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文檔簡介
講課月季的花藥培養(yǎng)演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有22頁\編輯于星期五(優(yōu)選)講課月季的花藥培養(yǎng)現(xiàn)在是2頁\一共有22頁\編輯于星期五現(xiàn)在是3頁\一共有22頁\編輯于星期五花的結(jié)構(gòu):花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊3、花的結(jié)構(gòu)現(xiàn)在是4頁\一共有22頁\編輯于星期五二、被子植物花粉粒的形成花絲花藥:囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)有很多花粉粒1、雄蕊的結(jié)構(gòu)雄蕊:現(xiàn)在是5頁\一共有22頁\編輯于星期五花粉是花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細胞。2、被子植物花粉的發(fā)育②花粉粒的形成花粉母細胞(小孢子母細胞)減數(shù)分裂①經(jīng)歷時期:四分體時期、單核期、雙核期現(xiàn)在是6頁\一共有22頁\編輯于星期五四分體時期(進入單核期)有絲分裂單核靠邊期(小孢子)單核居中期(小孢子)
小孢子(單核花粉粒)現(xiàn)在是7頁\一共有22頁\編輯于星期五精子精子有絲分裂花粉管細胞核生殖細胞核生殖細胞營養(yǎng)細胞雙核期兩個精子和一個營養(yǎng)核的基因型相同現(xiàn)在是8頁\一共有22頁\編輯于星期五1個花粉母細胞4個小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個花粉管細胞核4個生殖細胞核有絲分裂8個精子2nnnnn現(xiàn)在是9頁\一共有22頁\編輯于星期五四、產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑五、影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比?,F(xiàn)在是10頁\一共有22頁\編輯于星期五不同植物的誘導成功率很不相同,就同一種植物來說親本的生理狀況對誘導成功率也有直接影響。②選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導成功率的重要因素。因為并不是任何時期的花粉都可以經(jīng)過培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體,花粉發(fā)育的過程中,只有某一個時期對離體刺激敏感。選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。①選材現(xiàn)在是11頁\一共有22頁\編輯于星期五一般來說,在單核期,細胞核由中央移向細胞一側(cè)的時期,花藥培養(yǎng)的成功率最高。即:最適合花藥培養(yǎng)的小孢子發(fā)育時期為單核靠邊期。選擇單核期以前的花藥接種,質(zhì)地幼嫩,極易破碎;選擇單核期之后的花藥接種,花瓣已有些松動,又給材料的消毒帶來困難,且難以挑選到單核期的花藥。③花藥培養(yǎng)時期的選擇④其它時期選擇的缺點現(xiàn)在是12頁\一共有22頁\編輯于星期五為了挑選到單核期的花藥,通常選擇完全未開放的花蕾。盛開的或略微開放的花,都不宜選作實驗材料。⑥選擇完全未開放花蕾的原因完全未開放的花蕾,可挑選到單核期的花藥,菌少、易消毒⑤單核期花藥的挑選現(xiàn)在是13頁\一共有22頁\編輯于星期五(二)、材料的消毒:花蕾(70%酒精)大約30s(無菌水)清洗(無菌吸水紙)吸干水分(1%氯化汞溶液)2~4min(無菌水)沖洗
月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較,二者有何不同?
在酒精消毒前,花藥不需要預先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗;消毒時間不同?,F(xiàn)在是14頁\一共有22頁\編輯于星期五⑦為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難?
花瓣松動后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來困難。⑦花藥培養(yǎng)時間一般月季的花藥培養(yǎng)時間選在5月初到5月的中旬,即月季的初花期。初花期的花蕾營養(yǎng)狀態(tài)及生理狀態(tài)會比較好,可提高花粉的誘導成功率?,F(xiàn)在是15頁\一共有22頁\編輯于星期五月季花藥培養(yǎng)時的花粉粒最好是()
A、四分體時期B、單核居中期
C、單核靠邊期D、二核或三核花粉粒C2、培養(yǎng)基:花藥培養(yǎng)基所采用的培養(yǎng)基可能因植物的不同而有所變化小麥為N6培養(yǎng)基,馬鈴薯、月季為MS培養(yǎng)基,油菜為B5培養(yǎng)基?,F(xiàn)在是16頁\一共有22頁\編輯于星期五3、其他因素親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種的密度等對誘導成功都有一定的影響六、實驗操作(一)材料的選?、谀承┲参锏幕ǚ奂毎瞬灰字璨捎帽夯ㄇ?鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。①最常用的方法有醋酸洋紅法1、方法現(xiàn)在是17頁\一共有22頁\編輯于星期五①醋酸洋紅法染色機理醋酸洋紅為堿性染色劑,而花粉細胞內(nèi)有染色體,染色體主要成分是DNA和蛋白質(zhì),易被堿性染料著色染成紅色
。將體積分數(shù)45%的醋酸100ml煮沸,緩緩加入1g洋紅,再加熱回流8h,冷卻至50℃,過濾即可。②醋酸洋紅的配置2、醋酸洋紅法現(xiàn)在是18頁\一共有22頁\編輯于星期五將花藥放在載玻片上,加一滴質(zhì)量分數(shù)1%的醋酸洋紅,用鑷柄將花藥搗碎,蓋上蓋玻片在顯微鏡下檢查。③染色操作3、焙花青—鉻釩法將無水酒精與冰醋酸按體積比為3:1的比例混勻①卡諾氏固定液的配制方法現(xiàn)在是19頁\一共有22頁\編輯于星期五花藥應該在卡諾氏固定液中固定20min,然后取出放在載玻片上,加焙花青—鉻釩溶液染色,蓋上蓋玻片后在顯微鏡下檢查。這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。將5g鉻明礬[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸餾水中,溶解后加入0.1g焙花青,混勻并加熱至沸騰,煮沸5分鐘后冷卻至室溫,過濾,加蒸餾水定容至100ml。②焙花青—鉻釩溶液的配制方法③染色操作現(xiàn)在是20頁\一共有22頁\編輯于星期五(二)材料的消毒1、酒精處理①花蕾用體積分數(shù)為70%的酒精浸泡30秒,立即取出。②無菌水清洗③無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分現(xiàn)在是21頁\一共有22頁\編輯于星期五2、消毒液處理①放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中2-4
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