微生物的遺傳變異和育種待定優(yōu)秀課件

第一節(jié)遺傳變異的物質基礎第二節(jié)基因突變和誘變育種第三節(jié)基因重組和雜交育種第四節(jié)基因工程第五節(jié)菌種的衰退、復壯和保藏第七章微生物的遺傳變異和育種幾個概念遺傳(heredity)變異(variation)遺傳型(genotype)表型(phenotype)飾變(modification)第一節(jié)遺傳變異的物質基礎三個經(jīng)典實驗

轉化實驗噬菌體的感染實驗病毒的拆開和重建實驗轉化實驗轉化實驗（二）噬菌體感染實驗實驗材料：E.coli

噬菌體（三）病毒的拆開和重建實驗(TMV和HRV)二、遺傳物質在細胞中的存在方式(一)細胞水平(二)細胞核水平(三)染色體水平(四)核酸水平(五)基因水平(六)密碼子水平(七)核苷酸水平核酸的七個水平遺傳物質類型核基因組真核生物的原核生物的核外染色體真核生物的原核生物的細胞質基因線粒體葉綠體等共生生物2um質粒等F因子(F質粒)R因子(R質粒)Col質粒Ti質粒巨大質粒降解性質粒等有核膜包裹的真核(DNA+組蛋白)無核膜包裹的核區(qū)(環(huán)狀雙鏈DNA)(二)細胞核水平原核生物的質粒1.質粒的定義指游離于原核生物核基因組以外，具有獨立復制能力的小型共價閉合環(huán)狀的dsDNA分子，即cccDNA(circularcovalentlyclosedDNA)。3.質粒的種類按其復制與核染色體的復制是否同步嚴緊型質粒(stringentreplicationplasmid)

松弛型復制控制質粒(relaxedreplicationplasmid)

按其功能接合性質粒：如F質?？顾幮再|粒：如R質粒產細菌素的質粒：如Col質粒具有生理功能的質粒：如固氮的mega質粒、降解質粒等產毒質粒：如Ti質粒4.典型質粒簡介

1）F質粒(Fplasmid)是E.coli

等細菌決定性別并有轉移功能的質粒。

2）R質粒(Rplasmid,resistanceplasmid)4）Ti質粒(tumorinducingplasmid)

Agrobacterium

tumefaciens（根癌土壤桿菌）從一些雙子葉植物的受傷根部侵入，最后在其中溶解，釋放出Ti質粒，其上的T-DNA片段與植物細胞中的核染色體組發(fā)生整合，合成正常菌株所沒有的冠癭堿類，破壞控制細胞分裂的激素調節(jié)系統(tǒng)，從而使它轉變成癌細胞。致癌區(qū)冠嬰堿合成區(qū)冠嬰堿分解區(qū)Ti質粒接合轉移區(qū)(tra)毒性區(qū)(vir)DNA復制區(qū)(rep)6個功能區(qū)：

可遺傳變異不可遺傳變異-----飾變基因突變染色體畸變生物的變異突變基因重組DNA、RNA的一級結構

DNA一級結構5′3′OHOHOH5′3′RNA一級結構DNA的雙螺旋結構的形成5′3′5′3′5′3′5′3′磷酸核糖堿基T-A堿基對C-G堿基對突變株的表型選擇性突變株非選擇性突變株營養(yǎng)缺陷型抗性突變型條件致死突變型形態(tài)突變型抗原突變型產量突變型細菌的變異現(xiàn)象形態(tài)、結構變異毒力變異耐藥性變異菌落變異形態(tài)結構變異

3-6%食鹽

鼠疫耶氏菌多形態(tài)性

陳舊培基物

青霉素、溶菌酶

正常形態(tài)細菌L型變異抗體或補體

(部分或完全失去胞壁)

特殊結構的變異

42-43℃

炭疽桿菌失去形成芽胞能力,毒性降低

10-20天

變形桿菌0.1%石炭酸遷徙生長（H）點狀生長、單個菌落（O）鞭毛變異毒力變異β棒狀噬菌體

白喉棒狀桿菌獲得白喉毒素增強

膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基

牛分枝桿菌卡介苗減弱

13年(230代)

耐藥性變異

細菌對某種抗菌藥物有敏感變成耐藥的變異稱為耐藥性變異。金黃色葡萄球菌有些細菌還同時耐受多種抗菌藥物，即多重耐藥性，甚至產生藥物依賴性。含鏈霉素培基

痢疾桿菌依鏈株

長期培養(yǎng)

菌落變異

在陳舊培養(yǎng)基中長期培養(yǎng)

光滑型菌落粗糙型菌落

S

R

原因：失去LPS的特異多糖（三）突變率每一個細胞在每一世代中發(fā)生某一性狀突變的幾率；自發(fā)突變幾率一般在10-6~10-9范圍內；突變率為10-9的含義抗性突變是最常見的突變類型；細菌產生抗藥性的途徑基因突變抗藥性質粒的轉移生理適應由基因突變引起的抗藥性的原因？兩種觀點：突變的性狀與引起突變的原因間呈對應性—抗性突變株的產生是由環(huán)境因素誘發(fā)出來的，屬定向變異；突變是自發(fā)產生的，與環(huán)境是否存在該物質無關。1.變量試驗（fluctuationtest）實驗設計者美國的魯里亞和德爾波留克根據(jù)統(tǒng)計學原理設計；時間：1943年實驗材料：對T1噬菌體敏感的大腸桿菌實驗目的驗證突變的性狀與引起突變的原因間有無直接對應關系實驗過程103/mL24-36h如果突變的性狀與引起突變的原因間呈對應性結果如何？如何解釋得到的實驗結果？噬菌體的作用？實驗結果討論突變的發(fā)生在時間上是隨機的2.涂布試驗（Newcombeexperiment）實驗設計者1949年紐康布實驗材料對T1噬菌體敏感的大腸桿菌采用固體平板培養(yǎng)實驗過程突變率的計算接種時每一平皿的細胞數(shù)：5×104培養(yǎng)5h后每一平皿的細胞數(shù)：5×104×212.3（5100）=2.6×1086個平皿上共發(fā)現(xiàn)28個突變菌落突變率=突變的細胞數(shù)/增加的細胞總數(shù)=28/6×（2.6×108-5×104）=1.8×10-83.平板影印試驗（replicaplating）實驗設計者1952年，美國的萊德伯格夫婦實驗材料E.coliK12實驗過程Lederberg的平板培養(yǎng)法（四）突變的特點不對應性自發(fā)性稀有性獨立性誘變性穩(wěn)定性可逆性(五)基因突變及其機制突變誘變自發(fā)突變基因突變染色體畸變：缺失、添加、易位、倒位堿基置換移碼突變

轉換顛換

缺失

添加誘變劑：凡能顯著提高突變頻率的理化因子；1）堿基置換轉換（transition）嘌呤被嘌呤所置換或嘧啶被嘧啶所置換顛換（transversion）嘌呤被嘧啶所置換或嘧啶被嘌呤所置換1.誘發(fā)突變直接引起置換的誘變劑直接與核酸的堿基發(fā)生化學反應，體內或離體均有作用。如：亞硝酸、羥胺、和各種烷化劑；間接引起置換的誘變劑通過活細胞的代謝活動摻入到DNA分子中后引起的變化。如：堿基類似物；誘變劑種類2）移碼突變

DNA分子中的一個或少數(shù)幾個核苷酸的增添或缺失，從而使該部位后面的全部遺傳密碼發(fā)生轉錄和轉譯錯誤的一類突變；誘變劑種類：丫啶類染料（原黃素、丫啶黃、丫啶橙、-氨基丫啶等）和ICR類化合物；3）染色體畸變某些強烈理化因子，如電離輻射（X射線等）和烷化劑、亞硝酸等引起DNA分子的大片段損傷；染色體結構上的缺失、重復、插入、易位和倒位；染色體數(shù)目的變化；染色體的易位轉座DNA序列通過非同源重組的方式，從染色體某一部位轉移到同一染色體上另一部位或其他染色體上某一部位的現(xiàn)象。轉座(因)子IS插入序列(insertionsequence)Tn轉座子(transposon)Mu噬菌體(mutatorphage)ababab2.自發(fā)突變(spontaneousmutation)1、由背景輻射和環(huán)境因素引起；2、由微生物自身有害代謝物引起；3、由DNA復制過程中堿基配對錯誤引起等。（六）紫外線對DNA的損傷及其修復胞嘧啶水合物胸腺嘧啶二聚體二氫胸腺嘧啶胸腺嘧啶-胞嘧啶二聚體1.光復活作用PREA-AT=TPREA-AT=TA-AT-TPREUV可見光二聚體解離PRE光激活酶(photoreactivatingenzyme)A-AT-T5‘3‘5‘3‘A-AT-T5‘3‘5‘3‘A-AT=T5‘3‘5‘3‘A-AT=T5‘3‘5‘3‘OHPA-A5‘3‘5‘3‘OHPT=TA-AT-T5‘3‘5‘3‘UV酶I酶II酶III酶IV2.暗修復（切除修復）酶I——核酸內切酶酶II——核酸外切酶酶III——DNA聚合酶酶IV——DNA連接酶（一）自發(fā)突變與育種從生產中育種定向培育優(yōu)良菌株（二）誘變育種二、突變與育種指利用物理、化學等誘變劑處理均勻分散的微生物細胞群，在促進其突變率顯著提高的基礎上，采用簡便、快速和高效的篩選方法，從中挑選出少數(shù)符合目的的突變株，以供科學試驗或生產實踐使用。誘變育種的基本環(huán)節(jié)誘變育種的原則突變株的篩選方法產量突變株的篩選抗藥性突變株的篩選營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選春日霉素產生菌的孢子懸液

誘變涂布平板培養(yǎng)2天（29℃）培養(yǎng)4-5天(29℃)生物鑒定板上含供試菌種培養(yǎng)17-18小時(29℃）檢查抑菌圈的大小保持合適的溫、濕度產量突變株的篩選抗藥性突變株的篩選營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)缺陷型是指通過誘變產生的，由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變，因而只能在加有該酶合成產物的培養(yǎng)基中才能生長的突變株?；九囵B(yǎng)基（MM，符號為[-]）是指僅能滿足某微生物的野生型菌株生長所需的最低成分的合成培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基(CM，符號為[+])是指可滿足某種微生物的一切營養(yǎng)缺陷型菌株的營養(yǎng)需要的天然或半合成培養(yǎng)基。補充培養(yǎng)基（SM，符號為[A]或[B]等）是指在基本培養(yǎng)基中添加某種營養(yǎng)物質以滿足該營養(yǎng)物質缺陷型菌株生長需求的合成或半合成培養(yǎng)基。

營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選(1)與篩選營養(yǎng)缺陷型有關的三類培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基(minimalmidium，MM)—[-]完全培養(yǎng)基(completemedium,CM)—[+]補充培養(yǎng)基(supplementalmedium,SM)—[A]（2）與營養(yǎng)缺陷型突變有關的菌體野生型(wildtype)—能在[-]中生長營養(yǎng)缺陷型(auxotroph)—能在[+]或[A]生長原養(yǎng)型(prototroph)—能在[-]中生長抗生素法菌絲過濾法青霉素法制霉菌素法原菌株(出發(fā)菌株)誘變劑處理淘汰野生型檢出缺陷型鑒定缺陷型同一培養(yǎng)皿夾層培養(yǎng)法限量補充培養(yǎng)法不同培養(yǎng)皿逐個檢出法影印接種法生長譜法營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法夾層培養(yǎng)法夾層培養(yǎng)法

先在培養(yǎng)皿底部倒一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基，待凝，添加一層混有經(jīng)誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基，其上再澆一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后，對首次出現(xiàn)的菌落用記號筆一一標在皿底。然后再加一層完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)后新出現(xiàn)的小菌落多數(shù)都是營養(yǎng)缺陷型突變株。

限量補充培養(yǎng)法限量補充培養(yǎng)法

把誘變處理后的細胞接種在含有微量（＜0.01%）蛋白胨的基本培養(yǎng)基平板上，野生型細胞就迅速長成較大的菌落，而營養(yǎng)缺陷型則緩慢生長成小菌落。若需獲得某一特定營養(yǎng)缺陷型，可再在基本培養(yǎng)基中加入微量的相應物質。

營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法逐個檢出法逐個檢出法

把經(jīng)誘變處理的細胞群涂布在完全培養(yǎng)基的瓊脂平板上，待長成單個菌落后，用接種針或滅過菌的牙簽把這些單個菌落逐個整齊地分別接種到基本培養(yǎng)基平板和另一完全培養(yǎng)基平板上，使兩個平板上的菌落位置嚴格對應。經(jīng)培養(yǎng)后，如果在完全培養(yǎng)基平板的某一部位上長出菌落，而在基本培養(yǎng)基的相應位置上卻不長，說明此乃營養(yǎng)缺陷型。

營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法影印接種法營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法abc[-][+]影印平板法

將誘變劑處理后的細胞群涂布在一完全培養(yǎng)基平板上，經(jīng)培養(yǎng)長出許多菌落。用特殊工具——“印章”把此平板上的全部菌落轉印到另一基本培養(yǎng)基平板上。經(jīng)培養(yǎng)后，比較前后兩個平板上長出的菌落。如果發(fā)現(xiàn)在前一培養(yǎng)基平板上的某一部位長有菌落，而在后一平板上的相應部位卻呈空白，說明這就是一個營養(yǎng)缺陷型突變株。第四步，鑒定缺陷型生長譜法是指在混有供試菌的平板表面點加微量營養(yǎng)物，視某營養(yǎng)物的周圍有否長菌來確定該供試菌的營養(yǎng)要求。鑒定營養(yǎng)缺陷型的操作是：把生長在完全培養(yǎng)液里的營養(yǎng)缺陷型細胞經(jīng)離心和無菌水清洗后，配成適當濃度的懸液（如107～108個／ml），取0.1ml與基本培養(yǎng)基均勻混合后，傾注在培養(yǎng)皿內，待凝固、表面干燥后，在皿背劃幾個區(qū)，然后在平板上按區(qū)加上微量待鑒定缺陷型所需的營養(yǎng)物粉末（用濾紙片法也可），例如氨基酸、維生素、嘌呤或嘧啶堿基等。經(jīng)培養(yǎng)后，如發(fā)現(xiàn)某一營養(yǎng)物的周圍有生長圈，就說明此菌就是該營養(yǎng)物的缺陷型突變株。用類似方法還可測定雙重或多重營養(yǎng)缺陷型。營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法(4)營養(yǎng)缺陷型的篩選舉例——枯草桿菌氨基酸缺陷型菌體前培養(yǎng)氨基酸缺陷型菌株的營養(yǎng)要求的鑒定細胞懸浮液制備誘變處理中間培養(yǎng)淘汰野生型營養(yǎng)缺陷型菌株的檢出（使細胞處于對數(shù)生長期）（UV照射60s）（調整細胞濃度為108個/ml）（30度CM中振蕩過夜培養(yǎng)）（青霉素法）（生長譜法）營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選方法無菌水洗下離心清洗后配成菌懸液（107-108/ml）0.1ml[—].[+]上生長的營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)營養(yǎng)缺陷型的鑒定——生長譜法作為研究代謝途徑和基因重組等遺傳規(guī)律的標記菌種；作為氨基酸、維生素或堿基等物質生物測定的試驗菌種；用作發(fā)酵生產核苷酸、氨基酸等代謝產物的生產菌株；；營養(yǎng)缺陷型突變株的應用

Amestest測定潛在化學治癌物

理論依據(jù)一切生物的遺傳物質基礎都是核酸尤其是DNA，所以任何能改變核酸結構的因素都可引起核酸生物學功能的改變。生物化學統(tǒng)一性法則生物的“三致”（致突變、致畸變、致癌變）物質可引起核酸結構的改變，從而引起其功能的改變；反之亦然?；驹鞸almonellatyphimurium

的his-菌株在[-]的平板上不能生長，如發(fā)生回復突變，則能生長。試驗步驟：可疑“三致”試樣+鼠肝勻漿S.this-[-]吸入濾紙片保溫S.this+[-]陽性陰性培養(yǎng)1、某突變菌株在基本培養(yǎng)基上無法生長，而在添加了0.1%堿水解酵母核酸后，該菌株能生長。請設計一實驗方案以進一步確定該菌株的生長必需物。2、什么叫做營養(yǎng)缺陷型菌株?在實驗室中如何從原養(yǎng)型菌株獲得營養(yǎng)缺陷型菌株?請設計一個具體實驗方案。3、怎樣用實驗證明突變是自發(fā)產生的，而不是受環(huán)境誘導產生的？思考題第三節(jié)基因重組(generecombination)基因重組的定義兩個獨立基因組內的遺傳基因，通過一定的途徑轉移到一起，形成新的穩(wěn)定基因組的過程稱為基因重組或遺傳重組，簡稱重組。重組和雜交的關系重組是在核酸分子水平上的雜交，與細胞水平上的雜交有明顯區(qū)別雜交中必然包含著重組，而重組則不限于雜交一種形式。一、原核生物的基因重組（一）轉化（transformation）1.定義：受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。形成的雜種后代稱為轉化子。2.能進行轉化的微生物種類Streptococcuspneumoniae；Bacillus；Rhizobium；Pseudomonas；Staphylococcus；Saccharomycescerevisiae；Neurosporacrassa；Aspergillusniger等。但腸道菌科的細菌如E.coli等很難進行轉化。3.影響菌株間發(fā)生轉化的因素與它們在進化過程中的親緣關系有關；最易與細胞表面結合的是dsDNA；發(fā)生轉化的細胞必須處于感受態(tài);轉化的頻率低（0.1-1%，最高為20%）;轉化需要的DNA濃度極低;4.感受態(tài)（competence）指受體細胞最易接受外源DNA片段并能實現(xiàn)轉化的一種生理狀態(tài)。不同菌種感受態(tài)細胞所占比例、出現(xiàn)的時間和維持時間不同外界環(huán)境因子如環(huán)腺苷酸（cAMP）和Ca2+等可提高受體細胞的感受態(tài)水平。調節(jié)感受態(tài)的是一類特異蛋白—感受態(tài)因子dsDNA供體（strR）感受態(tài)受體（strS）同源區(qū)段配對單鏈整合，形成一小段雜合DNA區(qū)段轉化子（strR）非轉化子（strS）復制與分離5.轉化過程6.轉染(transfection)用提純的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主細胞，可增殖出一群正常病毒后代的現(xiàn)象稱為轉染。1.定義通過完全缺陷或部分缺陷噬菌體的媒介，把供體細胞的小片段DNA攜帶到受體細胞中，通過交換與整合，使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。獲得的重組細胞稱為轉導子。2.轉導的種類普遍轉導局限轉導（二）轉導(transduction)供體菌受體菌轉導噬菌體細菌DNA噬菌體DNA

通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對供體菌基因組上任何DNA小片段的“誤包”，而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象；一般用溫和噬菌體作為普遍轉導的媒介；可分為完全普遍轉導和流產普遍轉導；普遍轉導(generalizedtransduction)完全普遍轉導(generalizedtransduction)供體受體（2）流產普遍轉導外源DNA片段不與受體細胞核染色體組進行交換、整合和復制，僅表現(xiàn)穩(wěn)定的轉錄、轉譯和性狀表達，且每經(jīng)過一次分裂，就受到一次“稀釋”。通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中，并與后者的基因組整合、重組，形成轉導子的現(xiàn)象；特點：只局限于傳遞供體菌核染色體上的個別特定基因；該特定基因由部分缺陷的溫和噬菌體攜帶；缺陷噬菌體的形成方式是在脫離宿主核染色體過程中，發(fā)生低頻率（-10-5）的誤切；需要通過UV等因素對溶源菌的誘導；分為低頻轉導和高頻轉導局限轉導(restrictedtransduction)

galdgal1)低頻轉導（LFT）部分缺陷噬菌體以大腸桿菌噬菌體為例

gal

bio正常切割不正常切割biodbio其頻率為10-4—10-6

（LFT裂解物）E.coliK12gal-

少數(shù)穩(wěn)定的gal+轉導子低m.o.i.2)高頻轉導（HFT）雙重溶源菌（doublelysogen）同時感染有正常噬菌體和缺陷噬菌體的受體菌；被紫外線等誘導時，正常的噬菌體具有補償缺陷噬菌體（如dgal）所缺失的部分基因的功能，使兩種噬菌體同時獲得復制；存在于雙重溶源菌的正常噬菌體被稱作助體噬菌體；雙重溶源菌產生的裂解物中含有等量的和dgal粒子HFT裂解物低m.o.i.

Ecoli.K12gal-高頻地把它轉化成

穩(wěn)定的gal+轉導子；高m.o.i.的LFT裂解物感染

Ecoli.K12gal-

?低頻轉導和高頻轉導的異同點相同點只能轉導供體菌的個別特定基因該特定基因由部分缺陷的溫和噬菌體攜帶不同點低頻轉導：在裂解物中所含的部分缺陷噬菌體的比例極低，稱為低頻轉導裂解物。用其感染宿主，只獲得極少量的局限轉導子高頻轉導：產生高頻轉導裂解物，用其感染宿主，可獲得較多的轉導子。 當溫和噬菌體感染其宿主而使之發(fā)生溶源化時，因噬菌體基因整合到宿主基因上，而使后者獲得了除免疫性以外新性狀的現(xiàn)象，稱溶源轉變。溶源轉變（三）接合（conjugation）供體菌通過性菌毛與受體菌直接接觸，把F質?；蚱鋽y帶的核基因組傳遞給后者，使后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象。能進行結合的微生物種類主要在細菌和放線菌中存在；研究得最清楚的是E.coli；E.coli有性別分化，決定性別的是一種質粒，即F因子——是屬于附加體的質粒。根據(jù)F因子在細胞內的存在方式，將E.coli分為四種類型：

F+菌株含有游離的F因子，在細胞表面還有性菌毛F-菌株不含F(xiàn)因子，細胞表面沒有性菌毛。Hfr（高頻重組）菌株F因子整合在核染色體組特定位點上F’菌株Hfr菌株內的F因子因不正常切離而脫離核染色體組時形成的游離的但攜帶一小段核染色體基因的特殊F因子

初生的F’菌株大腸桿菌的四種類型F質粒的4種存在方式及相互關系大腸桿菌的接合方式F+×F-

F++F+

Hfr×

F-

Hfr+

F-（多數(shù)情況下）Hfr×

F-

Hfr+

Hfr（少數(shù)情況下）F’×F-

F’+F’F因子轉導以F’質粒通過接合來傳遞供體基因的方式F質粒的接合F+F-F+F-F+F+F+F+DonorRecipientF+中斷實驗（四）原生質體融合(protoplastfusion)通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩細胞的原生質體發(fā)生融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩(wěn)定重組子的過程。此重組子稱為融合子。能進行原生質體融合的細胞極其廣泛原核生物、真核生物、高等動植物、人體原生質體融合的主要步驟：1選擇親本有特殊價值有選擇性遺傳標記2獲得原生質體脫壁酶去除細胞壁（細菌、放線菌、真菌）3原生質體融合促融合劑PEG(聚乙二醇)或電脈沖4篩選穩(wěn)定的融合子原生質體融合的主要步驟：各種融合子長成菌落影印接種[-]檢出[A+B+]篩選優(yōu)良性狀的融合子篩選[+]原生質體融合的特點1.重組頻率高2.不受親緣關系的影響3.能轉移多數(shù)基因，可獲得生產性狀更為優(yōu)良的新物種4.兩個原生質體表面直接接觸，對等融合形成（雙向轉移）原生質體融合二、真核微生物的基因重組基因重組的方式：有性雜交、準性雜交、原生質體融合和遺傳轉化；（一）有性雜交

指不同遺傳型的兩性細胞之間發(fā)生的接合和隨之進行的染色體重組，進而產生新遺傳型后代的一種育種技術。舉例—釀酒酵母酒精酵母：產酒精率高但對葡萄糖的發(fā)酵力弱面包酵母：產酒精率低但對葡萄糖的發(fā)酵力強比較項目雙倍體單倍體細胞菌落液體培養(yǎng)在產孢培養(yǎng)基上大，橢圓形大，形態(tài)均一繁殖較快，細胞較分散會形成子囊小，球形小，形態(tài)變化多繁殖較慢，細胞常聚集成團不形成子囊S.cerev