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植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有哪些?
那么動(dòng)物細(xì)胞常用的技術(shù)手段呢?植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交問題探討
現(xiàn)在是1頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)手段動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)現(xiàn)在是2頁\一共有28頁\編輯于星期四
從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。原理:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞增殖現(xiàn)在是3頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程(見課本)現(xiàn)在是4頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官(取材)細(xì)胞懸液10代細(xì)胞50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液(分解細(xì)胞間的蛋白)原代培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶剪碎過程:細(xì)胞株細(xì)胞系動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量蛋白質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變現(xiàn)在是5頁\一共有28頁\編輯于星期四
細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別:1、遺傳物質(zhì)2、培養(yǎng)代數(shù)現(xiàn)在是6頁\一共有28頁\編輯于星期四原代培養(yǎng):傳代培養(yǎng):原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別分裝之前,10代以前分裝后繼續(xù)培養(yǎng),10代以后現(xiàn)在是7頁\一共有28頁\編輯于星期四1、無菌、無毒的環(huán)境動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件添加一定量的抗生素定期更換培養(yǎng)液培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具無菌處理現(xiàn)在是8頁\一共有28頁\編輯于星期四現(xiàn)在是9頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1、無菌、無毒的環(huán)境2、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清、血漿等培養(yǎng)基的不同是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)最重要的區(qū)別現(xiàn)在是10頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1、無菌、無毒的環(huán)境2、營(yíng)養(yǎng)3、溫度和PH36.5+0.5度現(xiàn)在是11頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件1、無菌、無毒的環(huán)境2、營(yíng)養(yǎng)3、溫度和PH4、氣體環(huán)境:
O2和CO2(95%空氣和5%CO2)現(xiàn)在是12頁\一共有28頁\編輯于星期四2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料?1、較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處?獨(dú)特之處有:1、液體培養(yǎng)基2、成分中有動(dòng)物血清等這些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛,分裂能力強(qiáng)現(xiàn)在是13頁\一共有28頁\編輯于星期四3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞?防止細(xì)胞間接觸抑制現(xiàn)象,使細(xì)胞與培養(yǎng)液更充分接觸現(xiàn)在是14頁\一共有28頁\編輯于星期四4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體?不能,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多,而不能發(fā)育成個(gè)體5、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎?能現(xiàn)在是15頁\一共有28頁\編輯于星期四6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中特別要注意什么?注意時(shí)間的控制7、能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎?為什么?
不能,因?yàn)閮烧叩淖钸mPH不同,而正常組織細(xì)胞的生存環(huán)境與胰蛋白酶的最適PH較接近現(xiàn)在是16頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體或組織獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白快速繁殖、培育無病毒植株等葡萄糖、動(dòng)物血清蔗糖、植物激素液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基細(xì)胞增殖培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基性質(zhì)原理現(xiàn)在是17頁\一共有28頁\編輯于星期四(1)生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品:病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。(2)培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植(3)用于檢測(cè)有毒物質(zhì)(4)用于生理、病理、藥理等方面的研究動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用現(xiàn)在是18頁\一共有28頁\編輯于星期四如何使動(dòng)物細(xì)胞的全能性表達(dá)出來?
利用動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)現(xiàn)在是19頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物核移植:
將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植(難度高)
用核移植的方法得到的動(dòng)物??寺?dòng)物:記一記現(xiàn)在是20頁\一共有28頁\編輯于星期四動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核重組細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(或早期胚胎培養(yǎng))早期胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利細(xì)胞核移植現(xiàn)在是21頁\一共有28頁\編輯于星期四1、卵母細(xì)胞為減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞2、原因?細(xì)胞比較大,易操作細(xì)胞質(zhì)中含有使體細(xì)胞核全能性表達(dá)出來的物質(zhì)3、克隆過程運(yùn)用的技術(shù)手段?動(dòng)物體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植4、多利的大部分性狀與誰一樣?白面綿羊5、結(jié)論?高度分化的體細(xì)胞核具有全能性現(xiàn)在是22頁\一共有28頁\編輯于星期四克隆動(dòng)物的研究意義1.克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改良動(dòng)物品種3.作為異種移植的供體4.保護(hù)瀕危動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題1.許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷,如體型過大,異常肥胖,發(fā)育困難,免疫失調(diào)等。2.成功率非常低3、克隆動(dòng)物食品的安全性問題?,F(xiàn)在是23頁\一共有28頁\編輯于星期四1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞()
A.細(xì)胞系B.細(xì)胞株C.原代細(xì)胞D.傳代細(xì)胞2、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)AD3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于A.培養(yǎng)基不同B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng),而植物細(xì)胞不能D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng),而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株。A教學(xué)反饋現(xiàn)在是24頁\一共有28頁\編輯于星期四4、一般來說,動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③培養(yǎng)基需要加入血清④溫度與動(dòng)物體溫相似⑤需要O2,不需要CO2⑥CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液PHA、①②③④⑤⑥B、①②③④C、①③④⑤⑥
D、①②③④⑥D(zhuǎn)現(xiàn)在是25頁\一共有28頁\編輯于星期四5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)()①細(xì)胞貼壁②有絲分裂③細(xì)胞分化④接觸抑制⑤減數(shù)分裂⑥原代培養(yǎng)一般傳1-10代A、①②④⑥B、②③④⑤C、①③④⑥
D、③④⑤⑥A現(xiàn)在是26頁\一共有28頁\編輯于星期四7.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于---()A.培養(yǎng)基不同;B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行;C.動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng),而植物細(xì)胞不能;D.動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng),而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株。A現(xiàn)在是27頁\一共有28頁\編輯于星期四8.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述
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