家兔基礎實驗操作及注意事項總結(jié)

第第10頁共10頁家兔基礎實驗操作及注意事項總結(jié)（一）家兔的給藥、基本手術(shù)及相關(guān)儀器的初步使用1、家兔的捉拿【實驗方法】然后用另一只手輕輕托住臀部，盡量使兔處在舒適、放松的狀態(tài)?！咀⒁馐马棥勘苊庾プ《涮崮眉彝?，這樣不但會損傷家兔的耳朵，而且易引起家兔的緊張并激起掙扎和反抗。抓取動物時手法不當，動作過激導致家兔驚嚇，產(chǎn)生強烈掙扎而長時間處于激動狀態(tài)，大腦皮層細胞興奮閾值增加，腎上腺素的釋放，大腦中樞電位頻率增高，大腦皮層運動區(qū)過度興奮，導致麻醉效果不佳。2、家兔的稱重與放置【實驗方法】兔籠放置在電子秤上，去皮。將兔子脖子卡住兔籠頭端的凹槽，蓋上兔籠蓋，使兔子呈趴伏狀，記錄數(shù)據(jù)。壓住兔籠蓋和后座，將兔籠轉(zhuǎn)移到操作臺準備實驗?！咀⒁馐马棥客没\重量提前去皮；盡量避免頭尾不對應；時刻注意壓住兔籠蓋，避免轉(zhuǎn)移途中兔子掙脫。3、耳緣靜脈麻醉【實驗方法】穿刺前準備工作：穿刺前應拔除待穿刺血管部位的兔毛，輕柔或以手指輕彈待穿刺的血管使其充血擴張，或用酒精棉球涂擦待穿刺的血管使血管擴張。穿刺手法：左手食指和中指夾住靜脈的近端，拇指繃緊靜脈的遠端，無名指及小指墊在下面，右手持頭皮針盡量從靜脈的遠端刺入。若回抽注射器有暗紅色血液流出或注射時若無阻力、無隆起現(xiàn)象，說明針頭在血管內(nèi)。移動拇指于針頭上以固定針頭，放開食指和中指，將藥液緩慢注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。lmg/Kg?！咀⒁馐马棥?、進針部位宜選擇在耳緣靜脈遠心端的血管段，若穿刺失敗，可向近心端前移一段再進行穿刺；2、可利用酒精棉球擦拭使耳緣靜脈血管擴張，便于操作；3、靜脈注射必須緩慢（5ml），家兔肌肉緊張、角膜反射和對皮膚夾捏的反應，當這些活動明顯減弱或消失時，應立即停止注射。在注射麻醉藥物時，可先用麻醉藥物總量的三分之二，密切觀察動物生命體征的變化，若已達到預計麻醉效果剩余藥液可暫不注射，以避免麻醉過深抑制呼吸中樞導致動物死亡；4、實驗動物的固定【實驗方法】將動物麻醉后，仰臥位固定于手術(shù)臺上，頸部伸直，口腔與氣管成一直線，保持氣管暢通。用粗麻繩打類蝴蝶結(jié)固定家兔四肢，用棉麻線套住家兔上切牙固定在兔臺頭端，使家兔四肢和頭部伸展并固定?！咀⒁馐马棥?、打結(jié)最好打利于捆縛的結(jié)，避免家兔掙脫。2、盡量使頸部抻直，避免扭曲。5、清理兔毛【實驗方法】使用彎頭兔毛剪剪掉實驗部位兔毛?！咀⒁馐马棥?、左手捏住要剪的兔毛，方便剪掉后及時清理。注意不要將兔毛掕起，這樣容易剪到皮膚和皮下神經(jīng)，引起兔子的強烈掙扎。2、盡量清理干凈，并且避免兔毛亂飛，可在廢物桶中加水防止兔毛亂飄。6、組織切開【實驗方法】1、組織切開的一般原則(1)根據(jù)實驗目的要求確定手術(shù)切口的部位和大小。如腎切除取左背部斜切口，腸切除取腹正中切口。(2)根據(jù)不同部位的切口采用不同的執(zhí)刀方法，常用的執(zhí)刀方法有三種，如圖1。【注意事項】平坦緊張而固定。刀刃與切開的組織垂直，以一次切開為佳。1(4重要血管及神經(jīng)橫貫的地方，以免將其損傷。(5注意選擇易于敷料或?qū)Ч馨凸潭ǖ牟课?。避免術(shù)后動物活動時被碰撞、磨擦而脫落。7、組織分離【實驗方法】分離目的在于充分顯露深層的組織或血管，便于手術(shù)操作。1、組織分離的一般原則(1同的分離方法。常用的分離方法有兩種：①用刀或剪作銳性分離，用剪割的方式將組織分離。該方法常用于致密組織，如皮開或牽拉開的鈍性分離。該法多用于皮下組織、肌肉筋膜間隙等疏松組織的分離。(2)沿正常組織間隙分離。這樣易于分離，且出血少，視野干凈、清楚?！咀⒁馐马棥糠蛛x，應在切斷處上下端先夾兩把血管鉗，切斷后結(jié)扎兩斷端以防止肌肉中血管出血。柔，細心操作，不可避暴，切忌橫向過分拉扯，以防斷裂。8、氣管內(nèi)插管【實驗操作】分離皮下組織，暴露頸部肌肉，分開頸部正中肌群即可看到氣1～1、5cm1～2cm“T”管內(nèi)分泌物，然后再向肺方向插入氣管插管。用已穿好的粗線扎緊后，再在插管的側(cè)管上打結(jié)，以防插管脫出?！咀⒁馐马棥?、切忌粗暴操作，小心勿傷及甲狀腺及氣管兩側(cè)后方的靜脈；2、不要在軟骨環(huán)之間的氣管組織切開，因此處血管較多，如仍有出血，可用溫濕紗布壓撥迫片刻，同時將兔臺后部抬高，使兔頭位置低下，以防止血液流入氣管造成窒息，出血停止后再做插管；3、插管前注意檢查氣管內(nèi)有無內(nèi)分泌物，有的話先清理氣管后插管；插管后，若氣管內(nèi)分泌物或血液較多，可用一細塑料管從插管的側(cè)管處將液體吸出。4、用已穿好的粗線扎緊后，再在插管的側(cè)管上打結(jié)，以防插管脫出；5、氣管插管的過程中應隨時注意觀察動物的呼吸變化。最好隔一段時間放開被夾閉的Y型管軟管，避免人為性呼衰。9、頸總動脈的分離及插管【實驗操作】沿胸鎖乳突肌前緣分離胸骨舌骨肌與胸骨甲狀肌之間的結(jié)締組織，在肌縫下找到呈粉紅色較粗血管，用手指觸之有搏動感，即為頸總動脈。分離頸總動脈時應選在距甲狀腺以下較遠地方開始，防止將甲狀腺前動脈切斷，用玻璃分針輕輕分離該動脈與神經(jīng)之間結(jié)締組織，切勿損傷血管和神經(jīng)。在分離好的頸總動脈下面穿過兩根結(jié)扎線，先結(jié)扎遠心端，再用動脈夾夾閉血管近心45V1/3～1/22cm～3cm用線將導管與血管牢固結(jié)扎并與遠心端結(jié)扎線連接扎緊，以防導管滑脫出血管。取下動脈夾，可見導管中有動脈回血，并隨心跳而搏動。用少許肝素將回血推回血管內(nèi)，實時觀察血壓?！咀⒁馐马棥?、分離頸總動脈時應選在距甲狀腺以下較遠地方開始，防止將甲狀腺前動脈切斷，并且切勿損傷血管和神經(jīng)。伴行血管的一束神經(jīng)包括：迷走神經(jīng)最粗且明亮；交感神經(jīng)次之，光澤較暗；最細的是減壓神經(jīng)；2、為了便于動脈插管，頸總動脈應盡量分離得長一些。一般家兔4cm～5cm，豚鼠和大鼠2cm～3cm；3、結(jié)締組織盡量分離干凈，否則插管時容易插到膜內(nèi)；4、兩根結(jié)扎線可通過一根線對折穿過動脈下后剪斷獲得。遠心端結(jié)扎線和備用結(jié)扎線一定要結(jié)扎緊，避免出血；5、動脈夾操作時一定要小心避免磨破動脈，最好將動脈夾深入頸總動脈下于動脈夾中段夾閉血管，以防夾閉不完全；6、插入血管內(nèi)插管盡量長，此時易于固定。但是一定不要插到動脈夾夾閉處，因為插管和動脈夾都是硬性材料，兩廂觸碰易使動脈管破裂；7、噴血時，應迅速找到出血口，并及時夾閉近心端血管，并用棉球清理創(chuàng)面；若還是出血不止，則考慮是否是遠心端結(jié)扎線未扎緊，這時夾閉遠心端；若各種措施都不起效，則可以考慮完全結(jié)扎實驗側(cè)頸總動脈；8、若是少量出血，則可能只是毛細血管受到損傷，這是可用棉球輕輕壓迫創(chuàng)面即可止血。10、輸尿管插管【實驗方法】4cm腎臟方向插入一根細塑料管，結(jié)扎，收集尿液?！咀⒁馐马棥?、家兔膀胱分脆弱，分離時應用鑷子探查，避免直接用手術(shù)刀或剪刀粗暴分離；2、輸尿管位置較深，分離和插管時需一人協(xié)助撥開腸子和拉扯膀胱，此時需注意用力大小，用力過大時膀胱會因尿液排出而迅速縮小（并不影響實驗）；3、如果可以，分離輸尿管時避免損傷伴行血管，否則會大出血影響視線；4、輸尿管近膀胱處結(jié)扎后，可略等片刻，待輸尿管略充盈后在剪口插管，會容易很多；5、插管的管子剪口需有一定銳度，但銳度過高易損傷輸尿管；插管時，可轉(zhuǎn)動插管，使斜面向下，否則易撕裂輸尿管。11、處死【實驗方法】空氣栓塞法【注意事項】判斷家兔死亡的標準可以是呼吸停止，這是可能生物電還存在波動，可能原因是心臟自律細胞還在活動，但此時心臟功能細胞其實已經(jīng)停止工作，故可以判定為死亡。12、其他注意事項1、創(chuàng)面長時間開放時，可撒些生理鹽水或用生理鹽水浸潤的紗布覆蓋，以防組織風干；2、切