惡性腫瘤實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)

惡性腫瘤實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)第1頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)位必修課程，授予學(xué)分。學(xué)習(xí)腫瘤的研究方法。第2頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五學(xué)習(xí)方法獲得學(xué)分

——參與網(wǎng)絡(luò)旁修，完成網(wǎng)絡(luò)作業(yè)學(xué)習(xí)研究方法

——聽講座，參與網(wǎng)上討論、交流…第3頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五對腫瘤的認(rèn)識什么是腫瘤？為什么研究腫瘤？如何研究腫瘤？腫瘤標(biāo)志物？第4頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五什么是腫瘤？腫瘤（Tumor）是機(jī)體在各種致癌因素作用下，局部組織的某一個(gè)細(xì)胞在基因水平上失去對其生長的正常調(diào)控，導(dǎo)致其克隆性異常增生而形成的新生物。學(xué)界一般將腫瘤分為良性和惡性兩大類。第5頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五2012年世界癌癥日——共同參與，成就奇跡世衛(wèi)組織和國際癌癥研究機(jī)構(gòu)鼓勵(lì)——篩查和疫苗接種為什么研究腫瘤？第6頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五1997年-2008年大腸腫瘤與乳腺癌基因調(diào)控比較研究第7頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第8頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第9頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五研究趨勢和方向免疫監(jiān)視功能？疫苗接種？第10頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五MMR調(diào)控網(wǎng)絡(luò)動(dòng)態(tài)調(diào)控子網(wǎng)靜態(tài)調(diào)控子網(wǎng)功能模塊表達(dá)模塊hMSH2hMSH6hMSH3hMLH1hPMS2MYCTP53KRASKRT19免疫監(jiān)視功能第11頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤篩查——早期診斷？ScreeningScreeningreferstotheuseofsimpletestsacrossahealthypopulationinordertoidentifyindividualswhohavedisease,butdonotyethavesymptoms.Examplesincludebreastcancerscreeningusingmammographyandcervicalcancerscreeningusingcytologyscreeningmethods,includingPapsmears.Screeningprogrammesshouldbeundertakenonlywhentheireffectivenesshasbeendemonstrated,whenresources(personnel,equipment,etc.)aresufficienttocovernearlyallofthetargetgroup,whenfacilitiesexistforconfirmingdiagnosesandfortreatmentandfollow-upofthosewithabnormalresults,andwhenprevalenceofthediseaseishighenoughtojustifytheeffortandcostsofscreening.鉬靶細(xì)胞學(xué)第12頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤篩查——早期診斷？ScreeningforcolorectalcancerEvidencetosuggestthatsigmoidoscopymaybeeffectiveforcolorectalcancerscreening,withbenefitslastingforuptotenyears,hascomefromtwocase-controlledstudies(Selbyetal.,1992;Newcombetal.,1992).Assuchstudiescannoteliminatetheeffectofselectionbias,however,thisbenefitmayhavebeenoverestimated.Trialsarenowunderwaytoevaluateflexiblesigmoidoscopyandcolonoscopyforscreening.Severaltrialshaveevaluatedtheeffectofthefaecaloccultbloodtest(FOBT).

第13頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤診斷流程癥狀+體征影像學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)第14頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第15頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤診斷——金標(biāo)準(zhǔn)病理學(xué)——細(xì)胞形態(tài)學(xué)第16頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤標(biāo)志物檢查是以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)大樣本篩查統(tǒng)計(jì)推斷詢證分析第17頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五什么是腫瘤標(biāo)志物？腫瘤標(biāo)志物概念：腫瘤標(biāo)志物(tumormarkers，TM)亦稱為腫瘤標(biāo)志，是指腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞由于癌基因或抗癌基因和其他腫瘤相關(guān)基因及其產(chǎn)物異常表達(dá)所產(chǎn)生的抗原和生物活性物質(zhì)。腫瘤標(biāo)志物可存在于腫瘤細(xì)胞表面、胞漿、細(xì)胞核內(nèi)或細(xì)胞外的體液中，能夠反映腫瘤存在和生長并能區(qū)分腫瘤和非腫瘤的生化物質(zhì)。

第18頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五檢測腫瘤標(biāo)志物的意義檢測腫瘤標(biāo)志物的存在或量變可以提示腫瘤的性質(zhì)，還可以了解腫瘤的組織發(fā)生、細(xì)胞分化、細(xì)胞功能，以幫助腫瘤的診斷、分類、預(yù)后判斷以及治療指導(dǎo)。第19頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

本章主要學(xué)習(xí)內(nèi)容和要求主要學(xué)習(xí)內(nèi)容要求基本概念腫瘤標(biāo)志物的分類常用的腫瘤標(biāo)志物

掌握

第六章惡性腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷進(jìn)展

常見腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷熟悉了解腫瘤標(biāo)志的發(fā)展概況

腫瘤的分子診斷

腫瘤標(biāo)志物檢測第20頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)腫瘤標(biāo)志的發(fā)展概況

一、腫瘤標(biāo)志的發(fā)展史

腫瘤標(biāo)志的發(fā)展主要分為五個(gè)階段,我國腫瘤標(biāo)志發(fā)展的起步相對較晚，為了促進(jìn)我國腫瘤標(biāo)志研究和應(yīng)用的發(fā)展，20世紀(jì)80年代末，國內(nèi)從事腫瘤標(biāo)志研究和應(yīng)用的科技工作者積極開展這一領(lǐng)域的科研工作。經(jīng)過國內(nèi)從事腫瘤標(biāo)志研究、開發(fā)、應(yīng)用的科學(xué)工作者的不懈努力，國內(nèi)腫瘤標(biāo)志的研究和應(yīng)用方面取得了巨大進(jìn)步。第21頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五二、腫瘤標(biāo)志物概念

腫瘤標(biāo)志物(tumormarkers，TM)亦稱為腫瘤標(biāo)志，是指腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞由于癌基因或抗癌基因和其他腫瘤相關(guān)基因及其產(chǎn)物異常表達(dá)所產(chǎn)生的抗原和生物活性物質(zhì)。腫瘤標(biāo)志物可存在于腫瘤細(xì)胞表面、胞漿、細(xì)胞核內(nèi)或細(xì)胞外的體液中，能夠反映腫瘤存在和生長并能區(qū)分腫瘤和非腫瘤的生化物質(zhì)。檢測腫瘤標(biāo)志物的存在或量變可以提示腫瘤的性質(zhì)，還可以了解腫瘤的組織發(fā)生、細(xì)胞分化、細(xì)胞功能，以幫助腫瘤的診斷、分類、預(yù)后判斷以及治療指導(dǎo)。第22頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、腫瘤標(biāo)志物分類（一）一般分類腫瘤標(biāo)志物的一般分類分為細(xì)胞標(biāo)志和體液標(biāo)志,這種將腫瘤標(biāo)志簡單分為細(xì)胞和體液標(biāo)志不夠全面，目前也不是常用的分類方法。（二）腫瘤抗原與腫瘤標(biāo)志的分類目前用免疫生物學(xué)分析方法，從體液或細(xì)胞組織中鑒定出各種腫瘤標(biāo)志，目前臨床上應(yīng)用的多為這類標(biāo)志，通常分為免疫細(xì)胞檢測的人類腫瘤抗原、抗體檢測的腫瘤相關(guān)抗原和用重組cDNA表達(dá)克隆技術(shù)檢測的人類腫瘤抗原。第23頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第24頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五四、腫瘤標(biāo)志生物學(xué)意義

基于單克隆抗體技術(shù)的快速發(fā)展，通過用抗體篩選腫瘤cDNA表達(dá)文庫、酵母雙雜交、免疫共沉淀、雙向電泳、質(zhì)譜技術(shù)等方法，陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一批有癌癥診斷價(jià)值的標(biāo)志物。

1.可用來限止、追蹤、控制腫瘤細(xì)胞生長。

2.有助于更深入地研究腫瘤生長、分化和發(fā)生的機(jī)制。

3.一些腫瘤標(biāo)志與人胚胎組織和細(xì)胞發(fā)生和生長有關(guān)。

第25頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五五、腫瘤標(biāo)志物測定的評估標(biāo)準(zhǔn)

從方法學(xué)來看，腫瘤標(biāo)志物測定方法很多，以放射免疫測定法、酶聯(lián)免疫測定法、化學(xué)發(fā)光免疫測定發(fā)為主。每種方法都有自己的精密度和重復(fù)性，可是從臨床免疫測定的全國室間質(zhì)量評價(jià)結(jié)果來看，腫瘤標(biāo)志定量測定表現(xiàn)出較大的離散度，這使得試劑和儀器的標(biāo)準(zhǔn)化問題成為了一個(gè)很重要的方面。試劑和儀器的標(biāo)準(zhǔn)化對保證腫瘤標(biāo)志臨床免疫測定的準(zhǔn)確性是必不可少的。第26頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五六、腫瘤標(biāo)志物測定方法1．免疫學(xué)技術(shù)將免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)的特異性和標(biāo)記物的敏感性相結(jié)合，主要包括酶聯(lián)免疫分析技術(shù)（ELASA）、放射免疫測定（RIA）等。已廣泛應(yīng)用于臨床檢測腫瘤標(biāo)志物。

2．免疫組化技術(shù)將免疫化學(xué)技術(shù)、組織病理學(xué)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)結(jié)合在一起的新興檢測技術(shù)，可從形態(tài)學(xué)上闡明細(xì)胞分化、增殖和功能變化的情況，對判斷腫瘤組織類型及評估預(yù)后有重要價(jià)值。第27頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

3．流式細(xì)胞術(shù)可用于分析腫瘤細(xì)胞的免疫表型、測定DNA含量及分析細(xì)胞周期、分析細(xì)胞功能等。但價(jià)格昂貴，難以全面推廣。

4．基因診斷技術(shù)利用DNA重組技術(shù)，通過分析基因的結(jié)構(gòu)以及功能的改變來對相關(guān)疾病進(jìn)行診斷和研究?？赏ㄟ^PCR法、基因芯片技術(shù)等檢測腫瘤基因，靈敏度較高。目前正由實(shí)驗(yàn)室研究向臨床應(yīng)用發(fā)展。第28頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第二節(jié)腫瘤標(biāo)志物的臨床檢測項(xiàng)目

一、胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物

胚胎抗原類物質(zhì)是在胚胎發(fā)育階段由胚胎組織產(chǎn)生的正常成分，在胚胎后期減少，出生后逐漸消失或僅存極微量。在癌腫患者中這些胚胎抗原重新出現(xiàn)。在20世紀(jì)60年代發(fā)現(xiàn)的AFP和CEA至今仍是常用的胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物。第29頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

1．甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）

AFP是一種胚原蛋白，它是胎兒發(fā)育早期主要由胚胎卵黃囊和肝細(xì)胞合成的一種糖蛋白（α-球蛋白)，在人出生兩年后基本處于關(guān)閉狀態(tài)。在原發(fā)性肝癌早期階段就有所升高，故被當(dāng)作診斷肝癌的金標(biāo)準(zhǔn)。在排除活動(dòng)性肝病、生殖腺胚胎瘤和妊娠等情況下，若AFP定量＞500(或400)μg/L持續(xù)4周，或＞200μg/L持續(xù)8周，而谷丙轉(zhuǎn)氨酶（SGPT）正常結(jié)合臨床表現(xiàn)則可診斷原發(fā)性肝癌。第30頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

2．癌胚抗原（carcino-embryonicantigen，CEA）

CEA是一種糖蛋白，在結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌、胰腺癌病人的血清、血漿及各種體液中，都可檢測出CEA的增高，但它是結(jié)直腸癌的首選腫瘤標(biāo)志物。然而吸煙、糖尿病、非特異性結(jié)腸炎等疾病病人血清中CEA也會(huì)升高，故不是惡性腫瘤的特異性標(biāo)志。CEA測定有助于輔助診斷、判斷預(yù)后和療效檢測，但其假陽性和假陰性都較高。第31頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五二、糖類抗原腫瘤標(biāo)志物

正常細(xì)胞表面存在大量糖蛋白，但當(dāng)細(xì)胞惡變后，糖基化酶被激活，細(xì)胞表面的糖蛋白也發(fā)生變異，成為一種腫瘤標(biāo)志物，根據(jù)其化學(xué)組分被稱為糖類抗原腫瘤標(biāo)志物。

1．高分子粘蛋白類腫瘤標(biāo)志物：

CA125、CA15-3、CA549、CA27-29、DU-PAN-2等，主要由哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞分泌。是乳腺癌的重要生物學(xué)指標(biāo)。

2．血型抗原腫瘤標(biāo)志物：

CA19-9、CA19-5、CA50、CA72-4、CA242等，此類抗原標(biāo)志物的命名沒有規(guī)律，常用檢測方法是單克隆抗體法，是唾液酸巖藻糖的衍生物，常為消化道腫瘤的標(biāo)志。

第32頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五三、酶類腫瘤標(biāo)志物

酶及同工酶是最早出現(xiàn)和使用的腫瘤標(biāo)志物之一。酶類標(biāo)志物有如下特點(diǎn)：

1.特異性不高；

2.腫瘤的發(fā)生、發(fā)展涉及全身多種酶類；

3.同功酶的分析的應(yīng)用提高了酶標(biāo)志的敏感性和臟器特異性；

4.酶類標(biāo)志物的敏感性較高，但其特異性較低

5.酶的活性測定受多種因素影響和干擾，穩(wěn)定性較差。第33頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

1.前列腺特異性抗原（PSA）

PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的單鏈糖蛋白，具有糜蛋白酶活性，在血清中主要有兩種存在形式：一種是游離型的PSA（F-PSA），另一種是與α1-抗糜蛋白酶（ACT）結(jié)合的PSA（PSA-ACT）。

PSA作為前列腺癌的特異性標(biāo)志物，對前腺癌的診斷特異性達(dá)90％?97％。被認(rèn)為是最有價(jià)值的前列癌的腫瘤標(biāo)志物，被廣泛應(yīng)用于前列腺癌的篩選、診斷及治療后的監(jiān)測。第34頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

2．前列腺特異性酸性磷酸酶（PAP）

PAP是前列腺分泌的一種含兩條肽鏈的糖蛋白酶，測定前列腺癌的特異性比PSA高，但靈敏度較低，PAP和PSA聯(lián)合使用可提高診斷的陽性率。

1987年，美國國立癌癥研究所（NCI）協(xié)調(diào)會(huì)議認(rèn)為，PAP有助于鑒定有轉(zhuǎn)移的病人，而對非轉(zhuǎn)移的效果遠(yuǎn)不及前列腺特異性抗原。第35頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

3．神經(jīng)元特異性稀醇化酶（NSE）

神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）是神經(jīng)母細(xì)胞瘤的腫瘤標(biāo)志物，由于SCLC是最常表現(xiàn)由神經(jīng)內(nèi)分泌性質(zhì)的腫瘤，目前NSE也是SCLC最敏感最特異的腫瘤標(biāo)志物。

NSE作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志物，對該病的早期診斷具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的尿中NSE水平也有一定升高，治療后血清NSE水平降至正常。血清NSE水平的測定對于監(jiān)測療效和預(yù)報(bào)復(fù)發(fā)均具有重要參考價(jià)值，比測定尿液中兒茶酚胺的代謝物更有意義。

第36頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

小細(xì)胞肺癌(SCLC)患者血清NSE檢出的陽性率可高達(dá)65%～100%，目前已公認(rèn)為NSE可作為SCLC高特異性、高靈敏性的腫瘤標(biāo)志物，有報(bào)道；NSE水平與SCLC轉(zhuǎn)移程度相關(guān)；但與轉(zhuǎn)移的部位無關(guān)；NSE水平與其對治療的反應(yīng)性之間也有一個(gè)良好的相關(guān)性。第37頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

4．堿性磷酸酶（AlkalinePhosphatase,ALP）

堿性磷酸酶異常見于原發(fā)和繼發(fā)性肝癌、膽道癌，在白血病、前列腺癌、淋巴瘤中ALP也會(huì)有所升高。

ALP及其同功能酶結(jié)合，可提高診斷的特異性和敏感性。

動(dòng)態(tài)的觀測ALP及其同工酶的變化可以有助于判斷預(yù)后。另外，在精原細(xì)胞瘤中，胎盤堿性磷酸酶陽性率在初次診斷者中為3%，在發(fā)生轉(zhuǎn)移者中為75%。一期精原細(xì)胞瘤病人偶爾可有PLAP增高，而AFP結(jié)果正常時(shí)，則可提示為精原細(xì)胞瘤。第38頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五四、激素類腫瘤標(biāo)志物

激素是一類由特異的內(nèi)分泌腺體或散在體內(nèi)的分泌細(xì)胞所產(chǎn)生的生物活性物質(zhì)，當(dāng)此類細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，就會(huì)使所分泌的激素量發(fā)生異常，此為正位激素異常：而正常情況下不能分泌激素的細(xì)胞，如若轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞后產(chǎn)生的激素或能產(chǎn)生激素的細(xì)胞癌變后，分泌其他分泌細(xì)胞所產(chǎn)生的激素，則為異位激素。如小細(xì)胞肺癌分泌促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)。第39頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

1．降鈣素(calcitonin，CT)

降鈣素是由甲狀腺濾泡細(xì)胞合成、分泌的一種由32個(gè)氨基酸組成的單鏈多肽激素，故又稱甲狀腺降鈣素。分子量約為3.5kD，半衰期4—12分鐘。正常情況下它的靶器官是骨、腎和小腸，它在血清鈣升高時(shí)分泌，抑制鈣從骨中釋放，增加尿磷，降低血鈣和血磷。

第40頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

CT常用于篩查甲狀髓樣瘤患者的無癥狀家族成員，甲狀腺髓樣癌患者的CT一定會(huì)升高，但由于其半衰期短，且CT和腫瘤大小、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)，如甲狀腺癌或肺癌手術(shù)后，血清CT仍持續(xù)升高，則說明有殘余的腫瘤組織形成，預(yù)后較差。此外．類癌、肺癌、腎癌、肝癌、消化道癌等惡性腫瘤中CT也有所升高；肺部疾病、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、惡性貧血、胰腺炎和急、慢性腎功能不全等非腫瘤性疾病也可升高。孕婦和兒童因骨骼生長，血清降鈣素水平增高，女性停經(jīng)后血清降鈣素水平下降。第41頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

2．人絨毛膜促性腺激素(hCG)

人絨毛膜促性腺激素是由胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的一類糖蛋白類激素，在正常妊娠婦女血中可檢測到。當(dāng)胎盤絨毛膜細(xì)胞惡變?yōu)閻盒云咸烟ズ?，HCG會(huì)異常升高（100％滋養(yǎng)體瘤和絨毛膜上皮細(xì)胞癌HCG異常升高），可達(dá)100萬U／L。

部分乳腺癌、胃腸道癌、黑素瘤、卵巢癌、睪丸癌等惡性腫瘤中HCG亦會(huì)升高；當(dāng)子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫、肝硬化、十二指腸潰瘍、炎癥等非腫瘤狀態(tài)中也可見HCG輕度異常。

第42頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

3．兒茶酚胺類物質(zhì)(catecholamines，CA)

兒茶酚胺類物質(zhì)是由腎上腺髓質(zhì)中的一些交感神經(jīng)節(jié)纖維末梢終止髓質(zhì)細(xì)胞（即嗜鉻細(xì)胞）產(chǎn)生和分泌的，既是激素又是神經(jīng)遞質(zhì)。包括腎上腺素、去甲腎上腺素、香草扁桃酸(VMA)、多巴胺、高香草酸（HVA）等。促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)為兒茶酚胺類相關(guān)性物質(zhì)，由垂體前葉促皮質(zhì)素細(xì)胞分泌，含39個(gè)氨基酸，相對分子質(zhì)量4.5kD。第43頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

兒茶酚胺類腫瘤標(biāo)志物常被認(rèn)為神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)節(jié)瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤的標(biāo)志物。大部分肺癌患者ACTH亦增加，多為相對分子質(zhì)量為2～3.6kD的無生物活性的大分子ACTH，但與小相對分子質(zhì)量的ACTH一樣同樣可以生成黑色素細(xì)胞刺激素。

約70%神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者均VMA增高，在四期神經(jīng)瘤患者VMA/HVA的比值可作為預(yù)后評價(jià)指標(biāo)。同時(shí)是嗜鉻細(xì)胞瘤診斷的首選標(biāo)志物，但由于增高程度不明顯故需同時(shí)測定尿中的兒茶酚胺和變腎上腺素。目前使用高效液相的紫外檢測仍是最有效的方法之一。第44頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

5．乳酸脫氫酶

乳酸脫氫酶（LactateDehydrogenase,LD）是糖代謝中的主要酶，催化乳酸變成丙酮酸的氧化反應(yīng)，在人體中分布廣泛，當(dāng)細(xì)胞受到腫瘤侵襲，LD會(huì)從細(xì)胞中釋放出來，使血清中含量升高。乳酸脫氫酶在肝癌、胰腺癌、前列腺癌、淋巴瘤等惡性腫瘤中均可檢測到。另外，在肝炎、心肌梗死、肝硬化等非腫瘤疾病中亦可增高。由于各組織中的LD含量較高，微量損傷即可使血清LD的升高，故敏感性強(qiáng)，為早期發(fā)現(xiàn)無癥狀腫瘤病人提供線索。第45頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五五、某些蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物

蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物是最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物，特異性差。但檢測方法較容易故作為常規(guī)檢測項(xiàng)目。常見的蛋白類腫瘤標(biāo)志物有β2微球蛋白、鐵蛋白、本周蛋白、C多肽、甲狀腺球蛋白等。

第46頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

（一）β2微球蛋白

β2微球蛋白是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種由100個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多肽小分子蛋白質(zhì)，可自由通過腎小球?yàn)V過，正常情況下可被腎小管全部吸收，故尿液中含量極低。在原發(fā)性肝癌、肺癌、骨髓瘤等患者的血液及尿中β2微球蛋白均有所升高。但在某些炎癥性疾病或腎小球?yàn)V過功能減低的血清中也會(huì)異常增高，故在診斷時(shí)應(yīng)排除此情況。另外在腫瘤早期，血清中的β2微球蛋白就會(huì)明顯的高于正常值，故有助于鑒別良、惡口腔腫瘤。第47頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

（二）鐵蛋白鐵蛋白于1937年首先分離出來，是一種脫鐵蛋白組成的具有大分子結(jié)構(gòu)的糖蛋白，由24個(gè)亞單位聚集組成，相對分子量為450000.某些腫瘤細(xì)胞可合成并釋放鐵蛋白。

在肝癌、肺癌、乳腺癌等腫瘤狀態(tài)時(shí)，酸性同分異構(gòu)體鐵蛋白會(huì)異常性增高，而色素沉著、炎癥等非腫瘤狀態(tài)下鐵蛋白也會(huì)升高。第48頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

（三）本周蛋白尿本周蛋白是最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物，于1963年被證實(shí)尿本周蛋白為免疫球蛋白的輕鏈成分，當(dāng)沉淀系數(shù)為3.6s，分子量為45000時(shí)屬于游離輕鏈雙體，而沉淀系數(shù)為1.8s，分子量為22500時(shí)，多屬于單體。

本周蛋白是多發(fā)性骨髓瘤的典型標(biāo)志物。但目前已被血和尿中輕鏈成分的檢測所取代。第49頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五六、基因類腫瘤標(biāo)志物

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，癌基因和抑癌基因的檢測已成為腫瘤臨床診斷的新一代標(biāo)志物。通過顯色技術(shù)，在同一反應(yīng)體系中患者血清與基因類腫瘤標(biāo)志物試劑進(jìn)行顯色，大大提高了檢測的敏感度，可以快速、準(zhǔn)確、早期發(fā)現(xiàn)腫瘤。（一）癌基因腫瘤標(biāo)志物癌基因是指在自然或?qū)嶒?yàn)條件下，具有潛在誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的基因。以ras基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物和myc基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物為主。第50頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

1.ras基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物

ras基因是一種原癌基因，其基因編碼產(chǎn)物為p21ras蛋白，其本質(zhì)為膜相關(guān)的G蛋白，具有GTP酶的活化性，可水解GTP生成GDP，參與信號傳導(dǎo)。作為原癌基因的ras基因被激活以后就變成有致癌活性的癌基因。

當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，編碼p21ras蛋白的第12、13及61位氨基酸的核苷酸可以發(fā)生點(diǎn)突變，突變型的蛋白無法將GTP水解為GDP。在乳腺癌、結(jié)直腸癌、肺癌、髓性白血病患者中可檢測到ras基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物異常升高。第51頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五2.myc基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物

myc基因?qū)儆诰幋a核蛋白的癌基因，編碼一種與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)的核內(nèi)DNA結(jié)合蛋白。myc基因家族及其產(chǎn)物可促進(jìn)細(xì)胞增殖，永生化，去分化和轉(zhuǎn)化等，在多種腫瘤形成過程中處于重要地位。myc基因家族中的3個(gè)成員對腫瘤形成及在腫瘤類型方面存在差異。目前認(rèn)為，C-myc的擴(kuò)增與腫瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，N-myc的擴(kuò)增對腫瘤的預(yù)后判斷有意義，L-myc擴(kuò)增與腫瘤的易患性和預(yù)后在不同的腫瘤中表現(xiàn)不一樣。近年來的研究表明，myc基因產(chǎn)物，尤其是c-myc在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過程中也起重要作用。第52頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

myc基因過度表達(dá)，見于各種腫瘤，如肺癌，胃癌，乳腺癌，結(jié)腸癌，宮頸癌，某些神經(jīng)母細(xì)胞病，粒細(xì)胞性白血病，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，成骨肉瘤，軟骨肉瘤，脊索瘤，脂肪肉瘤，橫紋肌肉瘤，何杰金氏病及頭部腫瘤等都有myc基因的擴(kuò)增或過度表達(dá)。第53頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

（二）抑癌基因

抑癌基因指對正常細(xì)胞增殖起負(fù)調(diào)節(jié)作用的基因。此類基因丟失、實(shí)火或變異時(shí)，會(huì)促使細(xì)胞失控而惡性生長。常見的抑癌基因類腫瘤標(biāo)志物有RB基因及其表達(dá)產(chǎn)物、p53基因及其產(chǎn)物、NF-1等。第54頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

1.RB基因及其表達(dá)產(chǎn)物

RB基因是世界上第一個(gè)被克隆和完成全序列測定的抑癌基因。Rb蛋白分布于核內(nèi)，是一類DNA結(jié)合蛋白。Rb蛋白的磷酸化／去磷酸化是其調(diào)節(jié)細(xì)胞生長分化的主要形式，在細(xì)胞周期的G0、G1期，它表現(xiàn)為去磷酸化，在G0、S、M期則處于磷酸化狀態(tài)。

RB是首先在兒童視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤研究中發(fā)現(xiàn)的，此類細(xì)胞中染色體13q14缺失。此后在膀胱癌、乳腺癌及肺癌中同時(shí)發(fā)現(xiàn)此基因喪失或失活。近期研究表明RB基因還與卵巢癌有關(guān)。第55頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

2.p53基因及其產(chǎn)物

p53基因是一種抑癌基因，編碼393個(gè)氨基酸蛋白,分子量為53KD，在停泊生長或非轉(zhuǎn)化細(xì)胞中P53mRNA水平很低，但刺激胞液后mRNA顯著增加.持續(xù)生長的細(xì)胞，其mRNA水平不隨細(xì)胞周期而出現(xiàn)明顯變化，但經(jīng)誘導(dǎo)分化后mRNA水平降低，部分是轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。

p53的突變可見于50%的人類惡性腫瘤中，屬最常見基因改變。乳腺癌、肺癌、肝癌、宮頸癌等均可發(fā)現(xiàn)p53基因突變。第56頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五第三節(jié)常見腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷

一、肺癌

肺癌是常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率已居惡性腫瘤的首位。目前常用的腫瘤標(biāo)志物有神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、細(xì)胞角蛋白、碳水化合物抗原（CA）、鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原（SCCA）等。第57頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

二、肝癌

原發(fā)性肝癌：原發(fā)性肝癌(Hcc)是一種常見的惡性腫瘤，其惡性程度極高，在全球范圍內(nèi)．它在男性惡性腫瘤發(fā)病率中居第七位，女性居第九位。目前文獻(xiàn)已報(bào)道的肝癌標(biāo)志物達(dá)數(shù)十種之多，主要為AFP、γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)及其同工酶、巖藻糖苷酶(AFU)、異常凝血酶原(AP)、鐵蛋白和酸性鐵蛋白等。第58頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

三、結(jié)直腸癌

結(jié)直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)生率僅次于胃癌和食道癌。好發(fā)部位為直腸及直腸與乙狀結(jié)腸交界處，占60％。

癌胚抗原(CEA)是檢測直腸癌的較特異的最常用的標(biāo)志物，CAl9-9、CA242、CA50和'TIMP-1也是臨床常見的用于判斷結(jié)腸癌預(yù)后的腫瘤標(biāo)志物，但是特異性和靈敏性都遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及CEA。建議與CEA聯(lián)合檢測，可大大提高特異性和靈敏性。第59頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五

四、乳腺癌乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，據(jù)資料統(tǒng)計(jì)，發(fā)病率占全身各種惡性腫瘤的7～10%，通常發(fā)生在乳房腺上皮組織，是一種嚴(yán)重影響婦女身心健康甚至危及生命的最常見的惡性腫瘤之一。

目前檢測乳腺癌常用的標(biāo)記物有：CAl53、端粒酶、環(huán)氧化酶、鈣黏蛋白以及c-erbB2基因、nm23基因、p53基因等基因標(biāo)志物。第60頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五腫瘤分子標(biāo)志物研究進(jìn)展腫瘤標(biāo)志物的作用已由最初的發(fā)現(xiàn)和診斷腫瘤，發(fā)展到現(xiàn)在應(yīng)用于治療和監(jiān)測腫瘤預(yù)后。迄今為止，發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物已超過200種，臨床常用的達(dá)40余種。腫瘤標(biāo)志物除用于腫瘤診斷外，還可以其為靶，進(jìn)行腫瘤的靶向治療及免疫治療，有關(guān)這方面的研究已成為熱點(diǎn)。而生物芯片技術(shù)的發(fā)展，為腫瘤標(biāo)志物的研究和應(yīng)用提供了一個(gè)廣泛的技術(shù)平臺(tái)。第61頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五PSA第62頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五TheGreatProstateMistake

《關(guān)于前列腺的重大錯(cuò)誤》理查德·埃布林（RichardAblin）教授

——紐約時(shí)報(bào)自1994年，PSA經(jīng)美國食品和藥品管理局（FDA）批準(zhǔn)作為前列腺癌檢測最常用指標(biāo)，全美每年用于PSA篩查的單項(xiàng)費(fèi)用已超過30億美元，但該檢測對前列腺癌的預(yù)測效率“幾乎不比投擲硬幣決定更高”。在國會(huì)尋找各種途徑壓縮醫(yī)療系統(tǒng)成本的今天，改變這種以PSA來篩查前列腺癌的手段，“將為國家醫(yī)療體系節(jié)省大量的費(fèi)用?！钡?3頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五PSA檢查“絕對不應(yīng)用于篩查大于50歲的全部男性”Ablin教授認(rèn)為：“相關(guān)藥物企業(yè)對PSA檢測的過分強(qiáng)調(diào)和推廣，以及對‘前列腺癌意識’的倡導(dǎo)，很有可能是受到了利益的驅(qū)動(dòng)”，而“前列腺癌意識”的強(qiáng)化可能會(huì)為個(gè)人和社會(huì)帶來許多壓力。美國男性一生中罹患前列腺癌的概率為16%，而大多前列腺癌具有緩慢的生長方式和低度的侵襲行為，真正的致死率僅為3%。換句話說，男性若有幸活到老年，他們更可能死于其他疾病，而不是死于前列腺癌。第64頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五他同時(shí)指出，不應(yīng)否定PSA檢測的重大意義。當(dāng)對治療后的前列腺癌患者進(jìn)行隨訪時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)PSA水平出現(xiàn)快速升高，則提示前列腺癌的復(fù)發(fā)。同樣，對于有前列腺癌家族史的男性進(jìn)行定期PSA監(jiān)測，若PSA水平出現(xiàn)急速升高，往往提示腫瘤的發(fā)生。Ablin教授說：“我從未想到，自己的發(fā)現(xiàn)在40年后會(huì)導(dǎo)致利益驅(qū)動(dòng)下的公共衛(wèi)生災(zāi)難”，“醫(yī)學(xué)界必須面對現(xiàn)實(shí)，并且停止PSA檢測的不恰當(dāng)使用，這樣能節(jié)省數(shù)十億美元，并且能夠從那些不必要的治療中拯救數(shù)十億男性”。他充滿信心地指出，醫(yī)學(xué)界的觀點(diǎn)“正慢慢地向反對PSA檢測轉(zhuǎn)變”。第65頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五Ablin教授還援引了3月公布的《美國癌癥學(xué)會(huì)指南》最新版本作為支持，敦促更加謹(jǐn)慎地使用PSA檢測。另外，他提到，美國預(yù)防科學(xué)院已經(jīng)得出相同結(jié)論，即“沒有充分證據(jù)推薦行PSA常規(guī)篩查”。3月11日，Ablin教授再次發(fā)表觀點(diǎn)，認(rèn)為曾經(jīng)令人類為之深受鼓舞的前列腺癌預(yù)測的最常用手段——PSA篩查，已成為一個(gè)“耗資巨大的公共衛(wèi)生災(zāi)難”。隨后，多位泌尿外科學(xué)界的知名人士對PSA及PSA篩查發(fā)表了各自的觀點(diǎn)。第66頁，共75頁，2023年，2月20日，星期五來自勞倫斯堪薩斯大學(xué)、美國泌尿?qū)W會(huì)（AUA）發(fā)言人思拉什（Thrasher）承認(rèn)，“僅靠PSA檢測確實(shí)不能很好地預(yù)測前列腺癌”。而對于AUA推薦的PSA最佳適用準(zhǔn)則，他解釋說，泌尿外科醫(yī)師對PSA檢測結(jié)果的解釋應(yīng)和其他危險(xiǎn)因素結(jié)合分析，如健康狀況、年齡、并發(fā)癥、PSA變化速度（PSA-V）、體格檢查等。他指出：“我不希望人們放棄PSA檢測這種篩查方法，甚至逐漸將其遺忘”。他在接受Medscape

Oncology（Medscape·腫瘤學(xué)）的采訪時(shí)，就