細(xì)胞凋亡知識點(diǎn)總結(jié)(五篇)

本文格式為Word版，下載可任意編輯——細(xì)胞凋亡知識點(diǎn)總結(jié)(五篇)總結(jié)是對某一特定時(shí)間段內(nèi)的學(xué)習(xí)和工作生活等表現(xiàn)狀況加以回想和分析的一種書面材料，它能夠使頭腦更加清醒，目標(biāo)更加明確，讓我們一起來學(xué)習(xí)寫總結(jié)吧。相信大量人會覺得總結(jié)很難寫？下面是我整理的個(gè)人今后的總結(jié)范文，歡迎閱讀共享，希望對大家有所幫助。

細(xì)胞凋亡知識點(diǎn)總結(jié)篇三細(xì)胞凋亡知識點(diǎn)總結(jié)篇五

細(xì)胞凋亡試驗(yàn)技術(shù)總結(jié)一形態(tài)學(xué)檢測

1、光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡觀測法

未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞體積變小、變形，膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，晚期出現(xiàn)凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮，變圓，脫落。染色細(xì)胞:姬姆薩染色，瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞染色質(zhì)濃縮，邊緣化，核膜裂解，染色質(zhì)分割成塊狀，形成凋亡小體。

2、熒光顯微鏡檢測法-熒光染料

例如，碘化丙啶(pi)是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，pi能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。選用536nm激發(fā)光，細(xì)胞核呈紅色熒光。

3、電子顯微鏡

收集細(xì)胞，2.5%戊二醛4°c固定24h，1%四氧化鋨后固定，丙酮梯度脫水，經(jīng)包埋劑浸透后環(huán)氧樹脂包埋，超薄切片，醋酸鈾和枸櫞酸鉛雙重染色，透射電鏡觀測。凋亡ⅰ期的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞，出現(xiàn)大量稱為氣穴現(xiàn)象的空泡結(jié)構(gòu)。ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;細(xì)胞凋亡的晚期，細(xì)胞核裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體。

4、激光掃描共焦顯微鏡技術(shù)

fitc-annexinv+pi雙染，觀測凋亡過程中細(xì)胞膜ps表面的變化，并區(qū)分正常細(xì)胞(an-pi-)，早期凋亡細(xì)胞(an+pi-)，晚期凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞(an+pi+)，細(xì)胞收集過程中出現(xiàn)的損傷細(xì)胞(an-pi+)。

二、細(xì)胞凋亡的生化及分子生物學(xué)檢測

1、dna斷裂檢測法

如使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，細(xì)胞凋亡時(shí)，核染色質(zhì)凝聚，染色質(zhì)dna在核小體單位之間的連接處斷裂。凋亡早期可形成50~300kbp的dna大片段，晚期核酸內(nèi)切酶在核小體之間剪切核dna，產(chǎn)生大量長度在180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段。

2、膜聯(lián)蛋白v法

磷脂酰絲氨酸(ps)位于正常細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在細(xì)胞凋亡的早期，ps可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面。annexin-ⅴ(膜聯(lián)蛋白-v)是一種分子量為35-36kd的ca2+依靠性磷脂結(jié)合蛋白，與ps高親和力。將annexin-ⅴ進(jìn)行熒光素或生物素標(biāo)記，以標(biāo)記了的annexin-ⅴ作為探針，利用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡以及共聚焦激光掃描顯微鏡檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。

3、細(xì)胞凋亡的酶caspase檢測

檢測caspase活力可用免疫雜交技術(shù)分析酶原的加工和底物水解的產(chǎn)物，或用人工底物檢測酶活力，也可對活化的caspase做親和標(biāo)記。例如分析底物的水解產(chǎn)物，parp(多聚adp-核糖聚合酶)第一個(gè)被認(rèn)識的caspase-3底物，它的相對分子質(zhì)量為116000，水解后形成相對分子質(zhì)量為85000及相對分子質(zhì)量為25000的兩個(gè)片段，用抗相對分子質(zhì)量為85000片段的抗體檢測細(xì)胞是否發(fā)生凋亡。

4、線粒體膜勢能變化的檢測

線粒體跨膜電位的存在，使一些親脂性陽離子熒光染料可結(jié)合到線粒體基質(zhì)，其熒光的加強(qiáng)或減弱反映了線粒體內(nèi)膜電負(fù)性的增高或降低流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的熒光強(qiáng)度或熒光顯微鏡觀測，拍照正常細(xì)胞中,rh123能夠依靠線粒體跨膜電位進(jìn)入線粒體基質(zhì)，熒光強(qiáng)度減弱或消失。而凋亡時(shí)，線粒體膜完整性破壞，線粒