實驗一細菌形態(tài)學(xué)檢查課件

實驗一細菌形態(tài)學(xué)檢查

生物安全1、進入實驗室必須穿白大褂，離室時脫下反折；無菌操作時必須戴口罩。2、不必要物品勿帶入實驗室，必要的文具、實驗指導(dǎo)和筆記本應(yīng)放在指定的操作區(qū)。3、實驗室內(nèi)禁止帶入飲食，抽煙，不得高聲談笑或隨便走動。4、需培養(yǎng)的物品應(yīng)做好標(biāo)記放在指定地點。用過的有菌器材必須放在消毒缸內(nèi)，小心處理傳染材料、培養(yǎng)物和污染的物品。5、避免任何有菌材料的濺出，若不甚污染工作臺、手、眼、衣服和地面等處，應(yīng)立即報告老師及時適當(dāng)處理。6、實驗完畢后物歸原處，并清潔桌面；肥皂洗手、消毒液浸泡洗凈后，關(guān)閉水、電、煤氣和門窗方可離開實驗室?！緦嶒?zāi)康摹?．

掌握臨床微生物實驗室規(guī)則，生物安全及其它注意事項。2．

掌握顯微鏡油鏡的使用和保護。3．

熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)和各部分的功能。4．

不染色和各種染色標(biāo)本的顯微鏡觀察。5．

細菌特殊結(jié)構(gòu)的染色與觀察。

形態(tài)學(xué)檢查的意義細菌鑒定的重要手段，有助于細菌的初步分群是決定采用何種生化反應(yīng)的重要提示初步診斷結(jié)核涂片淋球菌涂片顯微鏡的使用先用低倍鏡找出標(biāo)本位置，再轉(zhuǎn)用油鏡粗調(diào)+微調(diào)香柏油的作用：玻片和空氣密度不同，使部分光線經(jīng)空氣折射后不能進入透鏡，而香柏油的折光率與玻璃相近，可使進入油鏡的光線增多，視野光度增強，物像清晰鏡頭要保持清潔（可用二甲苯擦拭鏡頭）形態(tài)學(xué)檢查的方法不染色標(biāo)本檢查法染色標(biāo)本檢查法特殊染色檢查法不染色標(biāo)本檢查法2懸滴法染色標(biāo)本檢查法染色基本步驟：涂片：干燥：室溫自然干燥固定：殺死細菌;使菌體與玻片粘附;菌體蛋白變性易著色染色：革蘭染色鏡檢革蘭染色-基本步驟

a)初染：結(jié)晶紫1min；b)媒染：碘液1min；c)脫色：95%乙醇

至無紫色脫落為止；d)復(fù)染：石碳酸復(fù)紅30s，自然干燥后鏡檢特殊染色（示教）鞭毛染色芽胞染色莢膜染色鞭毛染色-套組內(nèi)容及規(guī)格內(nèi)容規(guī)格主要成分復(fù)紅酒精溶液(A液)20ml品紅鞣酸水溶液(B液)20ml鞣酸鉀明礬溶液(C液)20ml鉀明礬工作液過濾瓶鞭毛染色-工作液配制根據(jù)使用量將A液、B液、C液等比例混合，并置于工作液過濾瓶內(nèi)，混合均勻靜置2h后方可使用工作液2~8℃約可保存2~3天鞭毛染色-涂片的制備將菌種接種在肉湯管中，經(jīng)24h37℃孵育后離心，倒掉上清液，用接種環(huán)沾取沉淀物一環(huán)置于玻片的一端，并將玻片傾斜，使菌液自然流動至玻片的另一端，室溫下自然干燥鞭毛染色-操作方法滴加工作液于玻片上，染色10~15min將玻片微傾斜，用蒸餾水一滴滴沖洗干凈將玻片直立使水分流盡，自然晾干，鏡檢結(jié)果：菌體及鞭毛均為紅色芽胞染色-染液規(guī)格石碳酸復(fù)紅液20ml堿性品紅脫色液20ml乙醇堿性美藍液20ml亞甲藍實驗操作每組一套菌