu)成、極性可明顯改變組分分別成效。（）22．液相色譜指的是流動相是液體，固定相也是液體的色譜。（）23．高效液相色譜柱柱效高，凡是能用液相色譜剖析的樣品不用氣相色譜法剖析。（）24．在液相色譜中，流動相的流速變化對柱效影響不大。（）25．液相色譜的H一u曲線與氣相色譜的H一u相同，流速都存在一個最低點。（）26．液相色譜的中引轉(zhuǎn)機譜擴展的主要原由是分子擴散項。（）27．正相鍵合色譜的固定相為非（弱）極性固定相，反相色譜的固定相為極性固定相。（）28．某人用凝膠色譜分別易高聚物樣品，分別狀況很差，他改變流動相的構(gòu)成后，分別狀況大為改良，這種說法對嗎？（）29．在離子互換色譜中使用的固定相也屬于一種鍵合固定相。（）30．離子對色譜也可分為正相離子和反相離子對色譜，反相離子對色譜，往常采納極性固定相。高效液項色譜法習(xí)題解答一、思慮題1．從分別原理、儀器結(jié)構(gòu)及應(yīng)用范圍上簡要比較氣相色譜及液相色譜的異同點。答：二者都是依據(jù)樣品組分與流動相和固定相互相作使勁的差異進行分其余。從儀器結(jié)構(gòu)上看，液相色譜需要增添高壓泵以提升流動相的流動速度，戰(zhàn)勝阻力。同時液相色譜所采納的固定相種類要比氣相色譜豐富的多，分別方式也比許多樣。氣相色譜的檢測器主要采納熱導(dǎo)檢測器、氫焰檢測器和火焰光度檢測器等。而液相色譜則多使用紫外檢測器、熒光檢測器及電化學(xué)檢測器等?？墒嵌呔膳cMS等聯(lián)用。二者均具分別能力高、敏捷度高、剖析速度快，操作方便等長處，但沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)固性差的物質(zhì)難以用氣相色譜進行剖析。而只需試樣能夠制成溶液，既可用于HPLC剖析，而不受沸點高、熱穩(wěn)固性差、相對分子量大的限制。2．液相色譜中影響色譜峰展寬的要素有哪些?與氣相色譜對比較,有哪些主要不一樣之處?答：液相色譜中引轉(zhuǎn)機譜峰擴展的主要要素為渦流擴散、流動的流動相傳質(zhì)、滯留的流動相傳質(zhì)以及柱外效應(yīng)。在氣相色譜中徑向擴散常常比較明顯，而液相色譜中徑向擴散的影響較弱，常常能夠忽視。此外，在液相色譜中還存在比較明顯的滯留流動相傳質(zhì)及柱外效應(yīng)。3．在液相色譜中,提升柱效的門路有哪些?此中最有效的門路是什么?答：液相色譜中提升柱效的門路主要有：1）提升柱內(nèi)填料裝填的平均性；2）改良固定相：3）粒度;選擇薄殼形擔(dān)體;采納低粘度的流動相;4）適合提升柱溫此中，減小粒度是最有效的門路。.4．液相色譜有幾種種類?答：液相色譜有以下幾種種類：液-液分派色譜；液-固吸附色譜；化學(xué)鍵合色譜；離子互換色譜；離子對色譜；空間排阻色譜等。5．液-液分派色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？答：液－液分派色譜的保存機理是經(jīng)過組分在固定相和流動相間的多次分派進行分其余。能夠分別各樣無機、有機化合物。6．液-固分派色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？答：液-固吸附色譜是經(jīng)過組分在兩相間的多次吸附與解吸均衡實現(xiàn)分其余。最適合分其余物質(zhì)為中等相對分子質(zhì)量的油溶性試樣，凡是能夠用薄層色譜分其余物質(zhì)均可用此法分別。7．化學(xué)鍵合色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？答：化學(xué)鍵合色譜中因為鍵合基團不可以所有覆蓋擁有吸附能力的載體，因此同時按照吸附和分派的機理，最適合分其余物質(zhì)為與液-液色譜相同。8．離子互換色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？答：離子互換色譜和離子色譜是經(jīng)過組分與固定相間親協(xié)力差異而實現(xiàn)分其余。各樣離子及在溶液中能夠離解的物質(zhì)均可實現(xiàn)分別，包含無機化合物、有機物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白質(zhì)等。9．離子對色譜的保存機理是什么?這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中,最適合分其余物質(zhì)是什么?答：在離子對色譜色譜中，樣品組分進入色譜柱后，組分的離子與對離子互相作用生成中性化合物，從而被固定相分派或吸附從而實現(xiàn)分其余。各樣有機酸堿特別是核酸、核苷、生物堿等的分別是離子對色譜的特色。10．空間排阻色譜的保存機理是什么？這類種類的色譜在剖析應(yīng)用中，最適合分其余物質(zhì)是什么？答：空間排阻色譜是利用凝膠固定相的孔徑與被分別組分分子間的相對大小關(guān)系，而分別、剖析的方法。最適合分其余物質(zhì)是：此外，另有手性色譜、膠束色譜、環(huán)糊精色譜及親合色譜等機理。11．在液-液分派色譜中，為何可分為正相色譜及反相色譜？答：采納正相及反相色譜是為了降低固定液在流動相中的溶解度從而防止固定液的流失。12．何謂化學(xué)鍵合固定相？它有什么突出的長處？答：利用化學(xué)反響將固定液的官能團鍵合在載體表面形成的固定相當為化學(xué)鍵合固定相。長處：固定相表面沒有液坑,比一般液體固定相傳質(zhì)快的多；無固定相流失，增添了色譜柱的穩(wěn)固性及壽命；能夠鍵合不一樣的官能團，能靈巧地改變選擇性，可應(yīng)用與多種色譜種類及樣品的剖析；有益于梯度洗提，也有益于配用敏捷的檢測器和餾分的采集。13．何謂化學(xué)克制型離子色譜及非克制型離子色譜？試述它們的基來源理答：在離子色譜中檢測器為電導(dǎo)檢測器，以電解質(zhì)溶液作為流動相，為了除去強電解質(zhì)背景對電導(dǎo)檢測器RHNaOHRNaH2ORHNaXRNaHX的擾亂，往常除了剖析柱外，還增添一根克制柱，這類雙柱型離子色譜法稱為化學(xué)克制型離子色譜法。比如，為了分別陰離子，常使用NaOH溶液為流動相，鈉離子的擾亂特別嚴重，這時可在剖析柱后加一根克制柱，此中裝填高容量H+型陽離子互換樹脂，經(jīng)過離子互換，使NaOH轉(zhuǎn)變?yōu)殡妼?dǎo)值很小的H2O，從而除去了背景電導(dǎo)的影響?？墒羌偃绮杉{低電導(dǎo)的流動相（如１×10-４~5×10-4M的苯甲酸鹽或鄰苯二甲酸鹽），則因為背景電導(dǎo)較低，不擾亂樣品的檢測，這時候不用加克制柱，只使用剖析柱，稱為非克制型離子色譜法。14．何謂梯度洗提？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？答：在一個剖析周期內(nèi)，按必定程序不停改變流動相的構(gòu)成或濃度配比，稱為梯度洗提，是改良液相色譜分其余重要手段。CGE的分別原梯度洗提與氣相色譜中的程序升溫近似，可是前者連續(xù)改變的是流動相的極性、者改變的溫度。程序升溫也是改良氣相色譜分其余重要手段。15．高效液相色譜進樣技術(shù)與氣相色譜進樣技術(shù)有和不一樣之處？

pH或離子強度，爾后答：在液相色譜中為了承受高壓，經(jīng)常采納停流進樣與高壓定量進樣閥進樣的方式．16．以液相色譜進行制備有什么長處？答：以液相色譜進行制備時，分別條件平和，分別檢測中不會致使試樣被損壞，切易于回收原物．17．在毛細管中實現(xiàn)電泳分別有什么長處？答：毛細管因為散熱效率很高，能夠減少因焦耳熱效應(yīng)造成的區(qū)帶展寬，因此能夠采納較高的電壓，戰(zhàn)勝了傳統(tǒng)電泳技術(shù)的限制，極大地提升分別效率，并且分別時間縮短，試樣剖析范圍寬，檢測限低。關(guān)于大分子的分別常常比色譜方法擁有更高的柱效。18．試述CZE的基來源理答：毛細管區(qū)帶電泳（CZE）是在指外加電場的作用下，溶質(zhì)在毛細管內(nèi)的背景電解質(zhì)溶液中以必定速度遷徙而形成一個一個獨立的溶質(zhì)帶的電泳模式，其分別基礎(chǔ)是淌度的差異。因為中性物質(zhì)的淌度差為零，因此不可以分別中性物質(zhì)。帶電粒子的遷徙速度為電泳速度與電滲流的矢量和。在緩沖溶液中帶正電的粒子因為遷徙方向與電滲流相同，流動速度最快，最初流出，負電荷粒子的運動方向與電滲流相反，最后流出，中性粒子的電泳速度與電滲流相同，因此遷徙速度介于二者之間。這樣各樣粒子因差速遷徙而達到區(qū)帶分別，這就是CZE的分別原理。19．試述CGE的基來源理答：毛細管凝膠電泳（CGE）是毛細管內(nèi)填補凝膠或其余篩分介質(zhì)，如交聯(lián)或非交聯(lián)的聚丙烯酰胺。荷質(zhì)比相等，但分子的大小