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文檔簡介

生化及分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料一、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能本章重點(diǎn):1氨基酸的結(jié)構(gòu)及通式、名稱、分類;、蛋白質(zhì)的各級結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能特點(diǎn);3蛋白質(zhì)的理化性質(zhì),如光學(xué)性質(zhì)、膠體性質(zhì)、變性、復(fù)性;習(xí)題:、生物的不同層次結(jié)構(gòu)?答:環(huán)境小分子—-小分子前體—-大分子—-大分子復(fù)合物—-超分子結(jié)構(gòu)—-細(xì)胞器—-細(xì)胞—-組織—一器官一一生物機(jī)體、a螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)多肽鏈的主鏈原子沿一中心軸盤繞所形成的有規(guī)律的螺旋構(gòu)象。a螺旋是蛋白質(zhì)中最常見、最多的二級結(jié)構(gòu)元件。其結(jié)構(gòu)特征為:幾乎都是右手螺旋;螺旋每圈包含個(gè)氨基酸殘基,每一個(gè)氨基酸沿軸旋轉(zhuǎn)度,螺距為;螺旋以鏈內(nèi)氫鍵維系。、變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)改變①結(jié)晶及生物活性喪失是蛋白質(zhì)變性的主要特征。②硫水側(cè)鏈基團(tuán)外露。③理化性質(zhì)改變,溶解度降低、沉淀,粘度增加,分子伸展。④生理化學(xué)性質(zhì)改變。分子結(jié)構(gòu)伸展松散,易被蛋白酶水解。、生雞蛋和熟雞蛋哪個(gè)更有營養(yǎng)?答:熟雞蛋比生雞蛋更有營養(yǎng);熟雞蛋已經(jīng)發(fā)生蛋白質(zhì)變性,容易被蛋白酶水解,便于消化吸收;熟雞蛋中的病原微生物因蛋白質(zhì)熱變性而死亡,食用更安全;生雞蛋清內(nèi)的抗生物素蛋白會與生物素結(jié)合生成一種穩(wěn)定的化合物,使生物素不能被腸壁吸收。蛋白質(zhì)一、二、三、四級結(jié)構(gòu);B折疊、a螺旋二、核酸結(jié)構(gòu)與功能本章重點(diǎn):1核酸的功能,是遺傳物質(zhì);、核酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),型雙螺旋結(jié)構(gòu)特點(diǎn);、核酸的理化性質(zhì),變性、復(fù)性;4核酸的測序方法及原理。習(xí)題:1型雙螺旋 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞一個(gè)“中心軸”形成右手雙螺旋結(jié)構(gòu),螺旋表面有一條大溝和小溝;磷酸和脫氧核糖在外側(cè),通過3, ’一磷酸二酯鍵相連形成的骨架,與中心軸平行。堿基位于內(nèi)側(cè),與中心軸垂直;兩條鏈間存在堿基互補(bǔ):與或與配對形成氫鍵,稱為堿基互補(bǔ)原則;螺旋的穩(wěn)定因素為堿基堆集力和氫鍵;螺旋的直徑為n螺距為,相鄰堿基對的距離為,相鄰兩個(gè)核苷酸的夾角為度。、末端終止法測序的基本過程平行進(jìn)行四組反應(yīng),每組反應(yīng)均使用相同的模板,相同的引物以及四種脫氧核苷酸;在四組反應(yīng)中各加入適量的四種之一的雙脫氧核苷酸,使其隨機(jī)地接入 鏈中,使鏈合成終止,產(chǎn)生相應(yīng)的四組具有特定長度的、不同長短的鏈;這四組鏈再經(jīng)過聚丙烯酸胺凝膠電泳按鏈的長短分離開;經(jīng)過放射自顯影顯示區(qū)帶,直接讀出被測的核苷酸序列。3化學(xué)降解法測序的基本過程答:首先對待測 末端進(jìn)行放射性標(biāo)記,再通過組相互獨(dú)立的化學(xué)反應(yīng)分別得到部分降解產(chǎn)物,其中每一組反應(yīng)特異性地針對某一種或某一類堿基進(jìn)行切割。因此,產(chǎn)生組不同長度的放射性標(biāo)記的 片段,每組中的每個(gè)片段都有放射性標(biāo)記的共同起點(diǎn),但長度取決于該組反應(yīng)針對的堿基在原樣品 分子上的位置。此后各組反應(yīng)物通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行分離,通過放射自顯影檢測末端標(biāo)記的分子,并直接讀取待測 片段的核苷酸序列。核酸的一、二、三級結(jié)構(gòu); 變性、增色效應(yīng)三、酶本章重點(diǎn):1酶催化作用的特點(diǎn)及機(jī)理;2維生素與輔助因子,以及相應(yīng)的缺乏癥;、米氏方程及抑制作用下的酶動力學(xué);、影響酶活性的因素及機(jī)理。習(xí)題:1酶催化作用特點(diǎn)?一般特點(diǎn)同普通的催化劑:1只催化熱力學(xué)上允許的化學(xué)反應(yīng);、降低活化能,但不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn);3加快化學(xué)反應(yīng)速度,但催化劑本身反應(yīng)前后不發(fā)生改變。特殊之處:催化具有高效性;高度的專一性只能催化一種底物或一定結(jié)構(gòu)的底物); 易失活;催化活性受到調(diào)節(jié)和控制;催化活性與輔助因子有關(guān)全酶酶蛋白+輔助因子)、影響酶活性的因素主要有哪些?答:溫度、值、底物濃度、抑制劑、激活劑、時(shí)間、輔助因子、酶量3根據(jù)生活常識設(shè)計(jì)加酶洗衣粉,需要添加哪些酶? 答:堿性蛋白酶,水解血漬、奶漬等蛋白類污垢;堿性脂肪酶,水解豬油等油類污垢;堿性淀粉酶,水解稀飯、土豆泥等淀粉類污垢;堿性纖維素酶,水解棉織物表面因多次洗滌而在主纖維上出現(xiàn)的微毛和小絨球,使織物鮮艷柔軟。酶;維生素;酶促反應(yīng)速度;抑制劑;酶原四、生物氧化與氧化磷酸化本章重點(diǎn):1生物氧化的特點(diǎn);、線粒體結(jié)構(gòu)特點(diǎn),電子傳遞鏈結(jié)構(gòu)組成;、電子沿呼吸鏈傳遞的歷程;、化學(xué)滲透學(xué)說;5影響氧化磷酸化的因素及機(jī)理。習(xí)題:、生物氧化的特點(diǎn)?反應(yīng)條件溫和。生物氧化并非代謝物與氧直接結(jié)合,而是以脫氫為主的逐步反應(yīng)。生物氧化是逐步進(jìn)行的,能量釋放也是逐步的,一部分生成T終產(chǎn)物為有機(jī)物氧化成有機(jī)酸進(jìn)而脫羧生成。2試述氧化磷酸化的偶聯(lián)機(jī)制。氧化呼吸鏈存在于線粒體內(nèi)膜上;當(dāng)氧化反應(yīng)進(jìn)行時(shí),通過氫泵作用被排斥到線粒體內(nèi)膜外側(cè);從而形成跨膜 梯度和跨膜電位差;這種形式的“勢能”,可以被存在于線粒體內(nèi)膜上的 合酶利用,生成高能磷酸基團(tuán),并與 結(jié)合而合成。呼吸鏈;氧化磷酸化;底物水平磷酸化;解偶聯(lián)劑五、糖代謝本章重點(diǎn):1葡萄糖的分解代謝:糖酵解、三羧酸循環(huán)、磷酸戊糖途徑、葡萄糖的合成代謝:糖異生習(xí)題:1 生物學(xué)意義?糖的有氧分解代謝產(chǎn)生的能量最多,是機(jī)體利用糖或其他物質(zhì)氧化而獲得能量的最有效方式。三羧酸循環(huán)之所以重要在于它不僅為生命活動提供能量,而且還是聯(lián)系糖、脂、蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝的紐帶。三羧酸循環(huán)所產(chǎn)生的多種中間產(chǎn)物是生物體內(nèi)許多重要物質(zhì)生物合成的原料。在細(xì)胞迅速生長時(shí)期,三羧酸循環(huán)可提供多種化合物的碳架,以供細(xì)胞生物合成使用。植物體內(nèi)三羧酸循環(huán)所形成的有機(jī)酸,既是生物氧化的基質(zhì),又是一定器官的積累物質(zhì),發(fā)酵工業(yè)上利用微生物三羧酸循環(huán)生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物2磷酸戊糖途徑的生理意義是體內(nèi)生成 的主要代謝途徑該途徑的中間產(chǎn)物為許多化合物的生物合成提供原料。與光合作用聯(lián)系起來,實(shí)現(xiàn)某些單糖間的互變。此途徑是葡萄糖在人體內(nèi)生成磷酸核糖的唯一途徑糖酵解;三羧酸循環(huán);糖異生六、脂類代謝本章重點(diǎn):1脂肪動員的過程;2甘油三酯的分解代謝;、甘油三酯的合成代謝;習(xí)題:、脂類的生理功能?供能貯能。構(gòu)成生物膜。協(xié)助脂溶性維生素的吸收,提供必需脂肪酸。如亞油酸、亞麻酸和花生四烯酸。保護(hù)和保溫作用。2軟脂酸B氧化和從頭合成的比較異同、部位、?;d體、參與的二碳單位、電子供體或受體、羥脂酰中間體立體異構(gòu)、對和檸檬酸的要求、酶系、能量變化B氧化線粒體乙酰A型不要求種酶 從頭合成細(xì)胞質(zhì) 丙二酰單酰 型要求種酶蛋白組成復(fù)合體B氧化;a一氧化作用;3一氧化作用七、蛋白質(zhì)降解與氨基酸代謝本章重點(diǎn):i蛋白質(zhì)的酶促水解2蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值;3氨基酸的一般分解代謝;、酮酸的去向和尿素循環(huán)。習(xí)題:、試從必需氨基酸的角度分析食用野生動物是不科學(xué)的。決定蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值高低的因素有:必需氨基酸的含量; 種必需氨基酸的種類是否齊全;必需氨基酸的比例是否具有與人體需求相符的氨基酸組成;蛋白質(zhì)按必需氨基酸標(biāo)準(zhǔn)可分為完全蛋白質(zhì)、半完全蛋白質(zhì)和不完全蛋白質(zhì),所有的動物肉類都是完全蛋白質(zhì),野生動物肉類與家養(yǎng)動物肉類沒有明顯區(qū)別,但更難于消化吸收。、尿素循環(huán)的特點(diǎn):八:合成主要在肝臟細(xì)胞的線粒體和細(xì)胞溶膠中進(jìn)行;合成一分子尿素需消耗四分子T精氨酸代琥珀酸合成酶是尿素合成的關(guān)鍵酶;尿素分子中的兩個(gè)氮原子,一個(gè)H一個(gè)天冬氨酸。氧化脫氨基;轉(zhuǎn)氨基作用;聯(lián)合脫氨基;生物固氮;八、核酸降解與核苷酸代謝本章重點(diǎn):、核苷酸的分解代謝:嘌呤核苷酸的分解終產(chǎn)物及歷

程;2核苷酸的合成代謝:嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)的元素;、核苷酸從頭合成與補(bǔ)救途徑的關(guān)系:痛風(fēng)產(chǎn)生的原因。習(xí)題:、嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)從頭合成的元素?答:嘌呤堿合成的元素,嘌呤環(huán)來自天冬氨酸,、來自一碳單位見前)、來自谷氨酰胺,來自。4和來自甘氨酸;嘧啶堿合成的元素,嘧啶環(huán)的來自。 來自谷氨酰胺,、、及來自天冬氨酸。、市場上曾經(jīng)出現(xiàn)過以珍奧核酸為代表的核酸類保健品,請從核苷酸代謝的角度進(jìn)行分析答:、核酸營養(yǎng)和口服核酸可以進(jìn)行基因治療是一個(gè)騙局;、人體所需核甘酸主要通過自身從頭合成獲得,原料是一些簡單的前體物質(zhì);、幾乎所有的食品中都含有核酸,口服濃縮了的核酸口服液可能會造成過敏反應(yīng);、核酸攝入過多,可以導(dǎo)致嘌呤代謝失調(diào)而出現(xiàn)痛風(fēng)和結(jié)石等疾病。從頭合成途徑;補(bǔ)救途徑九、 生物合成本章重點(diǎn)、復(fù)制;、端粒酶機(jī)制、逆轉(zhuǎn)錄、損傷修復(fù);習(xí)題:復(fù)制所需的基本條件?

習(xí)題:復(fù)制所需的基本條件?答:底物;模板;引物; 聚合酶;連接酶;解復(fù)制的高度準(zhǔn)螺旋酶;拓?fù)洚悩?gòu)酶;單鏈結(jié)合蛋白、確性是通過什么機(jī)制來實(shí)現(xiàn)的?連接酶;解復(fù)制的高度準(zhǔn)答:聚合酶的選擇和校正作用;引物的合成與切除是提高復(fù)制準(zhǔn)確性的重要因素;復(fù)制后錯(cuò)配堿基的修復(fù);嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對規(guī)則。半保留復(fù)制;半不連續(xù)復(fù)制;復(fù)制叉;前導(dǎo)鏈;滯后鏈;逆轉(zhuǎn)錄; 修復(fù)十、 生物合成本章重點(diǎn)1復(fù)制;、的加工修飾習(xí)題:、轉(zhuǎn)錄的特點(diǎn)?轉(zhuǎn)錄的不對稱性;轉(zhuǎn)錄的連續(xù)性;轉(zhuǎn)錄的單向性;有特定的起始和終止位點(diǎn)正鏈;負(fù)鏈;核心酶;啟動子;剪接;核酶十一、蛋白質(zhì)生物合成本章重點(diǎn)1蛋白質(zhì)翻譯;、蛋白質(zhì)的加工修飾習(xí)題:、遺傳密碼的特點(diǎn)?答:連續(xù)性、簡并性;通用性;方向性,即解讀方向?yàn)?f’,擺動性;起始密碼: ;終止密碼:、、G、信號肽學(xué)說答:分泌蛋白的 先和游離的核糖體結(jié)合合成出信號肽,信號肽識別蛋白結(jié)合在信號肽上,暫時(shí)中止蛋白質(zhì)合成;信號肽識別蛋白一一核糖體復(fù)合物與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)表面的停泊蛋白結(jié)合;經(jīng)過一系列反應(yīng)后,核糖體與停泊蛋白緊密結(jié)合,中斷的翻譯恢復(fù)。信號肽識別蛋白被釋放參加下一輪作用。肽鏈在穿過轉(zhuǎn)位蛋白形成的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)孔時(shí),信號肽被信號肽酶切除。合成的新生肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔后折疊成最終構(gòu)象。簡并性;多核糖體;序列;十二、基因工程本章重點(diǎn)1 克隆的概念、 重組的基本步驟3目的基因獲取的方法、基因治療習(xí)題:1原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?基因組較小,沒有核膜包裹,且形式多樣。細(xì)菌染色體基因組則常為環(huán)狀雙鏈分子,并與其中央的和支架蛋白構(gòu)成一致密的區(qū)域,稱為類核功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因常常串連在一起,并轉(zhuǎn)錄在同一個(gè)分子中,稱為多順反子。 °分子絕大部分用于編碼蛋白質(zhì),不編碼部分又稱間隔區(qū)通常包含控制基因表達(dá)的順序?;蛑丿B是病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),即同一段片段能夠編碼兩種甚至三種蛋白質(zhì)分子,除真核細(xì)胞病毒外,基因是連續(xù)的,即不含內(nèi)含子序列。、 克隆過程?答:應(yīng)用酶學(xué)的方法,在體外將各種的遺傳物質(zhì)—-同源的或異源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的 N與載體 結(jié)合成一具有自我復(fù)制能力的 分子一一復(fù)制子 i繼而通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞,篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞,再進(jìn)行擴(kuò)增獲得大量同一 分子。3的基本過程?答:變性退火延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板的變性:模板經(jīng)加熱至3左右一定時(shí)間后,使模板 雙鏈或經(jīng) 擴(kuò)增形成的雙鏈 解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板與引物的退火復(fù)性:模板 經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至5左右,引物與模板 單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合;③新鏈的延伸: 模板引物結(jié)合物在 聚合酶的作用下,以 為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基互補(bǔ)配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈,重復(fù)循環(huán)變性退火延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。基因治療; ;限制性內(nèi)切酶基因治療:向有功能缺陷的細(xì)胞補(bǔ)充相應(yīng)功能基因,以糾正或補(bǔ)償其基因缺陷,從而達(dá)到治療的目的。十三、基因表達(dá)調(diào)控本章重點(diǎn):1乳糖操縱子、色氨酸操縱子習(xí)題:1乳糖操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制?負(fù)調(diào)節(jié):阻遏蛋白。該蛋白調(diào)節(jié)基因最先表達(dá)合成,與操縱子結(jié)合阻止轉(zhuǎn)錄;與乳糖結(jié)合失活。正調(diào)節(jié): A乳糖操縱子的啟動子是弱啟動子, 聚合酶與其結(jié)合的能力很弱,只有活化的 與結(jié)合)結(jié)合到啟動子上游的 位點(diǎn)后,促使 聚合酶與啟動子結(jié)合,才能開始有效轉(zhuǎn)錄。協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):負(fù)調(diào)節(jié)和正調(diào)節(jié)協(xié)調(diào)作用。、色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制?答:色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)可分為兩個(gè)層次:、阻遏蛋白的負(fù)調(diào)節(jié);、衰減調(diào)節(jié)。阻遏蛋白的負(fù)調(diào)節(jié):色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制與乳糖操縱子類似,但通常情況下,操縱子處于開放狀態(tài),其輔阻遏蛋白不能與操作子結(jié)合而阻遏轉(zhuǎn)錄。而當(dāng)色氨酸合成過多時(shí),色氨酸作為輔阻遏物與輔阻遏蛋白結(jié)合而形成阻遏蛋白,后者與操作子結(jié)合而使基因轉(zhuǎn)錄關(guān)閉。衰減調(diào)節(jié):色氨酸操縱子第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因前存在有一段前導(dǎo)序列其中有一衰減區(qū)域,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)色氨酸酸濃度很高時(shí),通過與轉(zhuǎn)錄相偶聯(lián)的翻譯過程,形成一個(gè)衰減子結(jié)構(gòu),使 聚合酶從 上脫落,導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄終止。看家基因;順式作用元件;反式作用因子十四、代謝調(diào)節(jié)本章重點(diǎn):1糖類和脂類的相互轉(zhuǎn)變;、糖類和蛋白質(zhì)的相互轉(zhuǎn)變;習(xí)題:、糖類與脂類的如何相互轉(zhuǎn)變?答:糖可通過下述途徑轉(zhuǎn)變成脂類:糖分解代謝的中間產(chǎn)物磷酸二羥丙酮可還原生成磷酸甘油。另一中間產(chǎn)物乙酰則可合成長鏈脂肪酸,此過程所需的 又可磷酸戊糖途徑供給。最后脂酰 與磷酸甘油酯化而生成脂肪。脂肪轉(zhuǎn)化成糖于生物種類不同而有所區(qū)別。在動物體內(nèi),甘油可經(jīng)脫氫生成磷酸二羥丙酮再通過糖異生作用轉(zhuǎn)變?yōu)樘恰V舅嵩趧游矬w內(nèi)也可轉(zhuǎn)變成糖,但需要在有其他的三羧酸循環(huán)中間有機(jī)酸回補(bǔ)時(shí),乙酰 才可轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗R宜幔俳?jīng)糖異生作用轉(zhuǎn)變?yōu)樘?。植物和微生物存在乙醛酸循環(huán),脂肪降解產(chǎn)生的乙酰 通過乙醛酸循環(huán)生成琥珀酸,后者轉(zhuǎn)成草酰乙酸后進(jìn)入糖異生作用生糖。但這一過程在植物中主要發(fā)生在含脂肪種子萌發(fā)時(shí)。限速反應(yīng);前饋和反饋調(diào)節(jié)十五、重要生物化學(xué)名詞英文縮寫二十種基本蛋白質(zhì)氨基酸英文三字母簡寫一、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能本章重點(diǎn):1氨基酸的結(jié)構(gòu)及通式、名稱、分類;、蛋白質(zhì)的各級結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能特點(diǎn);3蛋白質(zhì)的理化性質(zhì),如光學(xué)性質(zhì)、膠體性質(zhì)、變性、復(fù)性;習(xí)題:、生物的不同層次結(jié)構(gòu)?答:環(huán)境小分子—-小分子前體—-大分子—-大分子復(fù)合物—-超分子結(jié)構(gòu)—-細(xì)胞器—-細(xì)胞—-組織—一器官一一生物機(jī)體、a螺旋的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)多肽鏈的主鏈原子沿一中心軸盤繞所形成的有規(guī)律的螺旋構(gòu)象。a螺旋是蛋白質(zhì)中最常見、最多的二級結(jié)構(gòu)元件。其結(jié)構(gòu)特征為:幾乎都是右手螺旋;螺旋每圈包含個(gè)氨基酸殘基,每一個(gè)氨基酸沿軸旋轉(zhuǎn)度,螺距為;螺旋以鏈內(nèi)氫鍵維系。、變性蛋白質(zhì)的性質(zhì)改變①結(jié)晶及生物活性喪失是蛋白質(zhì)變性的主要特征。②硫水側(cè)鏈基團(tuán)外露。③理化性質(zhì)改變,溶解度降低、沉淀,粘度增加,分子伸展。④生理化學(xué)性質(zhì)改變。分子結(jié)構(gòu)伸展松散,易被蛋白酶水解。、生雞蛋和熟雞蛋哪個(gè)更有營養(yǎng)?答:熟雞蛋比生雞蛋更有營養(yǎng);熟雞蛋E經(jīng)發(fā)生蛋白質(zhì)變性,容易被蛋白酶水解,便于消化吸收;熟雞蛋中的病原微生物因蛋白質(zhì)熱變性而死亡,食用更安全;生雞蛋清內(nèi)的抗生物素蛋白會與生物素結(jié)合生成一種穩(wěn)定的化合物,使生物素不能被腸壁吸收。蛋白質(zhì)一、二、三、四級結(jié)構(gòu);B折疊、a螺旋二、核酸結(jié)構(gòu)與功能本章重點(diǎn):1核酸的功能,是遺傳物質(zhì);、核酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),型雙螺旋結(jié)構(gòu)特點(diǎn);、核酸的理化性質(zhì),變性、復(fù)性;、核酸的測序方法及原理。習(xí)題:1型雙螺旋 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞一個(gè)“中心軸”形成右手雙螺旋結(jié)構(gòu),螺旋表面有一條大溝和小溝;磷酸和脫氧核糖在外側(cè),通過3, ‘一磷酸二酯鍵相連形成的骨架,與中心軸平行。堿基位于內(nèi)側(cè),與中心軸垂直;兩條鏈間存在堿基互補(bǔ):與或與配對形成氫鍵,稱為堿基互補(bǔ)原則;螺旋的穩(wěn)定因素為堿基堆集力和氫鍵;螺旋的直徑為n螺距為,相鄰堿基對的距離為,相鄰兩個(gè)核苷酸的夾角為度。2末端終止法測序的基本過程平行進(jìn)行四組反應(yīng),每組反應(yīng)均使用相同的模板,相同的引物以及四種脫氧核苷酸;在四組反應(yīng)中各加入適量的四種之一的雙脫氧核苷酸,使其隨機(jī)地接入鏈中,使鏈合成終止,產(chǎn)生相應(yīng)的四組具有特定長度的、不同長短的鏈;這四組鏈再經(jīng)過聚丙烯酸胺凝膠電泳按鏈的長短分離開;經(jīng)過放射自顯影顯示區(qū)帶,直接讀出被測的核苷酸序列。3化學(xué)降解法測序的基本過程答:首先對待測 末端進(jìn)行放射性標(biāo)記,再通過組相互獨(dú)立的化學(xué)反應(yīng)分別得到部分降解產(chǎn)物,其中每一組反應(yīng)特異性地針對某一種或某一類堿基進(jìn)行切割。因此,產(chǎn)生組不同長度的放射性標(biāo)記的 片段,每組中的每個(gè)片段都有放射性標(biāo)記的共同起點(diǎn),但長度取決于該組反應(yīng)針對的堿基在原樣品 分子上的位置。此后各組反應(yīng)物通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行分離,通過放射自顯影檢測末端標(biāo)記的分子,并直接讀取待測 片段的核苷酸序列。核酸的一、二、三級結(jié)構(gòu); 變性、增色效應(yīng)三、酶本章重點(diǎn):1酶催化作用的特點(diǎn)及機(jī)理;2維生素與輔助因子,以及相應(yīng)的缺乏癥;、米氏方程及抑制作用下的酶動力學(xué);、影響酶活性的因素及機(jī)理。習(xí)題:、酶催化作用特點(diǎn)?一般特點(diǎn)同普通的催化劑:1只催化熱力學(xué)上允許的化學(xué)反應(yīng);、降低活化能,但不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn);、加快化學(xué)反應(yīng)速度,但催化劑本身反應(yīng)前后不發(fā)生改變。特殊之處:催化具有高效性;高度的專一性只能催化一種底物或一定結(jié)構(gòu)的底物); 易失活;催化活性受到調(diào)節(jié)和控制;催化活性與輔助因子有關(guān)全酶酶蛋白+輔助因子)、影響酶活性的因素主要有哪些?答:溫度、值、底物濃度、抑制劑、激活劑、時(shí)間、輔助因子、酶量、根據(jù)生活常識設(shè)計(jì)加酶洗衣粉,需要添加哪些酶?答:堿性蛋白酶,水解血漬、奶漬等蛋白類污垢;堿性脂肪酶,水解豬油等油類污垢;堿性淀粉酶,水解稀飯、土豆泥等淀粉類污垢;堿性纖維素酶,水解棉織物表面因多次洗滌而在主纖維上出現(xiàn)的微毛和小絨球,使織物鮮艷柔軟。酶;維生素;酶促反應(yīng)速度;抑制劑;酶原四、生物氧化與氧化磷酸化本章重點(diǎn):1生物氧化的特點(diǎn);2線粒體結(jié)構(gòu)特點(diǎn),電子傳遞鏈結(jié)構(gòu)組成;、電子沿呼吸鏈傳遞的歷程;、化學(xué)滲透學(xué)說;5影響氧化磷酸化的因素及機(jī)理。習(xí)題:、生物氧化的特點(diǎn)?反應(yīng)條件溫和。生物氧化并非代謝物與氧直接結(jié)合,而是以脫氫為主的逐步反應(yīng)。生物氧化是逐步進(jìn)行的,能量釋放也是逐步的,一部分生成T終產(chǎn)物為有機(jī)物氧化成有機(jī)酸進(jìn)而脫羧生成。2試述氧化磷酸化的偶聯(lián)機(jī)制。氧化呼吸鏈存在于線粒體內(nèi)膜上;當(dāng)氧化反應(yīng)進(jìn)行時(shí),通過氫泵作用被排斥到線粒體內(nèi)膜外側(cè);從而形成跨膜 梯度和跨膜電位差;這種形式的“勢能”,可以被存在于線粒體內(nèi)膜上的 合酶利用,生成高能磷酸基團(tuán),并與 結(jié)合而合成 。呼吸鏈;氧化磷酸化;底物水平磷酸化;解偶聯(lián)劑五、糖代謝本章重點(diǎn):1葡萄糖的分解代謝:糖酵解、三羧酸循環(huán)、磷酸戊糖途徑、葡萄糖的合成代謝:糖異生習(xí)題:1 生物學(xué)意義?糖的有氧分解代謝產(chǎn)生的能量最多,是機(jī)體利用糖或其他物質(zhì)氧化而獲得能量的最有效方式。三羧酸循環(huán)之所以重要在于它不僅為生命活動提供能量,而且還是聯(lián)系糖、脂、蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝的紐帶。三羧酸循環(huán)所產(chǎn)生的多種中間產(chǎn)物是生物體內(nèi)許多重要物質(zhì)生物合成的原料。在細(xì)胞迅速生長時(shí)期,三羧酸循環(huán)可提供多種化合物的碳架,以供細(xì)胞生物合成使用。植物體內(nèi)三羧酸循環(huán)所形成的有機(jī)酸,既是生物氧化的基質(zhì),又是一定器官的積累物質(zhì),發(fā)酵工業(yè)上利用微生物三羧酸循環(huán)生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物2磷酸戊糖途徑的生理意義是體內(nèi)生成 的主要代謝途徑該途徑的中間產(chǎn)物為許多化合物的生物合成提供原料。與光合作用聯(lián)系起來,實(shí)現(xiàn)某些單糖間的互變。此途徑是葡萄糖在人體內(nèi)生成磷酸核糖的唯一途徑糖酵解;三羧酸循環(huán);糖異生六、脂類代謝本章重點(diǎn):1脂肪動員的過程;2甘油三酯的分解代謝;、甘油三酯的合成代謝;習(xí)題:、脂類的生理功能?供能貯能。構(gòu)成生物膜。協(xié)助脂溶性維生素的吸收,提供必需脂肪酸。如亞油酸、亞麻酸和花生四烯酸。保護(hù)和保溫作用。2軟脂酸B氧化和從頭合成的比較異同、部位、?;d體、參與的二碳單位、電子供體或受體、羥脂酰中間體立體異構(gòu)、對檸檬酸的要求、酶系、能量變化B氧化線粒體乙酰A型不要求種酶 從頭合成細(xì)胞質(zhì) 丙二酰單酰 型要求種酶蛋白組成復(fù)合體B氧化;a一氧化作用;3一氧化作用七、蛋白質(zhì)降解與氨基酸代謝本章重點(diǎn):i蛋白質(zhì)的酶促水解2蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值;3氨基酸的一般分解代謝;、酮酸的去向和尿素循環(huán)。習(xí)題:、試從必需氨基酸的角度分析食用野生動物是不科學(xué)的。決定蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值高低的因素有:必需氨基酸的含量; 種必需氨基酸的種類是否齊全;必需氨基酸的比例是否具有與人體需求相符的氨基酸組成;蛋白質(zhì)按必需氨基酸標(biāo)準(zhǔn)可分為完全蛋白質(zhì)、半完全蛋白質(zhì)和不完全蛋白質(zhì),所有的動物肉類都是完全蛋白質(zhì),野生動物肉類與家養(yǎng)動物肉類沒有明顯區(qū)別,但更難于消化吸收。、尿素循環(huán)的特點(diǎn):八:合成主要在肝臟細(xì)胞的線粒體和細(xì)胞溶膠中進(jìn)行;合成一分子尿素需消耗四分子T精氨酸代琥珀酸合成酶是尿素合成的關(guān)鍵酶;尿素分子中的兩個(gè)氮

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